检索结果-内蒙古大学图书馆

解剖学研究 2004年第3期26卷 167-170,i001页

作者：孙燕王劼夏春林复旦大学上海医学院解剖与组织胚胎系上海200032 苏州大学解剖学教研室暨神经生物研究室

目的　在获取高纯度O 2A祖细胞的基础上 ,探讨O 2A祖细胞在体外分化的形态学特点。方法　采用“两次恒温摇床振荡法”和差速贴壁法 ,结合使用神经营养因子 (bFGF、PDGF AA) ,进行O 2A祖细胞体外纯化和扩增培养 ,并观察O 2A祖细胞在有血... 详细信息

目的　在获取高纯度O 2A祖细胞的基础上 ,探讨O 2A祖细胞在体外分化的形态学特点。方法　采用“两次恒温摇床振荡法”和差速贴壁法 ,结合使用神经营养因子 (bFGF、PDGF AA) ,进行O 2A祖细胞体外纯化和扩增培养 ,并观察O 2A祖细胞在有血清和无血清培养条件下的分化情况 ,用免疫细胞化学鉴定分化成熟的 2型星型胶质细胞和少突胶质细胞。结果　培养的O 2A祖细胞能形成克隆球 ,具有增殖能力 ,经免疫细胞化学鉴定细胞纯度达 90 %以上。在含血清的培养基中能定向分化为 2型星形胶质细胞 ,其胞体较大 ,从胞体上伸出细长突起 ,由突起上再发出更为细小的分支 ,GFAP和A2B5抗体标记均为阳性 ;在无血清的化学条件培养基中能定向分化为少突胶质细胞 ,其胞体较小 ,突起短而细 ,相互交织呈“蜘蛛网”样 ,CNPase抗体标记阳性。结论　 (1)培养的O 2A祖细胞保持定向干细胞的特性 ,具有增殖和双向分化的潜能 ;(2 )O 2A祖细胞定向分化为 2型星形胶质细胞过程中经历较长的增殖期 ,而分化为少突胶质细胞过程中则增殖期较短 ;(3)分化的 2型星形胶质细胞和少突胶质细胞在形态学和抗原表达上存在差异。

关键词：祖细胞少突胶质细胞星形胶质细胞定向分化阳性大脑皮质新生大鼠增殖期条件培养基贴壁法

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新生大鼠大脑O-2A细胞系的分离纯化和双向分化培养

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苏州大学学报（医学版） 2003年第3期23卷 307-310页

作者：孙燕夏春林孙茂民施婵宏万明辉苏州大学医学院人体解剖学教研室暨神经细胞生物学研究室苏州215007

目的　在体外培养条件下获取纯度较高的O - 2A细胞系细胞并探索其分化规律。方法　根据星形胶质细胞、O - 2A祖细胞的生长时间差异及细胞的粘附特性不同 ,采用振荡法和差速贴壁法 ,结合 1型星形胶质细胞条件培养液 ,培养、分离纯化O - 2... 详细信息

目的　在体外培养条件下获取纯度较高的O - 2A细胞系细胞并探索其分化规律。方法　根据星形胶质细胞、O - 2A祖细胞的生长时间差异及细胞的粘附特性不同 ,采用振荡法和差速贴壁法 ,结合 1型星形胶质细胞条件培养液 ,培养、分离纯化O - 2A祖细胞。结果　纯化的O - 2A祖细胞胞体呈椭圆形 ,具有典型的双极突起 ;经免疫细胞化学染色鉴定 ,细胞的纯度达 90 %。在有血清的情况下 ,O - 2A祖细胞定向分化为 2型星形胶质细胞 ;在无血清的情况下 ,定向分化为少突胶质细胞。结论　通过振荡法和差速贴壁法 ,结合 1型星形胶质细胞条件培养液分离纯化培养的O - 2A祖细胞具有双分化潜能。

关键词：星形胶质细胞大脑 O—2A细胞系分离纯化双向分化培养新生大鼠

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新生大鼠大脑皮质O-2A祖细胞的体外诱导分化

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交通医学 2003年第5期17卷 609-609页

作者：孙燕万明辉夏春林苏州大学解剖学教研室暨神经生物学研究室江苏215007

目的 :探索新生大鼠大脑皮质O -2A祖细胞的体外分离纯化的培养条件 ,并观察其在体外增殖、分化的规律 ;鉴定体外培养的O -2A祖细胞、2型星形胶质细胞及少突胶质细胞。方法 :根据 1型星形胶质细胞、O -2A祖细胞的生长时间差异及细胞的粘... 详细信息

目的 :探索新生大鼠大脑皮质O -2A祖细胞的体外分离纯化的培养条件 ,并观察其在体外增殖、分化的规律 ;鉴定体外培养的O -2A祖细胞、2型星形胶质细胞及少突胶质细胞。方法 :根据 1型星形胶质细胞、O -2A祖细胞的生长时间差异及细胞的粘附特性不同 ,采用振荡法和差速贴壁法 ,并结合使用生长因子 (PDGF ,bFGF )刺激O -2A祖细胞增殖 ,从而分离纯化、扩增O -2A祖细胞 ;观察O -2A祖细胞在有血清 (D/F + 2 0 %FCS)和无血清 (CDM )培养条件下的分化情况。免疫细胞化学法鉴定O -2A祖细胞(A2B5 )和分化成熟的 2型星形胶质细胞 (GFAP ,A2B5 )及少突胶质细胞 (CNPase)。结果 :①分离纯化的O -2A祖细胞胞体呈椭圆形 ,具有典型的双极或三极突起 ;经免疫细胞化学染色鉴定 ,A2B5抗体标记阳性 ,细胞纯度达 95 % ;②应用有血清的培养基诱导O -2A祖细胞定向分化为 2型星形胶质细胞 ,2型星形胶质细胞的胞体较大 ,突起多而细长 ,GFAP和A2B5抗体标记均为阳性 ;③应用无血清的化学条件培养基诱导O -2A祖细胞定向分化为少突胶质细胞 ,少突胶质细胞的胞体小 ,突起短而细 ,相互交织呈“蜘蛛网”样 ,CNPase抗体标记阳性。结论 :①采用振荡法和差速贴壁法 ,并结合使用生长因子 ,建立了分离纯化O -2A祖细胞的方法 ;②分离纯化的O

关键词：新生大鼠大脑皮质 O-2A祖细胞体外诱导细胞分化生长因子细胞培养

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脊髓半切损伤模型的建立

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交通医学 2003年第5期17卷 609-609页

作者：施婵宏万明辉夏春林苏州大学解剖学教研室暨神经细胞生物学研究室江苏215007

目的 :为脊髓损伤修复研究建立理想、稳定的动物模型 ,并选择客观敏感的检测手段对其功能进行观测评定。方法 :将 2 5只成年SD大鼠随机分为三组 :脊髓损伤组 (A组 ,9只 ) ,行T12椎板切除术 +脊髓左半侧切除 ;假手术组 (B组 ,8只 ) ,行T1... 详细信息

目的 :为脊髓损伤修复研究建立理想、稳定的动物模型 ,并选择客观敏感的检测手段对其功能进行观测评定。方法 :将 2 5只成年SD大鼠随机分为三组 :脊髓损伤组 (A组 ,9只 ) ,行T12椎板切除术 +脊髓左半侧切除 ;假手术组 (B组 ,8只 ) ,行T12椎板切除术不切脊髓 ;正常组 (C组 ,8只 ) ,与其他两组同期饲养检测指标。术后 1、2、3、4周进行改良联合行为评分 ,术后 2 4h及 4周进行双后肢体感诱发电位等检测 ,观察神经功能恢复情况与一致性。结果 :术后 4周A组动物 9只 (因A组死亡一只 ,为保持最终动物数一致 ,另加了 1只 ) ,存活 8只 ,存活率 88.89% ,B、C组 8只存活率均为 10 0 %。各周CBSA组右后肢明显低于左侧 (P <0 .0 1) ,与B、C组有显著差异 ,B、C组之间无显著性差异 (P >0 .0 5 )。A组术后 2 4h左后肢SEP消失 ,右后肢SEP较B、C组起始潜伏期 (PL)延长 ,峰峰值波幅降低。术后 4周左侧SEP随CBS恢复而出现 ,但PL较B、C组明显延长 (P <0 .0 1) ,波幅也明显降低 (P <0 .0 5 )。而B、C组间无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :该动物模型操作简单 ,动物存活率高且稳定。

关键词：脊髓损伤动物模型神经功能诱发电位神经再生

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硫氧还蛋白对缺氧/复氧海马神经元生长与凋亡的影响

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交通医学 2003年第5期17卷 610-610页

作者：孙茂民王宇卉夏春林苏州大学解剖学教研室暨神经细胞生物学研究室江苏215007

目的 :探讨硫氧还蛋白 (Thioredoxin ,Trx)在大鼠海马神经元缺氧 /复氧损伤中对神经元生长与凋亡的作用。方法 :①海马神经元培养和缺氧实验。取当天出生的SD大鼠 ,在无菌条件下断头取脑 ,分离双侧海马 ,参照文献进行鼠海马神经元的培... 详细信息

目的 :探讨硫氧还蛋白 (Thioredoxin ,Trx)在大鼠海马神经元缺氧 /复氧损伤中对神经元生长与凋亡的作用。方法 :①海马神经元培养和缺氧实验。取当天出生的SD大鼠 ,在无菌条件下断头取脑 ,分离双侧海马 ,参照文献进行鼠海马神经元的培养 ;取培养 10d的海马神经元 ,参照文献进行缺氧实验 ,在缺氧条件下继续培养 3h ,部分细胞在缺氧 3h后迅速更换新鲜培养液 ,在正常供氧环境下分别继续培养 12h、2 4h或 48h ,同时设置未缺氧的正常海马神经细胞作为对照。②Trx干预。取培养 10天的海马神经元 ,加入 2 0 μg/ml的Trx ,作用 1h后如上操作开始诱导缺氧 /复氧 ,如上设定时点终止培养。③细胞活力测定和caspase -3活性测定。采用MTT法测定细胞活力 ,caspase-3活性按照说明书进行操作。实验数据以 x±s表示 ,用ANOVA进行分析处理。结果 :与正常对照组相比 ,缺氧 /复氧组2 4/4 8h时点细胞存活率显著降低 (P <0 .0 0 1) ,Trx处理组的细胞活力也进行性下降 ,但与缺氧 /复氧组相比 ,2 4/4 8h时点细胞存活率明显提高 (P <0 .0 5 ) ;但与正常对照组相比 ,Trx处理组的细胞活力仍降低 (P <0 .0 5 ) ;在缺氧 /复氧组在复氧 12～ 48h ,caspase -3样蛋白酶活性明显增高 ,以复氧 2 4h为最高 (P <0 .0 0 1) ,在Trx处理组。

关键词：硫氧还蛋白缺氧复氧海马神经元细胞凋亡 caspase-3样蛋白酶

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硫氧还蛋白还原酶在大鼠阿尔茨海默病模型海马结构中的表达

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解剖学杂志 2002年第5期25卷 451-453页

作者：孙茂民魏福堂夏春林苏州大学医学院解剖学教研室暨神经细胞生物学研究室苏州215007

目的 :探讨硫氧还蛋白还原酶 (thioredoxinreductase,TR)在阿尔茨海默病 (Alzheimer′sDisease,AD)大鼠模型发生中的作用。方法 :注射海人藻酸 (Kainicacid ,KA)毁损Meynert基底核建立AD大鼠模型 ,通过Y形迷宫判断动物模型成功与否 ,采... 详细信息

目的 :探讨硫氧还蛋白还原酶 (thioredoxinreductase,TR)在阿尔茨海默病 (Alzheimer′sDisease,AD)大鼠模型发生中的作用。方法 :注射海人藻酸 (Kainicacid ,KA)毁损Meynert基底核建立AD大鼠模型 ,通过Y形迷宫判断动物模型成功与否 ,采用原位杂交方法检测AD大鼠模型中TRmRNA的表达。结果 :AD模型组大鼠短期学习记忆能力与对照组相比明显下降 (P <0 0 0 1 ) ,说明AD动物模型建立成功 ;TRmRNA原位杂交检测显示模型组大鼠海马各区TRmRNA杂交信号显著增强 ,与对照组相比有显著差异 (P <0 0 0 1 )。结论

关键词：硫氧还蛋白还原酶大鼠阿尔茨海默病海马结构

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体外培养获取高纯度O-2A祖细胞

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解剖学研究 2002年第4期24卷 255-260,I005页

作者：孙燕夏春林何炎施婵宏万明辉苏州大学解剖学教研室暨神经生物研究室苏州215007

目的获取较高纯度的O-2A祖细胞,并观察在不同的实验条件下O-2A祖细胞的分化作用。方法根据星形胶质细胞、O-2A祖细胞的生长时间差异,细胞的粘附特性不同,采用振荡和差速贴壁法结合Ⅰ型星形胶质细胞条件培养液,培养、分离纯化O-2A祖细... 详细信息

目的获取较高纯度的O-2A祖细胞,并观察在不同的实验条件下O-2A祖细胞的分化作用。方法根据星形胶质细胞、O-2A祖细胞的生长时间差异,细胞的粘附特性不同,采用振荡和差速贴壁法结合Ⅰ型星形胶质细胞条件培养液,培养、分离纯化O-2A祖细胞。结果培养的o-2A祖细胞胞体呈椭圆形,有典型的双极突起,少数呈三极突起;经免疫组织化学染色鉴定细胞的纯度达90％。在有血清的情况下,O-2A祖细胞定向分化为Ⅱ型星形胶质细胞;在无血清的情况下,其定向分化为少突胶质细胞。结论通过振荡法和Ⅰ型星形胶质细胞条件培养液结合差速贴壁法分离纯化培养O-2A祖细胞是一种可行的培养方法。

关键词：体外培养星形胶质细胞 O-2A祖细胞细胞发育细胞分化细胞培养振荡法差速贴壁法

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哺乳动物昼夜节律组构中的下丘脑视交叉上核和松果腺

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生理科学进展 2001年第2期32卷 116-120页

作者：周先举俞光第印其章苏州大学医学院基础医学系解剖学教研室苏州大学医学院基础医学系神经生物学研究室苏州215007

哺乳动物下丘脑视交叉上核 (SCN)是昼夜节律最主要的起搏器 ,控制着机体的生理和行为的节律。它具有自身内在的节律性 ,同时也受光照周期信号和一些内源性化学物质的调节。松果腺分泌褪黑素 (MEL)受SCN的调控 ,MEL通过作用于SCN上高亲和... 详细信息

哺乳动物下丘脑视交叉上核 (SCN)是昼夜节律最主要的起搏器 ,控制着机体的生理和行为的节律。它具有自身内在的节律性 ,同时也受光照周期信号和一些内源性化学物质的调节。松果腺分泌褪黑素 (MEL)受SCN的调控 ,MEL通过作用于SCN上高亲和性MEL受体 ,启动第二、第三信使系统 ,调整SCN的昼夜节律活动。这种调整具有时间敏感性。

关键词：视交叉上核松果腺褪黑素昼夜节律哺乳动物下丘脑

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星形细胞条件培养液对PC12细胞生长的影响

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苏州医学院学报 2001年第4期21卷 400-402页

作者：朱猛夏春林孙茂民邱悦苏州大学医学院解剖学教研室暨神经细胞生物学研究室苏州215007

目的　观察 1、2型星形细胞 (T1A ,T2A)条件培养液对PC12细胞生长情况的影响 ,探讨T1A ,T2A在神经再生过程中的作用。方法　利用分离纯化的T1A和T2A制备条件培养液 ,观察条件培养液对PC12细胞生长情况的影响 ,观察PC12细胞突起生长情况 ... 详细信息

目的　观察 1、2型星形细胞 (T1A ,T2A)条件培养液对PC12细胞生长情况的影响 ,探讨T1A ,T2A在神经再生过程中的作用。方法　利用分离纯化的T1A和T2A制备条件培养液 ,观察条件培养液对PC12细胞生长情况的影响 ,观察PC12细胞突起生长情况 ,并用MTT法检测PC12细胞活力。结果　对照组PC12细胞未见明显突起生长 ,TIA条件培养液作用组和T2A条件培养液作用组PC12细胞突起生长明显 ,OD值分别由 0 .2 78提高到0 .5 12 (P <0 .0 0 1)和 0 .5 6 6 (P <0 .0 0 1)。结论　T1A ,T2A条件培养液对PC12细胞有刺激生长作用 ,说明T1A 。

关键词：星形细胞细胞谱系细胞培养液 PC12细胞细胞生长神经再生

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AD模型海马结构中iNOS表达及作用

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苏州医学院学报 2001年第4期21卷 396-399页

作者：魏福堂夏春林何炎苏州大学医学院解剖学教研室暨神经细胞生物学研究室苏州215007

目的　建立Alzheimer病 (AD)大鼠动物模型 ,探讨iNOS在AD动物模型脑组织海马中的表达情况及其作用。方法　海人藻酸 (KA)毁损Meynert基底核建立AD大鼠模型 ,通过Y型迷宫实验及 β -APP的表达判断AD动物模型是否建立成功 ,检测动物模型... 详细信息

目的　建立Alzheimer病 (AD)大鼠动物模型 ,探讨iNOS在AD动物模型脑组织海马中的表达情况及其作用。方法　海人藻酸 (KA)毁损Meynert基底核建立AD大鼠模型 ,通过Y型迷宫实验及 β -APP的表达判断AD动物模型是否建立成功 ,检测动物模型海马中iNOS的表达情况。结果　迷宫实验发现 ,KA毁损NBM后大鼠短期学习记忆能力和手术前 (P <0 .0 0 1)和对照组 (P <0 .0 0 1)相比明显下降。免疫组化发现 ,β -APP和iNOS的表达明显增多 (P <0 .0 0 1) ,两者均以CA1和齿状回区最多。结论　海人藻酸毁损Meynert基底核可建立简便可靠的AD动物模型 ;AD动物模型中 ,iNOS高表达。

关键词： Alzheimer病 β淀粉样蛋白前体一氧化氮合酶动物模型 AD模型海马结构

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