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苏州大学学报（医学版） 2011年第1期31卷 43-47页

作者：王彬杨占山王天昶李娜胡莉钧杨斌俊苏州大学医学部放射医学与公共卫生学院放射毒理教研室江苏苏州215123

目的研究粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)转基因小鼠经中子照后肺脏和肝脏中血管内皮细胞生长因子(VEGF)蛋白的表达变化。方法 BALB/C小鼠进行全身中子照射,吸收剂量为0.6Gy,分为未转基因组和转基因组,转基因组于照射前24 h进行hGM... 详细信息

目的研究粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)转基因小鼠经中子照后肺脏和肝脏中血管内皮细胞生长因子(VEGF)蛋白的表达变化。方法 BALB/C小鼠进行全身中子照射,吸收剂量为0.6Gy,分为未转基因组和转基因组,转基因组于照射前24 h进行hGM-CSF活体基因电转染。两组小鼠照射后1、14和28 d分批活杀,应用HE染色观察组织病理形态学变化,免疫组化法检测VEGF的蛋白表达及用Western blot研究VEGF在肺脏和肝脏中的表达变化。结果转基因组小鼠在照后14～28 d,肺脏及肝脏病理损伤较轻,VEGF蛋白表达水平较未转基因组增高。结论 GM-CSF基因活体转染对小鼠中子急性损伤极期和恢复期血管生成和恢复具有促进作用。

关键词：中子损伤粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因转染血管内皮细胞生长因子肺脏肝脏

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重组人甲状旁腺素对慢性苯中毒小鼠造血损伤的改善作用

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环境与职业医学 2011年第2期28卷 80-83页

作者：丁晓飞冯晓青胡志勇刘华清靳宗达杜厚兵李冰燕张增利苏州大学放射医学与公共卫生学院卫生毒理学教研室江苏苏州215123

[目的]研究重组人甲状旁腺素(rhPTH)对慢性苯中毒小鼠造血损伤的改善作用。[方法]皮下注射苯诱导小鼠造血系统损伤模型。将造模成功的30只慢性苯中毒小鼠随机分为3组:生理盐水治疗组、40μg/kg rhPTH治疗组、80μg/kg rhPTH治疗组。每周... 详细信息

[目的]研究重组人甲状旁腺素(rhPTH)对慢性苯中毒小鼠造血损伤的改善作用。[方法]皮下注射苯诱导小鼠造血系统损伤模型。将造模成功的30只慢性苯中毒小鼠随机分为3组:生理盐水治疗组、40μg/kg rhPTH治疗组、80μg/kg rhPTH治疗组。每周5次腹腔注射生理盐水或不同剂量rhPTH,治疗3周,间隔1周后取样,测定3组小鼠骨髓中的造血干细胞(外源性脾结节法)、造血祖细胞(集落培养)以及外周血细胞计数和脾脏系数。[结果]经rhPTH治疗的小鼠一般状况明显好于生理盐水治疗组;40μg/kg rhPTH治疗组与80μg/kg rhPTH治疗组的造血干细胞数明显高于生理盐水治疗组(P<0.05),但两个剂量rhPTH治疗组间造血干细胞数差异无统计学意义;3组小鼠的造血祖细胞及外周血细胞计数均差异无统计学意义;两个rhPTH治疗组的脾脏系数均低于生理盐水治疗组(P<0.05)。[结论]rhPTH可明显增加慢性苯中毒小鼠骨髓中造血干细胞数量。

关键词：甲状旁腺素造血造血干细胞苯

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LyGD1基因转染对肺腺癌A549细胞生长及放化疗敏感性的影响

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苏州大学学报（医学版） 2011年第6期31卷 870-873,878页

作者：曹丽丽段广新董玉金王兴丹周新文苏州大学医学部放射医学与防护学院放射毒理学教研室江苏省放射医学与防护重点实验室江苏苏州215123

目的研究转染LyGDI基因对肺腺癌A549细胞生长及放、化疗敏感性的影响。方法用脂质体介导的方法,将构建于pEGFP载体上的LyGDI及空载体pEGFP-C1转入A549细胞,用G418筛选出稳定表达株,RT-PCR法了解LyGDI基因在转染细胞中的表达情况;用平板... 详细信息

目的研究转染LyGDI基因对肺腺癌A549细胞生长及放、化疗敏感性的影响。方法用脂质体介导的方法,将构建于pEGFP载体上的LyGDI及空载体pEGFP-C1转入A549细胞,用G418筛选出稳定表达株,RT-PCR法了解LyGDI基因在转染细胞中的表达情况;用平板克隆形成实验研究细胞生长情况;体外划痕试验观察对细胞侵袭及转移能力的影响;甲基偶氮唑蓝法、克隆形成实验分别研究细胞对放、化疗的敏感性。结果转染细胞中有相应融合基因表达;与转染前比较,基因转染后,阳性细胞尤其是表达LyGDI的A549细胞克隆形成能力显著降低(P<0.01),对常用化疗药物顺铂和放射线敏感度显著提高(P<0.05或<0.01)。结论建立了稳定转染细胞株;LyGDI转入抑制了A549细胞的生长能力,且增加了细胞对放、化疗的敏感性。

关键词： LyGDI A549细胞稳定转染细胞生长化疗敏感性放疗敏感性

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1,25(OH)_2D_3和卡铂联合应用对人卵巢癌细胞SKOV-3增殖的影响

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毒理学杂志 2011年第5期25卷 340-344,345页

作者：胡志勇张增利冯晓青丁晓飞童建李冰燕苏州大学医学部公共卫生学院卫生毒理教研室江苏省放射医学与防护重点实验室江苏苏州215123

目的本研究观察活性维生素D(1,25-dihydroxyvitamin D3,1,25(OH)2D3)和卡铂(carboplatin,CBP)两种药物不同的联合作用方案对SKOV-3细胞增殖的影响,以评价1,25(OH)2D3是否可以增强CBP的抗肿瘤效应。方法本研究分1,25(OH)2D3组,CBP组以及联合作用组。用CCK-8法测定细胞抑制率,使用流式细胞仪进行细胞周期、凋亡、细胞活性氧(Reactive Oxidative Species,ROS)及线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)等分析。结果1,25(OH)2 D3和CBP单独使用可抑制SKOV-3细胞的增殖,而且联用不同浓度的1,25(OH)2 D3后可以明显降低CBP的半数抑制浓度。实验发现不同的联合用药方案对肿瘤细胞的抑制作用也不同,两种药物同时应用时联合作用系数在0.57～0.78之间,其中10 nmol/L 1,25(OH)2 D3与CBP联用达到高度协同作用。先加1,25(OH)2 D3后加CBP组对SKOV-3细胞的抑制作用明显优于先加CBP后加1,25(OH)2 D3组。细胞周期分析显示,1,25(OH)2 D3使SKOV-3细胞阻滞于G0/G1期,CBP使细胞阻滞于G2/M期,先用1,25(OH)2D3再用CBP使细胞周期发生了双重阻滞作用。1,25(OH)2D3与CBP联用显著提高SKOV-3凋亡率。与正常对照相比较,各处理组均可使细胞ROS的释放增加,MMP下降(P<0.05),其中两种药物同时联合作用方案细胞ROS的产生最多,MMP下降最为显著,其次为先用1,25(OH)2D3后用CBP组。结论 1,25(OH)2D3可以抑制SKOV-3细胞的增殖,并且与CBP同时应用或先于CBP应用时均能显著增强其对卵巢癌细胞的杀伤能力。1,25(OH)2D3与CBP的协同作用与细胞周期的双重阻滞有关,并通过提高ROS和降低MMP抑制卵巢癌细胞的增殖。

关键词： 1,25-二羟维生素D3 卡铂卵巢癌 SKOV-3细胞

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二甲基苯蒽卵巢被膜下注射诱发小鼠卵巢肿瘤模型

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环境与职业医学 2011年第8期28卷 496-498页

作者：胡志勇李冰燕冯晓青童建张增利苏州大学医学部放射医学与公共卫生学院卫生毒理教研室江苏省放射医学与防护重点实验室江苏苏州215123

[目的]以二甲基苯蒽(7,12-dimethylbenz[a]anthracene,DMBA)卵巢被膜下注射诱发小鼠卵巢肿瘤,并初步观察其生物学特性,为探讨卵巢癌的发病机制及评价治疗措施提供理想的动物模型。[方法]取雌性C57BL/6小鼠10只,在麻醉状态下,用眼科微量... 详细信息

[目的]以二甲基苯蒽(7,12-dimethylbenz[a]anthracene,DMBA)卵巢被膜下注射诱发小鼠卵巢肿瘤,并初步观察其生物学特性,为探讨卵巢癌的发病机制及评价治疗措施提供理想的动物模型。[方法]取雌性C57BL/6小鼠10只,在麻醉状态下,用眼科微量注射器分别在小鼠双侧卵巢被膜内注入含有4g/L的DMBA注射液0.05mL,连续观察4个月,进行肿瘤生物学特性的一般状况观察、光镜观察、病理切片检查。[结果]在注射DMBA后4个月发现,1只小鼠因术后感染而死亡,2只无肿瘤发生,其余小鼠出现腹部隆起,发现有不同程度的未分化癌或腺癌,组织学特点与相应的人类卵巢肿瘤很相似。[结论]DMBA能原位诱发小鼠的卵巢肿瘤,肿瘤发生率达70%(7/10),可用于人卵巢癌的相关实验研究。

关键词：二甲基苯蒽卵巢肿瘤动物模型 C57BL/6小鼠

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纳米化紫杉醇与电离辐射对KB细胞联合作用的研究

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苏州大学学报（医学版） 2011年第1期31卷 16-20页

作者：刘敏李智慧许玉杰苏州大学医学部放射医学与公共卫生学院基础核医学教研室江苏省放射医学与防护重点实验室江苏苏州215123

目的研究纳米化紫杉醇(TAX-NLC)与电离辐射对KB细胞杀伤的联合作用。方法利用MTT法观察TAX-NLC、电离辐射及其二者联合对KB细胞的杀伤效应。通过流式细胞仪观察TAX-NLC及电离辐射对细胞周期的影响。结果 TAX-NLC较紫杉醇(TAX)对KB细胞... 详细信息

目的研究纳米化紫杉醇(TAX-NLC)与电离辐射对KB细胞杀伤的联合作用。方法利用MTT法观察TAX-NLC、电离辐射及其二者联合对KB细胞的杀伤效应。通过流式细胞仪观察TAX-NLC及电离辐射对细胞周期的影响。结果 TAX-NLC较紫杉醇(TAX)对KB细胞具有更强杀伤作用,TAX-NLC或TAX与电离辐射联合作用时,随着剂量的加大,对KB细胞的杀伤作用增强。与同等剂量的电离辐射联合作用时,同浓度的TAX-NLC也比TAX的作用强。同样,TAX-NLC可以影响细胞周期再分布,使G_2/M期细胞比例增加,与电离辐射联合作用时,其对细胞周期的影响要强于TAX。结论 TAX-NLC对KB细胞的杀伤作用高于TAX。TAX-NLC与电离辐射的联合效应比与TAX的联合效应要高。TAX-NLC作用机制可能是其更易通过细胞膜并在细胞中浓聚有关。

关键词：纳米化紫杉醇 KB细胞细胞周期电离辐射

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香烟烟雾诱发BEAS-2B细胞体外恶性转化的研究

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毒理学杂志 2011年第1期25卷 17-21页

作者：杜厚兵童建聂继华张素萍吴昭昭刘海云李建祥苏州大学医学部放射医学与公共卫生学院卫生毒理学教研室江苏省放射医学与防护重点实验室江苏苏州215123

目的通过香烟烟雾体外染毒诱发细胞恶性转化,建立吸烟致肺癌的细胞模型。方法确定合适染烟浓度及时间后,将永生化人支气管上皮细胞系BEAS-2B细胞分为对照组(C)和20%烟雾浓度组(S)。以每孔1×105细胞接种于Transwell培养皿,贴壁后置... 详细信息

目的通过香烟烟雾体外染毒诱发细胞恶性转化,建立吸烟致肺癌的细胞模型。方法确定合适染烟浓度及时间后,将永生化人支气管上皮细胞系BEAS-2B细胞分为对照组(C)和20%烟雾浓度组(S)。以每孔1×105细胞接种于Transwell培养皿,贴壁后置于气体染毒装置中,香烟烟雾持续泵入直接对细胞染毒。检测染毒后5、10、15、20代细胞恶性转化情况,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡变化。结果 BEAS-2B细胞在20%烟雾浓度下染毒5代后,出现生长动力学和形态学改变,生长失去接触抑制,获得对血清诱导分化的抗性和锚着独立性生长能力。G1期细胞百分比明显降低,S期细胞百分比明显升高,G2期细胞百分比先升高后降低,各代细胞凋亡率均明显降低。结论香烟烟雾染毒能够诱发BEAS-2B细胞体外转化,且随染毒代数的增加呈现剂量效应关系,可作为体外研究吸烟致肺癌的细胞模型。

关键词：香烟烟雾体外染毒 BEAS-2B细胞恶性转化

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抗辐射球菌pprI基因活体电转染对受照小鼠睾丸病理学作用的研究

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辐射研究与辐射工艺学报 2011年第1期29卷 17-22页

作者：连利霞陈婷婷张永芹王秀珍杨占山苏州大学医学部放射医学与公共卫生学院放射毒理教研室苏州215123

观察抗辐射球菌pprI基因活体电转染小鼠受γ射线辐照后睾丸组织的形态学变化,探讨一种新的原核基因表达对哺乳动物生殖系统损伤的防治作用。将含有pprI基因的pCMV-HA-pprI质粒注入小鼠肌肉内,然后采用活体基因电转染技术将该基因导入细... 详细信息

观察抗辐射球菌pprI基因活体电转染小鼠受γ射线辐照后睾丸组织的形态学变化,探讨一种新的原核基因表达对哺乳动物生殖系统损伤的防治作用。将含有pprI基因的pCMV-HA-pprI质粒注入小鼠肌肉内,然后采用活体基因电转染技术将该基因导入细胞内,对照组小鼠和转基因组小鼠均采用60Coγ射线全身照射,吸收剂量为6 Gy,分别于辐照后第1、7、14、28和35天取下注射部位肌肉组织,提取组织总蛋白,进行PprI蛋白的Western blotting检测。同时取小鼠睾丸组织,石蜡包埋制片,苏木精-伊红染色,进行镜下病理学观察。PprI蛋白在辐照后第1天有较强的表达,说明pprI质粒成功转染至小鼠体内。对照组小鼠在照后第1天生精小管结构完整,各级生精细胞未见明显病理变化;第7天在部分生精小管观察到少量精原细胞坏死;第14天生精细胞变性坏死明显加重,生精小管萎缩变细,相互"远离";至第28天各级生精细胞及精子极度减少,生精小管内细胞分层结构基本消失,甚至空虚,仅残留支持细胞,间质疏松;第35天空虚的生精小管内开始出现新生精原细胞。而转基因组小鼠辐照后第1天生精细胞未见明显病理变化;第7天部分生精小管见少量精原细胞坏死,较单纯照射组轻;第14天生精细胞变性坏死加重,各级生精细胞数量减少;第28天局部生精小管内出现新生精原细胞,基底层结构基本显现;第35天转基因组局部生精小管内新生生精细胞增多,出现分层现象。研究结果表明,pprI基因活体电转染对小鼠睾丸γ辐射损伤具有显著的防治作用,睾丸辐射损伤修复明显提前。

关键词：抗辐射球菌 pprI 活体电穿孔睾丸组织病理学

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肿瘤细胞^3H-葡萄糖代谢测量方法的建立

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苏州大学学报（医学版） 2011年第1期31卷 48-50,54页

作者：张昊文刘建军冯爽徐媛媛蒋昕刘芬菊苏州大学医学部放射医学与公共卫生学院放射生物教研室江苏苏州215123 上海交通大学医学院附属仁济医院核医学科上海200001

目的检测肿瘤细胞在单位时间内的葡萄糖利用率。方法将数量为2.5×10^5的HCT116结肠癌细胞培养至贴壁,在培养基中加入^3H定位标记（5位碳原子）的葡萄糖,30 min后终止反应,采用阴离子交换树脂滤去大分子代谢产物,通过液体闪烁计数... 详细信息

目的检测肿瘤细胞在单位时间内的葡萄糖利用率。方法将数量为2.5×10^5的HCT116结肠癌细胞培养至贴壁,在培养基中加入^3H定位标记（5位碳原子）的葡萄糖,30 min后终止反应,采用阴离子交换树脂滤去大分子代谢产物,通过液体闪烁计数法测量流出液中氚水的每分放射性计数,计算得到单位数目的 HCT116细胞在30min内的葡萄糖代谢率。结果当层析柱内的层析液体积大于5.0 ml时,层析柱对^3H-葡萄糖标准液内葡萄糖的吸附率几乎达到100%（99%）;30 min内3.7×10^5的HCT116细胞的葡萄糖代谢率约为1.23%。结论该方法通过在细胞培养液中加入同位素^3H定位标记的葡萄糖,可以准确定量测定肿瘤细胞的葡萄糖代谢率,从而为研究不同种类肿瘤细胞糖代谢及能量供给提供可靠的实验方法。

关键词：肿瘤细胞葡萄糖代谢率测定 ^3H定位标记葡萄糖

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1,25-(OH)_2D_3对1型糖尿病小鼠主要脏器的保护作用

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苏州大学学报（医学版） 2011年第5期31卷 713-717页

作者：周正宇吴淑燕李新寅薛智谋童建苏州大学医学部实验动物中心江苏苏州215123 苏州大学医学部基础医学与生物科学学院病原生物学系江苏苏州215123 苏州大学医学部公共卫生学院卫生毒理学教研室江苏苏州215123

目的研究1,25-(OH)2D3对1型糖尿病(T1DM)小鼠的作用及可能机制。方法 40 mg/kg STZ腹腔注射C57BL/6小鼠连续5 d建立T1DM模型,5μg/kg 1,25-(OH)2D3隔日腹腔注射,监测血糖、体质量、饮水及饲料消耗,分析各脏器的病理及超微结构。结果 1,2... 详细信息

目的研究1,25-(OH)2D3对1型糖尿病(T1DM)小鼠的作用及可能机制。方法 40 mg/kg STZ腹腔注射C57BL/6小鼠连续5 d建立T1DM模型,5μg/kg 1,25-(OH)2D3隔日腹腔注射,监测血糖、体质量、饮水及饲料消耗,分析各脏器的病理及超微结构。结果 1,25-(OH)2D3治疗14 d后,T1DM小鼠的血糖、饮食、饮水量显著下降(均P<0.05);1,25-(OH)2D3可减轻胰岛炎症状及各脏器的超微结构病变,诱导淋巴细胞的凋亡,并在胰腺中可见典型自噬现象。结论 1,25-(OH)2D3可诱导胰腺细胞的自噬,同时诱导淋巴细胞凋亡,从而减轻T1DM症状。

关键词：糖尿病 1,25-(OH)2D3 自噬

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