检索结果-内蒙古大学图书馆

中华血液学杂志 2011年第5期32卷 304-307页

作者：魏计锋陈广华仇惠英傅琤琤丁子轩刘红冯宇峰陈苏宁常伟荣吴德沛苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室215006

目的探讨急性髓系白血病（AML）患者TET2基因突变的发生率，并探讨其临床意义。方法采用基因组DNA—PCR方法扩增TET2基因3～11号外显子，基因测序分析TET2基因突变，随访患者判定其疗效及预后。结果96例AML患者中13例检测到TET2基因突... 详细信息

目的探讨急性髓系白血病（AML）患者TET2基因突变的发生率，并探讨其临床意义。方法采用基因组DNA—PCR方法扩增TET2基因3～11号外显子，基因测序分析TET2基因突变，随访患者判定其疗效及预后。结果96例AML患者中13例检测到TET2基因突变，突变率为13．54％（95％CI6．70％～20．38％）。突变组患者中位年龄54岁，未突变组患者中位年龄41岁，两者差异有统计学意义（P=0．010）。突变组患者初诊外周血HGB高于未突变组，分别为84（70～108）g／L和70（55～87）g／L，差异有统计学意义（P=0．032）；两者在性别、分型、初诊外周血白细胞计数、血小板计数、外周血原始细胞、骨髓原始细胞比例及染色体核型等方面差异无统计学意义（P值均〉0．05）。TET2基因突变与NPM1基因突变有一定的相关性，但与C—KIT、FLT3及JAK2V617F突变并无明显的相关性。在非M3型患者中，突变组的第1次化疗完全缓解率和2年总生存率均低于未突变组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论TET2基因突变更易存在于年龄偏大的AML患者中，在非M3型患者中TET2基因突变与患者的临床特点、疗效有一定相关性，提示是预后不良的分子学标志。

关键词：白血病,非淋巴细胞,急性基因,TET2 DNA突变分析预后

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角质细胞生长因子在白血病小鼠异基因脐带血移植中的作用

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中华医学杂志 2011年第40期91卷 2863-2867页

作者：陈广华王易乔淑敏冯宇锋朱子玲吴德沛苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室 215006

目的探讨角质细胞生长因子（KGF）在白血病小鼠异基因脐带血移植（UCBT）中的作用及机制。方法C57BL/6胎鼠外周血作为脐带血移植物。BALB／c小鼠随机数字表法分为7组，每组12只。对照1组：单纯接种白血病；对照2组：全身辐射（TBI）前第... 详细信息

目的探讨角质细胞生长因子（KGF）在白血病小鼠异基因脐带血移植（UCBT）中的作用及机制。方法C57BL/6胎鼠外周血作为脐带血移植物。BALB／c小鼠随机数字表法分为7组，每组12只。对照1组：单纯接种白血病；对照2组：全身辐射（TBI）前第4天（-4d）接种白血病，单纯TBI处理；对照3组：不接种白血病，TBI处理后输注2×10^6个脐带血总有核细胞数（TNC）；对照4组：不接种白血病，自TBI-3d起每日皮下注射磷酸盐缓冲液（PBS）连用7d，TBI后输注脐带血TNC，移植后第8天（＋8d）予输血小板支持；对照5组：TBI-4d接种白血病，自TBI-3d起每日皮下注射PBS连用7d，TBI后输注2×10^6个脐带血TNC，移植＋8d予输血小板支持；实验1组：不接种白血病，自TBI-3d起每日皮下注射KGF1mg／kg连用7d，TBI后输注脐带血TNC，移植＋8d予输血小板支持；实验2组：接种白血病，自移植-3d起每日皮下注射KGF1mg／kg连用7d，TBI后输注脐带血TNC，移植＋8d予输血小板支持。以生存期、病理组织学变化、脾脏淋巴细胞亚群、胸腺输出功能为观察指标并作组间比较。结果对照1组，12只小鼠全部死于白血病，小鼠生存时间为（11．1±1．5）d；对照2组，小鼠单纯TBI处理后12只全部死于造血衰竭，生存时间为（11．5±2．5）d；对照3组，5只（5／12）小鼠生存期超过100d，7只小鼠20d内死于内脏出血；对照5组，白血病小鼠脐带血移植后4只（4／12）生存期超过100d；实验2组，白血病小鼠9只（9／12）生存期超过100d。实验2组与对照5组白血病小鼠生存时间比较差异有统计学意义（Log-rank检验，χ^2=4．996，P=0．0254）。移植后对照4组小鼠脾脏T、NK和B细胞数分别为（9．32±0．48）×10^6、（1．59±0．11）×10^6、（18．74±2．01）×10^6个；实验1组小鼠脾脏T、NK和B细胞数分别为（13．20±1．14）×10^6、（1．75±0．12）×10^6、（20．36±0．86）×10^6个，实验1组T细胞、NK细胞数均高于对照4组（均P〈0．05）。实验1组信号结合T细胞受体删除DNA环（sjTREC）水平明显高于对照4组[（228±24）拷贝／10^5脾细胞比（167±17）拷贝／10^5脾细胞，P=0．002]。结论足月胎鼠外周血富含造血干祖细胞。KGF输注减少小鼠异基因脐带血移植后白血病复发，其机制为促进胸腺输出功能恢复。

关键词：脐血干细胞移植白血病小鼠近交C57BL 角质细胞生长因子免疫重建

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微小残留病变检测在急性高危白血病异基因造血干细胞移植中的意义

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中华医学杂志 2011年第38期91卷 2692-2696页

作者：施晓兰唐晓文魏孝艾赵丙瑞周倩兰叶凡路钰夏孙兴卫朱明清沈文红仇惠英孙爱宁吴德沛苏州大学附属第一医院血液科江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室 215006

目的分析急性白血病（AL）高危患者异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）前后微小残留病变（MRD）水平与移植后预后的关系。方法采用以CD45／SS设门的4色或5色荧光标记多参数流式细胞术（MFC）动态检测90例高危AL患者allo-HSCT前第30天、... 详细信息

目的分析急性白血病（AL）高危患者异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）前后微小残留病变（MRD）水平与移植后预后的关系。方法采用以CD45／SS设门的4色或5色荧光标记多参数流式细胞术（MFC）动态检测90例高危AL患者allo-HSCT前第30天、移植后第30、60、100天和6、9、12个月的MRD水平，以0．1％为界，将患者分为MRD高水平组（≥0．1％）和低水平组（〈0．1％），其中高水平组根据移植后是否干预治疗分为两组，回顾性分析MRD水平与预后的关系。结果移植前MRD水平与移植后预后无明显关系，移植后第60、100天MRD高水平组患者移植后复发率明显高于低水平组。移植后第100天，MRD高水平干预组、MRD高水平未干预组、MRD低水平组1年无复发生存率（RFS）分别为100％、60．87％和91．30％，3年RFS分别为85．71％、44．72％和68．48％，组间差异均有统计学意义（均P〈0．05）。复发患者首次检出MRD高水平的时间比临床诊断复发提前了2．5（1．0～26．0）个月。移植后第100天，30例MRD高水平组患者中，7例患者及时接受干预治疗后均未复发，而另外23例未接受干预治疗的患者中11例出现复发（P〈0．05）。结论多参数流式细胞术动态监测高危AL患者移植后MRD可以有效评估其临床预后，并可根据移植后第100天MRD进行危险分层，MRD≥〉0．1％的患者预后较差，及时进行有效的干预可以明显降低其复发率，增加长期生存率。

关键词：白血病造血干细胞移植微小残留病变高危流式细胞术

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抗血小板膜糖蛋白Ib单克隆抗体的制备、鉴定及其功能的初步研究

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细胞与分子免疫学杂志 2011年第6期27卷 650-652,656页

作者：谷颖季顺东赵益明沈飞阮长耿苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的:制备抗人血小板膜糖蛋白Ib(GPIb)单克隆抗体(mAb),并进行生化鉴定与初步探讨其临床应用。方法:采用血小板免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞融合。经间接ELISA法筛选和克隆化培养,获得1株抗人GPIbmAb的杂交瘤细胞,纯化其腹水... 详细信息

目的:制备抗人血小板膜糖蛋白Ib(GPIb)单克隆抗体(mAb),并进行生化鉴定与初步探讨其临床应用。方法:采用血小板免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞融合。经间接ELISA法筛选和克隆化培养,获得1株抗人GPIbmAb的杂交瘤细胞,纯化其腹水获得mAb;免疫双扩散鉴定其抗体亚类;流式细胞术和免疫放射法鉴定其识别的抗原;ELISA法检测该抗体对血浆血管性血友病因子(vWF)的瑞斯托霉素辅因子活性的影响。结果:成功制备了1株抗人GPIbmAb,命名为SZ-151。ELISA法测定其腹水效价为1∶20 000,免疫双扩散鉴定其为IgG1亚类。免疫放射法和流式细胞术检测结果证实SZ-151和mAb SZ-2识别同一抗原GPIb,且作用位点不同。ELISA结果显示,SZ-151对瑞斯托霉素辅因子活性无抑制作用。结论:获得1株新的抗血小板膜糖蛋白Ib的mAb,可用于血浆vWF的瑞斯托霉素辅因子活性检测,为血管性血友病的诊断和分型提供了有效的工具。

关键词：血小板糖蛋白Ib 单克隆抗体血管性血友病因子

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急性白血病造血干细胞移植后WTl基因检测与临床预后的相关性

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中华医学杂志 2011年第20期91卷 1375-1378页

作者：赵丙瑞唐晓文岑建农金松施晓兰魏孝艾常伟荣孙爱宁吴德沛苏州大学附属第一医院血液科江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室 215006

目的初步探索在急性白血病（AL）造血干细胞移植术（HSCT）后,Wilms瘤基因（WT1）水平对监测微小残留病（MRD）及预测临床预后的意义.方法采用实时定量PCR技术动态检测2001年12月至2009年9月苏州大学附属第一医院血液科63例HSCT后患者... 详细信息

目的初步探索在急性白血病（AL）造血干细胞移植术（HSCT）后,Wilms瘤基因（WT1）水平对监测微小残留病（MRD）及预测临床预后的意义.方法采用实时定量PCR技术动态检测2001年12月至2009年9月苏州大学附属第一医院血液科63例HSCT后患者的WTl基因及管家基因ABL mRNA表达水平（共326份骨髓标本）.比较移植后不同转归组患者的WT1表达水平,依据受试者工作特征（ROC）曲线确定出可预测临床复发的WT1阈值,根据阈值对WT1阳性与阴性患者预后以及干预治疗效果进行分析.结果 19例复发患者WT1中位表达水平为1270（55-47 596）,44例未复发患者WT1中位表达水平为132（0～2959）,复发组WT1表达水平高于未复发组,差异有统计学意义（P〈0.01）.19例复发患者中,除1例在复发后末继续检测WT1外,10例因复发导致死亡的患者WT1中位表达水平略高于其他8例患者,但差异无统计学意义（P〉0.05）.采用ROC曲线以wn=585为界将63例患者分为WT1阳性组（〉585）和阴性组（〈585）两组.WT1阴性组患者较阳性组患者具有更高的无复发生存（RFS）及总生存（OS）率（均P〈0.01）.随访21例WTl阳性的患者,发现在移植后3个月内、4～6个月、7～9个月和9个月后检测到WT1表达阳性的患者的累积复发率分别为：8/8,2/4,2/4,3/5（P=0.063）,并且干预治疗效果欠佳.结论 WT1基因可以作为AL患者HSCT后独立的MRD监测指标,WT1〉585为移植后患者的预后不良因素.

关键词：白血病造血干细胞移植 WT1基因微小残留病预后

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流式微球技术检测血小板特异性自身抗体方法的建立及临床应用

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中华检验医学杂志 2011年第3期34卷 230-235页

作者：何杨李锦霞朱明清赵益明阮长耿苏州大学附属第一医院血栓与止血研究室江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室 215006

目的建立流式微球技术检测血小板特异性自身抗体的方法，探讨其临床应用价值。方法用包被抗GPIb（单抗SZ2）、抗GPIIb（单抗SZ22）、抗GPⅢa（单抗SZ21）、抗GPⅡb／Ⅲa（单抗7E3）单克隆抗体的微球捕获血小板特异性抗原抗体复合物，加... 详细信息

目的建立流式微球技术检测血小板特异性自身抗体的方法，探讨其临床应用价值。方法用包被抗GPIb（单抗SZ2）、抗GPIIb（单抗SZ22）、抗GPⅢa（单抗SZ21）、抗GPⅡb／Ⅲa（单抗7E3）单克隆抗体的微球捕获血小板特异性抗原抗体复合物，加入FITC标记的羊抗人多克隆抗体，在流式细胞仪上进行检测分析。各取1份SZ2、SZ22、SZ21、7E3抗体阴性和阳性的血小板标本进行批内精密度测定，重复制备20次，上流式细胞仪检测MFI，计算批内CV。各取1份SZ2、SZ22、SZ21、7E3抗体阴性和阳性的血小板标本，每天上流式细胞仪检测1次，共测定8d，计算批问CV。选取2006年3月至2008年12月苏州大学附属第一医院85例ITP患者、17例NITP患者和50名健康对照者，利用流式微球技术检测4种血小板自身抗体SZ2、SZ22、SZ21、7E3的MFI，利用ROC曲线分析4种血小板自身抗体对诊断ITP的敏感度和特异度。同时采用MAIPA技术对4种血小板自身抗体进行检测，并与流式微球技术检测的敏感度进行比较。结果SZ2、SZ22、SZ21、7E3抗体阴性标本的批内CV分别为3．26％、2．86％、1．65％、4．94％，阳性标本的批内CV分别为6．16％、4．88％、5．20％、5．85％。SZ2、SZ22、SZ21、7E3抗体阴性标本的批问CV分别为5．86％、4．74％、5．69％、7．56％，阳性标本的批间CV分别为7．53％、5．49％、7．11％、6．25％。ITP组、NITP组和健康对照组SZ2抗体的MFI别为1．49（0．88～16．24）、1．12（1．00～1．33）、1．01（0．83～1．37），差异有统计学意义（H=36．89，P〈0．01），SZ22抗体的MFl分别为1．55（0．84—11．30）、1．13（1．00—1．29）、0．98（0．85～1．24），差异有统计学意义（H=28．41，P〈0．01），SZ21抗体的MFI分别为1．50（0．87～11．04）、1．13（0．97～1．32）、1．05（0．85—1．48），差异有统计学意义（日=54．42，P〈0．01），7E3抗体的MFI分别为1．51（0．84～9．81）、1．05（0．86～1．13）、1．03（0．74—1．28），差异有统计学意义（H=31．97，P〈0．01）。流式微球技术检测4种抗体SZ2[临界值（cut—off值）=1．37]、SZ22（cut—off值=1．24）、SZ21（cut—off值=1．48）和7E3（cut—off值=1．28）所对应的AUC分别为0．86、0．90、0．87和0．84，确定的敏感度分别为58．82％（50／85）、52．94％（45／85）、52．94％（45／85）、51．76％（44／85）。流式微球技术联合检测4种血小板特异性自身抗体对诊断ITP的敏感度为74．12％（63／85），高于改良间接MAIPA技术的50．59％（43／85），差异有统计学意义（X^2=6．78，P〈0．05）。结论流式微球技术可以同时进行4种自身抗体的联合检测，为ITP的临床诊断提供了一种新方法。

关键词：流式细胞术自身抗体糖蛋白血小板减少

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正常人外周血有核细胞膜表面G-CSFR的定量测定

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中国免疫学杂志 2011年第1期27卷 54-59页

作者：薛胜利戴兰乔曼陈艳邱桥成唐晓文吴德沛苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室苏州215006

目的:定量测定正常人外周血有核细胞膜表面G-CSFR的表达密度。方法:以荧光定量试剂盒作参照,利用荧光标记的抗G-CSFR单克隆抗体结合流式细胞技术测定22例健康人的外周血标本。结果:测定结果显示,中性粒细胞G-CSFR表达密度为(2 943±... 详细信息

目的:定量测定正常人外周血有核细胞膜表面G-CSFR的表达密度。方法:以荧光定量试剂盒作参照,利用荧光标记的抗G-CSFR单克隆抗体结合流式细胞技术测定22例健康人的外周血标本。结果:测定结果显示,中性粒细胞G-CSFR表达密度为(2 943±417)(antibodies bound per cell,ABC),单核细胞为(3 755±2 575)ABC,淋巴细胞为(996±369)ABC,CD3+T淋巴细胞为(2 787±946)ABC,CD19+B淋巴细胞为(10 112±6 345)ABC。中性粒细胞、单核细胞与T淋巴细胞间G-CSFR表达密度无统计学差异,淋巴细胞与其他细胞间及B淋巴细胞与其他细胞间G-CSFR表达密度存在统计学差异(P<0.05)。结论:研究描述了外周血有核细胞G-CSFR表达特点,将为今后同类研究提供参考。同时所用测定方法能够敏感、真实、客观地反映出各类细胞G-CSFR表达情况和规律,同传统的利用放免法相比,更为安全、便捷。

关键词：粒细胞集落刺激因子受体荧光分子定量检测外周血有核细胞

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四个遗传性凝血因子Ⅶ缺陷症家系的基因与表型分析

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中华血液学杂志 2011年第3期32卷 147-152页

作者：江明华王兆钺余自强白霞曹丽娟苏健孙雄华张威阮长耿苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室215006

目的研究4个遗传性凝血因子Ⅶ（FⅦ）缺陷症家系的临床表型及基因突变。方法用一期法测定先证者及其家系成员的凝血酶原时间（PT）及FⅦ活性（FⅦ：C），用双抗夹心ELISA测定血浆中FVH抗原（FⅦ：Ag），用PCR结合测序分析各家系成员的... 详细信息

目的研究4个遗传性凝血因子Ⅶ（FⅦ）缺陷症家系的临床表型及基因突变。方法用一期法测定先证者及其家系成员的凝血酶原时间（PT）及FⅦ活性（FⅦ：C），用双抗夹心ELISA测定血浆中FVH抗原（FⅦ：Ag），用PCR结合测序分析各家系成员的基因突变情况。结果各家系先证者PT明显延长，FⅦ：C与FⅦ：Ag明显降低。家系1先证者FⅦ基因为18041T→G纯合性突变，使未成熟FⅦ（ProFⅦ）的408位组氨酸（His）变为谷氨酸（Gln）（成熟蛋白的His348Gln）；家系2先证者FⅦ基因测序发现5078—5079CT双碱基的纯合性缺失，致使阅读框改变，在ProFⅦ的N端25位提前终止；家系3先证者FⅦ基因分析发现15975G→A与18093C→T双重杂合突变，前者为内含子6的3’端剪接位点突变（IVS6—1G→A），后者为无义突变，致使ProFⅦ蛋白的426位提前终止；家系4先证者FⅦ基因测序发现15975G→A与17908G→A双重杂合突变，后者使ProFⅦ364位Arg→Gln。结论在4个遗传性FⅦ缺陷症家系中发现His408Gln与5078—5079del CT两个纯合突变及IVS6—1G→A、Gln426stop与IVS6—1G→A、Arg364Gln两个双重杂合突变。其中His408Gln与5078—5079del CT为国内首次报道的纯合突变，IVS6—1G→A、Gln426stop为国际首次报道的突变。

关键词：凝血因子Ⅶ缺陷遗传性基因分析聚合酶链反应

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血栓出凝血疾病研究现状及展望

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中国实用内科杂志 2011年第3期31卷 161-163页

作者：阮长耿苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室苏州215006

出血与血栓性疾病是血液病学的重要研究方向之一,它不仅是血液病工作者的研究内容,还与很多非血液疾病,尤其是严重危害人类健康一些疾病密切相关,比如脑梗死、冠心病、心肌梗死等。文章就出血与血栓性疾病的发生机制以及今年来在诊疗方... 详细信息

出血与血栓性疾病是血液病学的重要研究方向之一,它不仅是血液病工作者的研究内容,还与很多非血液疾病,尤其是严重危害人类健康一些疾病密切相关,比如脑梗死、冠心病、心肌梗死等。文章就出血与血栓性疾病的发生机制以及今年来在诊疗方面有所进展的相关疾病,如动、静脉血栓症、遗传性出血性疾病、抗栓新药的研制等作一评述。

关键词：出血性疾病血栓性疾病抗栓药物

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植物固醇血症相关的巨大血小板伴血小板减少与溶血性贫血

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中华血液学杂志 2011年第9期32卷 635-637页

作者：王兆钺苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室215006

植物固醇血症（Phytosterolemia或sitosterolemia）是一种常染色体隐性遗传性代谢疾病，1974年由Bhattacharyya首次报道；患者的主要临床表现为肌腱与皮下出现多个黄褐瘤、动脉粥样硬化、早发性冠心病与关节炎等，并可导致早期死亡。

关键词：植物固醇溶血性贫血血小板减少巨大血小板血症遗传性代谢疾病常染色体隐性动脉粥样硬化

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