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教育教学论坛 2018年第4期 86-87页

作者：张志威慕晓玲姜玉峰周宗瑶魏虹王菊裴学莲张悦石河子大学医学院基础医学系组织胚胎学教研室新疆石河子832000

对石河子大学2016级四年制护理专业大一新生的《组织胚胎学》的教学过程进行了回顾,发现压缩教学内容突出教学重点,适当引入PBL教学、反向课堂环节有助于提高教学效果;此外,多因素方差分析结果显示男生的组织胚胎学期末考试成绩显著低... 详细信息

对石河子大学2016级四年制护理专业大一新生的《组织胚胎学》的教学过程进行了回顾,发现压缩教学内容突出教学重点,适当引入PBL教学、反向课堂环节有助于提高教学效果;此外,多因素方差分析结果显示男生的组织胚胎学期末考试成绩显著低于女生。

关键词：组织胚胎学护理本科教学过程

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EGCG对富亮氨酸重复激酶2活性的影响及其作用机制

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江苏大学学报（医学版） 2018年第5期28卷 397-402页

作者：钮婧歆郭晶郭青李杰刘珺刘朝晖苏州大学医学部人体解剖与组织胚胎学系江苏苏州215123 连云港中医药高等职业技术学校基础医学教研室江苏连云港222007 苏州卫生职业技术学院基础医学教研室江苏苏州215009

目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对富亮氨酸重复激酶2(leucine rich repeat kinase 2,LRRK2)活性的影响及其分子机制。方法:选用Ddc-LRRK2-G2019S品系果蝇,分为7组,对照组用标准玉米培养基饲养,各实验组果蝇分别用含LRRK2抑制剂GW5074、N-乙酰半胱氨酸(NAC)及浓度为0.1、1、10和100μmol/L的EGCG加药培养基饲养,检测并统计果蝇生命周期和运动能力,筛选出药物作用的最佳浓度与最适时间点;用蛋白质印迹法检测果蝇脑组织中p-LRRK2、p-p38 MAPK、核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、p-ERK1/2和酪氨酸羟化酶(TH)等蛋白的表达。结果:与对照组相比,10μmol/L EGCG延长果蝇寿命、改善果蝇运动能力的效果最为突出,1μmol/L EGCG效果较好(P<0.05);各组果蝇第5周时行为学变化最显著(均P<0.05);与对照组相比,10μmol/L和1μmol/L EGCG组Nrf2、p-ERK1/2、TH表达均明显增加(均P<0.05),p-LRRK2、p-p38 MAPK表达明显降低(P<0.05)。结论:EGCG可能通过Keap1-Nrf2-ARE、MAPK等信号通路有效抑制LRRK2激酶活性。

关键词：富亮氨酸重复激酶2 表没食子儿茶素没食子酸酯核因子E2相关因子2 MAPK

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甘氨鹅脱氧胆酸对体外细粒棘球蚴原头节活力及ROS影响

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中国人兽共患病学报 2018年第7期34卷 595-598页

作者：汤光耀姜玉峰吕海龙李佳洁杨仁坦秦文娟马斌马容基王麟尧陈琳许雅成都医学院基础医学系成都610000 成都市第三人民医院肝胆外科成都610000 石河子大学医学院组织胚胎学教研室石河子832008 山东省济宁市济宁第一人民医院济宁272000 石河子大学医学院第一附属医院超声诊断教研室石河子832008 石河子大学医学院第一附属医院肝胆外科石河子832008

目的研究甘氨鹅脱氧胆酸(glycochenodeoxycholic acid,GCDCA)对体外细粒棘球蚴原头节活力及活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平的影响。方法将细粒棘球蚴原头节分为对照组及GCDCA处理组(500、1 500、2 500μmol/L),应用体外培养技... 详细信息

目的研究甘氨鹅脱氧胆酸(glycochenodeoxycholic acid,GCDCA)对体外细粒棘球蚴原头节活力及活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平的影响。方法将细粒棘球蚴原头节分为对照组及GCDCA处理组(500、1 500、2 500μmol/L),应用体外培养技术,通过伊红染色法每天定时在光学显微镜下观察原头节的活力并记录存活和死亡数目。使用试剂盒检测不同浓度GCDCA处理24h后各组原头节体内caspase-3酶活性变化;DCFH-DA染色法荧光显微镜观察GCDCA作用24h后原头节内ROS水平变化。结果 500、1 500、2 500μmol/L GCDCA处理后均可导致原头节活力减弱,且最高浓度组在第7d时原头节全部死亡。500、1 500、2 500μmol/L GCDCA组作用原头节24h后caspase-3酶活性与对照组相比明显升高(F=555.162,P<0.05)。500、1 500、2 500μmol/L GCDCA作用原头节24h后原头节内ROS水平与对照组相比明显升高(F=216.901,P<0.05)。结论 GCDCA能抑制体外原头节生长,促使原头节死亡,可能与活化caspase-3及提高原头节内ROS水平相关,具体机制有待进一步研究。

关键词：甘氨鹅脱氧胆酸细粒棘球蚴原头节 caspase-3 活性氧

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基于FISH技术研究线粒体分裂蛋白Drp1 mRNA在小鼠杏仁复合体的分布

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神经解剖学杂志 2017年第2期33卷 149-154页

作者：罗婷婷王嘉琪王圣明戴春秋拜云虎郭保霖吴菲菲谢祥军罗世城王东辉杨雁灵王亚云武胜昔成都医学院基础医学院成都610500 第四军医大学神经生物教研室西安710032 第四军医大学人体解剖与组织胚胎学教研室暨梁銶琚脑研究中心西安710032 第四军医大学西京医院肝胆外科西安710032 第四军医大学预防医学系营养学教研室西安710032 复旦大学神经科学协同创新中心上海200433

目的:最新研究表明,对线粒体的分裂进行精密调控的关键蛋白是Drp1(dynamin-related protein 1,Drp1)。杏仁复合体属于中枢神经系统边缘系统的一部分,功能重要但是非常复杂。本研究拟通过荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridizatio... 详细信息

目的:最新研究表明,对线粒体的分裂进行精密调控的关键蛋白是Drp1(dynamin-related protein 1,Drp1)。杏仁复合体属于中枢神经系统边缘系统的一部分,功能重要但是非常复杂。本研究拟通过荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术对Drp1在杏仁复合体的分布特点进行描述。方法:本实验通过自行设计Drp1基因的引物、合成探针,同时采用(FISH)进行染色观察,得到Drp1 mRNA在小鼠杏仁核复合体的分布特点。结果:研究发现,Drp1 mRNA几乎分布于全部杏仁核,且在内侧杏仁核、皮质杏仁核和基底杏仁核的表达水平非常高。亚细胞水平研究进一步表明,Drp1 mRNA全部位于神经元胞体,特别是核周区域,而在突起处未见其表达。结论:以上结果提示,Drp1可能通过调节杏仁复合体处神经元的线粒体的分裂状态,参与动物的内脏活动、防御功能以及情绪变化。但是具体机制尚需进一步研究。

关键词：杏仁复合体小鼠

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人多指来源的BMSCs倾向于分化成软骨细胞的研究

人多指来源的BMSCs倾向于分化成软骨细胞的研究

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2016第十一届全国免疫学学术大会

作者：许云云李芳梁含思甄允方汪健张学光苏州大学附属儿童医院儿科研究所苏州大学基础医学与生物科学学院人体解剖与组织胚胎学教研室苏州大学附属第一医院临床免疫研究所苏州大学附属儿童医院小儿骨科诊断与治疗中心

目的：自体软骨细胞移植在治疗膝关节软骨缺损方面已得到较广泛的应用,在踝关节、肘关节软骨、距骨等的临床应用也迅速发展,但也存在很多问题。其中,充足的软骨细胞来源便是亟待解决的难题。为此,寻找另外一种有效的细胞是本领域研究的... 详细信息

目的：自体软骨细胞移植在治疗膝关节软骨缺损方面已得到较广泛的应用,在踝关节、肘关节软骨、距骨等的临床应用也迅速发展,但也存在很多问题。其中,充足的软骨细胞来源便是亟待解决的难题。为此,寻找另外一种有效的细胞是本领域研究的重点。本课题组前期研究发现,一种特殊来源的BMSCS——人多指来源的BMSCs更倾向于向软骨细胞的诱导分化。本研究旨在研究人多指来源BMSCs(BMSCs from polydactyly,pBMSCs)的生物学特性,进而阐明其倾向于向软骨细胞分化的作用及机制。

关键词：多指 pBMSCs 软骨细胞分化 Sox9/BMP信号通路

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人多指来源的BMSCs倾向于分化成软骨细胞的研究

人多指来源的BMSCs倾向于分化成软骨细胞的研究

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第十一届全国免疫学学术大会

目的:自体软骨细胞移植在治疗膝关节软骨缺损方面已得到较广泛的应用,在踝关节、肘关节软骨、距骨等的临床应用也迅速发展,但也存在很多问题。其中,充足的软骨细胞来源便是亟待解决的难题。为此,寻找另外一种有效的细胞是本领域研究的... 详细信息

目的:自体软骨细胞移植在治疗膝关节软骨缺损方面已得到较广泛的应用,在踝关节、肘关节软骨、距骨等的临床应用也迅速发展,但也存在很多问题。其中,充足的软骨细胞来源便是亟待解决的难题。为此,寻找另外一种有效的细胞是本领域研究的重点。本课题组前期研究发现,一种特殊来源的BMSCS——人多指来源的BMSCs更倾向于向软骨细胞的诱导分化。本研究旨在研究人多指来源BMSCs(BMSCs from polydactyly,pBMSCs)的生物学特性,进而阐明其倾向于向软骨细胞分化的作用及机制。方法:从苏州大学附属儿童医院获取幼儿多指(经患者家属同意),收集骨髓细胞进行贴壁培养,获得pBMSCs细胞。随后通过PT-PCR、流式细胞仪检测MSCs细胞的特异性标志;绘制生长曲线观察pBMSCs细胞的增殖能力;分化实验证明pBMSCs细胞向脂肪细胞、骨细胞和软骨细胞的诱导分化能力;Real-time PCR和Western Blot分析Sox9/BMP信号在调控软骨细胞形成中的作用;共培养实验观察pBMSCs对软骨细胞体外生长的作用。结果:pBMSCs细胞高表达间充质细胞表面标志CD73、CD90、CD105和CD166,不表达造血细胞表面标志CD34、CD45、CD133和HLA-DR。较之于BMSCs,pBMSCs具有更强的体外增殖能力;进而发现,pBMSCs向脂肪和骨诱导分化的能力较弱,但pBMSCs具有较强向软骨细胞分化的能力,其诱导成软骨细胞的时间为7d,而BMSCs诱导成软骨细胞所需时间为14d。机制实验初步证实pBMSCs中BMP4的表达显著高于BMSCs,而且Sox9的表达也高于BMSCs,随后我们又在蛋白水平上观察到同样的情况:pBMSCs中Sox9和BMP4的蛋白水平明显高于BMSCs。最后,将pBMSCs与软骨细胞共培养后,发现其对软骨细胞的生长具有支持作用。结论:本研究发现pBMSCs具有较强向软骨细胞分化的能力,Sox9/BMP通路介导了pBMSCs向软骨细胞的分化,且pBMSCs可支持软骨细胞的生长。为此,pBMSCs有望成为膝关节置换的种子细胞。

关键词：多指 pBMSCs 软骨细胞分化 Sox9/BMP信号通路

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富氢盐水对吗啡依赖小鼠自然戒断后焦虑样行为的影响

富氢盐水对吗啡依赖小鼠自然戒断后焦虑样行为的影响

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第十四届全国药物依赖性学术会议暨国际精神疾病研讨会

作者：文迪赵鹏沈千朝龚淼郭红艳王健惠蓉吉马春玲丛斌河北医科大学基础医学院法医学系河北省法医学重点实验室河北省法医分子鉴定协同创新中心河北医科大学基础医学院河北医科大学基础医学院组织胚胎学教研室

目的:观察富氢盐水对吗啡依赖小鼠自然戒断后焦虑样行为的影响。方法:采用剂量递增法腹腔注射吗啡3天(25,25,50,50,50,75,75,75,100 mg/kg)建立小鼠慢性吗啡依赖模型,并进行自然戒断,期间给予2.0 mmol/L富氢盐水(0.2 mL/只,3次/d)进行干... 详细信息

目的:观察富氢盐水对吗啡依赖小鼠自然戒断后焦虑样行为的影响。方法:采用剂量递增法腹腔注射吗啡3天(25,25,50,50,50,75,75,75,100 mg/kg)建立小鼠慢性吗啡依赖模型,并进行自然戒断,期间给予2.0 mmol/L富氢盐水(0.2 mL/只,3次/d)进行干预,通过高架十字迷宫、明暗箱及自发活动测试观察富氢盐水对吗啡戒断小鼠焦虑样行为的影响。结果:给予纳洛酮进行急性催促戒断,可诱导明显的小鼠跳跃及体重下降症状,说明小鼠吗啡依赖模型建立成功。吗啡自然戒断后d 3时,小鼠出现明显的焦虑样行为,高架十字迷宫开臂进入次数百分比、开臂停留时间百分比明显减少(P<0.001),在明暗箱中暗箱停留时间百分比明显增加(P<0.001);自然戒断期间给予富氢盐水干预可显著降低小鼠戒断后焦虑样行为,高架十字迷宫开臂进入次数百分比(P<0.01)、开臂停留时间百分比(P<0.001)较对照组明显增加,明暗箱中暗箱停留时间百分比明显减少(P<0.001);并且富氢盐水干预对小鼠自发活动无明显影响(P>0.05)。结论:富氢盐水可以显著降低吗啡戒断过程中的焦虑样行为。

关键词：吗啡依赖吗啡戒断焦虑样行为富氢盐水

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人羊水干细胞作为汗腺重建种子细胞的研究

人羊水干细胞作为汗腺重建种子细胞的研究

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中国免疫学会第五届全国免疫学博士生论坛

作者：梁含思孙青李芳甄允方许云云刘尧秦明德张学光苏州大学附属第一医院临床免疫研究所江苏省干细胞与生物医用材料重点实验室苏州大学附属第一医院临床免疫研究所苏州大学基础医学与生物科学学院人体解剖与组织胚胎学教研室苏州大学附属儿童医院小儿骨科诊断与治疗中心苏州大学附属儿童医院儿科研究所江苏省干细胞与生物医用材料重点实验室

研究背景：严重烧伤获救的病人由于无汗腺功能的疤痕组织取代皮肤使其终生丧失正常皮肤功能，严重影响其生活质量。干细胞可以定向分化为具有汗腺细胞表型的汗腺样细胞，但是对于汗腺组织的功能性重建还未见报道。

关键词：人羊水干细胞干细胞分化汗腺样结构低免疫源性汗腺重建

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人羊水干细胞作为汗腺重建种子细胞的研究

人羊水干细胞作为汗腺重建种子细胞的研究

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第十届全国免疫学学术大会

作者：梁含思孙青李芳甄允方许云云秦明德张学光苏州大学附属第一医院临床免疫研究所江苏省干细胞与生物医用材料重点实验室苏州大学基础医学与生物科学学院人体解剖与组织胚胎学教研室苏州大学附属儿童医院小儿骨科诊断与治疗中心苏州大学附属儿童医院儿科研究所

目的 :利用条件培养基诱导的方法将人羊水干细胞诱导为汗腺样细胞,研究人羊水干细胞重建汗腺的可能性,使汗腺的功能性重建和功能性皮肤修复成为可能,具有创新性和潜在的应用价值。方法 :取稳定培养的人羊水干细胞,以5×104个/孔的... 详细信息

目的 :利用条件培养基诱导的方法将人羊水干细胞诱导为汗腺样细胞,研究人羊水干细胞重建汗腺的可能性,使汗腺的功能性重建和功能性皮肤修复成为可能,具有创新性和潜在的应用价值。方法 :取稳定培养的人羊水干细胞,以5×104个/孔的密度接种于6孔板中,待细胞贴壁后,添加汗腺细胞诱导培养基(SGDM,汗腺细胞培养基:CM=1:1,额外添加50ng/ml EGF。CM为培养过人汗腺细胞的KGM2培养基,用0.22μm的滤器过滤,收集到的培养基),诱导分化21天后得到汗腺样细胞;光学显微镜观察其细胞形态;Realtime-PCR分析其基因表达情况;流式细胞仪检测汗腺相关蛋白表达;免疫荧光染色检测汗腺相关蛋白表达;电镜技术观察细胞内部结构;3D组织培养方法检测分化后的汗腺样细胞形成汗腺样结构的能力,并对形成的汗腺样结构进行免疫荧光染色检测;汗腺样细胞与T细胞共培养,CCK8检测其对活化T细胞增殖的抑制作用。结果 :人羊水干细胞分化后得到的汗腺样细胞与体外培养的人汗腺细胞形态相似;诱导分化比例约为30%;Realtime-PCR和免疫荧光结果显示,诱导后的汗腺样细胞表达汗腺细胞相关指标EDA、EDAR、K8和CEA;透射电镜结果显示诱导后的细胞可以观察到与汗腺细胞相似的结构-微绒毛;3D组织培养结果显示诱导后的K8+细胞可以在胶中形成汗腺样结构,使汗腺样细胞分化更加完善;T细胞增殖实验结果显示汗腺样细胞具有抑制T细胞增殖的能力。结论 :人羊水干细胞是介于成体干细胞和胚胎干细胞之间的一类干细胞,它具有较高的增殖能力和分化能力,以及低免疫源性,使其作为汗腺重建的种子细胞具有独特的优势。利用条件培养基可以将人羊水干细胞诱导成为汗腺样细胞,并能在胶中形成汗腺样结构。汗腺样细胞与人羊水干细胞相似具有低免疫源性,为汗腺的功能性重建提供了良好的种子细胞。

关键词：人羊水干细胞干细胞分化汗腺样结构低免疫源性汗腺重建

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人羊水干细胞分化为汗腺样细胞的研究

人羊水干细胞分化为汗腺样细胞的研究

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第十四届全国肿瘤生物治疗大会

作者：梁含思孙青李芳甄允方许云云刘尧秦明德张学光江苏省干细胞与生物医用材料重点实验室苏州大学基础医学与生物科学学院人体解剖与组织胚胎学教研室苏州大学附属儿童医院小儿骨科诊断与治疗中心苏州大学附属儿童医院儿科研究所苏州大学附属第一医院临床免疫研究所

研究背景:大面积皮肤严重烧伤的救治是目前亟待解决的医学和社会问题。严重烧伤获救的病人由于无汗腺功能的疤痕组织取代皮肤使其终生丧失正常皮肤功能,严重影响病人的生活质量。干细胞可以定向分化为具有汗腺细胞表型的汗腺样细胞,但... 详细信息

研究背景:大面积皮肤严重烧伤的救治是目前亟待解决的医学和社会问题。严重烧伤获救的病人由于无汗腺功能的疤痕组织取代皮肤使其终生丧失正常皮肤功能,严重影响病人的生活质量。干细胞可以定向分化为具有汗腺细胞表型的汗腺样细胞,但是对于汗腺组织的功能性重建还未见报道,且干细胞分化为汗腺样细胞的具体机制尚待探讨。人羊水干细胞是介于成体干细胞和胚胎干细胞之间的一类干细胞,其作为汗腺细胞再生的种子细胞具有独特的优势。目的:利用条件培养基诱导的方法将人羊水干细胞诱导为汗腺样细胞,为其他类型干细胞分化为汗腺样细胞提供理论基础,使汗腺的功能性重建和功能性皮肤修复成为可能,具有研究的创新性和潜在的应用价值。方法:收集培养过人汗腺细胞的KGM2培养基,用0.22μm的滤器过滤,收集到的培养基为CM;取稳定培养的人羊水干细胞,以5×104个/孔的密度接种于6孔板中,待细胞贴壁后,添加汗腺细胞诱导培养基(SGDM,汗腺细胞培养基:CM=1:1,额外添加50 ng/ml EGF);诱导分化21 d后得到汗腺样细胞;光学显微镜观察其细胞形态;Real-time PCR分析其基因表达情况;流式细胞仪检测汗腺相关蛋白表达;免疫荧光染色检测汗腺相关蛋白表达;电镜技术观察细胞内部结构;3D组织培养方法检测分化后的汗腺样细胞形成汗腺样结构的能力,并对形成的汗腺样结构进行免疫荧光染色检测。结果:分化过程中,由人羊水干细胞诱导分化得到的汗腺样细胞与体外培养的人汗腺细胞形态相似;诱导后的分化比例约为30%;Real-time PCR和免疫荧光结果显示,诱导后的细胞表达汗腺细胞相关指标EDA、EDAR、K8和CEA;透射电镜结果显示诱导后的细胞可以观察到与汗腺细胞相似的结构-微绒毛;3D组织培养结果显示诱导后的K8+细胞可以在胶中形成汗腺样结构,使汗腺样细胞分化更加完善。结论:利用条件培养基可以将人羊水干细胞诱导成为汗腺样细胞,并能在胶中形成汗腺样结构。

关键词：人羊水干细胞干细胞分化汗腺细胞汗腺样结构

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