检索结果-内蒙古大学图书馆

免疫学杂志 2015年第8期31卷 645-650页

作者：刘永浩宋媛雷蕾林丹丹胡博刘海燕苏州大学生物医学研究院细胞与分子肿瘤免疫实验室 215123

目的研究IL-23在体内外对肝细胞肝癌发展的影响。方法采用慢病毒体系将构建好的IL-23质粒转入Hepa1-6肝癌细胞株中,流式分选得到过表达IL-23的Hepa1-6稳转细胞,ELISA确定所得到的稳转细胞能够表达高水平的IL-23。采用MTT方法检测IL-23对... 详细信息

目的研究IL-23在体内外对肝细胞肝癌发展的影响。方法采用慢病毒体系将构建好的IL-23质粒转入Hepa1-6肝癌细胞株中,流式分选得到过表达IL-23的Hepa1-6稳转细胞,ELISA确定所得到的稳转细胞能够表达高水平的IL-23。采用MTT方法检测IL-23对Hepa1-6细胞增殖的影响,流式细胞染色法检测IL-23对Hepa1-6细胞周期的影响,通过原位种植Hepa1-6细胞建立肝癌模型,检测IL-23体内在肝细胞肝癌发展中的作用。结果 IL-23能够明显促进肝癌细胞的增殖,然而对肝癌细胞的凋亡却没有影响,IL-23在体外促进肝癌细胞的迁移水平,并且在小鼠肝癌模型中,IL-23在体内能够促进肝癌的发展。结论IL-23在体内体外能够直接促进肝细胞肝癌的发展。

关键词： IL-23 肝细胞肝癌增殖细胞周期

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携带TGF-βⅡ型受体及NKG2D融合基因的NK-92细胞生物学特性研究

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免疫学杂志 2013年第3期29卷 206-210页

作者：王仲娟林丹丹张胤晟赵李祥刘海燕苏州大学生物医学研究院肿瘤与细胞分子免疫实验室 215123

目的构建携带TGF-βreceptorⅡ(TGF-βRⅡ)胞外段跨膜区及NKG2D胞内段融合基因的NK-92细胞,并检测其生物学特性。方法通过RT-PCR从人外周血淋巴细胞中扩增出TGF-βreceptorⅡ胞外段跨膜区及NKG2D胞内段基因;利用PCR的方法将2段基因融合... 详细信息

目的构建携带TGF-βreceptorⅡ(TGF-βRⅡ)胞外段跨膜区及NKG2D胞内段融合基因的NK-92细胞,并检测其生物学特性。方法通过RT-PCR从人外周血淋巴细胞中扩增出TGF-βreceptorⅡ胞外段跨膜区及NKG2D胞内段基因;利用PCR的方法将2段基因融合,并构建含有融合基因的慢病毒穿梭质粒;将该质粒与包装质粒共转染293T细胞,获得慢病毒颗粒并感染NK-92细胞系,筛选出稳定转染的NK-92细胞系;采用流式细胞术检测目的基因在转染后的NK-92细胞系中的表达,用CCK-8的方法检测24 h和48 h时NK-92-TN的存活能力,同时用Transwell的方法检测NK-92-TN的迁移能力。结果测序表明,成功获得了TGF-βRⅡ胞外段跨膜区与NKG2D胞内段的融合基因;获得了重组慢病毒;通过筛选得到了可稳定表达融合基因的NK-92细胞系,同时NK-92-TN的存活能力和迁移能力要明显优于对照组。结论成功建立表达TN的NK-92细胞系,并且发现NK-92-TN的存活能力和迁移能力明显优于对照组,从而为NK-92-TN细胞的体内生物学功能的研究工作奠定了基础。

关键词： TGF-βⅡ型受体 NKG2D NK-92 存活迁移

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快速高效构建小鼠体内成像肿瘤模型的方法学平台

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免疫学杂志 2013年第4期29卷 346-350页

作者：张胤晟林丹丹雷蕾胡博王仲娟刘海燕苏州大学生物医学研究院肿瘤细胞与分子免疫学实验室 215123 苏州大学第一附属医院江苏省血液研究中心 215006

目的建立小鼠肿瘤模型,并用体内成像的方法进行检测,降低传统方法中的系统误差与人为测量错误,提高模型的准确性与客观性。方法构建萤火虫素酶的慢病毒表达载体,体外包装能表达萤火虫素酶的慢病毒颗粒。用病毒颗粒转染目标细胞,筛选出... 详细信息

目的建立小鼠肿瘤模型,并用体内成像的方法进行检测,降低传统方法中的系统误差与人为测量错误,提高模型的准确性与客观性。方法构建萤火虫素酶的慢病毒表达载体,体外包装能表达萤火虫素酶的慢病毒颗粒。用病毒颗粒转染目标细胞,筛选出稳定表达萤火虫素酶的目标细胞系。体外运用双荧光素酶分析系统进行质控检测,通过后建立小鼠肿瘤模型,最后使用活体成像的方法对小鼠肿瘤模型中肿瘤的大小进行定量分析,以评估小鼠肿瘤模型的恶化程度。结果成功构建含有萤火虫素酶基因的慢病毒质粒;包装能正确表达具有功能活性萤火虫素酶的慢病毒颗粒;使用病毒颗粒感染目标细胞并筛选出能表达萤火虫素酶的稳转细胞系;建立小鼠皮下肿瘤模型,并利用活体成像的方法对肿瘤大小进行定量分析。结论通过该种方法可以建立表达萤火虫素酶的稳转细胞系,利用体内成像的检测方法可以准确的对肿瘤模型的发生发展进行评估。

关键词：小鼠肿瘤模型慢病毒活体成像萤火虫素酶

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中药干预雄激素受体治疗前列腺癌的研究进展

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中华中医药学刊 2019年第6期37卷 1331-1334页

作者：李天雨陈子珺李云森上海中医药大学上海201203 苏州大学生物医学研究院肿瘤细胞与分子免疫实验室江苏苏州215123

前列腺癌(Prostate cancer,PCa)是男性常见的雄激素驱动的与内分泌有关的恶性肿瘤。随着社会的发展,饮食结构和生活习惯的改变以及老龄化的到来,前列腺癌在我国的发病率逐年增高。雄激素受体(androgen receptor, AR)是前列腺生长发育以... 详细信息

前列腺癌(Prostate cancer,PCa)是男性常见的雄激素驱动的与内分泌有关的恶性肿瘤。随着社会的发展,饮食结构和生活习惯的改变以及老龄化的到来,前列腺癌在我国的发病率逐年增高。雄激素受体(androgen receptor, AR)是前列腺生长发育以及维持自身内稳态的关键信号分子,也是前列腺癌治疗中最为重要的药物靶点。临床药物机制多为抑制雄激素受体的活性和雄激素的合成,治疗后可以有效减缓病程发展,但大多数PCa患者后期会发展为去势抵抗性前列腺癌,并且产生耐药性,对临床治疗构成挑战。中医药在提高患者生存质量、减轻临床症状、延长生存期等方面显示出一定的优势,为PCa的治疗提供新的方向。概述了中药干预雄激素受体治疗前列腺癌的研究进展。

关键词：前列腺癌去势抵抗性前列腺癌雄激素受体中药

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三氧化二砷抑制小鼠乳腺癌细胞MA-891生长作用及其对端粒酶活性的影响

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中国中药杂志 2012年第5期37卷 637-642页

作者：石莹胡博郭俣王慧夏俊蚌埠医学院生化与分子生物学教研室安徽蚌埠233030 苏州大学生物医学研究院肿瘤细胞与分子免疫实验室江苏苏州215123 蚌埠医学院临床检验诊断学实验中心安徽蚌埠233030

目的:探讨As2O3在诱导小鼠乳腺癌细胞MA-891凋亡过程中的作用,以及对端粒酶及其亚单位mTERT mRNA活性表达的影响,为进一步进行小鼠体内实验提供理论和实验依据。方法:以小鼠乳腺癌细胞株MA-891为研究对象,将不同浓度的As2O3与MA-891细... 详细信息

目的:探讨As2O3在诱导小鼠乳腺癌细胞MA-891凋亡过程中的作用,以及对端粒酶及其亚单位mTERT mRNA活性表达的影响,为进一步进行小鼠体内实验提供理论和实验依据。方法:以小鼠乳腺癌细胞株MA-891为研究对象,将不同浓度的As2O3与MA-891细胞共培养不同时间后,MTT法检测As2O3对MA-891细胞的生长抑制作用;流式细胞术检测As2O3对MA-891细胞凋亡的影响;TRAP-PAGE-银染法检测As2O3作用后MA-891细胞中端粒酶活性的改变;RT-PCR检测As2O3对MA-891细胞鼠端粒酶逆转录酶(mTERT)的影响。结果:As2O3能显著抑制MA-891细胞生长,24,48 h的半数生长抑制浓度(IC50)分别为9.68,5.50μmol.L-1。5,10,20μmol.L-1的As2O3诱导MA-891细胞24 h后,细胞凋亡率依次为30.21%,48.26%,57.43%。5,10,20μmol.L-1的As2O3作用MA-891细胞24,48 h后,端粒酶活性显著下降,抑制程度呈明显的时间和浓度依赖性;银染条带也显示出相同结果。RT-PCR产物显示mTERT mRNA表达显著下降并呈时间和浓度依赖关系。结论:As2O3能显著抑制MA-891细胞生长、诱导细胞凋亡,可能是通过抑制细胞端粒酶及其亚单位端粒酶逆转录酶的活性而发挥作用。

关键词： As2O3 小鼠乳腺癌细胞MA-891 凋亡端粒酶端粒酶逆转录酶

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S1P受体激动剂FTY720抑制小鼠体内成熟DC的分布并减轻急性GVHD

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中华微生物学和免疫学杂志 2014年第7期34卷 498-502页

作者：程巧马守宝梅雨龚欢乐雷蕾刘海燕苏州大学生物医学研究院细胞与分子肿瘤免疫实验室江苏省感染免疫重点实验室215123 苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所唐氏血液中心215006

目的探讨S1P受体激动剂FTY720在异基因造血干细胞移植后急性移植物抗宿主病（acute graft-versus-host disease，aGVHD）进程中的作用及其可能的机制。方法 BALB/c （H2d）受体鼠接受750 cGy全身性致死性辐照，4 h后通过尾静脉注射的方... 详细信息

目的探讨S1P受体激动剂FTY720在异基因造血干细胞移植后急性移植物抗宿主病（acute graft-versus-host disease，aGVHD）进程中的作用及其可能的机制。方法 BALB/c （H2d）受体鼠接受750 cGy全身性致死性辐照，4 h后通过尾静脉注射的方法输注1×10^7个C57BL/6（H2b）小鼠来源的骨髓细胞和5＆#215;106个全脾细胞，建立aGVHD模型。从移植前第1天（ day 1）至移植后第4天（day 4）每天给小鼠腹腔注射FTY720（3 mg/kg）或等体积对照组溶剂，观察小鼠生存。移植后第4天采用流式细胞术检测两组小鼠的脾脏、肝脏、肺和小肠4个脏器中的免疫细胞的表型。结果FTY720能显著延长异基因造血干细胞移植后aGVHD的相关存活；流式细胞术结果发现FTY720能显著抑制肺和小肠中成熟DC的分布。结论 FTY720能显著抑制肺和小肠中成熟DC分布，从而减轻aGVHD。

关键词： S1P S1P受体激动剂内皮细胞趋化因子 GVHD

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羽扇豆醇对白血病细胞株增殖和凋亡作用的影响

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苏州大学学报（医学版） 2011年第3期31卷 425-427,440页

作者：单琳林丹丹张胤晟薛智谋刘海燕苏州大学医学部基础医学与生物科学学院细胞生物学系江苏苏州215123 苏州大学生物医学研究院肿瘤细胞与分子免疫学实验室江苏苏州213123

目的研究羽扇豆醇对人髓系K562、NB4、SHI-01及淋系Jurkat白血病细胞的增殖和凋亡作用。方法以不加药物处理为对照组,设置5个羽扇豆醇浓度梯度分别处理人髓系、淋系白血病细胞,采用MTT法检测细胞活力及增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡... 详细信息

目的研究羽扇豆醇对人髓系K562、NB4、SHI-01及淋系Jurkat白血病细胞的增殖和凋亡作用。方法以不加药物处理为对照组,设置5个羽扇豆醇浓度梯度分别处理人髓系、淋系白血病细胞,采用MTT法检测细胞活力及增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果随着羽扇豆醇浓度的升高,细胞增殖明显受到抑制。当浓度达到150μmol/L时,4种细胞都呈现出明显的增殖抑制作用(均P<0.05);与对照组相比,羽扇豆醇组细胞凋亡率明显增加(P<0.05)。结论羽扇豆醇可显著抑制人髓系K562、NB4、SHI-01及淋系Jurkat白血病细胞增殖并诱导其凋亡。

关键词：羽扇豆醇髓系白血病细胞淋系白血病细胞增殖凋亡

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益生菌在小鼠急性肝损伤模型中的作用

益生菌在小鼠急性肝损伤模型中的作用

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第九届全国免疫学学术大会

作者：雷蕾刘海燕苏州大学生物医学研究院肿瘤细胞与分子免疫实验室

背景:微生物大量存在于人体,特别是在胃肠道中。有研究表明,肠道微生物群对宿主体内的稳态的维护起重要作用。改变肠道微生物群,对于一些胃肠道疾病和肝脏疾病会产生一定的影响。肝脏和肠道之间的共生关系使这两个器官的健康状态息息相... 详细信息

背景:微生物大量存在于人体,特别是在胃肠道中。有研究表明,肠道微生物群对宿主体内的稳态的维护起重要作用。改变肠道微生物群,对于一些胃肠道疾病和肝脏疾病会产生一定的影响。肝脏和肠道之间的共生关系使这两个器官的健康状态息息相关。改变肠道微生物群的类型和数量可能会导致严重的肝脏机能障碍如肝硬化、非酒精性脂肪肝、酒精性肝病、和肝性脑病等。肠杆菌科、肠球菌、链球菌等病原体会导致肠道通透性增加和细菌易位。使用抗生素、益生菌等可以用来抑制病原体的生长。与抗生素治疗相比,益生菌更安全。我们实验室前期分离了一株嗜酸乳杆菌,命名为Prol5。目的:研究Pro15菌株在小鼠急性肝损伤模型中的作用,并且探究其作用机制。方法:将小鼠分为实验组与对照组,在第1,3,5,7天分别给实验组和对照组小鼠以灌胃的方法给Pro15菌株或PBS,在第8天采用四氯化碳油溶液腹腔注射构建小鼠急性肝损伤模型。灌胃体积均100ul,益生菌浓度为10As/100ul。我们按5ml/kg给小鼠腹腔注射四氯化碳油溶液,观察小鼠的存活情况。同时,我们按2ml/kg给小鼠腹腔注射四氯化碳油溶液,24小时后颈椎脱臼处死小鼠,检测小鼠血清中谷丙转氨酶和谷草转氨酶含量,并分析小鼠的免疫细胞表型。结果:与对照组相比,Pro15菌株可以延长急性肝损伤小鼠的存活时间,抑制小鼠体内NK细胞和CD8T细胞的活化,降低Th1细胞的比例,减少CD8T细胞分泌干扰素v。结论:Pro15菌株可以减轻四氯化碳诱导的急性肝损伤,其机制可能是通过抑制NK细胞和CD8T细胞的活化,对肝脏炎症起保护作用。

关键词：益生菌嗜酸乳杆菌急性肝损伤

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益生菌在小鼠急性肝损伤模型中的作用

益生菌在小鼠急性肝损伤模型中的作用

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中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会

作者：雷蕾刘海燕苏州大学生物医学研究院肿瘤细胞与分子免疫实验室

背景:微生物大量存在于人体,特别是在胃肠道中.有研究表明,肠道微生物群对宿主体内的稳态的维护起重要作用.改变肠道微生物群,对于一些胃肠道疾病和肝脏疾病会产生一定的影响.肝脏和肠道之间的共生关系使这两个器官的健康状态息息相关.... 详细信息

背景:微生物大量存在于人体,特别是在胃肠道中.有研究表明,肠道微生物群对宿主体内的稳态的维护起重要作用.改变肠道微生物群,对于一些胃肠道疾病和肝脏疾病会产生一定的影响.肝脏和肠道之间的共生关系使这两个器官的健康状态息息相关.改变肠道微生物群的类型和数量可能会导致严重的肝脏机能障碍如肝硬化、非酒精性脂肪肝、酒精性肝病、和肝性脑病等.肠杆菌科、肠球菌、链球菌等病原体会导致肠道通透性增加和细菌易位.使用抗生素、益生菌等可以用来抑制病原体的生长.与抗生素治疗相比,益生菌更安全.我们实验室前期分离了一株嗜酸乳杆菌,命名为Pro15.

关键词：益生菌嗜酸乳杆菌急性肝损伤

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重组人IL-1β分子的克隆、表达及其单克隆抗体的制备

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苏州大学学报（医学版） 2011年第4期31卷 609-612页

作者：刘佳佳马守宝梁勇王明华刘海燕苏州大学医学部基础医学与生物科学学院生物化学与分子生物学系江苏苏州215123 苏州大学生物医学研究院细胞分子与肿瘤免疫学实验室江苏苏州215123

目的克隆人IL-1β基因,纯化其原核表达的产物,并制备其单克隆抗体(mAb)。方法重组原核表达质粒pET-32a(+)-IL-1β在宿主菌BL21(DE3)表达后,用割胶回收、电洗脱的方法纯化原核表达的蛋白,并用其免疫BALB/c小鼠,采用常规杂交瘤技术制备相... 详细信息

目的克隆人IL-1β基因,纯化其原核表达的产物,并制备其单克隆抗体(mAb)。方法重组原核表达质粒pET-32a(+)-IL-1β在宿主菌BL21(DE3)表达后,用割胶回收、电洗脱的方法纯化原核表达的蛋白,并用其免疫BALB/c小鼠,采用常规杂交瘤技术制备相应的mAb。用ELISA法检测mAb的效价,并进行Ig亚类、特异度的检测。结果本研究利用HL-60细胞系cDNA为模板经PCR克隆了人IL-1β基因,纯化的重组人IL-1β蛋白纯度和含量分别为95%和0.75μg/μl。共筛选出能稳定分泌抗人IL-1β的杂交瘤细胞2株,分别为5G5和8H8。抗体亚型均为IgG2a,轻链均为κ链。结论克隆了人IL-1β基因,并成功纯化了其原核表达的蛋白,以纯化的蛋白为免疫原制备的鼠抗人IL-1β的单克隆抗体(mAb),为实验室及临床研究奠定了一定的基础。

关键词： IL-1β 蛋白纯化单克隆抗体

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