检索结果-内蒙古大学图书馆

中国组织工程研究与临床康复 2009年第14期13卷 2727-2732页

作者：王江涛杨丽红张悦红解军山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室省部共建细胞生理学教育部重点实验室山西省太原市030001

背景:Notch信号通路在神经干细胞分化过程中起着关键作用,而γ-分泌酶是Notch信号通路调节的核心环节。目的:对神经干细胞分化过程中γ-分泌酶的活性、酶解产物Notch胞内段的生成量以及活性中心早老素1的表达进行检测。设计、时间及地点... 详细信息

背景:Notch信号通路在神经干细胞分化过程中起着关键作用,而γ-分泌酶是Notch信号通路调节的核心环节。目的:对神经干细胞分化过程中γ-分泌酶的活性、酶解产物Notch胞内段的生成量以及活性中心早老素1的表达进行检测。设计、时间及地点:细胞学基因水平检测,于2008-10/2009-01在山西医科大学生物化学与分子生物学实验室完成。材料:清洁级胚龄15d的BALB/c胎鼠由中国药品生物制品检定所提供,质粒Notch1△E-GVP和MH100由瑞典斯德哥尔摩诺贝尔医学学会的Urban Lendahl教授惠赠,荧光素酶质粒pRL-CMV为Promega公司产品。方法:体外分离培养胎鼠脑皮质神经干细胞,传至第5代后,按5×104/cm2密度接种到24孔板,每孔转染200ng MH100,100ng Notch1△E-GVP和2ng pRL-CMV质粒。主要观察指标:利用Gal4-VP16/UAS系统和双荧光素酶报告基因系统测定神经干细胞分化过程中γ-分泌酶的活性;通过Western blot技术检测酶解产物Notch胞内段的生成量;采用实时荧光定量PCR法测定γ-分泌酶活性中心早老素1mRNA的表达。结果:在γ-分泌酶抑制剂DAPT作用下,γ-分泌酶活性呈剂量依赖性降低,与对照组相比,0.1μmol/L DAPT即可对γ-分泌酶活性产生明显的抑制作用(P<0.05),至50μmol/L DAPT时γ-分泌酶活性降低近100倍(P<0.001)。Notch胞内段的生成量也同步减少,与DAPT抑制γ-分泌酶活性呈剂量依赖性的结果一致。与对照组相比,早老素1mRNA表达水平经0.1μmol/L DAPT干预后开始升高,并随着DAPT浓度增加而逐渐升高。结论:神经干细胞分化过程中,γ-分泌酶抑制剂干预后γ-分泌酶活性与酶解产物生成量呈剂量依赖性降低,活性中心基因表达则呈反馈性的同步增高。

关键词： γ-分泌酶早老素1 Notch 神经干细胞分化

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表达抗血管内皮细胞生长因子核酶和白细胞介素24腺病毒载体的构建及其对结肠癌HT-29细胞的毒性作用

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中华肿瘤杂志 2009年第6期31卷 433-433页

作者：常树建杨吉成陈卫昌谢宇峰盛伟华苏州大学附属第一医院消化内科 215006 苏州大学基础医学院细胞与分子生物学教研室

肿瘤的发生是一个多基因改变过程，因此，在肿瘤基因治疗过程中，以单一基因为靶点的治疗很难取得显著的抗肿瘤效果。我们构建了同时带有双基因抗血管内皮细胞生长因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）发夹状核酶（Rz）和白... 详细信息

肿瘤的发生是一个多基因改变过程，因此，在肿瘤基因治疗过程中，以单一基因为靶点的治疗很难取得显著的抗肿瘤效果。我们构建了同时带有双基因抗血管内皮细胞生长因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）发夹状核酶（Rz）和白细胞介素24（interleukin-24，IL-24）的腺病毒载体，并初步观察了其对结肠癌HT-29细胞的毒性作用。

关键词：血管内皮细胞生长因子脱氧核糖核酸酶类白细胞介素24 腺病毒载体 HT-29细胞

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抗肿瘤基因重组药物和腺病毒基因治疗载体的产业化转让项目

抗肿瘤基因重组药物和腺病毒基因治疗载体的产业化转让项目

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第六届长三角科技论坛生物产业发展分论坛

作者：杨吉成谢宇锋盛伟华缪竞诚苏州大学医学部基础医学系细胞分子生物学教研室苏州 215123

本文分别介绍了人白细胞介素-24 (hIL-24)基因重组抗肿瘤药物蛋白(rhIL-24)项目，hIL-24腺病毒载体(Ad- hIL-24)肿瘤基因治疗项目、ING4腺病毒载体(Ad-ING4)肿瘤基因治疗项目、双基因表达腺病毒肿瘤墓因治疗载体项目的项目研究以及项目... 详细信息

本文分别介绍了人白细胞介素-24 (hIL-24)基因重组抗肿瘤药物蛋白(rhIL-24)项目，hIL-24腺病毒载体(Ad- hIL-24)肿瘤基因治疗项目、ING4腺病毒载体(Ad-ING4)肿瘤基因治疗项目、双基因表达腺病毒肿瘤墓因治疗载体项目的项目研究以及项目产业发展前景。

关键词：抗肿瘤基因重组药物腺病毒基因治疗载体产业化转让

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用酵母双杂交系统筛选CENP-E相互作用蛋白

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中国生物化学与分子生物学报 2009年第8期25卷 719-726页

作者：都建陈立建沈继龙花沙沙姚雪彪安徽医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室合肥230032 安徽医科大学第一附属医院麻醉科合肥230032 安徽医科大学病原生物学教研室合肥230032 中国科学技术大学细胞动力学实验室合肥230027

纺锤体检验点(spindle checkpoint)是一个重要的细胞分裂生化调节通路,可监督染色体正确分离和传代.着丝粒相关蛋白E(centromere-associated protein E,CENP-E)是一个分子量为312kD的微管马达驱动蛋白,可以衔接纺锤体微管与动点并参与... 详细信息

纺锤体检验点(spindle checkpoint)是一个重要的细胞分裂生化调节通路,可监督染色体正确分离和传代.着丝粒相关蛋白E(centromere-associated protein E,CENP-E)是一个分子量为312kD的微管马达驱动蛋白,可以衔接纺锤体微管与动点并参与纺锤体检验点调控.为研究CENP-E的作用机理,以其动点结合区域为诱饵蛋白,用酵母双杂交技术从人HeLa细胞cDNA文库中筛选出了Nuf2蛋白.体外的pull-down实验和体内的免疫共沉淀实验表明,Nuf2蛋白通过其卷曲螺旋(coiled-coil)功能域特异结合CENP-E的C末端区域,间接免疫荧光显示Nuf2与CENP-E共定位于细胞有丝分裂期染色体的动点.由此推论,CENP-E通过Nuf2的直接作用参与构筑动点-微管界面,进而参与细胞有丝分裂纺锤体检验点信号转导通路,为染色体正确分离发挥调控作用.

关键词：酵母双杂交着丝粒相关蛋白E(CENP-E) 马达驱动蛋白有丝分裂

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Ad-ING4抑制人A549肺癌细胞及其裸鼠移植瘤的生长

Ad-ING4抑制人A549肺癌细胞及其裸鼠移植瘤的生长

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第六届长三角科技论坛生物产业发展分论坛

作者：杜贤荣杨吉成谢宇锋盛伟华朱晔涵苏州大学附属第一医院呼吸内科苏州 215006 苏州大学基础医学院细胞与分子生物学教研室苏州 215123

目的：研究腺病毒介导的ING4基因(Ad—ING4)对肺癌体内外的抑制作用及其潜在的分子机制。方法：体外采用不同MOI的Ad—ING4感染人A549肺癌细胞,并用MTT法检测Ad—ING4对A549肺癌细胞的抑制作用,流式细胞仪(FCM)检测肿瘤细胞的凋亡率,采... 详细信息

目的：研究腺病毒介导的ING4基因(Ad—ING4)对肺癌体内外的抑制作用及其潜在的分子机制。方法：体外采用不同MOI的Ad—ING4感染人A549肺癌细胞,并用MTT法检测Ad—ING4对A549肺癌细胞的抑制作用,流式细胞仪(FCM)检测肿瘤细胞的凋亡率,采用A549细胞株建立人肺癌裸鼠模型,瘤体局部注射干预用药,每隔5d测量一次肿瘤体积,治疗结束后1wk,将裸鼠处死,摘除瘤体称重,计算抑瘤率;瘤块HE染色,免疫组化检测ING4、P53、Caspase3、Survivin、CD34、HIF—1等基因的表达。结果：Ad—ING4感染A549细胞抑制率可达47.62％左右：72 h凋亡率为18.5％;荷瘤裸鼠经治疗后,Ad—ING4组和DDP组的肿瘤体积、瘤重均明显缩小,其抑瘤率分别达到42.43％和46.47％,DDP组出现不良反应;免疫组化检测Ad—ING4组和DDP组与对照组比较,P53、Caspase3的表达上调(P细胞及其裸鼠移植瘤的生长具有明显的抑制作用。其抑瘤机制可能与上调P53、Caspase3基因的表达和下调Survivin、CD34、HIF—1的基因表达进而诱导肿瘤细胞凋亡和抑制肿瘤血管形成等有关。

关键词：腺病毒介导 ING4基因肺癌细胞移植瘤生长抑制细胞凋亡

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吉林地区汉族人群4个Y-STR基因座的遗传多态性调查

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苏州大学学报（医学版） 2009年第6期29卷 1170-1172,1181页

作者：庄文越王雪松张吉林王冰梅北华大学检验学院分子生物学教研室吉林吉林132013 苏州大学医学部基础医学与生物科学学院江苏苏州215123 吉林市卫生局卫生监督所吉林吉林132001

目的调查吉林地区汉族人群4个Y染色体短串联重复序列(Y-STR)基因座的遗传多态性。方法利用PCR扩增和聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对吉林地区汉族群体无关男性血样进行4个Y-STR基因座的分型。结果4个Y-STR基因座在吉林地区汉族群体分别发现4～... 详细信息

目的调查吉林地区汉族人群4个Y染色体短串联重复序列(Y-STR)基因座的遗传多态性。方法利用PCR扩增和聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对吉林地区汉族群体无关男性血样进行4个Y-STR基因座的分型。结果4个Y-STR基因座在吉林地区汉族群体分别发现4～5个等位基因,GD值最低为0.645 1(DYS389I),最高为0.716 7(DYS19)。结论4个Y-STR基因座在吉林地区汉族群体均具有较高的遗传多态性,可应用于法医学个体识别和亲子鉴定。

关键词：短串联重复序列 Y染色体遗传多态性

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吡咯喹啉醌对γ辐射小鼠防护作用的初步研究

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中国辐射卫生 2009年第4期18卷 403-404页

作者：邱秀芹吴士良刘春亮徐岚赵俊宇苏州卫生职业技术学院江苏苏州215009 苏州大学基础医学与生命科学学院生物化学与分子生物学教研室生化工程研究所江苏苏州215123

目的研究吡咯喹啉醌(PQQ)对γ辐射小鼠的防护作用。方法将40只昆明小鼠随机分四组,即未照射组、单纯照射组、照射前给药组、照射后给药组。给药组小鼠口服PQQ剂量按体重计每天2mg/kg,连续给药7天。采用60Coγ射线单次全身照射,剂量5Gy... 详细信息

目的研究吡咯喹啉醌(PQQ)对γ辐射小鼠的防护作用。方法将40只昆明小鼠随机分四组,即未照射组、单纯照射组、照射前给药组、照射后给药组。给药组小鼠口服PQQ剂量按体重计每天2mg/kg,连续给药7天。采用60Coγ射线单次全身照射,剂量5Gy。于照射后第8天,颈椎脱臼处死小鼠,收集血清、制备肝匀浆,进行各项生化指标测定。制作肝HE染色切片。结果照射后小鼠血清及肝脏中SOD、T-AOC显著下降(P<0.05),MDA显著升高(P<0.05)。照射给药组小鼠血清SOD、T-AOC含量显著升高(P<0.05),MDA含量显著减低(P<0.05);肝脏中SOD含量显著升高(P<0.05)。所有照射组小鼠肝组织都有肝板排列紊乱,出现肝细胞水肿,变性、坏死现象。结论γ辐射引发小鼠全身性的氧化应激,肝脏是重要的辐射敏感器官。PQQ对γ辐射小鼠的防护作用机制是:PQQ能直接清除自由基,同时能调动照射小鼠的全身自由基清除系统,尤其是SOD的活性,降低自由基含量。

关键词：吡咯喹啉醌 γ辐射抗氧化力自由基

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抑瘤素M的研究进展

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上海医学 2008年第8期31卷 602-604页

作者：胡志清缪竞诚苏州大学基础医学系细胞与分子生物学教研室 215123

抑瘤素M(OSM)最初是1986年Zarling等从U937组织型淋巴瘤细胞(histiocytic lymphomacells)培养上清液中分离的一种对A375黑色素瘤细胞有生长抑制作用的因子^[1]。OSM主要由活化的T淋巴细胞、单核细胞和巨噬细胞分泌,这种诱导分泌过程可... 详细信息

抑瘤素M(OSM)最初是1986年Zarling等从U937组织型淋巴瘤细胞(histiocytic lymphomacells)培养上清液中分离的一种对A375黑色素瘤细胞有生长抑制作用的因子^[1]。OSM主要由活化的T淋巴细胞、单核细胞和巨噬细胞分泌,这种诱导分泌过程可以出现在机体的大多数组织中。OSM属于白细胞介素(IL)-6家族成员,[第一段]

关键词：抑瘤素M 生长抑制作用黑色素瘤细胞淋巴瘤细胞培养上清液 T淋巴细胞白细胞介素 U937

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重组人源化ING4基因的构建及其对肺癌NCI-H460细胞生长抑制作用

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肿瘤 2008年第11期28卷 942-945页

作者：段光军韩志强林云霞杨鹏胡华成盛伟华王金志杨吉成苏州大学附属第二医院呼吸内科苏州215004 苏州大学基础医学院细胞与分子生物学教研室苏州215123

目的:构建重组人源化hING4基因并探究其对肺癌细胞的生长抑制效应。方法:以pcDNA3.0-mING4重组质粒为模板,通过定点突变技术构建带有绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒Ad-hING4基因。用荧光显微镜和RT-PCR法检测hING4在肺癌细胞中的表达;We... 详细信息

目的:构建重组人源化hING4基因并探究其对肺癌细胞的生长抑制效应。方法:以pcDNA3.0-mING4重组质粒为模板,通过定点突变技术构建带有绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒Ad-hING4基因。用荧光显微镜和RT-PCR法检测hING4在肺癌细胞中的表达;Western印迹法检测hING4对肺癌细胞中Bax、Bcl-2表达的影响;集落形成试验和FCM法检测hING4对肺癌细胞增殖和凋亡影响。结果:基因测序和PCR结果提示成功构建人源化Ad-hING4基因;并能在肺癌细胞中表达,对肺癌细胞有细胞毒作用;Western印迹法检测结果提示基因在上调Bax表达同时下调Bcl-2的表达;集落形成试验、FCM检测结果提示hING4基因可抑制肺癌细胞增殖并诱导凋亡。结论:成功构建了Ad-hING4基因,并能在体外抑制肺癌细胞生长。

关键词：肺肿瘤 ING4蛋白人诱变突点基因肿瘤抑制

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RNA干扰HIF-1α表达对白血病K562细胞高三尖杉酯碱敏感性的影响

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癌症 2008年第7期27卷 723-728页

作者：李炳宗庄文卓陈萍傅晋翔苏州大学附属第二医院血液科江苏苏州215004 苏州大学基础医学院细胞与分子生物学教研室江苏苏州215123

背景与目的:缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)是细胞对缺氧应答的一个重要的转录因子,目前对缺氧条件下血液系统恶性肿瘤,尤其是白血病生物学改变的研究相对较少。本研究探讨应用RNA干扰技术抑制HIF-1α在慢性... 详细信息

背景与目的:缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)是细胞对缺氧应答的一个重要的转录因子,目前对缺氧条件下血液系统恶性肿瘤,尤其是白血病生物学改变的研究相对较少。本研究探讨应用RNA干扰技术抑制HIF-1α在慢性粒细胞白血病细胞系K562中的表达后,细胞对化疗药物高三尖杉酯碱(homoharringtonine,HHT)敏感性的变化。方法:利用shRNA表达载体pSilencer2.1-U6hygro构建RNA干扰载体,在K562细胞中抑制HIF-1α的表达,潮霉素筛选获得阳性克隆。应用实时定量RT-PCR技术研究缺氧(1%O2分压)条件下,抑制HIF-1α的表达对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、磷酸甘油酸激酶(phosphoglycerate kinase,PGK)、葡萄糖转运蛋白-1(glucose transporter-1,Glut-1)和P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达的影响。应用MTT比色法观察抑制HIF-1α表达后,K562细胞对HHT敏感性的变化。结果:转染后HIF-1α在mRNA和蛋白水平的表达均被抑制,缺氧条件下HIF-1α的靶基因VEGF、PGK、Glut-1、P-gp等表达明显下调。HIF-1α被干扰后的K562细胞对HHT的敏感性增加。结论:抑制K562细胞的HIF-1α表达可以抑制血管生成和糖代谢相关基因表达,并且增加对HHT的敏感性。

关键词： RNA干扰缺氧诱导因子-1α K562细胞靶基因高三尖杉酯碱

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