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第六届长三角科技论坛生物产业发展分论坛

作者：黄兴锐朱云霞赵爱琴刘海昌贾俊霞夏春林苏州大学医学部博习临床解剖学研究所暨细胞神经生物学研究室苏州 215123

目的：观察碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblastgrowth factor,bFGF)对小鼠脑损伤后伤侧皮质及海马神经元凋亡及星形胶质细胞活化的影响。方法：36只小鼠随机分为3组：对照组、生理盐水组、bFGF组,每组各12只。采用自由落体打击装... 详细信息

目的：观察碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblastgrowth factor,bFGF)对小鼠脑损伤后伤侧皮质及海马神经元凋亡及星形胶质细胞活化的影响。方法：36只小鼠随机分为3组：对照组、生理盐水组、bFGF组,每组各12只。采用自由落体打击装置建立脑损伤模型,3、7天后各组取3只动物分别应用免疫荧光双标和蛋白质免疫印迹检测大脑皮质、海马中神经细胞凋亡因子caspase—3的变化,以及大脑皮质中胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的表达。结果：bFGF组的皮质和海马中caspase—3的表达比生理盐水组和对照组减少(P＜0.05);bFGF组的皮质中GFAP表达比生理盐水组和对照组增加(P＜0.05)：生理盐水组与对照组的caspase—3及GFAP表达差异无统计学意义(P＞0.05)。结论：bFGF能降低小鼠脑损伤后大脑皮质和海马caspase—3的表达、增高大脑皮质GFAP的表达,抑制神经元凋亡,促进大脑皮质星形胶质细胞活化。

关键词：碱性成纤维细胞生长因子创伤性脑损伤神经元凋亡星形胶质细胞活化

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EPO激活的星形胶质细胞条件培养液对神经干细胞促分化作用及对分化后细胞的保护作用

EPO激活的星形胶质细胞条件培养液对神经干细胞促分化作用及对分...

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第六届长三角科技论坛生物产业发展分论坛

作者：张静沈慧夏春林苏州大学医学部博习临床解剖学研究所暨细胞神经生物学研究室苏州 215123

目的：观察红细胞生成素激活的星形胶质细胞条件培养液(EACM)对神经干细胞促分化作用及对分化后细胞的保护作用。方法：原代培养神经干细胞和1型星形胶质细胞,收集红细胞生成素刺激的星形胶质细胞上清液,用于神经干细胞分化试验的研究... 详细信息

目的：观察红细胞生成素激活的星形胶质细胞条件培养液(EACM)对神经干细胞促分化作用及对分化后细胞的保护作用。方法：原代培养神经干细胞和1型星形胶质细胞,收集红细胞生成素刺激的星形胶质细胞上清液,用于神经干细胞分化试验的研究。对分化后的细胞进行免疫细胞化学染色,计算其分化为神经元的比率;同时利用FeSO4和H2O2制造细胞损伤模型,用EACM继续培养48h,然后检测细胞活性和存活细胞数。结果：EACM组神经干细胞分化明显,神经元比率较星形胶质细胞上清组和对照组均有明显增加。当分化后的细胞中加入H2O2后,继续用EACM培养的实验组0D值和细胞存活百分比均较对照组高。结论：红细胞生成素激活的星形胶质细胞条件培养液对神经干细胞有促其向神经元分化的作用,并对分化后的细胞有保护作用。

关键词：星形胶质细胞条件培养液神经干细胞促红细胞生成素细胞分化免疫细胞化学神经系统损伤

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0-2A祖细胞移植对大鼠脊髓损伤后运动功能恢复的作用

0-2A祖细胞移植对大鼠脊髓损伤后运动功能恢复的作用

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第六届长三角科技论坛生物产业发展分论坛

作者：孙茂民孙文阁王宇卉黄兴锐朱云霞夏春林苏州大学医学部博习临床解剖学研究所暨细胞神经生物学研究室苏州 215123

目的：研究0—2A祖细胞移植对大鼠脊髓损伤(SCI)后运动功能恢复的作用。方法：从新生1～2d SD大鼠大脑皮质中分离纯化0—2A祖细胞。80只SD成年大鼠,随机分为4组：A组为正常组,与其他3组同期饲养;其他3组均行T9脊髓左半侧离断手术,B组损... 详细信息

目的：研究0—2A祖细胞移植对大鼠脊髓损伤(SCI)后运动功能恢复的作用。方法：从新生1～2d SD大鼠大脑皮质中分离纯化0—2A祖细胞。80只SD成年大鼠,随机分为4组：A组为正常组,与其他3组同期饲养;其他3组均行T9脊髓左半侧离断手术,B组损伤处植入吸附生理盐水的明胶海绵(损伤对照组)：C组损伤处移植50%0—2A祖细胞和50％1型星形胶质细胞(T1A)混悬液(0—2A+T1A组)：D组损伤处植入含有纯化0—2A祖细胞的细胞悬液(0—2A移植组)。移植术后3、7、14、21、28 d分别以CBS及BBB方法进行大鼠神经功能评定。结果：A组大鼠后肢CBS和BBB得分分别为100和21。0—2A祖细胞移植术后3、7、14、2l、28 d,B、C、D组动物后肢神经功能均有不同程度的恢复,左后肢得分均显著低于右侧,差异均有高度统计学意义(P＜0.01),D组运动功能恢复最好。结论：0—2A祖细胞移植可促进大鼠脊髓损伤后神经功能的恢复。

关键词：脊髓损伤神经功能运动功能恢复细胞移植

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衰老1型星形胶质细胞的Aβ1-40及相关分子表达变化

衰老1型星形胶质细胞的Aβ1-40及相关分子表达变化

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第六届长三角科技论坛生物产业发展分论坛

作者：朱云霞赵爱琴赵俊利黄兴锐夏春林苏州大学医学部博习临床解剖学研究所暨细胞神经生物学研究室苏州 215123

通过体外建立1型星形胶质细胞(T1A)衰老模型,研究衰老T1A中β—淀粉样蛋白1—40(Aβ1—40)及相关蛋白的表达变化。采用振荡培养与差速贴壁法分离纯化新生SD(Sprague—Dawley)大鼠的T1A,免疫细胞化学标记检测体外培养21天(21 DIV)及90天(... 详细信息

通过体外建立1型星形胶质细胞(T1A)衰老模型,研究衰老T1A中β—淀粉样蛋白1—40(Aβ1—40)及相关蛋白的表达变化。采用振荡培养与差速贴壁法分离纯化新生SD(Sprague—Dawley)大鼠的T1A,免疫细胞化学标记检测体外培养21天(21 DIV)及90天(90 DIV)的T1A中β—淀粉样蛋白1—40(Aβ1—40)的表达;以western blotting检测微管相关蛋白1A/1B轻链3(1.C3)、caspase—3及Bcl—2的表达水平。结果发现体外长程培养的T1A中Aβl—40蛋白表达增加,同时,90 DIV组细胞中LC3II及活化的caspase—3表达水平提高,Bcl—2表达水平降低。本研究结果提示衰老的T1A表达Aβ,细胞内自噬及凋亡活性增强,在年龄相关的神经变性过程中,T1A的衰老可促进神经元的损伤,衰老T1A表达的Aβ很可能是阿尔茨海默病老年斑的重要来源。

关键词：星形胶质细胞阿尔茨海默病细胞内自噬细胞凋亡神经元损伤

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少突胶质细胞电离辐射后早期基因表达谱的检测

少突胶质细胞电离辐射后早期基因表达谱的检测

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中华医学会放射肿瘤治疗学分会六届二次暨中国抗癌协会肿瘤放疗专业委员会二届二次学术会议

作者：陈暑波田野刘春风李春鹏张晔夏春林苏州大学附属第二医院放疗科苏州大学附属第二医院神经内科苏州大学解剖学系暨细胞神经生物学研究室

目的:检测电离辐射后早期少突胶质细胞基因表达的变化特征。方法:将离体培养的少突胶质细胞经10 Gy照射后在1和4小时时间点,采用Affymetrix RAT 2302.0基因表达谱芯片进行检测,并用实时荧光定量RT-PCR验证髓鞘碱性蛋白(MBP)和神经细胞

关键词：少突胶质细胞电离辐射基因表达谱

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少突胶质谱系细胞易损性的研究

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南通大学学报（医学版） 2009年第5期29卷 313-316页

作者：卢玉仙张海燕夏春林盐城卫生职业技术学院护理系盐城224005 苏州大学医学部人体解剖学暨细胞神经生物学教研室

目的:研究TNF-α对O-2A祖细胞、原少突胶质细胞、少突胶质细胞(oligodendrocytes,OL)这三个不同发育阶段少突胶质谱系细胞的易损性。方法:采用TNF-α分别刺激这三个不同发育阶段的细胞,MTT法检测存活率,免疫细胞化学检测活化的caspase-... 详细信息

目的:研究TNF-α对O-2A祖细胞、原少突胶质细胞、少突胶质细胞(oligodendrocytes,OL)这三个不同发育阶段少突胶质谱系细胞的易损性。方法:采用TNF-α分别刺激这三个不同发育阶段的细胞,MTT法检测存活率,免疫细胞化学检测活化的caspase-3。结果:O-2A祖细胞与OL相比存活率明显降低,原少突胶质细胞与OL相比存活率也降低;50ng/mlTNF-α刺激少突胶质谱系细胞48h以内,O-2A祖细胞的存活率与原少突胶质细胞、OL的存活率相比差异无统计学意义,而原少突胶质细胞的存活率与OL存活率相比较明显降低;caspase-3免疫细胞化学染色显示在这些细胞的胞浆和胞核有大量阳性信号。结论:TNF-α降低少突胶质谱系细胞的存活率具有细胞成熟程度的依赖性;caspase-3参与TNF-α诱导的3个不同发育阶段的OL的凋亡。

关键词：肿瘤环死因子α O-2A祖细胞原少突胶质细胞少突胶质细胞易损性

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少突胶质细胞发生过程中S-100β表达的变化

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解剖学杂志 2008年第5期31卷 615-617,628页

作者：卢玉仙张海燕夏春林苏州大学医学院解剖学教研室暨细胞神经生物学教研室苏州215123

目的:探讨少突胶质细胞发生过程中3个主要不同阶段S-100β的表达。方法:采用振荡法和差速贴壁法,获得纯化的O-2A祖细胞;双重免疫荧光细胞化学显色法观察S-100β在少突胶质细胞发生过程中的表达情况。结果:O-2A祖细胞在含有碱性成纤维细... 详细信息

目的:探讨少突胶质细胞发生过程中3个主要不同阶段S-100β的表达。方法:采用振荡法和差速贴壁法,获得纯化的O-2A祖细胞;双重免疫荧光细胞化学显色法观察S-100β在少突胶质细胞发生过程中的表达情况。结果:O-2A祖细胞在含有碱性成纤维细胞因子(10 ng/ml)和血小板源性生长因子(10 ng/ml)培养液中培养48 h,不表达S-100β;换成含有3′碘甲状腺原氨酸(30 ng/ml)培养液继续培养24 h,S-100β免疫反应呈现阳性。前少突胶质细胞、少突胶质细胞中表达S-100β。结论:少突胶质细胞发生过程中S-100β的表达始于O-2A祖细胞过渡到前少突胶质细胞之间,可能与其从多潜能分化阶段过渡到形态学上的分化阶段有关。

关键词： O-2A祖细胞前少突胶质细胞少突胶质细胞 S-100β

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轴突成束和延伸蛋白ζ-1基因在1型和2型星形胶质细胞中的表达

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解剖学报 2008年第5期39卷 636-639页

作者：何江虹张晔夏春林张万钰朱婷万明辉苏州大学医学院解剖学教研室暨细胞神经生物学研究室江苏苏州215123 南通大学江苏省神经再生重点实验室江苏南通226001

目的探讨轴突成束和延伸蛋白ζ-1(FEZ1)基因在1型和2型星形胶质细胞(T1A、T2A)中的表达差异,及其在新生SD大鼠中枢神经系统中的表达。方法培养、分离、纯化T1A和T2A,提取总RNA,分别以Cy3-dCTP和Cy5-dCTP标记T1A和T2A的mRNA,进行基因表... 详细信息

目的探讨轴突成束和延伸蛋白ζ-1(FEZ1)基因在1型和2型星形胶质细胞(T1A、T2A)中的表达差异,及其在新生SD大鼠中枢神经系统中的表达。方法培养、分离、纯化T1A和T2A,提取总RNA,分别以Cy3-dCTP和Cy5-dCTP标记T1A和T2A的mRNA,进行基因表达谱芯片检测分析。选取其中与轴突延伸相关的FEZ1基因,应用半定量RT-PCR法研究FEZ1在新生大鼠中枢神经系统多个部位的表达。结果T1A和T2A中差异表达基因138条,其中60条在T1A中高表达,78条在T2A中高表达。FEZ1基因在T2A中高表达。RT-PCR结果显示,FEZ1在新生大鼠中枢神经系统大脑皮层、嗅球和脊髓组织中均有表达。结论T1A和T2A中存在多个差异表达基因,其中与轴突延伸相关的FEZ1基因表达明显差异,提示T1A和T2A可能在诱导轴突生长方面有不同功能;FEZ1基因与中枢神经系统的发育和再生相关。

关键词：轴突成束和延伸蛋白ζ-1 星形胶质细胞胶质细胞谱系基因表达谱芯片反转录-聚合酶链式反应大鼠

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O-2A祖细胞移植对大鼠脊髓损伤后运动功能恢复的作用

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苏州大学学报（医学版） 2008年第6期28卷 900-904,F0002页

作者：孙茂民孙文阁王宇卉黄兴锐朱云霞夏春林苏州大学医学部博习临床解剖学研究所暨细胞神经生物学研究室江苏苏州215123

目的研究O-2A祖细胞移植对大鼠脊髓损伤(SCI)后运动功能恢复的作用。方法从新生1～2 d SD大鼠大脑皮质中分离纯化O-2A祖细胞。80只SD成年大鼠,随机分为4组:A组为正常组,与其他3组同期饲养;其他3组均行T9脊髓左半侧离断手术,B组损伤处植... 详细信息

目的研究O-2A祖细胞移植对大鼠脊髓损伤(SCI)后运动功能恢复的作用。方法从新生1～2 d SD大鼠大脑皮质中分离纯化O-2A祖细胞。80只SD成年大鼠,随机分为4组:A组为正常组,与其他3组同期饲养;其他3组均行T9脊髓左半侧离断手术,B组损伤处植入吸附生理盐水的明胶海绵(损伤对照组);C组损伤处移植50%O-2A祖细胞和50%1型星形胶质细胞(T1A)混悬液(O-2A+T1A组);D组损伤处植入含有纯化O-2A祖细胞的细胞悬液(O-2A移植组)。移植术后3、7、14、21、28 d分别以CBS及BBB方法进行大鼠神经功能评定。结果A组大鼠后肢CBS和BBB得分分别为100和21。O-2A祖细胞移植术后3、7、14、21、28 d,B、C、D组动物后肢神经功能均有不同程度的恢复,左后肢得分均显著低于右侧,差异均有高度统计学意义(均P<0.01),D组运动功能恢复最好。结论O-2A祖细胞移植可促进大鼠脊髓损伤后神经功能的恢复。

关键词：脊髓损伤神经功能 O-2A祖细胞移植

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少突胶质细胞与2型星形胶质细胞中S-100β表达差异性的研究

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解剖科学进展 2008年第3期14卷 309-311页

作者：卢玉仙张海燕刘珺孙茂民夏春林苏州大学医学部人体解剖学暨细胞神经生物学教研室江苏苏州215123

目的研究少突胶质细胞(oligodendrocytes,OL)与2型星形胶质细胞(type-2astrocyte,T2A)中S-100的表达。方法根据各种胶质细胞的生长时间的差异及细胞的黏附性不同,通过机械振荡法和差速贴壁法获得纯化的O-2A祖细胞;免疫细胞化学染色法观... 详细信息

目的研究少突胶质细胞(oligodendrocytes,OL)与2型星形胶质细胞(type-2astrocyte,T2A)中S-100的表达。方法根据各种胶质细胞的生长时间的差异及细胞的黏附性不同,通过机械振荡法和差速贴壁法获得纯化的O-2A祖细胞;免疫细胞化学染色法观察S-100β在O-2A谱系细胞中的表达情况。结果O-2A祖细胞在含有PDGF、bFGF的培养液中培养3d,分化成T2A,培养5d分化成OL;OL中S-100β免疫反应呈现阳性,T2A中不表达S-100β。结论O-2A谱系细胞中的S-100β的表达与O-2A祖细胞向OL分化有关。

关键词： O-2A祖细胞少突胶质细胞 2型星形胶质细胞 S-100β

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