检索结果-内蒙古大学图书馆

解放军医药杂志 2014年第4期26卷 50-54页

作者：王奕鸿刘济生盛伟华杨吉成苏州大学附属第一医院耳鼻咽喉科江苏苏州215006 苏州大学基础医学院细胞与分子生物学教研室江苏苏州215006

目的研究RGD修饰的腺病毒介导的ING4对人鼻咽癌细胞(CNE)裸鼠移植瘤的影响并探讨其可能调节机制。方法用RGD修饰的ING4单基因腺病毒载体(***-ING4)及腺病毒空载体(***-GFP)感染CNE细胞,RT-PCR法及Western blot法检测ING4基因的表达水平... 详细信息

目的研究RGD修饰的腺病毒介导的ING4对人鼻咽癌细胞(CNE)裸鼠移植瘤的影响并探讨其可能调节机制。方法用RGD修饰的ING4单基因腺病毒载体(***-ING4)及腺病毒空载体(***-GFP)感染CNE细胞,RT-PCR法及Western blot法检测ING4基因的表达水平。采用CNE细胞株来建立15只人鼻咽癌裸鼠模型,分为PBS组、***-GFP及***-ING4组,每组5只。分别对瘤体内局部注射相应的干预用药,动态测量肿瘤体积,免疫组化检测Caspase-3基因的表达。结果 CNE细胞感染***-ING4 72 h后,ING4在CNE细胞中过表达,***-ING4组肿瘤体积明显小于PBS组及***-GFP组(P<0.01),免疫组化结果显示***-ING4组比其余两组Caspase-3基因的表达明显上调(P<0.01)。结论 ***-ING4抑制人鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤的生长,可能的机制是通过上调Caspase-3基因促进肿瘤细胞凋亡。

关键词： Ad RGD-ING4 鼻咽肿瘤基因,肿瘤 Caspase-3 裸鼠

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腺病毒介导的白介素24联合放疗对CNE-2Z细胞株及其裸鼠移植瘤的抑瘤增效作用

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2013年第11期48卷 942-950页

作者：孙朋杨吉成谢宇锋盛伟华刘济生苏州大学附属第一医院耳鼻咽喉苏州215006 苏州大学基础医学院细胞与分子生物学教研室

目的研究以腺病毒为载体的白细胞介素24（IL-24）基因（简称AdVIL-24）过表达对人CNE-2Z鼻咽癌细胞体内外放疗的抑癌增效作用及潜在的作用机制.方法将AdVIL-24感染CNE-2Z细胞,用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）法及Western blot法检测IL... 详细信息

目的研究以腺病毒为载体的白细胞介素24（IL-24）基因（简称AdVIL-24）过表达对人CNE-2Z鼻咽癌细胞体内外放疗的抑癌增效作用及潜在的作用机制.方法将AdVIL-24感染CNE-2Z细胞,用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）法及Western blot法检测IL-24在CNE-2Z细胞中的转录和表达.体外实验：将PBS组、AdV组、AdVIL-24组、放疗组及AdVIL-24联合放疗组的CNE-2Z细胞,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测CNE-2Z细胞的生长情况；碘化丙啶（PI）染色检测细胞周期,Annexin-V-PE/7-AAD染色检测CNE-2Z细胞凋亡率的变化；RT-PCR检测CNE-2Z细胞中P21、P27、cyclin E、CDK2、Bcl-2、Bax的转录；Western blot检测CNE-2Z细胞中P21、P27、cyclin E、CDK2、Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达.体内实验：采用CNE-2Z细胞株建立人鼻咽癌裸鼠模型,然后将各组荷瘤裸鼠瘤体进行相应处理,动态测量肿瘤体积及最后取瘤称量重量；免疫组化检测P21、P27、cyclin E、CDK2、Bcl-2、Bax、Caspase-3、CD34、VEGF等因子的表达以及微脉管密度.采用金正均法（Q值）计算联合用药后的最终效应.结果体外实验：AdVIL-24联合放疗组能使CNE-2Z细胞生长出现抑制（P＜0.05,Q3d=0.916,Q4d=1.050）；G1期阻滞（50.37％,P＜0.05,Q=1.042）;并诱导其凋亡（48.82％,P＜0.05,Q=1.042）；能明显上调P21、P27、Bax/Bcl-2、Caspase-3等基因转录和表达,下调cyclin E、CDK2基因的转录和表达（P＜0.05；QP21 =0.959,QP27 =0.956,Qcyclin E=1.078,QCDK2=1.046,QBax/Bcl-2=0.995）.体内实验：AdVIL-24联合放疗组能使CNE-2Z移植瘤生长出现抑制（P＜0.05,Qvolume14=1.053,Qweight=1.004）；诱导其凋亡（P＜0.05,Q=0.974）；上调P21、P27、Bax/Bcl-2、cleaved-Caspase-3的表达,下调cyclin E、CDK2的表达（P ＜0.05,QP21=0.920,QP27=0.937,Qcyclin E=1.060,QCDK2=1.019,QBax/Bcl-2=0.982,Qcleaved-Caspase-3=0.927）；CD34、VEGF的表达以及微脉管密度较弱（P＜0.05；QCD34=0.990,QMVD=0.988）.放疗组VEGF的表达出现了明显的表达增强（P＜0.05）,然而AdVIL-24能够明显抑制其表达（P＜0.05）.结论 AdVIL-24联合放疗能有效抑制肿瘤的生长促进其凋亡,是治疗鼻咽癌的一种可能有效的方法.

关键词：鼻咽肿瘤白细胞介素类基因疗法放射疗法细胞系,肿瘤

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Ad-IL-24联合DDP对A549细胞体外生长的影响

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中国现代医药杂志 2014年第7期16卷 1-4页

作者：郭锦锦王少慧孙万邦杨吉成盛伟华缪竞诚遵义医学院珠海校区贵州省免疫学研究生教育创新基地广东珠海519041 苏州大学细胞与分子生物学教研室

目的探讨白细胞介素24基因腺病毒载体(Ad-IL-24)联合顺铂体外对人肺腺癌的抑制效应及诱导人肺腺癌的细胞凋亡机制。方法用Ad-IL-24、DDP、Ad-IL-24联合DDP分别体外作用于A549细胞12h、24h、48h,采用CCK8法及流式细胞术(FCM)分别检测细... 详细信息

目的探讨白细胞介素24基因腺病毒载体(Ad-IL-24)联合顺铂体外对人肺腺癌的抑制效应及诱导人肺腺癌的细胞凋亡机制。方法用Ad-IL-24、DDP、Ad-IL-24联合DDP分别体外作用于A549细胞12h、24h、48h,采用CCK8法及流式细胞术(FCM)分别检测细胞增殖抑制率和细胞凋亡率。结果 Ad-IL-24作用于A549细胞48h后细胞增殖抑制率为27.7%,Ad-IL-24联合DDP作用于A549细胞48h后细胞增殖抑制率为45.2%;Ad-IL-24作用于A549细胞48h细胞凋亡率为22.9%,联合用药后细胞凋亡率为35.9%。结论 Ad-IL-24对A549细胞具有生长抑制作用,能引起A549细胞凋亡,联合DDP用药后效果更佳,Ad-IL-24具有化疗增敏效应。

关键词：腺病毒白细胞介素24 顺铂肺腺癌基因治疗

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赤子爱胜蚓核酸酶样蛋白的一级结构特征

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中国组织工程研究 2014年第15期18卷 2390-2396页

作者：于保锋刘志贞张悦红解军程牛亮王建华牛勃山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室山西省太原市030001 山西医科大学细胞生理学省部共建教育部重点实验室山西省太原市030001 首都儿科研究所生物技术研究室北京市100020

背景:前期研究从赤子爱胜蚓组织中获得一组核酸酶样蛋白,对该组核酸酶样蛋白的一级结构进行研究,有利于揭示其结构的基本性质,为进一步结构与功能的研究奠定基础。目的:对核酸酶样蛋白EWD1和EWD2进行一级结构的测定。方法:采用Edman降... 详细信息

背景:前期研究从赤子爱胜蚓组织中获得一组核酸酶样蛋白,对该组核酸酶样蛋白的一级结构进行研究,有利于揭示其结构的基本性质,为进一步结构与功能的研究奠定基础。目的:对核酸酶样蛋白EWD1和EWD2进行一级结构的测定。方法:采用Edman降解法测定EWD1和EWD2的N末端氨基酸序列,采用酸水解法测定其氨基酸组成,LC-MS/MS测定蛋白质内部分氨基酸的序列,MALDI-TOF-MS测定蛋白的含糖量和二硫键数目。结果与结论:核酸酶样蛋白EWD1和EWD2的氨基酸组成中,天冬氨酸和天冬酰胺之和的含量最高,都达到近10%,疏水氨基酸亮氨酸的含量也较高,半胱氨酸含量较少,氨基酸组成比较显示,该2种酶与其它核酸酶较相似。Edman降解法测定,EWD1蛋白大亚基的N末端6个氨基酸序列为:D、E、W、V、Y、P,EWD2蛋白的N末端9个氨基酸序列为:L、L、G、P、Y、K、P、K、C;串,联质谱的结果提示2种核酸酶为新蛋白;MALDI-TOF-MS法显示1号核酸酶中含有8个半胱氨酸,形成4对二硫键,2号核酸酶中有6个半胱氨酸,形成3对二硫键。EWD1,2均为糖蛋白,EWD1中的含糖量为17.3%,EWD2蛋白中的含糖量为15.6%。

关键词：组织构建组织工程赤子爱胜蚓核酸酶样蛋白一级结构质谱二硫键国家自然科学基金

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日本血吸虫脱尾童虫表膜结合短肽的筛选与鉴定

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2013年第1期31卷 27-32页

作者：刘彦张组萍王可耕顾孔珍蔡立汀曾庆仁南华大学医学院寄生虫学教研室衡阳421001 中南大学基础医学院细胞与分子生物学实验中心长沙410013

目的筛选噬菌体十二肽库中与日本血吸虫(Shistosoma japonicum)脱尾童虫表膜特异性结合而不与尾蚴表膜结合的短肽并鉴定。方法利用M13噬菌体十二肽库,经体外逆向差异筛选日本血吸虫尾蚴和脱尾活童虫,从第3轮回收的结合噬菌体中随机挑取1... 详细信息

目的筛选噬菌体十二肽库中与日本血吸虫(Shistosoma japonicum)脱尾童虫表膜特异性结合而不与尾蚴表膜结合的短肽并鉴定。方法利用M13噬菌体十二肽库,经体外逆向差异筛选日本血吸虫尾蚴和脱尾活童虫,从第3轮回收的结合噬菌体中随机挑取15个克隆进行测序获取目标噬菌体后,采用ELISA法、洗脱回收率实验(以M13KE为阴性对照)和免疫组织化学法检测日本血吸虫脱尾童虫、尾蚴与噬菌斑克隆的特异性结合。荧光显微镜观察人工合成的阳性噬菌体短肽与日本血吸虫脱尾童虫体外的特异性结合。构建目的片段pEGFP-C2质粒体外转染日本血吸虫脱尾童虫。结果经3轮逆向差异筛选后.噬菌体回收率从第1轮的3.50×10^(-5)%到第3轮的3.20×10^(-2)%,富集度明显提高。DNA测序结果表明,15个噬菌体克隆分别含有ZL6、ZL4和ZL1等3个不同的短肽序列。ELISA结果显示,M13噬菌体短肽ZL4(MppZL4)、MppZL6和MppZL1分别与脱尾童虫膜蛋白结合后的P/N值为6.72,3.65和2.22,分别与尾蚴膜蛋白结合后的P/N值为1.58,5.15和1.20。洗脱回收率实验结果显示.MppZL4与脱尾童虫洗脱回收率[(4.60±0.27)×10^(-2)%]远高于MppZL6[(2.10±0.23)×10^(-3)%]、MppZL1[(1.20±0.28)×10^(-3)%]和M13KE[(1.30±0.60)×10^(-7)%)(P<0.01)。免疫组化结果显示,日本血吸虫脱尾童虫与MppZL4特异性结合.阳性率为83.0%(83/100)。荧光显微镜检测结果显示,人工合成的RhB-ZL4可与日本血吸虫脱尾童虫体外特异性结合。构建的ZL4/pEGFP-C2质粒体外可成功转染日本血吸虫脱尾童虫。结论筛选获得的短肽ZL4能与日本血吸虫童虫表膜特异性结合.不与尾蚴表膜结合。

关键词：日本血吸虫表膜噬菌体展示技术

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非白色假丝酵母菌代谢产物对人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞增殖的诱导作用

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华西口腔医学杂志 2013年第2期32卷 186-190页

作者：陈斌车团结白德成何祥一兰州大学口腔医学院口腔修复学教研室兰州大学生命科学院细胞与分子生物学实验室兰州大学基础医学院甘肃省新药临床前研究重点实验室兰州730000

目的研究3种常见的非白色假丝酵母菌对人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞增殖及细胞周期的影响。方法制备热带假丝酵母菌、克鲁斯假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌上清液并行倍比稀释,设1、4、16倍3个稀释度以及对照组。体外培养ECV304细胞,分别... 详细信息

目的研究3种常见的非白色假丝酵母菌对人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞增殖及细胞周期的影响。方法制备热带假丝酵母菌、克鲁斯假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌上清液并行倍比稀释,设1、4、16倍3个稀释度以及对照组。体外培养ECV304细胞,分别将3种非白色假丝酵母菌不同稀释度的上清液与ECV304细胞共培养,采用MTT法测定培养24、48、72 h后的细胞增殖率;倒置显微镜观察培养48 h后细胞密度的变化;流式细胞术测定培养48 h后对ECV304细胞周期的影响。结果培养24 h后,3种假丝酵母菌1倍稀释的上清液均可促进细胞增殖,4倍稀释的克鲁斯假丝酵母菌也可促进细胞增殖(P<0.05);培养48、72 h后,克鲁斯假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌上清液仍可促进ECV304细胞增殖,而热带假丝酵母菌上清液无论稀释度高低均不能促进ECV304细胞增殖。培养48 h后,克鲁斯假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌上清液组的细胞密度明显增高,同时其G0/G1期细胞所占比例降低,细胞增殖指数(PI)升高(P<0.05);而热带假丝酵母菌组的细胞密度和PI均无明显变化(P>0.05)。结论克鲁斯假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌的代谢产物对ECV304细胞的增殖有诱导作用,临床上应加强非白色假丝酵母菌感染的检测和治疗。

关键词： ECV304细胞非白色假丝酵母菌增殖代谢产物

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铁对绝经后妇女的影响

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中国老年学杂志 2013年第2期33卷 453-454页

作者：雷宇华赵娟范婧琪段相林常彦忠河北师范大学生命科学院铁代谢分子生物学研究室河北医科大学基础医学院细胞生物学教研室河北石家庄050017

目前认为雌激素缺乏是妇女更年期症状的主要诱因，但是人们还发现妇女绝经后在雌激素水平下降的同时铁的含量却明显上升。铁作为生命活动的微量元素，是一把双刃剑，含量过多也会对身体健康造成危害。各种原因引起的铁过载，往往会影响... 详细信息

目前认为雌激素缺乏是妇女更年期症状的主要诱因，但是人们还发现妇女绝经后在雌激素水平下降的同时铁的含量却明显上升。铁作为生命活动的微量元素，是一把双刃剑，含量过多也会对身体健康造成危害。各种原因引起的铁过载，往往会影响心脏、肝脏、内分泌系统和其他器官的正常功能，绝经引起的铁含量增加也是影响绝经期妇女健康的一个危险因素。本文概括了铁对与绝经期妇女相关的3种疾病骨质疏松、皮肤老化和潮热的影响，为治疗相关疾病提供了新的思路。

关键词：铁绝经期骨质疏松皮肤老化热潮红

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人类多重剪接RNA结合蛋白类基因的克隆和分析

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江苏医药 2013年第6期39卷 624-628页

作者：张雅娟肖娟娟鲁德意王尉平苏州卫生职业技术学院检验药学系江苏省215009 苏州大学医学部基础医学与生物科学学院生物化学与分子生物学教研室

目的通过同源筛选的方法拼接并克隆人类多重剪接RNA结合蛋白2(RBPMS2)基因。方法采用同源筛选策略,以人RBPMS2基因作为信息探针,在GeneBank数据库中进行分析,将获得的高度同源的表达序列标签(EST)用VECTOR NTI软件拼接成重叠群。通过UCS... 详细信息

目的通过同源筛选的方法拼接并克隆人类多重剪接RNA结合蛋白2(RBPMS2)基因。方法采用同源筛选策略,以人RBPMS2基因作为信息探针,在GeneBank数据库中进行分析,将获得的高度同源的表达序列标签(EST)用VECTOR NTI软件拼接成重叠群。通过UCSCGenome Blat Server分析,确定RBPMS2基因的染色体定位,SMART网上分析工具进行结构域预测,Unigene数据库进行表达谱分析。结果电子克隆到人类RBPMS2新基因cDNA序列,含完整的开放阅读框(ORF)。RBPMS2基因编码的多肽由209个氨基酸组成,分子量22.5KDa,等电点8.63。SMART分析显示RBPMS2蛋白包含1个RNA识别模体(RRM)结构域。RBPMS2基因位于第15号染色体,定位在15q22.31,由7个外显子和6个内含子组成。电子表达谱分析显示RBPMS2在卵细胞、受精卵、囊胚、不同发育阶段的胚胎、膀胱、肾脏等组织中高表达。结论分析并克隆到了一个新的人类RBPMS2基因。

关键词：多重剪接RNA结合蛋白克隆

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B7-H4实时荧光定量PCR检测方法的建立及其在人胃癌组织中的初步应用

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中国医药生物技术 2013年第2期8卷 81-87页

作者：王琦蒋敬庭魏文祥苏州大学医学部基础医学与生物科学学院细胞与分子生物学教研室 215123 苏州大学附属第三医院肿瘤生物诊疗中心常州213003

目的建立实时荧光定量PCR检测B7-H4的方法并初步应用于人胃癌组织。方法将B7-H4和内参GAPDH的PCR扩增产物经测序鉴定正确后克隆入载体pMD19－T，构建重组质粒标准品，并纯化、定量及梯度稀释，分别建立B7．H4和GAPDH的标准曲线，应用实... 详细信息

目的建立实时荧光定量PCR检测B7-H4的方法并初步应用于人胃癌组织。方法将B7-H4和内参GAPDH的PCR扩增产物经测序鉴定正确后克隆入载体pMD19－T，构建重组质粒标准品，并纯化、定量及梯度稀释，分别建立B7．H4和GAPDH的标准曲线，应用实时荧光定量PCR检测8例人胃癌组织中的B7一H4相对于GAPDH的表达情况。结果B7．H4的最低检测拷贝数为5．27拷贝，线性范围5．27×10^1～5．27×10^7拷贝，标准曲线方程Y=-3．1395X＋41．805，直线回归相关系数r=0．994904，批间变异系数范围2.39％～3．59％，扩增效率108．2％；GAPDH的最低检测拷贝数为38．6拷贝，线性范围3．86×10^2～3．86×10^7拷贝，标准曲线方程Y=-3．2436x＋41．083，直线回归相关系数r=0．998913，批间变异系数范围2．26％～3．86％，扩增效率103．4％。8例人胃癌组织的B7．H4相对于GAPDHmRNA表达水平在0．044～0．888之间。结论荧光定量PCR检测B7．H4的方法具备较高的敏感性和特异性，且系统有良好的重复性和线性范围。

关键词：胃肿瘤实时荧光定量PCR B7-H4

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重组人CXCL8(3-72)/G31P干预小鼠非酒精性脂肪肝治疗的初探

重组人CXCL8(3-72)/G31P干预小鼠非酒精性脂肪肝治疗的初探

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第四届泛环渤海生物化学与分子生物学会学术交流会

作者：秦元华马巍莎赵莹潘灵敏高颖大连医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室大连医科大学基础医学院辽宁省医学细胞分子生物学重点实验室

目的:非酒精性脂肪肝（NAFLD）是由多种因素导致的一种慢性炎症疾病,NAFLD的各个发展阶段以可溶性细胞因子和趋化因子为基础,调控炎症细胞的功能与存活。白细胞介素-8（IL-8）作为趋化因子ELRCXC家族中的主要成员,与NAFLD的发生发展关... 详细信息

目的:非酒精性脂肪肝（NAFLD）是由多种因素导致的一种慢性炎症疾病,NAFLD的各个发展阶段以可溶性细胞因子和趋化因子为基础,调控炎症细胞的功能与存活。白细胞介素-8（IL-8）作为趋化因子ELRCXC家族中的主要成员,与NAFLD的发生发展关系极为密切。G31P是通过对人IL-8基因定点突变获得的IL-8类似物,其可高亲和力结合CXCR1/2而无生物学活性,使其成为理想的IL-8受体CXCR1

关键词：非酒精性脂肪肝 NAFLD 高脂饮食模型组 CXCL8

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