检索结果-内蒙古大学图书馆

2016第十一届全国免疫学学术大会

作者：许云云李芳梁含思甄允方汪健张学光苏州大学附属儿童医院儿科研究所苏州大学基础医学与生物科学学院人体解剖与组织胚胎学教研室苏州大学附属第一医院临床免疫研究所苏州大学附属儿童医院小儿骨科诊断与治疗中心

目的：自体软骨细胞移植在治疗膝关节软骨缺损方面已得到较广泛的应用,在踝关节、肘关节软骨、距骨等的临床应用也迅速发展,但也存在很多问题。其中,充足的软骨细胞来源便是亟待解决的难题。为此,寻找另外一种有效的细胞是本领域研究的... 详细信息

目的：自体软骨细胞移植在治疗膝关节软骨缺损方面已得到较广泛的应用,在踝关节、肘关节软骨、距骨等的临床应用也迅速发展,但也存在很多问题。其中,充足的软骨细胞来源便是亟待解决的难题。为此,寻找另外一种有效的细胞是本领域研究的重点。本课题组前期研究发现,一种特殊来源的BMSCS——人多指来源的BMSCs更倾向于向软骨细胞的诱导分化。本研究旨在研究人多指来源BMSCs(BMSCs from polydactyly,pBMSCs)的生物学特性,进而阐明其倾向于向软骨细胞分化的作用及机制。

关键词：多指 pBMSCs 软骨细胞分化 Sox9/BMP信号通路

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人多指来源的BMSCs倾向于分化成软骨细胞的研究

人多指来源的BMSCs倾向于分化成软骨细胞的研究

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第十一届全国免疫学学术大会

目的:自体软骨细胞移植在治疗膝关节软骨缺损方面已得到较广泛的应用,在踝关节、肘关节软骨、距骨等的临床应用也迅速发展,但也存在很多问题。其中,充足的软骨细胞来源便是亟待解决的难题。为此,寻找另外一种有效的细胞是本领域研究的... 详细信息

目的:自体软骨细胞移植在治疗膝关节软骨缺损方面已得到较广泛的应用,在踝关节、肘关节软骨、距骨等的临床应用也迅速发展,但也存在很多问题。其中,充足的软骨细胞来源便是亟待解决的难题。为此,寻找另外一种有效的细胞是本领域研究的重点。本课题组前期研究发现,一种特殊来源的BMSCS——人多指来源的BMSCs更倾向于向软骨细胞的诱导分化。本研究旨在研究人多指来源BMSCs(BMSCs from polydactyly,pBMSCs)的生物学特性,进而阐明其倾向于向软骨细胞分化的作用及机制。方法:从苏州大学附属儿童医院获取幼儿多指(经患者家属同意),收集骨髓细胞进行贴壁培养,获得pBMSCs细胞。随后通过PT-PCR、流式细胞仪检测MSCs细胞的特异性标志;绘制生长曲线观察pBMSCs细胞的增殖能力;分化实验证明pBMSCs细胞向脂肪细胞、骨细胞和软骨细胞的诱导分化能力;Real-time PCR和Western Blot分析Sox9/BMP信号在调控软骨细胞形成中的作用;共培养实验观察pBMSCs对软骨细胞体外生长的作用。结果:pBMSCs细胞高表达间充质细胞表面标志CD73、CD90、CD105和CD166,不表达造血细胞表面标志CD34、CD45、CD133和HLA-DR。较之于BMSCs,pBMSCs具有更强的体外增殖能力;进而发现,pBMSCs向脂肪和骨诱导分化的能力较弱,但pBMSCs具有较强向软骨细胞分化的能力,其诱导成软骨细胞的时间为7d,而BMSCs诱导成软骨细胞所需时间为14d。机制实验初步证实pBMSCs中BMP4的表达显著高于BMSCs,而且Sox9的表达也高于BMSCs,随后我们又在蛋白水平上观察到同样的情况:pBMSCs中Sox9和BMP4的蛋白水平明显高于BMSCs。最后,将pBMSCs与软骨细胞共培养后,发现其对软骨细胞的生长具有支持作用。结论:本研究发现pBMSCs具有较强向软骨细胞分化的能力,Sox9/BMP通路介导了pBMSCs向软骨细胞的分化,且pBMSCs可支持软骨细胞的生长。为此,pBMSCs有望成为膝关节置换的种子细胞。

关键词：多指 pBMSCs 软骨细胞分化 Sox9/BMP信号通路

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人羊水干细胞作为汗腺重建种子细胞的研究

人羊水干细胞作为汗腺重建种子细胞的研究

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中国免疫学会第五届全国免疫学博士生论坛

作者：梁含思孙青李芳甄允方许云云刘尧秦明德张学光苏州大学附属第一医院临床免疫研究所江苏省干细胞与生物医用材料重点实验室苏州大学附属第一医院临床免疫研究所苏州大学基础医学与生物科学学院人体解剖与组织胚胎学教研室苏州大学附属儿童医院小儿骨科诊断与治疗中心苏州大学附属儿童医院儿科研究所江苏省干细胞与生物医用材料重点实验室

研究背景：严重烧伤获救的病人由于无汗腺功能的疤痕组织取代皮肤使其终生丧失正常皮肤功能，严重影响其生活质量。干细胞可以定向分化为具有汗腺细胞表型的汗腺样细胞，但是对于汗腺组织的功能性重建还未见报道。

关键词：人羊水干细胞干细胞分化汗腺样结构低免疫源性汗腺重建

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人羊水干细胞分化为汗腺样细胞的研究

人羊水干细胞分化为汗腺样细胞的研究

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第十四届全国肿瘤生物治疗大会

作者：梁含思孙青李芳甄允方许云云刘尧秦明德张学光江苏省干细胞与生物医用材料重点实验室苏州大学基础医学与生物科学学院人体解剖与组织胚胎学教研室苏州大学附属儿童医院小儿骨科诊断与治疗中心苏州大学附属儿童医院儿科研究所苏州大学附属第一医院临床免疫研究所

研究背景:大面积皮肤严重烧伤的救治是目前亟待解决的医学和社会问题。严重烧伤获救的病人由于无汗腺功能的疤痕组织取代皮肤使其终生丧失正常皮肤功能,严重影响病人的生活质量。干细胞可以定向分化为具有汗腺细胞表型的汗腺样细胞,但... 详细信息

研究背景:大面积皮肤严重烧伤的救治是目前亟待解决的医学和社会问题。严重烧伤获救的病人由于无汗腺功能的疤痕组织取代皮肤使其终生丧失正常皮肤功能,严重影响病人的生活质量。干细胞可以定向分化为具有汗腺细胞表型的汗腺样细胞,但是对于汗腺组织的功能性重建还未见报道,且干细胞分化为汗腺样细胞的具体机制尚待探讨。人羊水干细胞是介于成体干细胞和胚胎干细胞之间的一类干细胞,其作为汗腺细胞再生的种子细胞具有独特的优势。目的:利用条件培养基诱导的方法将人羊水干细胞诱导为汗腺样细胞,为其他类型干细胞分化为汗腺样细胞提供理论基础,使汗腺的功能性重建和功能性皮肤修复成为可能,具有研究的创新性和潜在的应用价值。方法:收集培养过人汗腺细胞的KGM2培养基,用0.22μm的滤器过滤,收集到的培养基为CM;取稳定培养的人羊水干细胞,以5×104个/孔的密度接种于6孔板中,待细胞贴壁后,添加汗腺细胞诱导培养基(SGDM,汗腺细胞培养基:CM=1:1,额外添加50 ng/ml EGF);诱导分化21 d后得到汗腺样细胞;光学显微镜观察其细胞形态;Real-time PCR分析其基因表达情况;流式细胞仪检测汗腺相关蛋白表达;免疫荧光染色检测汗腺相关蛋白表达;电镜技术观察细胞内部结构;3D组织培养方法检测分化后的汗腺样细胞形成汗腺样结构的能力,并对形成的汗腺样结构进行免疫荧光染色检测。结果:分化过程中,由人羊水干细胞诱导分化得到的汗腺样细胞与体外培养的人汗腺细胞形态相似;诱导后的分化比例约为30%;Real-time PCR和免疫荧光结果显示,诱导后的细胞表达汗腺细胞相关指标EDA、EDAR、K8和CEA;透射电镜结果显示诱导后的细胞可以观察到与汗腺细胞相似的结构-微绒毛;3D组织培养结果显示诱导后的K8+细胞可以在胶中形成汗腺样结构,使汗腺样细胞分化更加完善。结论:利用条件培养基可以将人羊水干细胞诱导成为汗腺样细胞,并能在胶中形成汗腺样结构。

关键词：人羊水干细胞干细胞分化汗腺细胞汗腺样结构

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人羊水干细胞作为汗腺重建种子细胞的研究

人羊水干细胞作为汗腺重建种子细胞的研究

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第十届全国免疫学学术大会

作者：梁含思孙青李芳甄允方许云云秦明德张学光苏州大学附属第一医院临床免疫研究所江苏省干细胞与生物医用材料重点实验室苏州大学基础医学与生物科学学院人体解剖与组织胚胎学教研室苏州大学附属儿童医院小儿骨科诊断与治疗中心苏州大学附属儿童医院儿科研究所

目的 :利用条件培养基诱导的方法将人羊水干细胞诱导为汗腺样细胞,研究人羊水干细胞重建汗腺的可能性,使汗腺的功能性重建和功能性皮肤修复成为可能,具有创新性和潜在的应用价值。方法 :取稳定培养的人羊水干细胞,以5×104个/孔的... 详细信息

目的 :利用条件培养基诱导的方法将人羊水干细胞诱导为汗腺样细胞,研究人羊水干细胞重建汗腺的可能性,使汗腺的功能性重建和功能性皮肤修复成为可能,具有创新性和潜在的应用价值。方法 :取稳定培养的人羊水干细胞,以5×104个/孔的密度接种于6孔板中,待细胞贴壁后,添加汗腺细胞诱导培养基(SGDM,汗腺细胞培养基:CM=1:1,额外添加50ng/ml EGF。CM为培养过人汗腺细胞的KGM2培养基,用0.22μm的滤器过滤,收集到的培养基),诱导分化21天后得到汗腺样细胞;光学显微镜观察其细胞形态;Realtime-PCR分析其基因表达情况;流式细胞仪检测汗腺相关蛋白表达;免疫荧光染色检测汗腺相关蛋白表达;电镜技术观察细胞内部结构;3D组织培养方法检测分化后的汗腺样细胞形成汗腺样结构的能力,并对形成的汗腺样结构进行免疫荧光染色检测;汗腺样细胞与T细胞共培养,CCK8检测其对活化T细胞增殖的抑制作用。结果 :人羊水干细胞分化后得到的汗腺样细胞与体外培养的人汗腺细胞形态相似;诱导分化比例约为30%;Realtime-PCR和免疫荧光结果显示,诱导后的汗腺样细胞表达汗腺细胞相关指标EDA、EDAR、K8和CEA;透射电镜结果显示诱导后的细胞可以观察到与汗腺细胞相似的结构-微绒毛;3D组织培养结果显示诱导后的K8+细胞可以在胶中形成汗腺样结构,使汗腺样细胞分化更加完善;T细胞增殖实验结果显示汗腺样细胞具有抑制T细胞增殖的能力。结论 :人羊水干细胞是介于成体干细胞和胚胎干细胞之间的一类干细胞,它具有较高的增殖能力和分化能力,以及低免疫源性,使其作为汗腺重建的种子细胞具有独特的优势。利用条件培养基可以将人羊水干细胞诱导成为汗腺样细胞,并能在胶中形成汗腺样结构。汗腺样细胞与人羊水干细胞相似具有低免疫源性,为汗腺的功能性重建提供了良好的种子细胞。

关键词：人羊水干细胞干细胞分化汗腺样结构低免疫源性汗腺重建

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人羊水干细胞作为汗腺重建种子细胞的研究

人羊水干细胞作为汗腺重建种子细胞的研究

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中国免疫学会第十届全国免疫学学术大会

作者：梁含思孙青李芳甄允方许云云秦明德张学光苏州大学附属第一医院临床免疫研究所江苏省干细胞与生物医用材料重点实验室苏州大学基础医学与生物科学学院人体解剖与组织胚胎学教研室苏州大学附属儿童医院小儿骨科诊断与治疗中心苏州大学附属儿童医院儿科研究所苏州大学附属第一医院临床免疫研究所江苏省干细胞与生物医用材料重点实验室

目的：利用条件培养基诱导的方法将人羊水干细胞诱导为汗腺样细胞,研究人羊水干细胞重建汗腺的可能性,使汗腺的功能性重建和功能性皮肤修复成为可能,具有创新性和潜在的应用价值.方法：取稳定培养的人羊水干细胞,以5×104个/孔的密... 详细信息

目的：利用条件培养基诱导的方法将人羊水干细胞诱导为汗腺样细胞,研究人羊水干细胞重建汗腺的可能性,使汗腺的功能性重建和功能性皮肤修复成为可能,具有创新性和潜在的应用价值.方法：取稳定培养的人羊水干细胞,以5×104个/孔的密度接种于6孔板中,待细胞贴壁后,添加汗腺细胞诱导培养基(SGDM,汗腺细胞培养基：CM=1∶1,额外添加50ng/ml EGF.

关键词：人羊水干细胞干细胞分化汗腺样结构低免疫源性汗腺重建

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葡萄球菌肠毒素B诱导脐静脉内皮细胞凋亡机制的探讨

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中国微生态学杂志 2010年第12期22卷 1085-1088页

作者：管俊昌刘婷婷朱琍燕马丽娜闵宏林李凤云蚌埠医学院安徽省感染与免疫重点实验室病原生物学教研室安徽蚌埠233030 苏州大学基础医学与生物科学学院围产与胚胎学研究室江苏苏州215123

目的探讨金黄色葡萄球菌(金葡菌)肠毒素B诱导脐静脉内皮细胞凋亡的机制。方法将不同浓度金葡菌肠毒素B感染脐静脉内皮细胞8 h后,用流式细胞术检测细胞凋亡率,同时用比色法检测TNF-α、caspase-3及caspase-8的产生量,并检测加入TNF-α抗... 详细信息

目的探讨金黄色葡萄球菌(金葡菌)肠毒素B诱导脐静脉内皮细胞凋亡的机制。方法将不同浓度金葡菌肠毒素B感染脐静脉内皮细胞8 h后,用流式细胞术检测细胞凋亡率,同时用比色法检测TNF-α、caspase-3及caspase-8的产生量,并检测加入TNF-α抗体、caspase-3和caspase-8抑制剂后的细胞凋亡率。结果不同浓度肠毒素B作用脐静脉内皮细胞8 h后均可诱导细胞凋亡,且TNF-α、caspase-3和caspase-8的产生量均高于对照组(P<0.01);而加入TNF-α抗体、caspase-3和caspase-8抑制剂后凋亡率明显降低。结论金葡菌肠毒素B可以诱导脐静脉内皮细胞凋亡,其凋亡机制可能是通过TNF-α介导的caspase-8及caspase-3激活的外源性死亡因子受体途径。

关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素B 脐静脉内皮细胞凋亡

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金黄色葡萄球菌肠毒素B对脐静脉内皮细胞凋亡的影响

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苏州大学学报（医学版） 2009年第4期29卷 607-609页

作者：刘婷婷朱琍燕管俊昌马丽娜闵宏林李凤云蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233000 苏州大学基础医学与生物科学学院围产与胚胎学研究室江苏苏州215123

目的观察金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)诱导脐静脉内皮细胞的凋亡效应。方法用不同浓度SEB感染脐静脉内皮细胞(HUVEC)2、4、8与12h后,用流式细胞术检测细胞凋亡率。结果SEB各浓度均可诱导HUVEC发生凋亡,与对照组比较差异有高度统计学意义(... 详细信息

目的观察金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)诱导脐静脉内皮细胞的凋亡效应。方法用不同浓度SEB感染脐静脉内皮细胞(HUVEC)2、4、8与12h后,用流式细胞术检测细胞凋亡率。结果SEB各浓度均可诱导HUVEC发生凋亡,与对照组比较差异有高度统计学意义(P<0.01)。当SEB浓度为5μg/ml时诱导细胞凋亡的能力最强;5μg/mlSEB作用HUVEC细胞2h后,即可诱导细胞产生明显的凋亡,且随着作用时间的延长,细胞凋亡率逐渐增加(P<0.01)。结论SEB可以诱导脐静脉内皮细胞凋亡,并表现出明显的时间、剂量效应关系,这可能与金葡菌L型垂直感染影响宫内胎儿发育的机制有关。

关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素B 脐静脉内皮细胞凋亡

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人胚胎生殖细胞体外培养条件优化及细胞移植实验研究

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南通大学学报（医学版） 2008年第6期28卷 415-418页

作者：李芳陈永珍张于娟李金苏州大学基础医学与生物科学学院组织胚胎学教研室苏州215123

目的:优化人胚胎生殖细胞(EG细胞)的体外培养体系,并将生长状态良好的传代的人EG细胞移植用于大鼠心肌梗死模型的治疗。探讨人胚胎生殖细胞进行异种移植对大鼠心肌梗死的治疗机制。方法:取5～10周人胚胎生殖腺嵴和背侧肠系膜,用添加和... 详细信息

目的:优化人胚胎生殖细胞(EG细胞)的体外培养体系,并将生长状态良好的传代的人EG细胞移植用于大鼠心肌梗死模型的治疗。探讨人胚胎生殖细胞进行异种移植对大鼠心肌梗死的治疗机制。方法:取5～10周人胚胎生殖腺嵴和背侧肠系膜,用添加和不添加细胞因子的两种培养体系对比进行组织块原代及传代培养,选取生长情况良好的传至第4代的人EG细胞,移植到急性心肌梗死大鼠的梗死心肌周围,分别于移植后1天、1、2、4周处死大鼠,以鼠抗人细胞核抗体MAB1281作为示踪剂,通过免疫组化方法检测移植细胞的分布。结果:在培养液中添加LIF和b-FGF后原代及传代培养的人EG细胞生长旺盛,形成集落更早,传到第4代形成的集落体积变化不大:移植组人EG细胞在移植后1天、1周、2周、4周均可以在心梗区域观察到MAB1281阳性细胞。结论:添加LIF和b-FGF的培养体系是更高效的人EG细胞培养体系。人EG细胞可异种移植,人EG细胞在大鼠心肌梗死处由心外膜层逐渐向心肌层迁移。

关键词：人胚胎生殖细胞白血病抑制因子碱性成纤维细胞生长因子心肌梗死细胞移植

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