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华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流会

作者：吴艳孙其昌周嘉良吴士良苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室苏州大学生化工程研究所苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室苏州大学生化工程研究所苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室苏州大学生化工程研究所苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室苏州大学生化工程研究所

β3GALT7(AY277592,EC2．4．1-)基因是我们实验室利用TBLASTN信息途径,以β3GALT1为信息探针进行同源帅选后从人肺cDNA文库中克隆到的人类β3-半乳糖基转移酶家族的一个新成员。 Northern杂交显示其在肺、喉和回肠组织中高表达而在舌、... 详细信息

β3GALT7(AY277592,EC2．4．1-)基因是我们实验室利用TBLASTN信息途径,以β3GALT1为信息探针进行同源帅选后从人肺cDNA文库中克隆到的人类β3-半乳糖基转移酶家族的一个新成员。 Northern杂交显示其在肺、喉和回肠组织中高表达而在舌、乳房、子宫等组织中表达较低。为了进一步认知该酶的功能,我们进行了一些探索性的研究。方法:通过原核表达系统表达β3GALT7蛋白,以纯化的β3GALT7蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体并用Western Blot和免疫组化的方法分析其在多种组织和细胞中的表达情况;通过荧光免疫细胞化学的方法进行亚克隆定位;克隆β3GALT7编码区的基因并构建其真核正义和反义表达载体,并运用脂质体介导将此重组载体转染中度表达该基因的人 SGC7901细胞株,和较高表达β3GALT7的A549细胞株,并通过荧光显微镜,激光共聚焦显微镜,RTPCR, western印迹等方法对其进行了初步的功能研究。结果:获得了较纯的β3GALT7表达蛋白和高效价、高特异性的抗β3GALT7的多克隆抗体,免疫组化显示肿瘤细胞和组织中该酶有较高的表达,与正常组织比较具有一定的差异,亚克隆定位显示β3GALT7大部分位于核膜周围的胞浆。同时获得了β3GALT7的正义、反义的真核重组质粒及稳定转染了这些重组质粒的细胞株,发现转染了正义质粒的 SGC7901细胞其β3GALT7蛋白表达水平增加,MMP2、MMP14的蛋白表达水平随其亦有所上升,而转染了反义β3GALT7的A549细胞其MMP2和MMP14的蛋白表达量随着β3GALT7的被抑制而成正相关下降,提示β3GALT7可能与肿瘤的发生、发展和转移具有一定的相关性。

关键词：半乳糖基转移酶 β3GALT7 多克隆抗体免疫组化原核表达真核表达

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白介素-24与肺癌

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国际呼吸杂志 2006年第2期26卷 109-111页

作者：朱晔涵杨吉成胡华成苏州大学附属第一医院呼吸科 215006 苏州大学医学院基础医学系细胞和分子生物学教研室 215007 苏州大学附属第二医院呼吸科 215004

白介素-24(IL-24)即是黑色素瘤分化相关基因-7(mda-7),属于IL-10家族成员,除具免疫刺激应答功能外,还被认为是一抑癌基因。IL-24可以抑制多种肺癌细胞的生长,其主要机制是提高肿瘤抑制基因表达,减少原癌基因的表达,促进凋亡,以及抑制肿... 详细信息

白介素-24(IL-24)即是黑色素瘤分化相关基因-7(mda-7),属于IL-10家族成员,除具免疫刺激应答功能外,还被认为是一抑癌基因。IL-24可以抑制多种肺癌细胞的生长,其主要机制是提高肿瘤抑制基因表达,减少原癌基因的表达,促进凋亡,以及抑制肿瘤血管生成。IL-24还具有增加肺癌细胞对射线敏感性的作用。IL-24有望成为肿瘤临床综合治疗的有效手段之一。

关键词：白介素-24 黑色素瘤分化相关基因-7 肺癌

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人类多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族分子进化的初步研究

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江苏大学学报（医学版） 2006年第2期16卷 105-108页

作者：杭赛宇吴士良苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室江苏苏州215123 苏州大学生化工程研究所江苏苏州215123

目的:探讨人类多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族成员间的同源性,揭示其进化规律。方法:采用生物信息学软件和网上数据库对核酸蛋白质序列进行同源比较,结构域分析和进化树绘制。结果:人类多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族一级结构、二... 详细信息

目的:探讨人类多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族成员间的同源性,揭示其进化规律。方法:采用生物信息学软件和网上数据库对核酸蛋白质序列进行同源比较,结构域分析和进化树绘制。结果:人类多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族一级结构、二级结构均有较高的同源性,系统进化树显示各成员来源于同一祖先并在不同时期分野。结论:各成员来自于同一祖先的同一家族,其进化方式属于趋异性进化。

关键词：多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶序列比较结构域系统进化树

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多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族在不同发育阶段的小鼠脑中的mRNA表达差异

多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族在不同发育阶段的小鼠脑中的mRN...

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华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流会

作者：胡鹤娟杨静杭赛宇吴士良苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室生化工程研究所苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室生化工程研究所苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室生化工程研究所苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室生化工程研究所

目的:为了观察三个不同发育阶段的小鼠脑中多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族(polypeptide: N-acetylgalactosaminytransferase,ppGalNAc-T)的表达差异,以探讨多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族在脑发育中的功能与作用;方法:取不同发育阶... 详细信息

目的:为了观察三个不同发育阶段的小鼠脑中多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族(polypeptide: N-acetylgalactosaminytransferase,ppGalNAc-T)的表达差异,以探讨多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族在脑发育中的功能与作用;方法:取不同发育阶段(即孕末期,新生期,4周龄)的小鼠各六只, 取脑组织后,我们采用半定量逆转录PCR方法从mRNA水平上粗略地研究了多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族在三个发育阶段的表达情况,以β-actin作为内对照,计算酶家族各成员的相对表达量,从而进行半定量分析;结果:我们发现三个不同发育阶段的小鼠脑中此酶家族的表达谱是不尽相同的。 T1、T2、T3、T4、T9、T10、T13、T14稳定表达,T3、T4、T9、T10在胎鼠中表达较高,在新生鼠和4周龄鼠中表达较低,且在新生鼠和4周龄鼠中的表达基本相同,T1、T2、T14等在各发育阶段鼠脑中表达基本无变化;结论:我们初步认为在小鼠脑的发育过程中多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族的表达有一定的变化,在今后的实验中,将在时间点及脑分区,即时空性表达方面,作更进一步地完善细致的研究, 进一步推动多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族在神经系统发育方面的研究工作,以探讨多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶家族在脑发育中的功能与作用

关键词： ppGalNAc-T 小鼠脑表达 RT-PCR

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亨廷顿舞蹈病一家系四例

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中华医学遗传学杂志 2006年第4期23卷 486-486页

作者：林芳陈志欣刘春风顾振纶秦正红苏州大学独墅湖校区基础医学系药理教研室 215123 第二附属医院神经内科

先证者(Ⅱ8)男,41岁.3年前无明显诱因,逐渐出现头颈部及四肢不自主运动,精细动作困难,运动不协调.同时还出现情绪不稳,反应迟钝.问诊及体检时患者烦躁、注意力不集中.患者四肢肌力正常,肌张力减低,腱反射对称,无感觉障碍。

关键词：亨廷顿舞蹈病家系注意力不集中不自主运动运动不协调无感觉障碍精细动作情绪不稳反应迟钝先证者

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大鼠视交叉上核与松果体中Clock基因转录的昼夜节律性及不同光反应性(英文)

大鼠视交叉上核与松果体中Clock基因转录的昼夜节律性及不同光反...

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2006全国时间生物医学学术会议

作者：王国卿傅春玲李建祥杜玉珍童建苏州大学医学院基础医学系生理学教研室苏州大学放射医学与公共卫生学院卫生毒理学教研室苏州大学放射医学与公共卫生学院卫生毒理学教研室苏州大学放射医学与公共卫生学院卫生毒理学教研室苏州大学放射医学与公共卫生学院卫生毒理学教研室

目的:探讨12 h光照、12 h黑暗交替(12 h-light:12 h-dark cycle,LD)及持续黑暗(constant darkness,DD)光制下视交叉上核(suoracguasnatuc nucleus,SCN)与松果体(pineal gland,PG)中Clock基因的昼夜节律性表达及其光反应变化。方法:Sprague-Dawley大鼠在LD和DD光制下分别被饲养4周(n＝36)和8周(n＝36)后,在一昼夜内每隔4h 采集一组SCN和PG组织(n＝6),提取总RNA,用竞争性定量RT-PCR测定不同昼夜时点(circadian times,CT or zeitgeber times,ZT)各样品中Clock基因的mRNA相对表达量,通过余弦法和Clock Lab软件获取节律参数,并经振幅检验是否存在昼夜节律。结果:(1)在DD或LD光制下,SCN和PG中Clock基因mRNA的表达均呈现昼夜节律陸振荡(P<0．05)。(2)在DD光制下,SCN和PG之间Clock基因转录显示相似的节律外观(P>0．05),峰值出现于主观夜晚(SCN为CT15,PG为CT18),谷值位于主观白天(SCN为CT3,PG为CT6)。(3)与DD光制下比较,LD光制下松果体Clock基因的转录也展示出上述类似的节律外观,但其表达的振幅及峰值相的mRNA水平均明显降低(P<0．05),而其在SCN中转录的相应参数变化却恰恰相反(P<0．05)。(4)在LD光制下,PG中Clock 基因转录的节律外观反时相于SCN。结论:Clock基因的昼夜转录在SCN和松果体中存在同步的内源性节律本质, 而光导引在这西个中枢核团调节Clock基因昼夜节律性转录方面有着不同的作用。

关键词： Clock基因昼夜节律光照视交叉上核松果体

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挤压家兔后肢导致急性肝损伤和抗氧化能力降低

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法医学杂志 2006年第4期22卷 248-250页

作者：韩业兴谷振勇丛斌岑新海刘东旭刘晓苏州大学医学院法医学教研室江苏苏州215123 河北医科大学法医学系河北石家庄050017 张家口市公安局刑警支队河北张家口075000

目的本实验观察挤压家兔后肢导致肝氧化损伤,探讨氧化应激在挤压家兔后肢导致肝损伤中的作用。方法用标准重物间断压迫家兔后肢复制模型。采用生化方法检测ALT和AST活性;分析天平称重方法检测肝脏湿干重比值(W/D);比色法测定肝组织超氧... 详细信息

目的本实验观察挤压家兔后肢导致肝氧化损伤,探讨氧化应激在挤压家兔后肢导致肝损伤中的作用。方法用标准重物间断压迫家兔后肢复制模型。采用生化方法检测ALT和AST活性;分析天平称重方法检测肝脏湿干重比值(W/D);比色法测定肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和总抗氧化能力(T-AOC)以及丙二醛(MDA)含量变化;并观察肝组织病理学改变。结果血清ALT和AST活性明显增高(P<0.01),肝细胞明显肿胀,肝窦轻度淤血,而肝脏湿干重比值(W/D)轻度增加(P<0.05);肝脏氧化损伤明显加重,MDA含量增高,而肝脏抗氧化能力下降,SOD、CAT、GSH-Px活性和T-AOC分别比对照组降低了17%、29%、24%和21%(P均<0.01)。结论挤压家兔后肢引起急性肝损伤及肝脏的抗氧化能力下降;肝脏局部抗氧化能力下降可能是肝损伤的重要因素。

关键词：肝脏氧化应激抗氧化能力挤压伤

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胰腺实性假乳头状瘤临床病理特征及预后的研究

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中华普通外科杂志 2006年第4期21卷 244-247页

作者：仲伟霞宋化郭玲玲穆殿斌孙兰萍杨爱清战雪梅李俞慧李胜山东省肿瘤医院病理科济南250117 菏泽市立医院病理科 274031 苏州大学基础医学系病理教研室 215000 山东省肿瘤医院病理科 250017 山东省肿瘤医院病理科 271000 临沂市人民医院病理科 276003 山东省肿瘤医院肝胆外科济南250117

目的探讨胰腺实性假乳头状瘤临床病理和免疫组化特征、组织起源及生物学行为。方法对20例胰腺实性假乳头状瘤手术标本进行HE和免疫组化SP法染色检查。结果 20例患者中女性18例,男性2例,年龄13-48岁,平均25．3岁。多以腹块、腹痛为首发... 详细信息

目的探讨胰腺实性假乳头状瘤临床病理和免疫组化特征、组织起源及生物学行为。方法对20例胰腺实性假乳头状瘤手术标本进行HE和免疫组化SP法染色检查。结果 20例患者中女性18例,男性2例,年龄13-48岁,平均25．3岁。多以腹块、腹痛为首发症状。术后17例获得随访,随访时间9-120个月。其中14例生存至今,3例患者死亡。肿瘤组织学特征:有包膜,囊实性混合,镜下特征性结构为肿瘤细胞围绕纤维血管复层排列形成假乳头状突起。免疫组化α-1抗胰蛋白酶17例(85％)和波形蛋白14例(70％)弥漫阳性,突触素阳性10例(50％),嗜铬粒素A灶状弱阳性5例(25％),细胞角蛋白阳性2例(10％),胰岛素阳性2例(10％)和胰高血糖素阳性1例 (5％),S-100蛋白阳性1例(5％),孕激素受体(PR)弥漫强阳性14例(70％),雌激素受体(ER)阳性 1例(5％),pS2蛋白阳性6例(30％),癌胚抗原及胃泌素全部阴性。结论胰腺实性假乳头状瘤多发生在年轻女性,肿瘤细胞多为外分泌细胞及内分泌细胞分化,与性激素受体关系密切,是一种低度恶性肿瘤。

关键词：胰腺肿瘤病理学,临床诊断预后性激素受体

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GSFs细胞蛋白质组双向电泳图谱的建立

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江苏大学学报（医学版） 2006年第6期16卷 496-499页

作者：王明华蒋东吴士良王久存苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室江苏苏州215123 苏州大学附属第一人民医院胸外科江苏苏州215006 复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室上海200433

目的：建立GSF细胞蛋白质组双向电泳图谱。方法：用含10％胎牛血清的DMEM培养液培养GSF细胞，胰酶消化后收集细胞，加入细胞裂解液使细胞充分裂解，离心后取上清液进行第一向等电聚焦电泳和平衡，再进行第二向SDS-PAGE（十二烷基磺酸钠... 详细信息

目的：建立GSF细胞蛋白质组双向电泳图谱。方法：用含10％胎牛血清的DMEM培养液培养GSF细胞，胰酶消化后收集细胞，加入细胞裂解液使细胞充分裂解，离心后取上清液进行第一向等电聚焦电泳和平衡，再进行第二向SDS-PAGE（十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳）和银染显色及图像扫描与分析。结果：通过对GSF细胞蛋白提取液进行双向电泳，在17cm pH5～8IPG胶条上可得到重复性及分辨率均较好的蛋白位点。结论：GSF细胞蛋白质组双向电泳图谱的建立。为其蛋白质组学的进一步研究奠定了基础。

关键词：双向电泳 GSF细胞蛋白质组

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运用Excel软件对教学切片制作进行优化管理

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实用预防医学 2006年第1期13卷 201-201页

作者：邹鹰黄河陈庆林李菁中南大学基础医学院组织学与胚胎学教研室湖南长沙410013 中南大学基础医学院法医学系

教学切片是医学形态学课程的重要教学工具,许多医学主干课程,如组织学、胚胎学、病理学、法医学和寄生虫学等皆需要大量的教学切片进行实验教学。因而教学切片的制作是教辅工作的重要组成部分,切片质量的好坏直接影响到实验教学效果,而... 详细信息

教学切片是医学形态学课程的重要教学工具,许多医学主干课程,如组织学、胚胎学、病理学、法医学和寄生虫学等皆需要大量的教学切片进行实验教学。因而教学切片的制作是教辅工作的重要组成部分,切片质量的好坏直接影响到实验教学效果,而教学切片制作的管理则是教学切片质量的重要保证。为了制作出优质的教学切片,需从动物或人身上取大量的新鲜组织来一一制作样片,通过在显微镜下对样片的认真观察,来筛选出符合教学要求的组织蜡块(一种教学切片可能有几个符合条件的样片),再来成批制作成教学切片。[第一段]

关键词：切片制作教学工具 Excel软件管理教学切片医学形态学优化主干课程实验教学切片质量

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