检索结果-内蒙古大学图书馆

一个中国雄性激素不敏感综合征大家系中AR-Arg^(840)Cys突变的生物学效应

中国生物化学与分子生物学报 2007年第2期23卷 160-166页

作者：王明华叶璐夷蒋东吴士良赵志民王久存苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室苏州大学附属第一人民医院胸外科贵阳中医学院第一附属医院普外科复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室上海200433

雄性激素不敏感综合征在中国有一个患者大家系.遗传分析表明,雄性激素受体(AR)的Arg840Cys突变是引起本家系疾病的原因.家系中的患者个体呈现高度变异的表型特征.选择具有显著代表性的3个患者个体,成功建立了这些个体的生殖器皮肤成纤... 详细信息

雄性激素不敏感综合征在中国有一个患者大家系.遗传分析表明,雄性激素受体(AR)的Arg840Cys突变是引起本家系疾病的原因.家系中的患者个体呈现高度变异的表型特征.选择具有显著代表性的3个患者个体,成功建立了这些个体的生殖器皮肤成纤维细胞系(GSF),并研究了各细胞系的生长动力曲线和生长周期的分布,发现这些指标和个体病症的严重程度呈一定的正相关性.通过比较野生型与突变性AR的空间结构变化以及转激活能力的变化,结合个体表型的差异性,推测由于个体的基因背景差异,相关AR辅调控因子的表达也会存在着差异,可能最终导致该家系患者显著的表型变化.目前,已利用蛋白质双向电泳,观察到个体间差异表达的蛋白,并在其中寻找AR的辅调控因子,以期进一步阐明AR-Arg840Cys突变一因多效性的机制.

关键词：雄性激素不敏感综合征生殖器皮肤成纤维细胞辅调控因子转激活

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大鼠视交叉上核与松果体中Clock基因转录的昼夜节律性及不同光反应性(英文)

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生理学报 2006年第4期58卷 359-364页

作者：王国卿傅春玲李建祥杜玉珍童建苏州大学医学院基础医学系生理学教研室苏州大学放射医学与公共卫生学院卫生毒理学教研室苏州215123

本研究旨在观察和比较视交叉上核(suprachiasmatic nucleus,SCN)与松果体(pineal gland,PG)中Clock基因内源性昼夜转录变化规律以及光照对其的影响。Sprague-Dawley大鼠在持续黑暗(constant darkness,DD)和12 h光照：12 h黑暗交替(12 hour- light：12 hour-dark cycle,LD)光制下分别被饲养8周(n=36)和4周(n=36)后,在一昼夜内每隔4 h采集一组SCN和PG组织(n=6),提取总RNA,用竞争性定量RT-PCR测定不同昼夜时点(circadian times,CT or zeitgeber times,ZT)各样品中Clock基因的mRNA相对表达量,通过余弦法和Clock Lab软件获取节律参数,并经振幅检验是否存在昼夜节律性转录变化。结果如下：(1)SCN中Clock基因mRNA的转录在DD光制下呈现昼低夜高节律性振荡变化(P＜0．05),PG中Clock基因的转录也显示相似的内源性节律外观,即峰值出现于主观夜晚(SCN为CT15,PG为CT18),谷值位于主观白天(SCN为CT3,PG为CT6)(P＞0．05)。(2) LD光制下SCN中Clock基因的转录也具有昼夜节律性振荡(P＜0．05),但与其DD光制下节律外观相比,呈现反时相符律变化(P＜0．05),且其表达的振幅及峰值的mRNA水平均增加(P＜0．05),而PG中Clock基因在LD光制下转录的相应节律参数变化却恰恰相反(P＜0．05)。(3)在LD光制下,光照使PG中Clock基因转录的节律外观反时相于SCN(P＜0．05),即在SCN和PG的峰值分别出现于光照期ZT10和黑暗期ZT17,谷值分别位于黑暗期ZT22和光照期ZT5。结果表明,Clock基因的昼夜转录在SCN和PG中存在同步的内源性节律本质,而光导引在这两个中枢核团调节Clock基因昼夜节律性转录方面有着不同的作用。

关键词： Clock基因昼夜节律光照视交叉上核松果体

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宫颈鳞癌生存素与p53表达的相关性

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江苏医药 2006年第4期32卷 386-387页

作者：王修珍顾永平邓海珍苏州大学医学院基础医学系病理教研室 215123

生存素(survivin)是近年新发现的一种凋亡抑制基因,具有抑制凋亡效应蛋白酶Caspase活性、参与细胞周期调控及调节有丝分裂等多种生物学作用。我们应用免疫组织化学方法观察宫颈癌组织中生存素和p53蛋白的表达,着重探索生存素和p53在宫... 详细信息

生存素(survivin)是近年新发现的一种凋亡抑制基因,具有抑制凋亡效应蛋白酶Caspase活性、参与细胞周期调控及调节有丝分裂等多种生物学作用。我们应用免疫组织化学方法观察宫颈癌组织中生存素和p53蛋白的表达,着重探索生存素和p53在宫颈鳞癌发生发展中的相关性。[第一段]

关键词： p53表达宫颈鳞癌生存素免疫组织化学方法 Caspase 凋亡抑制基因细胞周期调控生物学作用 p53蛋白宫颈癌组织

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丹参提取物调脂作用机制

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江苏医药 2006年第8期32卷 752-754页

作者：薛洁谢梅林顾振纶苏州大学医学院基础医学系药理教研室 215007

目的探讨丹参提取物调脂作用机制。方法采用高效液相色谱法(HPLC),观察丹参提取物在大鼠血清中的吸收情况;采用两性霉素B细胞模型和RTPCR法,分别观察丹参素钠对细胞内内源性胆固醇合成和肝细胞胆固醇7α羟化酶(CYP7A)mRNA表达的影响。... 详细信息

目的探讨丹参提取物调脂作用机制。方法采用高效液相色谱法(HPLC),观察丹参提取物在大鼠血清中的吸收情况;采用两性霉素B细胞模型和RTPCR法,分别观察丹参素钠对细胞内内源性胆固醇合成和肝细胞胆固醇7α羟化酶(CYP7A)mRNA表达的影响。结果丹参提取物以72mg/kg给大鼠口服给药30min后,在标准品丹参素钠吸收峰相应的出峰时间有吸收峰出现;在两性霉素B细胞模型实验中,丹参素钠组(25～200μg/ml)的细胞存活率从24.0%增加到80.2%,同时它也能上调大鼠BRL肝细胞上CYP7AmRNA表达。结论丹参提取物口服给药后能吸收入血,并通过抑制内源性胆固醇合成和上调CYP7AmRNA表达来发挥调脂作用。

关键词：丹参素钠内源性胆固醇胆固醇 7α-羟化酶

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人多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶2基因反义RNA表达质粒的构建及其功能的初步研究

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中国生物化学与分子生物学报 2006年第1期22卷 43-48页

作者：仇灏金美芳周迎会孙其昌刘可人沈宏杰吴士良苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室苏州215007

反义封闭人多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(pp-GalNAc-T2)的基因表达,对胃癌细胞SGC7901中转化生长因子-β1(TGF-β1)与基质金属蛋白酶2(MMP2)基因表达及细胞增殖有影响.在对几株肿瘤细胞的pp-GalNAc-T2基因表达水平进行分析后,以高表达pp... 详细信息

反义封闭人多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(pp-GalNAc-T2)的基因表达,对胃癌细胞SGC7901中转化生长因子-β1(TGF-β1)与基质金属蛋白酶2(MMP2)基因表达及细胞增殖有影响.在对几株肿瘤细胞的pp-GalNAc-T2基因表达水平进行分析后,以高表达pp-GalNAc-T2的人胃癌细胞株SGC7901的总RNA为模板,利用RT-PCR方法扩增两段不同长度pp-GalNAc-T2基因片段,构建反义表达载体转染胃癌细胞SGC7901,通过G418筛选,建立一系列旨在封闭胃癌细胞SGC7901ppGalNAc-T2基因表达的亚细胞克隆.通过流式细胞术、荧光显微镜、RT-PCR及Western印迹检测反义封闭pp-GalNAc-T2基因RNA表达后胃癌细胞SGC7901增殖以及TGF-β1、MMP2表达水平的变化.反义封闭pp-GalNAc-T2基因表达后,胃癌细胞SGC7901 pp-GalNAc-T2的表达水平明显降低,细胞分裂增殖减慢,表明反义封闭pp-GalNAc-T2基因表达对胃癌细胞SGC7901的生长增殖有影响.结果还显示,反义封闭pp-GalNAc-T2基因表达可使TGF-β1、MMP2基因在mRNA与蛋白质表达水平均增加,提示pp-GalNAc-T2基因表达可能对胃癌细胞SGC7901浸润转移产生影响.以上结果表明,pp-GalNAc-T2基因在肿瘤细胞中广泛表达,并可能与肿瘤的增殖及浸润转移相关.

关键词：多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶基质金属蛋白酶转化生长因子-β1 SGC7901细胞

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神经细胞凋亡和Caspase-3表达与脑损伤时间的关系

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四川大学学报（医学版） 2006年第4期37卷 618-620页

作者：李凡王晔莫耀南刘敏马淑玲秦豪杰廖志钢四川大学华西基础医学和法医学院法医病理学教研室河南科技大学法医学系

目的观察脑挫伤后神经细胞凋亡和调节因子C aspase-3表达的时序变化,探索损伤时间推断的新方法。方法采用TUNEL和免疫组化染色方法,结合图像分析技术对不同损伤时间组的脑挫伤组织进行染色观察和分析。结果①TUNEL和C aspase-3免疫组化... 详细信息

目的观察脑挫伤后神经细胞凋亡和调节因子C aspase-3表达的时序变化,探索损伤时间推断的新方法。方法采用TUNEL和免疫组化染色方法,结合图像分析技术对不同损伤时间组的脑挫伤组织进行染色观察和分析。结果①TUNEL和C aspase-3免疫组化染色的阳性细胞分布在挫伤灶中央及其周围的半影区,与远隔部位和对照组脑组织呈阴性染色形成明显对比;半影区比中央区更显著,两者差异有统计学意义(P<0.05)。②脑挫伤后随着损伤时间的延长,半影区TUNEL染色和C aspase-3表达逐渐增强,呈平行关系;48 h内两种染色方法的平均积分光密度(IOD)增加与损伤时间呈线性关系(r分别为0.93和0.69)。结论观察脑挫伤后神经细胞凋亡和C aspase-3的表达随损伤时间逐渐增强的变化规律,可以作为损伤时间推断的新方法。

关键词：脑挫伤神经细胞凋亡 Caspase-3 损伤时间推断法医病理学

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ING4的原核表达及多克隆抗体的制备

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苏州大学学报（医学版） 2006年第6期26卷 930-932,935页

作者：王金志缪竞诚盛伟华谢宇锋杨吉成苏州大学医学院基础医学系细胞与分子生物学教研室江苏苏州215123

目的在原核系统中表达并纯化ING4蛋白,制备多克隆抗体。方法构建表达载体pET-21a(+)-ING4,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳检测。结果构建的表达载体pET-21a(+)-hGDNF经酶切、PCR鉴定均出现750 bp左右的条带,测序结... 详细信息

目的在原核系统中表达并纯化ING4蛋白,制备多克隆抗体。方法构建表达载体pET-21a(+)-ING4,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳检测。结果构建的表达载体pET-21a(+)-hGDNF经酶切、PCR鉴定均出现750 bp左右的条带,测序结果正确,用IPTG诱导转化菌有30KD大小的目的条带,表达的目的蛋白占菌体总蛋白10%以上,以包涵体形式存在,纯化后其纯度可达70%以上。用纯化的ING4蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体。结论制备的多克隆抗体为下阶段的研究提供了重要的实验材料。

关键词：原核表达抗体 ING4

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一株新的鼠抗人2IgB7-H3功能性单克隆抗体的研制及其生物学特性的鉴定

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现代免疫学 2006年第4期26卷 278-282页

作者：饶爱华周迎会陈永井马震宇张学光苏州大学基础医学系生物化学教研室苏州大学医学院生物技术研究所苏州215007

研制功能性鼠抗人2IgB7-H3单克隆抗体。以人2IgB7-H3基因转染细胞1．929／2IGB7-H3为免疫原，常规免疫6～8周龄的雌性BALB／c小鼠；利用B淋巴杂交瘤技术，将免疫小鼠脾脏细胞和骨髓瘤细胞株SP2／0融合，1．929／2IGB7-H3细胞为抗原筛选... 详细信息

研制功能性鼠抗人2IgB7-H3单克隆抗体。以人2IgB7-H3基因转染细胞1．929／2IGB7-H3为免疫原，常规免疫6～8周龄的雌性BALB／c小鼠；利用B淋巴杂交瘤技术，将免疫小鼠脾脏细胞和骨髓瘤细胞株SP2／0融合，1．929／2IGB7-H3细胞为抗原筛选阳性细胞；经间接免疫荧光标记法对杂交瘤细胞进行反复筛选和多次克隆化培养；采用快速定性试纸法鉴定单抗Ig亚类；利用竞争抑制性实验分析该单抗识别的抗原表位；采用MTT法分析该单抗在体外阻断DC对T细胞的促增殖效应。结果：获得了1株持续稳定分泌鼠抗人2IgB7-H3单克隆抗体的杂交瘤细胞株（命名为7D7），该单抗可特异识别1．929／2IGB7-H3分子和介导有效的共刺激信号。该单抗的成功获得和其生物学特性的初步鉴定，为进一步研究B7-H3两个异构体在DC细胞及肿瘤细胞上的作用机制奠定了物质基础。

关键词： 2IgB7-H3 单克隆抗体共刺激信号杂交瘤细胞株

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PD-1及其配体PD-L1/PD-L2在寄生虫感染免疫中的作用

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国际医学寄生虫病杂志 2006年第1期33卷 53-56页

作者：李颖夏超明苏州大学基础医学系寄生虫教研室苏州215000

程序性死亡-1(programmed death1,PD-1)及其配体PD-L1(ligand1of programmed death-1)/PD-L2(ligand2of programmed death-1)是继CTLA-4/CD28后发现的B7/CD28家族分子,能负调控T细胞的活化和细胞因子的分泌,在寄生虫感染免疫、肿瘤免疫和自身免疫性疾病中有重要的临床应用前景。该文对PD-1的生物学特点及其与配体的作用途径等进行综述。

关键词： PD-1 感染免疫寄生虫感染

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Huntingtin聚合与Huntington舞蹈病

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中国临床神经科学 2006年第1期14卷 106-109,112页

作者：王晔顾振纶秦正红苏州大学医学院基础医学系药理教研室 215123

许多神经退行性疾病是由蛋白质错误折叠导致的。Huntington舞蹈病(HD)是由蛋白质多聚谷氨酰胺延长引起的9种疾病之一,含延长多聚谷氨酰胺序列的蛋白质聚集在中枢神经系统的神经元中形成包涵体(inclusions)和聚集体(aggregates)。本文综... 详细信息

许多神经退行性疾病是由蛋白质错误折叠导致的。Huntington舞蹈病(HD)是由蛋白质多聚谷氨酰胺延长引起的9种疾病之一,含延长多聚谷氨酰胺序列的蛋白质聚集在中枢神经系统的神经元中形成包涵体(inclusions)和聚集体(aggregates)。本文综述了Huntingtin蛋白错误折叠和聚集的机制以及疾病治疗的有关研究进展。

关键词：蛋白质构型异常蛋白酶系统 Huntington舞蹈病聚集体

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