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第三军医大学学报 2018年第4期40卷 296-301页

作者：唐斌林王亚伟祥蔚缪洪明史春梦陆军军医大学(第三军医大学)军事预防医学系全军复合伤研究所、创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400038

目的探讨线粒体靶向七甲川花菁类荧光小分子IR-61对小鼠非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)模型的治疗效果。方法通过喂养高脂饲料建立NAFLD小鼠模型,腹腔注射磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline,PBS)或IR-61... 详细信息

目的探讨线粒体靶向七甲川花菁类荧光小分子IR-61对小鼠非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)模型的治疗效果。方法通过喂养高脂饲料建立NAFLD小鼠模型,腹腔注射磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline,PBS)或IR-61,治疗18周后,取肝脏组织切片HE常规染色,显微镜下观察,采用酶比色法检测肝脏和血清甘油三酯(triglyceride,TG)含量,Real-time PCR和Western blot法检测固醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulatory element binding protein 1c,SREBP-1c)、乙酰辅酶A羧化酶1(acetyl-Co A carboxylase-1,ACC1)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator-activated receptor-α,PPARα)和肉毒碱棕榈酰转移酶-1(carnitine palmitoyltransferase-1,CPT1)的mRNA及蛋白表达水平。结果 IR-61可降低高脂诱导的小鼠肝脏TG含量增加,抑制SREBP-1c、ACC1过度表达;同时增加肝脏PPARα、CPT1的表达(P<0.05);IR-61可明显改善小鼠肝脏的脂肪沉积。结论 IR-61通过抑制高脂诱导的脂肪合成代谢过度增强,促进肝脏脂肪酸氧化,减少肝脏甘油三酯沉积,从而改善非酒精性脂肪肝。

关键词： IR-61 非酒精性脂肪肝固醇调节元件结合蛋白1c 乙酰辅酶A羧化酶1

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RNA结合蛋白与RNA相互作用鉴定技术

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中国生物化学与分子生物学报 2017年第2期33卷 103-107页

作者：陈伟许馨孙绍光河北医科大学基础医学院临床医学系石家庄050017 河北医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室石家庄050017

RNA结合蛋白(RNA binding proteins,RBPs)通过与RNA相互作用,广泛参与到RNA的剪切、转运、编辑、胞内定位及翻译调控等过程中。RNA领域尤其是非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)研究的快速发展,催生了多种RBPs-RNAs相互作用鉴定技术。这... 详细信息

RNA结合蛋白(RNA binding proteins,RBPs)通过与RNA相互作用,广泛参与到RNA的剪切、转运、编辑、胞内定位及翻译调控等过程中。RNA领域尤其是非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)研究的快速发展,催生了多种RBPs-RNAs相互作用鉴定技术。这些技术反之又推动了RNA领域的研究进程。本文对紫外交联免疫沉淀(ultraviolet crosslinking and immunoprecipitation,CLIP),CLIP cDNA文库高通量测序(high-throughput sequencing of CLIP cDNA library,HITS-CLIP),光活化核苷增强的CLIP(photoactivatable-ribonucleoside-enhanced crosslinking and immunoprecipitation,PAR-CLIP),单核苷酸分离CLIP(individual nucleotide resolution CLIP,i CLIP),TRIBE(targets of RNA-binding protein identified by editing),RNA标记,相互作用组捕获(interactome capture,IC)和Ser IC(serial RNA interactome capture)等RBPs-RNAs相互作用鉴定技术的基本原理和优缺点以及应用进行综述。

关键词： RNA结合蛋白紫外交联免疫沉淀 CLIP cDNA文库高通量测序光活化核苷增强的CLIP RNA结合蛋白免疫沉淀微阵列 TRIBE RNA标记相互作用组捕获

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大鼠脑创伤对学习记忆及海马环磷腺苷反应元件结合蛋白的影响

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重庆医学 2018年第14期47卷 1850-1852页

作者：熊翺金戈李利锋吴双熊仁平鲁宏郑州大学临床医学系 450001 郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室 450001 重庆市第七人民医院放射科 400054 陆军军医大学大坪医院野战外科研究所/创伤烧伤与复合伤国家重点实验室分子生物学中心重庆400042

目的观察脑创伤早期的脑含水量、环磷腺苷反应元件结合蛋白(CREB)及其磷酸化水平,探讨脑创伤和磷酸化CREB(p-CREB)水平的改变对学习记忆的影响。方法将54只成年雄性Wistar大鼠,按随机数字表法分为正常组、对照组、创伤性脑损伤(TBI)组,... 详细信息

目的观察脑创伤早期的脑含水量、环磷腺苷反应元件结合蛋白(CREB)及其磷酸化水平,探讨脑创伤和磷酸化CREB(p-CREB)水平的改变对学习记忆的影响。方法将54只成年雄性Wistar大鼠,按随机数字表法分为正常组、对照组、创伤性脑损伤(TBI)组,每组18只。采用改良的Feeney法和前期实验参数建立TBI大鼠模型,Western blot观察创伤后12h脑海马组织CREB和p-CREB表达、干湿质量法测定脑组织含水量和Morris水迷宫实验。结果大鼠TBI后12h脑组织含水量,与正常组和对照组相比,TBI组升高明显(P<0.01)。与正常组和对照组比较,TBI组大鼠TBI后12h海马CREB和p-CREB蛋白的表达量降低明显;潜伏期增加,2min内寻求正确次数减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 TBI后脑水肿明显,CREB和p-CREB水平降低,可能是使认知和学习记忆功能受损的原因之一。

关键词：创伤性脑损伤 Morris水迷宫环磷腺苷反应元件结合蛋白

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虚拟实验在生物化学实验中的应用

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基础医学教育 2017年第11期19卷 866-868页

作者：徐岚朱旻高上上苏州大学基础医学与生物科学学院生物化学与分子生物学教研室苏州215123 苏州大学基础医学与生物科学学院办公室

为了培养学生的实践能力,激发学生自主学习的兴趣,充分利用实验教学资源,文章对如何将生物化学虚拟实验引入传统实验教学,做出了实验教学改革的必要性分析并提出了改革方案,旨在探讨虚拟实验与传统实验的合理结合,实现两种模式的优势互... 详细信息

为了培养学生的实践能力,激发学生自主学习的兴趣,充分利用实验教学资源,文章对如何将生物化学虚拟实验引入传统实验教学,做出了实验教学改革的必要性分析并提出了改革方案,旨在探讨虚拟实验与传统实验的合理结合,实现两种模式的优势互补,提高实验教学质量。

关键词：生物化学虚拟实验实验教学教学设计

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钒暴露与hsp70-hom基因多态性对神经行为功能的交互作用研究

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四川大学学报（医学版） 2016年第1期47卷 49-53,59页

作者：张勤刘云兴崔鹂李顺品高伟胡高林张祖辉兰亚佳四川大学华西公共卫生学院环境卫生与职业医学系成都610041 攀枝花市第二人民医院职业病科攀枝花617068 深圳市龙岗区疾病预防控制中心职业病防治科深圳518100 四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室成都610041

目的探讨钒暴露与hsp70-hom基因多态性对作业人群神经行为的综合影响,为制订钒作业工人的健康保护措施提供依据。方法整群抽样某钒制品及化工厂工人为研究对象,问卷调查收集人口学信息及钒暴露资料;神经行为核心测试组合(NCTB)法检测神... 详细信息

目的探讨钒暴露与hsp70-hom基因多态性对作业人群神经行为的综合影响,为制订钒作业工人的健康保护措施提供依据。方法整群抽样某钒制品及化工厂工人为研究对象,问卷调查收集人口学信息及钒暴露资料;神经行为核心测试组合(NCTB)法检测神经行为功能;限制性片段长度多态性-聚合酶链反应(RFLP-PCR)法检测hsp70-hom基因型分布;主成分分析法构建神经行为功能综合指标(NBI)。结果 1钒暴露组在包括平均反应时间、视觉保留、数字跨度倒序、非利手提转捷度、目标追踪正确点数和总打点数及数字译码7个指标及NBI指数上,均以T/C基因型表现最差(P<0.05)。2NBI异常的风险,C/C基因型是T/T基因型的1.748倍;而钒暴露组是对照组的3.048倍(P<0.05);经年龄和文化程度调整后,钒暴露风险降低为1.879倍(P<0.05),而基因未产生影响;3当基因多态和钒暴露双重因素作用时,钒暴露使NBI异常的风险为2.828倍(P<0.05),而T/C基因型为4.577倍(P<0.05);调整文化程度和年龄后,T/C基因型风险增加至7.777倍(P<0.05),而钒暴露未见影响。4当钒暴露与T/C基因型共存时,对NBI指数存在明显交互作用,交互作用超额危险度为4.12倍,交互作用归因比为0.7,交互作用系数为6.45;经年龄调整后,依次为3.77倍、0.7和7.44;经年龄和文化程度同时调整后,依次为2.49倍、0.75,未得出交互作用系数。结论具有T/C基因型的文化程度偏低的钒暴露工人尤其需要加强职业防护。

关键词：钒热休克蛋白70 多态性神经行为功能

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钒接触与热休克蛋白70-hom基因多态性对工人氧化应激影响

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中国职业医学 2016年第6期43卷 666-672页

作者：吴玲玉刘云兴崔鹂李顺品张祖辉兰亚佳张勤四川大学华西公共卫生学院环境卫生与职业医学系四川成都610041 攀枝花市第二人民医院职业病科攀枝花617068 深圳市龙岗区疾病预防控制中心职业病防治科广东深圳518100 四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室 610041

目的探讨职业钒接触和热休克蛋白70（HSP70）-hom基因多态性对工人氧化应激水平影响的交互作用。方法采用判断抽样方法,以从事钒接触作业的87名工人为钒接触组,63名化工厂工人为对照组;检测血清总超氧化物歧化酶（SOD）、锰SOD、铜锌SO... 详细信息

目的探讨职业钒接触和热休克蛋白70（HSP70）-hom基因多态性对工人氧化应激水平影响的交互作用。方法采用判断抽样方法,以从事钒接触作业的87名工人为钒接触组,63名化工厂工人为对照组;检测血清总超氧化物歧化酶（SOD）、锰SOD、铜锌SOD、诱导型一氧化氮合酶（i NOS）的活力和MDA水平,采用限制性片段长度多态性-聚合酶链反应法检测HSP70-hom基因型分布,分析HSP70-hom基因多态性对钒接触人群氧化应激水平的综合影响。结果与对照组比较,钒接触组人群血清总SOD和锰SOD活力均下降（P〈0.01）,MDA水平升高（P〈0.01）。HSP70-hom的T/T基因型组人群血清总SOD活力低于T/C＋C/C基因型组人群（P〈0.01）。单因素Logistic回归分析结果显示,HSP70-hom基因型与钒接触的交互项与血清总SOD活力和MDA高水平的发生均有关联（P〈0.05）。多因素Logistic回归分析和叉生分析结果显示,HSP70-hom基因型与钒接触对血清总SOD活力偏高发生的具有相乘交互作用[比值比（OR）及其95%可信区间（CI）为6.051（1.001~36.572）,P=0.05],并具有相加的交互作用,交互作用归因比及其95%CI为0.935（0.086~1.783）;血清MDA水平偏高的发生仅与钒接触有关[OR（95%CI）为6.352（3.099~13.021）,P〈0.01],钒接触与HSP70-hom基因型对血清MDA水平偏高的发生无交互作用。未发现钒接触或HSP70-hom基因多态性对血清铜锌SOD和i NOS活力有影响。结论钒及其化合物可通过影响血清SOD和MDA而导致钒接触人群发生氧化损伤;钒接触与HSP70-hom基因多态性对作业工人血清总SOD活力偏高的发生具有交互作用。

关键词：钒热休克蛋白70 基因多态性氧化应激

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NGAL重组蛋白的表达与纯化及其促进结肠癌转移的研究

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成都医学院学报 2015年第2期10卷 142-146,151页

作者：刘桦杨晓龙唐丽胡开锋刘明佳刘戟四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室成都610041 成都医学院生物医学系成都610500

目的研究NGAL重组蛋白促进人结肠癌细胞SW480转移的作用机制。方法通过基因工程方法构建重组表达载体pet32a-tev-NGAL,转化大肠杆菌(BL21-DE3)进行表达;采用亲和层析纯化,并用tev酶进行酶切获得NGAL重组蛋白;Transwell与基质胶实验检测N... 详细信息

目的研究NGAL重组蛋白促进人结肠癌细胞SW480转移的作用机制。方法通过基因工程方法构建重组表达载体pet32a-tev-NGAL,转化大肠杆菌(BL21-DE3)进行表达;采用亲和层析纯化,并用tev酶进行酶切获得NGAL重组蛋白;Transwell与基质胶实验检测NGAL对细胞迁移、侵袭能力的影响;Western blot检测NGAL对肿瘤转移相关蛋白表达的影响;ELISA检测不同肿瘤分期结肠癌患者血液中NGAL表达情况。结果成功构建pet32a-tev-NGAL原核表达载体,并通过体外表达与纯化获得NGAL重组蛋白;该蛋白促进SW480的迁移和侵袭;Western blot检测结果表明,NGAL激活EMT信号通路;ELISA结果表明,NGAL表达量与肿瘤恶化程度成正相关。结论 NGAL通过激活EMT信号通路促进结肠癌细胞SW480转移。

关键词： NGAL重组蛋白结肠癌细胞肿瘤转移

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HLA-DP基因多态性与丙型肝炎病毒感染转归的关系

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现代预防医学 2015年第11期42卷 2090-2093+2113页

作者：韦娟王佳佳王洁唐筛娣袁琛南京医科大学康达学院生物化学与分子生物学教研室南京医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系江南大学无锡医学院基础医学系扬州市妇幼保健院妇产科科

目的探讨人类白细胞抗原（Human Leukocyte Antigens,HLA）DP基因多态性与高危人群丙型肝炎病毒（Hepatitis C Virus,HCV）感染转归的关系。方法采用病例对照研究设计,运用Taqman-MGB技术检测401例HCV持续感染者,268例HCV自限感染者和98... 详细信息

目的探讨人类白细胞抗原（Human Leukocyte Antigens,HLA）DP基因多态性与高危人群丙型肝炎病毒（Hepatitis C Virus,HCV）感染转归的关系。方法采用病例对照研究设计,运用Taqman-MGB技术检测401例HCV持续感染者,268例HCV自限感染者和984例健康对照者HLA-DP基因rs3077、rs9277535、rs2395309位点的基因多态性,比较不同基因型与HCV感染转归的关系。结果采用Logistic回归分析调整性别、年龄和高危人群种类混杂因素后结果显示,rs3077位点:杂合基因型CT和突变型TT在感染组（持续感染组+自限清除组）中的频率均显著高于对照组（调整OR值及其95%CI分别为1.31,1.05;.64和1.93,1.36;.73）;rs2395309位点:杂合基因型GA和突变型AA在感染组中的频率均显著高于对照组（调整OR值及其95%CI分别为1.29,1.03;.61和1.89,1.34;.68）;rs9277535位点:杂合基因型GA和突变型AA在持续性感染组中的频率均高于自限清除组（P=0.018,P=0.037）。结论rs3077、rs9277535、rs2395309三个位点的基因多态性可能与丙型肝炎转归有一定的关联。

关键词： HLA-DP 基因多态性丙型肝炎病毒

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钒作业工人的氧化应激水平研究

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四川大学学报（医学版） 2015年第6期46卷 856-859页

作者：魏腾达李顺品刘云兴谭春萍李娟张祖辉兰亚佳张勤四川大学华西公共卫生学院环境卫生与职业医学系成都610041 攀枝花市第二人民医院职业病科攀枝花617068 攀枝花市第二人民医院检验科攀枝花617068 四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室成都610041

目的评价钒暴露作业工人外周血氧化应激水平,为研究钒对神经系统的影响机制提供人群资料。方法采用整群抽样的方法纳入86例接钒工人,65例对照工人。自制问卷收集人口学基本信息及职业暴露资料,试剂盒法检测目标人群外周血血清样本中的... 详细信息

目的评价钒暴露作业工人外周血氧化应激水平,为研究钒对神经系统的影响机制提供人群资料。方法采用整群抽样的方法纳入86例接钒工人,65例对照工人。自制问卷收集人口学基本信息及职业暴露资料,试剂盒法检测目标人群外周血血清样本中的氧化应激水平〔超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),诱导型一氧化氮合酶(iNOS)〕。比较接钒工人和对照工人血清氧化应激水平的差异。结果接钒工人血清中MDA含量高于对照工人(P<0.05),总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性低于对照工人(P<0.05),其中锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性降低明显(P<0.05),而铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)活性无明显变化(P>0.05)。接钒工人和未接钒工人血清中的iNOS活性比较接近,差异无统计学意义(P>0.05)。结论钒暴露可能会影响作业工人的脂质过氧化,显著降低机体的抗氧化水平。目前尚不能确定钒与活性氮损伤之间的关系。

关键词：钒及其化合物氧化应激

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高原短期暴露男性返回低海拔地区后脱适应期性激素水平的动态变化及意义

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西北国防医学杂志 2014年第1期35卷 40-42页

作者：杨磊杨有利周其全唐萃解放军第十医院检验科甘肃武威733000 第三军医大学高原军事医学系高原疾病学教研室重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室分子医学与肿瘤研究中心

目的:了解高原短期暴露人群返回低海拔后性激素的变化。方法:对参加玉树(海拔3 700m)抗震救灾116d后返回平原的613名官兵(观察组)在返回后的第2、15、30天分别抽取空腹静脉血,放射免疫竞争法分析其血清中睾酮(T)、雌二醇(E2)的浓度。未... 详细信息

目的:了解高原短期暴露人群返回低海拔后性激素的变化。方法:对参加玉树(海拔3 700m)抗震救灾116d后返回平原的613名官兵(观察组)在返回后的第2、15、30天分别抽取空腹静脉血,放射免疫竞争法分析其血清中睾酮(T)、雌二醇(E2)的浓度。未到高原的140名官兵作为对照组。结果:观察组返回平原第2、15天T含量略高于对照组(P>0.05),第30天T含量略低于对照组(P>0.05)。与对照组相比,观察组返回平原第2、15、30天E2含量均明显降低(P<0.05)。观察组返回平原第30天E2含量明显低于第2、15天的含量(P<0.05),但第15天与第2天比较无统计学差异(P>0.05)。结论:成年男性高原短期暴露返回低海拔地区后,血清T水平呈先增高后降低趋势,并出现过度重新调整现象,E2水平呈持续下降趋势。由于E2缺乏与骨质疏松相关,应避免过度训练引发骨损伤。

关键词：高原男性性激素睾酮雌二醇

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