检索结果-内蒙古大学图书馆

中国血液流变学杂志 2004年第1期14卷 48-49,56页

作者：贾伟吴士良苏州大学基础医学系生物化学与分子生物学教研室苏州215007

目的　通过实验方法扩增N 乙酰氨基半乳糖转移酶基因家族cDNA。方法　主要通过PCR技术 ,用各种N 乙酰氨基半乳糖转移酶基因家族cDNA的特异性引物进行扩增并结合电泳技术 ,用不同的限制性内切酶进行酶切鉴定。结果　通过电泳图谱和酶切... 详细信息

目的　通过实验方法扩增N 乙酰氨基半乳糖转移酶基因家族cDNA。方法　主要通过PCR技术 ,用各种N 乙酰氨基半乳糖转移酶基因家族cDNA的特异性引物进行扩增并结合电泳技术 ,用不同的限制性内切酶进行酶切鉴定。结果　通过电泳图谱和酶切图谱初步证实了这一家族的不同成员均已得到有效的扩增。结论　成功扩增了N 乙酰氨基半乳糖转移酶基因家族cDNA ,并为其文库的建立打下良好的基础。

关键词： N-乙酰氨基半乳糖转移酶基因家族 cDNA扩增 PcR 限制性内切酶

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多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2真核表达载体的构建及在SHG-44细胞的表达

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江苏大学学报（医学版） 2004年第4期14卷 277-279,281页

作者：金美芳潘浩郭向红仇灏吴士良苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室

目的 :为探讨O 糖基化在肿瘤发生发展及转移中的作用和功能 ,构建pcDNA3/ppGalNAc T2真核表达质粒并转染人神经胶质瘤细胞SHG 4 4。方法 :采用PCR技术从pDONR2 0 1 T2得到ppGalNAc T2全长编码序列 ,亚克隆至真核表达载体pcDNA 3 1,脂质... 详细信息

目的 :为探讨O 糖基化在肿瘤发生发展及转移中的作用和功能 ,构建pcDNA3/ppGalNAc T2真核表达质粒并转染人神经胶质瘤细胞SHG 4 4。方法 :采用PCR技术从pDONR2 0 1 T2得到ppGalNAc T2全长编码序列 ,亚克隆至真核表达载体pcDNA 3 1,脂质体介导基因转染人神经胶质瘤细胞SHG 4 4细胞 ,采用RT PCR法检测重组质粒的表达。结果 :酶切图谱分析和基因测序证实pcDNA3 1 T2真核表达质粒构建成功。RT PCR显示转染细胞有T2的表达。结论 :成功构建了真核表达载体pcDNA3 1 T2 ,并成功转染入SHG 4 4细胞 ,为进一步研究ppGalNAcT2的功能奠定了基础。

关键词：多肽 N-乙酰氨基半乳糖转移酶2 神经胶质瘤细胞 O-糖基化真核表达载体肿瘤发展肿瘤转移

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多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶基因家族低密度表达谱芯片建立

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中国血液流变学杂志 2004年第4期14卷 455-457页

作者：贾伟史宁吴士良苏州大学基础医学系生物化学与分子生物学教研室江苏苏州215007

目的　初步创建多肽 :N 乙酰氨基半乳糖转移酶基因家族低密度基因芯片 ,并对人两种肿瘤细胞中的N 乙酰氨基半乳糖转移酶进行表达谱分析。方法　主要为PCR和分子杂交技术。结果　制成N 乙酰氨基半乳糖转移酶基因家族低密度表达谱基因芯... 详细信息

目的　初步创建多肽 :N 乙酰氨基半乳糖转移酶基因家族低密度基因芯片 ,并对人两种肿瘤细胞中的N 乙酰氨基半乳糖转移酶进行表达谱分析。方法　主要为PCR和分子杂交技术。结果　制成N 乙酰氨基半乳糖转移酶基因家族低密度表达谱基因芯片 ,通过此芯片采用化学发光法能够检测到人肿瘤细胞中的N 乙酰氨基半乳糖转移酶基因家族不同程度的阳性信号。结论　在不同肿瘤细胞中 ,N 乙酰氨基半乳糖转移酶基因家族表达谱有差异 ,但它们之间具体的联系还需进一步的研究。

关键词：半乳糖转移酶酶基因家族表达谱芯片多肽低密度基因芯片氨基 PCR

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人脑源性神经营养因子成熟肽基因克隆及表达

人脑源性神经营养因子成熟肽基因克隆及表达

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第14次全国干扰素及细胞因子学术会议

作者：张虎杨吉成盛伟华缪竞诚李丽娥王金志白艳艳谢宇锋苏州大学医学院基础医学系细胞与分子生物学教研室(江苏苏州)

目的:构建表达人脑源性神经营养因子的基因工程菌.方法:人工合成一对含EcoRI和BamHI限制性酶切位点的特异引物,以健康成人末梢白细胞基因组DNA作为模板.应用PCR技术扩增hBDNF成熟肽基因,用A-T克隆法与pUCm-T载体连接,pUCm-T-BDNF克隆片... 详细信息

目的:构建表达人脑源性神经营养因子的基因工程菌.方法:人工合成一对含EcoRI和BamHI限制性酶切位点的特异引物,以健康成人末梢白细胞基因组DNA作为模板.应用PCR技术扩增hBDNF成熟肽基因,用A-T克隆法与pUCm-T载体连接,pUCm-T-BDNF克隆片段再定向插入原核表达功体PBV220,构建的重组体PBV220-BDNF转化大肠杆菌DH5a经热诱导表达.结果:经DNA测序和限制酶切确证重组人载体片段为目的基因的核苷酸序列,并成功表达蛋白.结论:本研究成功地克隆出hBDNF基因编码序列并在大肠杆菌中获得稳定表达,为今后的生物学活性和神经系统的基因治疗奠定了基础.

关键词：脑源性神经营养因子基因表达基因克隆基因编码序列生物学活性

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人脑源性神经营养因子成熟肽基因克隆及表达

人脑源性神经营养因子成熟肽基因克隆及表达

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首届长三角科技论坛：长三角生物医药发展论坛

作者：张虎杨吉成盛伟华缪竞诚李丽娥王金志白艳艳谢宇锋苏州大学医学院基础医学系细胞与分子生物学教研室江苏苏州 215007

目的：构建表达人脑源性神经营养因子的基因工程菌。方法：人工合成一对含EcoRI和BamHI限制性酶切位点的特异引物，以健康成人末梢白细胞基因组DNA作为模板。应用PCR技术扩增hBDNF成熟肽基因，用A-T克隆法与pUCm-T载体连接，pUC... 详细信息

目的：构建表达人脑源性神经营养因子的基因工程菌。方法：人工合成一对含EcoRI和BamHI限制性酶切位点的特异引物，以健康成人末梢白细胞基因组DNA作为模板。应用PCR技术扩增hBDNF成熟肽基因，用A-T克隆法与pUCm-T载体连接，pUCm-T-BDNF克隆片段再定向插入原核表达载体PB V220，构建的重组体PB V220-BDNF转化大肠杆菌DH5a经热诱导表达。结果：经DNA测序和限制性酶切确证重组入载体片段为目的基因的核苷酸序列，并成功表达蛋白。结论：本研究成功地克隆出hBDNF基因编码序列并在大肠杆菌中获得稳定表达，为今后的生物学活性和神经系统的基因治疗奠定了基础。

关键词：脑源性神经营养因子基因表达基因工程菌原核表达生物学活性基因治疗核苷酸

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编码蛋白激酶的人类新基因NEK8的电子克隆

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江苏大学学报（医学版） 2004年第5期14卷 389-393,396页

作者：黄超群翟倩婷周嘉梁吴士良苏州大学医学院基础医学系生物化学和分子生物学教研室江苏苏州215007

目的 :克隆人类基因组中小鼠NEK8基因的同源物。方法 :用同源筛选策略 ,以小鼠NEK8基因作为信息探针 ,在GenBank数据库中进行TBLASTN分析 ,将获得的高度同源的EST用VECTORNTⅠ软件拼接成重叠群。利用BLAT分析确定NEK8基因的基因组结构... 详细信息

目的 :克隆人类基因组中小鼠NEK8基因的同源物。方法 :用同源筛选策略 ,以小鼠NEK8基因作为信息探针 ,在GenBank数据库中进行TBLASTN分析 ,将获得的高度同源的EST用VECTORNTⅠ软件拼接成重叠群。利用BLAT分析确定NEK8基因的基因组结构以及染色体定位。利用SMART网上分析工具进行结构域预测 ,利用Unigene数据库进行表达谱分析。结果 :电子克隆到人类NEK8新基因cDNA序列 ,长度为 2 85 8bp ,含完整的ORF ,编码一条 6 92个氨基酸的多肽 ,被预测的分子量为 74 8KDa ,等电点 8 0 4。定位在染色体 17q11 2 ,由 15个外显子和 14个内含子组成。其编码蛋白含有一个苏氨酸 /丝氨酸蛋白激酶结构域 ,与NEK家族成员有较高的同源性。电子表达谱分析显示NEK8基因在胎盘 ,胃 ,结肠 ,眼 ,胰腺 ,骨骼 ,肾 ,子宫等组织中表达。结论 :电子克隆到编码苏氨酸

关键词：新基因小鼠蛋白激酶编码蛋白人类表达谱结肠电子克隆结构域内含子

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干扰素治疗病理性瘢痕的实验研究

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江苏大学学报（医学版） 2004年第4期14卷 282-284页

作者：孙其昌周嘉梁王秀珍周迎会吴士良苏州大学医学院基础医学系生物化学与分子生物学教研室苏州大学医学院生化工程研究所江苏苏州215007

目的 :研究体外干扰素 (INF)对瘢痕组织成纤维细胞 (FB)中转化生长因子 β1(TGF β1)、血小板衍生生长因子BB(PDGF BB)、基质金属蛋白酶 (MMP 1)以及糖基转移酶 (ppGalNAc T2 )的mRNA表达的影响 ,以求阐明干扰素对病理性瘢痕的作用机理... 详细信息

目的 :研究体外干扰素 (INF)对瘢痕组织成纤维细胞 (FB)中转化生长因子 β1(TGF β1)、血小板衍生生长因子BB(PDGF BB)、基质金属蛋白酶 (MMP 1)以及糖基转移酶 (ppGalNAc T2 )的mRNA表达的影响 ,以求阐明干扰素对病理性瘢痕的作用机理。方法 :组织块法培养瘢痕组织FB ,传代后分成 3组①对照组 :生理盐水处理 ;②低浓度组 :10 0U/mlINF α2b处理 ;③高浓度组 :10 0 0 0U/mlINF α2b处理 ;RT PCR检测TGF β1、MMP 1、PDGF BB及ppGalNAc T2表达。结果 :体外培养瘢痕FB经 10 0U/ml及 10 0 0 0U/ml干扰素α 2b处理后 ,RT PCR检测TGF β1、PDGF BB及pp GalNAc T2表达降低 ,MMP 1表达升高 ,呈显著差异 ,且具有浓度依赖性。结论 :干扰素α2b对瘢痕FB具有抑制作用 ,其机理可能与多种细胞因子有关 ,如TGF β1、PDGF BB。

关键词：增生性瘢痕干扰素α2b TGF-β1 PDGF-BB MMP-1 ppGalNAcT2 治疗病理性瘢痕实验转化生长因子β1 血小板衍生生长因子BB 糖基转移酶基质金属蛋白酶

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肺癌患者血清肿瘤标志物检测的临床意义

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中国血液流变学杂志 2004年第4期14卷 524-526页

作者：徐跃华汪家敏苏州大学附二院呼吸科江苏苏州215004 苏州大学医学院基础医学系生物化学和分子生物学教研室江苏苏州215007

目的　测定小细胞肺癌和晚期非小细胞肺癌患者化疗前后癌胚抗原 (CEA)、细胞角蛋白 19片段 (CYFRA2 1 1)、神经元特异性烯醇化酶 (NSE)的变化 ,并探讨该种变化的临床意义。方法　用放射免疫分析的方法分别测定 2 0例肺部良性疾病、2 0... 详细信息

目的　测定小细胞肺癌和晚期非小细胞肺癌患者化疗前后癌胚抗原 (CEA)、细胞角蛋白 19片段 (CYFRA2 1 1)、神经元特异性烯醇化酶 (NSE)的变化 ,并探讨该种变化的临床意义。方法　用放射免疫分析的方法分别测定 2 0例肺部良性疾病、2 0例广泛期小细胞肺癌 (SCLC)以及 4 5例初诊晚期非小细胞肺癌 (NSCLC)患者化疗前后血清CEA、CYFRA2 1 1、NSE的水平 ,再分别作对比分析。结果　肺癌组CEA、CYFRA2 1 1、NSE的水平高于良性疾病组 ,但CYFRA2 1 1在良性疾病和小细胞肺癌中、NSE在良性疾病和鳞癌以及良性疾病和腺癌中均未见统计学差异 (P >0 .0 5 ) ;化疗后小细胞肺癌患者NSE显著下降 (P <0 0 1) ,鳞癌患者CYFRA2 1 1水平显著下降 (P <0 .0 1) ,但在腺癌患者只有NSE水平较化疗前下降 ,另两种标志物未见统计学差异 (P >0 .0 5 )。结论　三种肿瘤标志物在非小细胞肺癌晚期均升高 ,其中CEA在腺癌、CYFRA2 1 1在鳞癌、NSE在SCLC中尤为明显 ,化疗后显著下降 ,三种指标的测定有助于肺癌的病理分型 ,并且可以分别作为判定不同病理类型肺癌化疗疗效的指标。

关键词： CYFRA21-1 NSE 患者良性疾病鳞癌肺癌临床意义水平结论差异

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白细胞介素24的研究进展

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国外医学（分子生物学分册） 2003年第5期25卷 260-262页

作者：陈雄艳杨吉成苏州大学医学院基础医学系细胞和分子生物学教研室，苏州215007

IL 2 4是一种分子量为 2 3.8kD的细胞因子 ,系IL 10家族成员。人IL 2 4基因位于染色体 1q32 .2 q4 1,编码产物为 2 0 6个氨基酸的蛋白质。IL 2 4主要表达于外周血单个核细胞、胸腺及脾脏等免疫器官。在信号转导方面 ,IL 2 4介导STAT1和... 详细信息

IL 2 4是一种分子量为 2 3.8kD的细胞因子 ,系IL 10家族成员。人IL 2 4基因位于染色体 1q32 .2 q4 1,编码产物为 2 0 6个氨基酸的蛋白质。IL 2 4主要表达于外周血单个核细胞、胸腺及脾脏等免疫器官。在信号转导方面 ,IL 2 4介导STAT1和STAT3的激活。研究表明 ,IL 2 4基因是一个既抑制肿瘤生长 ,又表达刺激免疫系统的蛋白的基因 ,对此基因的研究具有非常重要的理论和临床意义。

关键词：白细胞介素 IL-2 细胞因子免疫系统氨基酸蛋白质基因

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