检索结果-内蒙古大学图书馆

中国血液流变学杂志 2010年第1期20卷 22-26页

作者：贾红亮谢宇锋杨吉成盛伟华孙凌吕海涛苏州大学附属儿童医院心内科江苏苏州215003 苏州大学基础医学系细胞与分子生物学教研室江苏苏州215123

目的构建携带人血管内皮细胞生长因子165（VEGF165）基因的腺病毒表达载体（Ad—VEGF165），并观察其感染QBI．293A靶细胞后目的基因的表达及促进血管形成的作用。方法以含有VEGF165基因片段的pSV-K3-VEGF165质粒为模板，PCR扩增获得的V... 详细信息

目的构建携带人血管内皮细胞生长因子165（VEGF165）基因的腺病毒表达载体（Ad—VEGF165），并观察其感染QBI．293A靶细胞后目的基因的表达及促进血管形成的作用。方法以含有VEGF165基因片段的pSV-K3-VEGF165质粒为模板，PCR扩增获得的VEGF165目的片段（XhoI、EcoRV）亚克隆至GFP标记的pAdTrack—CMV载体中构建重组转移质粒***165，行PCR、双酶切和DNA测序鉴定。将测序正确的pAdTrack—***65质粒经PmeI线性化后与腺病毒骨架质粒pAdEasy．1共转化BJ5183细菌，获得同源重组腺病毒质粒***165（***165），再经PacI线性化后用脂质体转染QBI．293A包装细胞，通过多轮扩增和氯化铯密度梯度离心纯化获得***65重组腺病毒。***和ELISA检测腺病毒介导的外源性VEGFl65基因在QB｜．293A细胞中的转录和表达。将孵育8d的生长状态良好的鸡胚随机分成Ad空载体腺病毒组、Ad—VEGFI65重组腺病毒组、NS组。采用鸡胚尿囊膜（CAM）法检测VEGF165重组腺病毒促进尿囊膜血管形成活性。结果PCR、双酶切和测序鉴定结果证实成功构建了***—VEGF165重组转移质粒，并获得了高滴度的***165重组腺病毒，其病毒效价可达2×10^10pfu／mL。Ad-VEGFl65感染后，QBI．293A细胞中的VEGF165含量较QBI．293A细胞对照组和Ad空病毒感染组均明显升高（P〈0．05）。Ad-VEGF165组与Ad．空载体组和NS组比较，CAM三级分支血管生长更旺盛，毛细血管更丰富（P〈0．05）。结论成功获得了携带人VEGF165基因的腺病毒表达载体，具有明显的促CAM血管形成活性，为进一步开展VEGF165基因修饰干细胞的应用研究奠定了实验基础。

关键词：血管内皮生长因子1 65 腺病毒载体表达

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葡萄球菌肠毒素B诱导脐静脉内皮细胞凋亡机制的探讨

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中国微生态学杂志 2010年第12期22卷 1085-1088页

作者：管俊昌刘婷婷朱琍燕马丽娜闵宏林李凤云蚌埠医学院安徽省感染与免疫重点实验室病原生物学教研室安徽蚌埠233030 苏州大学基础医学与生物科学学院围产与胚胎学研究室江苏苏州215123

目的探讨金黄色葡萄球菌(金葡菌)肠毒素B诱导脐静脉内皮细胞凋亡的机制。方法将不同浓度金葡菌肠毒素B感染脐静脉内皮细胞8 h后,用流式细胞术检测细胞凋亡率,同时用比色法检测TNF-α、caspase-3及caspase-8的产生量,并检测加入TNF-α抗... 详细信息

目的探讨金黄色葡萄球菌(金葡菌)肠毒素B诱导脐静脉内皮细胞凋亡的机制。方法将不同浓度金葡菌肠毒素B感染脐静脉内皮细胞8 h后,用流式细胞术检测细胞凋亡率,同时用比色法检测TNF-α、caspase-3及caspase-8的产生量,并检测加入TNF-α抗体、caspase-3和caspase-8抑制剂后的细胞凋亡率。结果不同浓度肠毒素B作用脐静脉内皮细胞8 h后均可诱导细胞凋亡,且TNF-α、caspase-3和caspase-8的产生量均高于对照组(P<0.01);而加入TNF-α抗体、caspase-3和caspase-8抑制剂后凋亡率明显降低。结论金葡菌肠毒素B可以诱导脐静脉内皮细胞凋亡,其凋亡机制可能是通过TNF-α介导的caspase-8及caspase-3激活的外源性死亡因子受体途径。

关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素B 脐静脉内皮细胞凋亡

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Ad-hING4联合^(125)Ⅰ粒子对裸鼠胰腺癌移植瘤的抑癌增效作用

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核技术 2009年第12期32卷 940-946页

作者：翟红彦杨吉成盛伟华谢宇锋法逸华苏成海苏州大学附属第一医院核医学科苏州215006 苏州大学基础医学系细胞与分子生物学教研室苏州215006

本工作探讨腺病毒介导的人ING4基因(Ad-hING4)联合125I粒子对裸鼠胰腺癌移植瘤的抑癌增效作用及其可能的机制。将本室构建的Ad-hING4腺病毒感染QBI-293A细胞,扩增后获得高滴度的病毒。建立25只裸鼠胰腺癌PANC-1皮下移植瘤模型,分成PBS... 详细信息

本工作探讨腺病毒介导的人ING4基因(Ad-hING4)联合125I粒子对裸鼠胰腺癌移植瘤的抑癌增效作用及其可能的机制。将本室构建的Ad-hING4腺病毒感染QBI-293A细胞,扩增后获得高滴度的病毒。建立25只裸鼠胰腺癌PANC-1皮下移植瘤模型,分成PBS对照组、空病毒Ad组、125I粒子近距离放疗组、Ad-hING4基因治疗组、125I粒子和Ad-hING4联合治疗组,进行抑瘤治疗实验;此后每5天测量1次肿瘤体积,20天后处死,计算抑瘤率和金氏q值。常规病理切片观察细胞生长形态、组织损伤程度和范围,并进行凋亡细胞计数(AI);免疫组化SP法检测肿瘤标本中微血管密度(MVD)、生存素Survivin和活化的Caspase-3凋亡相关蛋白的表达。结果发现,125I粒子组、Ad-hING4组、联合治疗组抑瘤率分别达到34.19%(P<0.01)、31.50%(P<0.01)、67.15%(P<0.01),联合治疗组抑瘤率明显高于125I粒子和Ad-hING4治疗组(P<0.01);病理切片检查显示近粒子处肿瘤细胞变性坏死,远离粒子处可见存活肿瘤细胞;三个治疗组凋亡指数(AI)、Caspase-3阳性细胞数明显高于PBS组(P<0.05),且联合治疗组明显高于125I粒子和Ad-hING4治疗组(P<0.01);三个治疗组MVD值、Survivin阳性细胞明显低于PBS组(P<0.05),且联合治疗组明显低于125I粒子和Ad-hING4治疗组(P<0.01);Ad组与PBS组的各指标无显著性差异(P>0.05)。可见125I粒子、Ad-hING4可显著抑制裸鼠PANC-1胰腺癌移植瘤的生长,两者联用具有抑癌增效的协同作用,Ad-hING4有望作为一种新的放疗增敏剂;其抑瘤机制可能是通过下调Survivin和上调Caspase3的表达,以诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤血管形成。

关键词： 125I粒子近距离治疗 hING4 胰腺肿瘤裸鼠基因治疗放疗增敏剂机制

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福尔马林灭活RSV疫苗增强性疾病模型建立及特征研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第4期29卷 326-327页

作者：余蓓蓓彭慧琴顾晓萌刘怡严杰钱景浙江大学医学院基础医学系病原生物学教研室杭州310058 浙江大学医学院医学系

以福尔马林灭活呼吸道合胞病毒（RSV）疫苗（FI-RSV）预防接种的婴儿或学龄前儿童，自然感染RSV后较之未接种疫苗感染者表现出更为严重的支气管痉挛性肺炎。此类因疫苗免疫接种使相应病原微生物感染时致病作用增强的疾病或现象，称为“... 详细信息

以福尔马林灭活呼吸道合胞病毒（RSV）疫苗（FI-RSV）预防接种的婴儿或学龄前儿童，自然感染RSV后较之未接种疫苗感染者表现出更为严重的支气管痉挛性肺炎。此类因疫苗免疫接种使相应病原微生物感染时致病作用增强的疾病或现象，称为“疫苗增强性疾病”（vaccine enhanced disease，VED）。目前关于VED免疫病理调控机制的研究多建立在动物模型基础上。本研究通过制备FI—RSV疫苗，建立BALB／c小鼠FI—RSV相关VED模型，定义其病毒滴度、抗体水平以及病理诊断特征，为进一步研究RSV相关VED的分子机制提供实验资料。

关键词： RSV疫苗疾病模型福尔马林强性灭活 BALB/c小鼠呼吸道合胞病毒病原微生物感染

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硫糖铝对抗幽门螺杆菌重组VacA卵黄抗体的保护作用

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中国生物制品学杂志 2009年第5期22卷 457-460,467页

作者：郭丽媛杨致邦田一玲黄伟韩飞范贵荣向瑜重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室神经科学研究中心基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室重庆400016 西南大学荣昌校区动物医学系重庆402460

目的观察硫糖铝对抗幽门螺杆菌重组细胞空泡毒素抗原(VacA)卵黄抗体(IgY)的保护作用,为制备能耐受胃酸和蛋白酶的IgY制剂奠定基础。方法诱导重组菌DH5α-vacA-pQE30,大量表达并纯化VacA重组蛋白,免疫洛曼母鸡,制备VacAIgY,并进行纯化。... 详细信息

目的观察硫糖铝对抗幽门螺杆菌重组细胞空泡毒素抗原(VacA)卵黄抗体(IgY)的保护作用,为制备能耐受胃酸和蛋白酶的IgY制剂奠定基础。方法诱导重组菌DH5α-vacA-pQE30,大量表达并纯化VacA重组蛋白,免疫洛曼母鸡,制备VacAIgY,并进行纯化。在不同pH值的IgY液中加入不同浓度的硫糖铝和不同浓度的胃蛋白酶,将含不同浓度硫糖铝的IgY反复冻融7次,将含30%硫糖铝的IgY室温放置1d～4周,ELISA法测定各实验组IgY的相对抗体活性(AT/AC)。结果在pH1.5、2.0和3.0的条件下,含30%～60%硫糖铝的IgY的相对抗体活性高于不加硫糖铝的IgY;在pH1.5条件下,60%硫糖铝可使IgY的相对抗体活性保持68.7%;在pH2.0和3.0条件下,50%和40%以上的硫糖铝几乎可完全保持IgY的相对抗体活性。在pH值为2.0和3.0时,正常胃蛋白酶浓度(0.02mg/ml)下,30%以上的硫糖铝均可有效保护IgY的相对抗体活性。30%以上的硫糖铝可增强IgY的抗冻融能力。室温放置4周后,含30%硫糖铝的IgY仍能保持80%以上的相对抗体活性。结论30%以上的硫糖铝可增强VacAIgY对低pH和胃蛋白酶的耐受能力及抗冻融能力,是较理想的IgY保护剂。

关键词：幽门螺杆菌细胞空泡毒素抗原卵黄抗体硫糖铝抗体活性

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利用酵母双杂交系统筛选Pak4相互作用蛋白质

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中国医科大学学报 2009年第1期38卷 8-10,14页

作者：李彦姝李晓东吴怡李丹妮李丰中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室细胞生物学卫生部重点实验室沈阳110001 沈阳医学院病原生物学教研室沈阳110034 中国医科大学临床医学系沈阳110001

目的利用酵母双杂交系统从人胎脑cDNA文库中筛选信号转导分子Pak4相互作用蛋白。方法将Pak4激酶域序列克隆到酵母表达载体pGBKT7构建诱饵质粒。质粒转化到酵母感受态AH109和Y187中验证蛋白表达。将人胎脑cDNA文库转化酵母Y187,与已转化... 详细信息

目的利用酵母双杂交系统从人胎脑cDNA文库中筛选信号转导分子Pak4相互作用蛋白。方法将Pak4激酶域序列克隆到酵母表达载体pGBKT7构建诱饵质粒。质粒转化到酵母感受态AH109和Y187中验证蛋白表达。将人胎脑cDNA文库转化酵母Y187,与已转化诱饵质粒的AH109酵母进行交配实验。交配子在SD/-Leu/-Trp/-His和SD/-Leu/-Trp/-His/-Ade/X-α-gal平板上筛选,阳性克隆质粒酶切鉴定。结果成功构建了pGBKT7-Pak4 KD诱饵质粒,Western blot证实其在酵母菌AH109和Y187中表达,筛选了多个与Pak4相互作用的阳性转化子。结论利用酵母双杂交系统筛选出Pak4相互作用蛋白质。

关键词： Pak4 酵母双杂交信号转导

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金黄色葡萄球菌肠毒素B对脐静脉内皮细胞凋亡的影响

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苏州大学学报（医学版） 2009年第4期29卷 607-609页

作者：刘婷婷朱琍燕管俊昌马丽娜闵宏林李凤云蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233000 苏州大学基础医学与生物科学学院围产与胚胎学研究室江苏苏州215123

目的观察金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)诱导脐静脉内皮细胞的凋亡效应。方法用不同浓度SEB感染脐静脉内皮细胞(HUVEC)2、4、8与12h后,用流式细胞术检测细胞凋亡率。结果SEB各浓度均可诱导HUVEC发生凋亡,与对照组比较差异有高度统计学意义(... 详细信息

目的观察金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)诱导脐静脉内皮细胞的凋亡效应。方法用不同浓度SEB感染脐静脉内皮细胞(HUVEC)2、4、8与12h后,用流式细胞术检测细胞凋亡率。结果SEB各浓度均可诱导HUVEC发生凋亡,与对照组比较差异有高度统计学意义(P<0.01)。当SEB浓度为5μg/ml时诱导细胞凋亡的能力最强;5μg/mlSEB作用HUVEC细胞2h后,即可诱导细胞产生明显的凋亡,且随着作用时间的延长,细胞凋亡率逐渐增加(P<0.01)。结论SEB可以诱导脐静脉内皮细胞凋亡,并表现出明显的时间、剂量效应关系,这可能与金葡菌L型垂直感染影响宫内胎儿发育的机制有关。

关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素B 脐静脉内皮细胞凋亡

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外源性一氧化氮体外杀伤红内期间日疟原虫的实验研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2009年第4期27卷 318-321页

作者：方强夏惠王雪梅陆凤陶志勇曹俊孙新高琪苏州大学基础医学系寄生虫学教研室苏州215123 蚌埠医学院病原生物学教研室、安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 江苏省寄生虫病防治研究所、卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室无锡214064

目的探讨外源性一氧化氮(NO)对红内期间日疟原虫的杀伤作用。方法采集以早期滋养体期为主,原虫密度>0.5%的患者血样,配成含2%红细胞的虫血混悬液。96孔板中每孔加100μl虫血混悬液,再加入各组试剂,亚硝基铁氰化钠(SNP,分别为0.02、0... 详细信息

目的探讨外源性一氧化氮(NO)对红内期间日疟原虫的杀伤作用。方法采集以早期滋养体期为主,原虫密度>0.5%的患者血样,配成含2%红细胞的虫血混悬液。96孔板中每孔加100μl虫血混悬液,再加入各组试剂,亚硝基铁氰化钠(SNP,分别为0.02、0.05、0.10、0.20、0.50、1.00mmol/L),SNP+血红蛋白(Hb)0.15mmol/L,SNP+硫酸亚铁(FeSO4)0.15mmol/L,SNP+L-半胱氨酸(L-cyst)1.00mmol/L,SNP+FeSO40.15mmol/L+L-cyst1.00mmol/L,后4组SNP浓度均为1.00mmol/L,设对照组,每组重复3次,置37℃5%CO2培养箱中培养。根据虫龄,估计发育至裂殖体时间,提前3h取空白对照孔涂片镜检,确定终止培养时间,培养终止后吉氏染色,镜检计数成熟裂殖体,计算NO对红内期间日疟原虫的抑制率,统计分析各组对间日疟原虫抑制率的差异。结果SNP0.02mmol/L组,间日疟原虫抑制率为(0.84±1.69)%,对培养的红内期间日疟原虫无杀伤作用(P>0.05);SNP0.05mmol/L组,间日疟原虫抑制率为(12.26±3.04)%,对培养的红内期间日疟原虫存在杀伤作用(P<0.01)。且抑制率随SNP浓度上升而升高。在含有1.00mmol/LSNP的孔中分别加入Hb、L-cyst、FeSO4和FeSO4+L-cyst与只添加SNP1.00mmol/L孔相比,红内期间日疟原虫抑制率自(85.40±2.90)%下降为(5.90±2.90)%、(25.86±4.02)%、(30.16±2.75)%和(16.71±2.30)%。结论外源性NO对体外培养的红内期间日疟原虫有杀伤作用,而Hb、L-cyst和FeSO4可以逆转这种杀伤作用。

关键词：外源性NO 间日疟原虫红内期

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抗肿瘤基因重组药物和腺病毒基因治疗载体的产业化转让项目

抗肿瘤基因重组药物和腺病毒基因治疗载体的产业化转让项目

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第六届长三角科技论坛生物产业发展分论坛

作者：杨吉成谢宇锋盛伟华缪竞诚苏州大学医学部基础医学系细胞分子生物学教研室苏州 215123

本文分别介绍了人白细胞介素-24 (hIL-24)基因重组抗肿瘤药物蛋白(rhIL-24)项目，hIL-24腺病毒载体(Ad- hIL-24)肿瘤基因治疗项目、ING4腺病毒载体(Ad-ING4)肿瘤基因治疗项目、双基因表达腺病毒肿瘤墓因治疗载体项目的项目研究以及项目... 详细信息

本文分别介绍了人白细胞介素-24 (hIL-24)基因重组抗肿瘤药物蛋白(rhIL-24)项目，hIL-24腺病毒载体(Ad- hIL-24)肿瘤基因治疗项目、ING4腺病毒载体(Ad-ING4)肿瘤基因治疗项目、双基因表达腺病毒肿瘤墓因治疗载体项目的项目研究以及项目产业发展前景。

关键词：抗肿瘤基因重组药物腺病毒基因治疗载体产业化转让

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特异性IgG抗体在同源与异种疟原虫再感染中的作用研究

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中国人兽共患病学报 2009年第4期25卷 358-360页

作者：方强刘军陈光曹雅明高琪苏州大学医学院寄生虫学教研室苏州215123 蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 中国医科大学免疫学教研室沈阳110001 佳木斯大学基础医学院寄生虫学教研室佳木斯154000 江苏省寄生虫病防治研究所、卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室无锡

目的探讨特异性IgG抗体在同源和异种疟原虫再感染过程中的作用。方法DBA/2小鼠经腹腔感染致死型约氏疟原虫(Py17XL)60d后,采用等量Py17XL、Py17XNL、Pynigeriensis或PbANKA分别再次攻击,计数红细胞感染率;采用ELISA方法动态检测脾细胞... 详细信息

目的探讨特异性IgG抗体在同源和异种疟原虫再感染过程中的作用。方法DBA/2小鼠经腹腔感染致死型约氏疟原虫(Py17XL)60d后,采用等量Py17XL、Py17XNL、Pynigeriensis或PbANKA分别再次攻击,计数红细胞感染率;采用ELISA方法动态检测脾细胞培养上清中IFN-γ及其血清中特异性IgG抗体水平的变化。结果Py17XNL和Pynigeriensis再感染小鼠出现一过性低水平的原虫血症;再感染后第4d脾细胞培养上清中IFN-γ水平与正常小鼠相比无显著性差异(P>0.05),而血清中特异性IgG抗体水平明显升高(P<0.01),小鼠全部存活。相比,PbANKA再感染小鼠出现高水平的原虫血症,与其初次感染水平相近,再感染后第4d脾细胞培养上清中IFN-γ水平出现明显升高(P<0.01),而血清中特异性的IgG抗体水平却无明显变化,与正常小鼠水平接近,小鼠全部死亡。结论特异性IgG抗体可在宿主抗同源疟原虫再感染中发挥着重要作用,而对异种疟原虫再感染无保护性。

关键词：特异性IgG 啮齿类疟原虫再感染

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