检索结果-内蒙古大学图书馆

上海交通大学学报（医学版） 2011年第7期31卷 875-879页

作者：程旭红孙青姚玉峰周爱萍赵英伟苏州大学基础医学与生物科学学院苏州215123 上海交通大学基础医学院病原生物学教研室上海200025 西藏民族学院咸阳712082

目的研究结核分枝杆菌Rv1272和Rv1273基因编码蛋白与药物外排的关系。方法利用生物信息学方法分析Rv1272和Rv1273基因及其编码蛋白的结构,采用PCR技术扩增该两个基因,并与pMF406质粒连接构建重组质粒,测序正确后,电穿孔法将重组质粒转... 详细信息

目的研究结核分枝杆菌Rv1272和Rv1273基因编码蛋白与药物外排的关系。方法利用生物信息学方法分析Rv1272和Rv1273基因及其编码蛋白的结构,采用PCR技术扩增该两个基因,并与pMF406质粒连接构建重组质粒,测序正确后,电穿孔法将重组质粒转化耻垢分枝杆菌m c2155。采用W estern b lotting对两个目的蛋白进行亚细胞定位;试管法测定重组菌株对常用的9种抗菌药物的最低抑菌浓度(M IC),以转化pMF406空质粒的耻垢分枝杆菌作为对照菌株。结果经测序验证重组质粒构建成功,W estern b lotting结果显示Rv1272和Rv1273为膜蛋白。试管法测定结果显示:含有目的基因的重组菌株对9种抗菌药物的M IC与对照菌株比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Rv1272和Rv1273蛋白为膜蛋白,未发现其与结核菌耐药之间的直接关系。

关键词：结核分枝杆菌 Rv1272 Rv1273 膜蛋白最低抑菌浓度

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

核受体相关因子1基因过表达诱导神经干细胞分化为多巴胺能神经元

引用

解剖学报 2011年第2期42卷 159-163页

作者：谭雪锋田美玲金国华秦建兵朱蕙霞张蕾李浩明苏州大学医学部基础医学与生物科学学院苏州215123 南通大学医学院人体解剖学教研室神经生物学研究所江苏南通226001

目的探讨核受体相关因子1(Nurr1)基因对大鼠中脑神经干细胞(NSCs)体外诱导分化为多巴胺能神经元的作用。方法通过基因重组技术构建pEGFP-N1-Nurr1真核表达载体,用电穿孔法将重组质粒转染第3代NSCs,用荧光显微镜观察转染效率,免疫印迹法... 详细信息

目的探讨核受体相关因子1(Nurr1)基因对大鼠中脑神经干细胞(NSCs)体外诱导分化为多巴胺能神经元的作用。方法通过基因重组技术构建pEGFP-N1-Nurr1真核表达载体,用电穿孔法将重组质粒转染第3代NSCs,用荧光显微镜观察转染效率,免疫印迹法检测基因表达效果;并对转染后的NSCs进行体外分化培养3周,用免疫荧光双标技术检测酪氨酸羟化酶(TH)和微管相关蛋白-2(MAP-2)的表达。结果电穿孔法转染NSCs48h后转染效率达35%,1周后免疫印迹法检测到Nurr1蛋白高表达,约为对照组的5倍;Nurr1基因转染的NSCs分化为TH阳性神经元的比率为15.45%,明显高于对照组,而MAP-2阳性神经元数量与对照组相似。结论 Nurr1基因过表达可以诱导NSCs向TH阳性的多巴胺能神经元分化。

关键词：核受体相关因子1 神经干细胞多巴胺能神经元分化细胞培养大鼠

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

RMP基因干扰对肝癌细胞周期的影响

RMP基因干扰对肝癌细胞周期的影响

引用

第七届全国医学生物化学与分子生物学和第四届全国临床应用生物化学与分子生物学联合学术研讨会暨医学生化分会会员代表大会

作者：郭云兰杨慧翠魏文祥苏州大学基础医学与生物科学学院细胞分子生物学教研室

目的:建立RMP(RPB5-Mediating Protein)基因干扰的稳定细胞株,研究RMP基因干扰对正常肝细胞及其肝癌细胞周期的影响。方法:构建RMP基因的短发卡RNA(short-hairpin RNA,shRNA)真核表达载体pGPU6-Neo-RMPi。通过脂质体转染的方法转染到SMM... 详细信息

目的:建立RMP(RPB5-Mediating Protein)基因干扰的稳定细胞株,研究RMP基因干扰对正常肝细胞及其肝癌细胞周期的影响。方法:构建RMP基因的短发卡RNA(short-hairpin RNA,shRNA)真核表达载体pGPU6-Neo-RMPi。通过脂质体转染的方法转染到SMMC-7721肝癌细胞中,G418筛选出干扰RMP基因的细胞株;RT-PCR检测RMP基因的表达:流式细胞仪PI染色检测细胞周期

关键词：干扰 RMP 肝癌细胞细胞周期

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

脐血CD34+造血干/祖细胞在再生丝素膜上向内皮细胞分化的研究

脐血CD34+造血干/祖细胞在再生丝素膜上向内皮细胞分化的研究

引用

2011 International Conference on Biomedicine and Engineering

作者：陈瑶田丽娜张晓峰盛伟华韩亚丽刘铁连杨吉成缪竞诚苏州大学医学部基础医学与生物科学学院细胞与分子生物学教研室

目的:以人脐血CD34造血干/祖细胞为种子细胞,探讨其体外分离、纯化、诱导扩增和分化为内皮细胞的可行性,以及丝素材料对其生长、粘附、分化等情况的影响。方法:采集新鲜脐血,磁珠分选方法（MACS）分离出CD34单个核细胞,分别接种到再生... 详细信息

目的:以人脐血CD34造血干/祖细胞为种子细胞,探讨其体外分离、纯化、诱导扩增和分化为内皮细胞的可行性,以及丝素材料对其生长、粘附、分化等情况的影响。方法:采集新鲜脐血,磁珠分选方法（MACS）分离出CD34单个核细胞,分别接种到再生丝素膜（SF）和明胶包被的培养皿上,用含有内皮细胞生长因子（VEGF）和纤维细胞生长因子（bF GF）的M199培养基诱导分化,并比较不同材料上D34细胞的贴壁率及向内皮细胞分化比率。结果:细胞形态学观察发现,SF组和明胶组CD34细胞培养2周细胞长满瓶底并达到增殖高峰,细胞呈"铺路石"状排列;经诱导培养10d后,SF组和明胶组内皮细胞表型CD31阳性率分别为（75.53±4.89）%和（74.59±3.58）%,培养14d后,两组细胞vW F阳性率均可达80%以上;透射电镜两组细胞胞浆内均可见内皮细胞的Weibel-Palade小体;CD34+细胞在明胶和SF上均可较快贴壁,平均贴壁率为90.8%和85.2%,同时两组内皮细胞的分化比率均能达到60%以上,无明显差异。结论:脐血D34造血干/祖细胞在VEGF等细胞因子的诱导下有可能定向分化为内皮细胞,同时可用SF作为其向内皮细胞分化的支架材料,最终用于具有快速形成毛细血管网能力的组织化器官替代品。

关键词：脐血 CD34+造血干/祖细胞诱导分化内皮细胞丝素

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Ad-VEGF165-Ang-1转基因细胞修饰的再生丝素膜诱导血管形成效应及分子机制研究

Ad-VEGF165-Ang-1转基因细胞修饰的再生丝素膜诱导血管形成效应及...

引用

2011 International Conference on Biomedicine and Engineering

作者：陈瑶田丽娜张晓峰刘铁连韩亚丽盛伟华杨吉成缪竞诚苏州大学医学部基础医学与生物科学学院细胞与分子生物学教研室

目的:构建VEGF165及Ang-1双基因共表达腺病毒载体并研究该转基因细胞修饰的再生丝素膜诱导血管形成活性及其分子机制。方法:首先在科室已构建的IRES和双启动子介导的腺病毒空载体间分别插入Ang-1和VEGF165基因,由此构建出Ad-VEGF165-Pol... 详细信息

目的:构建VEGF165及Ang-1双基因共表达腺病毒载体并研究该转基因细胞修饰的再生丝素膜诱导血管形成活性及其分子机制。方法:首先在科室已构建的IRES和双启动子介导的腺病毒空载体间分别插入Ang-1和VEGF165基因,由此构建出Ad-VEGF165-PolyA-promoter-Ang-1、Ad-Ang-1-PolyA-promoter-VEGF165和Ad-VEGF165-IRES-Ang-1重组腺病毒载体。ELISA法检测比较IRES及PolyA-promoter二个不同载体中目的基因的表达;同时结合兔角膜缘注射病毒诱导血管新生的结果,挑选出一个最佳Ang-1与VEGF165双基因共表达腺病毒载体。将此最佳双基因共表达腺病毒感染在再生丝素膜上培养的兔骨髓基质细胞,用荧光显微镜、RT-PCR及ELISA法检测VEGF165及Ang-1基因在兔骨髓基质细胞中的转录和表达;转基因细胞修饰的再生丝素膜植入兔角膜层,检测角膜新生血管生长面积;HE染色及免疫组化法检测兔角膜层中血管密度及血管形成相关因子的表达。结果:(1)并成功获得了高效价的Ad-VEGF165-PolyA-promoter-Ang-1、Ad-Ang-1-PolyA-promoter-VEGF165和Ad-VEGF165-IRES-Ang-1重组病毒子。(2)ELISA法及兔角膜缘注射病毒法挑选与血管形成相关的最佳双基因腺病毒共表达载体Ad-VEGF165-PolyA-promoter-Ang-1。(3)培养于再生丝素膜上生长的兔骨髓基质细胞经上述挑选的病毒感染后,将该转基因细胞修饰的再生丝素膜植入兔角膜层,2周新生血管长入再生丝素膜植入区域的角膜内,新生血管维持1月以上,HE染色与免疫组化显示血管密度明显增多,CD34在兔角膜层中获得成功表达,与转Ad-GFP细胞修饰的再生丝素膜组和单纯再生丝素膜组比较呈显著性差异(P<0.05),由此证明Ad-VEGF165-PolyA-promoter-Ang-1转基因兔骨髓基质细胞修饰的丝素材料可促进血管生成。结论:成功构建并挑选出VEGF165和Ang-1最佳双基因共表达腺病毒载体,转VEGF165及Ang-1基因修饰的再生丝素膜有利于新生血管形成,为今后利用转基因种子细胞修饰的再生丝素膜,或构建诱导血管形成的生物膜材料提供了分子依据。

关键词：再生丝素膜血管生成素-1 血管内皮生长因子腺病毒转基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

利培酮和齐拉西酮对精神分裂症病人血浆CK影响

引用

齐鲁医学杂志 2011年第6期26卷 515-516页

作者：薛晓斌缪竞诚苏州大学基础医学与生物科学学院细胞与分子生物学教研室江苏苏州215100 青岛市精神卫生中心六病房

目的观察精神分裂症病人血浆细胞因子（CK）水平的变化,探讨利培酮和齐拉西酮对病人CK水平的影响。方法采用酶联免疫吸附法,检测50例精神分裂症病人治疗前后白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平,... 详细信息

目的观察精神分裂症病人血浆细胞因子（CK）水平的变化,探讨利培酮和齐拉西酮对病人CK水平的影响。方法采用酶联免疫吸附法,检测50例精神分裂症病人治疗前后白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平,以50名健康人作为对照。结果治疗前后利培酮和齐拉西酮组IL-2、IL-6和TNF-α的水平均高于正常对照组,差异有显著性（F=74.73-140.53,q=14.72-45.06,P〈0.01）;经利培酮及齐拉西酮治疗8周后,IL-2、IL-6和TNF-a水平均明显降低,与治疗前比较差异有显著意义（t=3.34-19.43,P〈0.01）。结论精神分裂症存在CK介导的免疫功能障碍,利培酮和齐拉西酮对CK具有调节作用。

关键词：精神分裂症利培酮齐拉西酮白细胞介素2 白细胞介素6 肿瘤坏死因子α

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

pp-GalNAc-T4表达载体的构建

引用

医药论坛杂志 2011年第24期32卷 131-133页

作者：李喆郭向红吴士良苏州市中医医院药剂科江苏苏州215007 苏州工业园区娄葑医院内科苏州大学基础医学及生物科学学院生物化学与分子生物学教研室

目的构建pp-GalNAc-T4的正义表达载体。方法采用质粒转染法构建真核表达载体。结果构建了pp-GalNAc-T4的正义表达载体,并得到了鉴定。结论构建了pp-GalNAc-T4的正义表达载体,研究发现了在pp-GalNAc-T4c DNA转染NB4细胞株后,在mRNA水平... 详细信息

目的构建pp-GalNAc-T4的正义表达载体。方法采用质粒转染法构建真核表达载体。结果构建了pp-GalNAc-T4的正义表达载体,并得到了鉴定。结论构建了pp-GalNAc-T4的正义表达载体,研究发现了在pp-GalNAc-T4c DNA转染NB4细胞株后,在mRNA水平及蛋白水平能稳定上调pp-GalNAc-T4的表达,可以用于以后的研究。

关键词： pp-GalNAc-T4 载体构建

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

吞噬烟曲霉对巨噬细胞活性变化的影响

引用

苏州大学学报（医学版） 2011年第1期31卷 26-29,34页

作者：陶莎韩雪琳张称徐培君黄德辉韩黎苏州大学医学部基础医学与生物科学学院病原生物学教研室江苏苏州215123 中国人民解放军军事医学科学院疾病预防控制所医院感染监控中心北京100071 中国人民解放军总医院神经内科北京100853

目的研究烟曲霉对巨噬细胞吞噬能力及细胞活性的影响规律。方法通过免疫荧光法测定巨噬细胞吞噬烟曲霉后吞噬量的变化,同时利用MTT比色法测定巨噬细胞的细胞活性变化。结果在吞噬初期(20min),巨噬细胞吞噬乳胶颗粒的速度明显高于吞噬孢... 详细信息

目的研究烟曲霉对巨噬细胞吞噬能力及细胞活性的影响规律。方法通过免疫荧光法测定巨噬细胞吞噬烟曲霉后吞噬量的变化,同时利用MTT比色法测定巨噬细胞的细胞活性变化。结果在吞噬初期(20min),巨噬细胞吞噬乳胶颗粒的速度明显高于吞噬孢子(P<0.05),然而最终(70min)吞噬两种颗粒的能力无明显差异(P>0.05);巨噬细胞吞噬休眠孢子及热灭活孢子的量无显著差异(P>0.05);另外,休眠孢子、热灭活休眠孢子及膨胀孢子均可显著降低巨噬细胞的细胞活性(均P<0.05),而烟曲霉菌丝和乳胶颗粒对巨噬细胞的细胞活性无明显影响(P>0.05)。无色素的烟曲霉白化株休眠孢子不能使巨噬细胞活性降低(P>0.05)。结论烟曲霉孢子表面色素可能是降低巨噬细胞活性的影响因素。

关键词：烟曲霉巨噬细胞细胞活性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

RMP基因沉默对肝癌SMMC-7721细胞增殖和迁移能力的影响

引用

肿瘤 2010年第1期30卷 15-20页

作者：连晓宁杨慧翠曹锴李敏盛伟华王晓婷郭云兰魏文祥苏州大学基础医学与生物科学学院细胞分子生物学教研室苏州215123

目的:建立RMP(RPB5-mediating protein)基因沉默的稳定细胞株,研究RMP小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人肝癌SMMC-7721细胞增殖和迁移的抑制作用。方法:首先,体外合成3条RMP基因的siRNA,并转染到SMMC-7721细胞中,RT-PCR检测3条siRNA对RMP基因表达的抑制作用,筛选出最佳干扰序列;然后,pGPU6-Neo-RMP-484真核表达载体转染,G418筛选出稳定干扰RMP基因的细胞株,RT-PCR法检测该稳定细胞株中RMP基因的干扰效率,MTT法检测RMP-siRNA对SMMC-7721细胞增殖及细胞黏附能力的影响,划痕实验检测细胞迁移能力的变化。结果:利用RNA干扰技术成功建立了RMP基因下调的稳定细胞株,与SMMC-7721细胞对照组比较,其RMP mRNA表达水平下调了(83.67±2.56)%。稳定转染siRNA的细胞株细胞增殖受到抑制,增殖抑制率可达(74.33±0.58)%。稳定转染细胞株的细胞黏附能力有所增加,迁移率则相应降低。结论:成功筛选出了稳定转染RMP-siRNA重组载体的细胞株。pGPU6-Neo-RMP-484重组载体能有效抑制RMP基因在肝癌SMMC-7721细胞内的表达,可作为RMP分子机制研究的细胞模型。RMP基因的下调能有效抑制肝癌细胞SMMC-7721的增殖,使其黏附率增加,同时细胞的迁移率降低。

关键词：癌,肝细胞 RNA干扰细胞增殖细胞运动 RPB5调节蛋白

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

结核分枝杆菌H37有毒株与无毒株的代谢相关基因pabB和lpdA启动子活性分析

引用

微生物学报 2010年第4期50卷 459-464页

作者：孙青吕亮东姚玉峰赵英伟苏州大学基础医学与生物科学学院苏州215123 上海交通大学医学院病原生物学教研室上海200025 复旦大学生命科学学院上海200433

【目的】通过分析结核分枝杆菌无毒株H37Ra的全基因组序列,并与H37Rv基因组序列比较,发现pabB和lpdA预测的启动子区发生了突变。我们利用报告基因,确认启动子突变与其基因转录水平的关系,探索结核分枝杆菌H37Ra毒力丧失的内在原因。【... 详细信息

【目的】通过分析结核分枝杆菌无毒株H37Ra的全基因组序列,并与H37Rv基因组序列比较,发现pabB和lpdA预测的启动子区发生了突变。我们利用报告基因,确认启动子突变与其基因转录水平的关系,探索结核分枝杆菌H37Ra毒力丧失的内在原因。【方法】利用生物信息学方法预测这两对基因的启动子区,采用PCR技术克隆这两对基因的启动子,与分枝杆菌启动子探针载体pMC210相连,DNA测序证实连接片段正确后,用电穿孔法将重组质粒转化至耻垢分枝杆菌mc2155。利用Quantitative Real-Time RT-PCR检测报告基因lacZ转录水平的差异,进一步验证这两对基因启动子的突变对相应基因转录水平的影响。【结果】Quantitative Real Time PCR检测结果显示H37RapabB启动子活性是H37Rv pabB启动子活性的6倍(p<0.05),而H37Rv lpdA启动子的活性是H37RalpdA启动子的2倍(p<0.05)。【结论】pabB,lpdA的启动子在H37Ra中的突变对其启动子的活性产生了影响,其中lpdA启动子的突变可能与结核分枝杆菌H37Ra的毒力丧失有关。

关键词：结核分枝杆菌 H37Rv H37Ra pMC210 pabB lpdA

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：