目的:探讨经RGD修饰的生长抑制因子4(inhibitor of growth 4,ING4)基因与第10染色体缺失与张力蛋白同源的磷酸酶基因(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome ten,PTEN)双基因共表达的腺病毒载体(***-ING4-PTEN)体外...
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目的:探讨经RGD修饰的生长抑制因子4(inhibitor of growth 4,ING4)基因与第10染色体缺失与张力蛋白同源的磷酸酶基因(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome ten,PTEN)双基因共表达的腺病毒载体(***-ING4-PTEN)体外对神经胶质瘤U87细胞的增殖、凋亡及侵袭的影响。方法:以***-ING4-PTEN为实验组,***-ING4/-PTEN为单基因对照组,PBS、***/Ad-GFP为空白对照组,分别体外感染U87神经胶质瘤细胞。Western blotting检测目的基因ING4和PTEN在U87细胞中的表达,MTT法检测实验组病毒感染对U87细胞增殖的影响,流式细胞术及Real-time PCR法检测神经胶质瘤细胞凋亡及凋亡相关基因(Bcl-2、Bax、caspase-3、HIF-1α)表达变化,划痕实验及Transwell实验检测实验组病毒感染对U87细胞迁移及侵袭能力的影响,Real-time PCR法检测侵袭相关基因(MMP-2、MMP-9)表达变化。结果:成功检测到ING4和PTEN仅在实验组及相应单基因对照组中表达。实验组第5天细胞抑制率可达(83.1±4.6)%、凋亡率可达(40.7±4.3)%,与单基因组及空白对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05);实验组能明显上调U87细胞中Bax、caspase-3和下调HIF-1α、Bcl-2等细胞凋亡相关蛋白的表达(均P<0.05),而且肿瘤侵袭相关分子MMP-2、MMP-9的表达也明显下调(均P<0.05);实验组细胞迁移距离[(70.1±6.2)μm]和穿膜细胞数[(26.6±3.5)个]均明显减少,与单基因组及空白对照组比较差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:与单基因腺病毒相比,***-ING4-PTEN双基因具有更显著的抑制U87神经胶质瘤细胞增殖、诱导其凋亡,并抑制其迁移及侵袭能力。
动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是一种由多因素诱导的血管慢性炎症反应性疾病,严重威胁人类身体健康.在AS发生过程中,巨噬细胞吞噬脂质形成泡沫细胞,泡沫细胞崩解后,释放酶类和脂质,组织坏死,形成动脉粥样硬化斑块.Pannexin-1 (Panx1)寡聚体形成的膜通道开放后,重要的细胞信号分子—三磷酸腺苷(ATP)经由该通道释放,释放的ATP与P2X7受体结合,加重炎症反应.目前认为,激活的肝X受体(LXR)会减少AS斑块的形成,减缓AS的过程,但具体机制并不明确.阐明此科学问题,有望为预防和治疗AS开辟新的思路.目的：研究Panx1通道是否参与LXR促进THP-1源性巨噬细胞释放ATP,并且初步探讨Panx1通道对巨噬细胞摄取氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)的调节作用.
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