检索结果-内蒙古大学图书馆

苏州大学学报（医学版） 2011年第6期31卷 874-878页

作者：王菲菲赵益明江淼姚拾秀李雪美阮长耿苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的以能与vWF-A3区特异结合的单克隆抗体SZ-123为模板,构建其单链抗体,为深入研究vWF-A3结构与功能的关系提供有力的工具。方法通过逆转录及多聚酶链反应,扩增并克隆单抗SZ-123的可变区基因VH、VL,经测序后加入连接肽,构建成SZ-123单... 详细信息

目的以能与vWF-A3区特异结合的单克隆抗体SZ-123为模板,构建其单链抗体,为深入研究vWF-A3结构与功能的关系提供有力的工具。方法通过逆转录及多聚酶链反应,扩增并克隆单抗SZ-123的可变区基因VH、VL,经测序后加入连接肽,构建成SZ-123单链抗体(SZ-123 ScFV),并在大肠杆菌中进行表达。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western blot方法验证SZ-123 ScFV的免疫原性。结果 VH、VL可变区基因符合小鼠抗体可变区特征,SZ-123 ScFV基因拼接正确。表达产物除少量为分泌型外,主要以包涵体形式存在,表达量占菌体蛋白的20%。经过变性和复性后,获得具有生物活性的高纯度单链抗体片段。结论成功表达了SZ-123单链抗体,该小分子抗体具有特异结合vWF-A3区的能力。

关键词： vWF-A3区单链抗体(ScFv) 原核表达

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雷帕霉素治疗伊马替尼耐药的难治性慢性髓系白血病急髓变

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中华血液学杂志 2011年第8期32卷 553-554页

作者：谢静张翔方宝枝何广胜赵昀吴德沛苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室 215006 苏州大学唐仲英血液学研究中心

伊马替尼是治疗慢性髓系白血病（CML）有效的药物，但其耐药性的产生以及微量残留病的存在严重影响了伊马替尼的疗效。耐药性的产生与几种不同的机制有关。

关键词：慢性髓系白血病伊马替尼耐药性雷帕霉素治疗难治性微量残留病

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双色荧光原位杂交技术检测B系急性淋巴细胞白血病IgH基因重排

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苏州大学学报（医学版） 2011年第6期31卷 946-949,971页

作者：董莎莎仇惠英陈苏宁王谦吴丽丽潘金兰吴亚芳张俊苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的研究急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)中免疫球蛋白重链基因(IgH)重排的发生率,并分析其临床特点及其他细胞遗传学特征。方法选取158例初诊B-ALL患者的骨髓标本,应用短期培养法制备染色体悬液,采用R显带技术进行核型分析。选用位于14q32 ... 详细信息

目的研究急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)中免疫球蛋白重链基因(IgH)重排的发生率,并分析其临床特点及其他细胞遗传学特征。方法选取158例初诊B-ALL患者的骨髓标本,应用短期培养法制备染色体悬液,采用R显带技术进行核型分析。选用位于14q32 IgH基因两端的序列特异性探针,应用荧光原位杂交技术(FISH)对158例患者的染色体悬液进行IgH基因重排检测。结果 158例中,检出IgH基因重排阳性11例(6.9%),其阳性细胞比例为10.5%～88.2%。结合染色体核型分析发现,11例中同时伴随染色体核型异常的有9例,其中8例为复杂异常。9例染色体异常病例中明确累及14q32的有5例。不同染色体核型异常患者IgH基因重排阳性率差异有统计学意义(P<0.05),其中染色体复杂异常患者IgH基因重排阳性率(14.5%)高于正常核型(3.8%)及非复杂异常(1.9%)。而不同性别、年龄及不同白细胞、血红蛋白、血小板水平患者IgH基因重排阳性率差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 IgH基因重排在B-ALL中有较高的发生率。FISH技术以其较高的敏感性和特异性对提高IgH基因重排的检出率起着重要的作用。

关键词：白血病淋巴细胞性 IgH基因重排荧光原位杂交

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血管性血友病因子vWF73和vWF114片段的表达及其在ADAMTS13活性测定中的应用

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中华血液学杂志 2011年第5期32卷 337-341页

作者：张敬宇马珍妮董宁征胡璐萍苏健王兆钺阮长耿苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室215006 河北医科大学第二医院血液科 050000

目的构建血管性血友病因子（vWF）A2区片段vWF73和vWF114的表达质粒，在大肠杆菌中表达两种谷胱甘肽S转移酶（GST）融合蛋白，并探讨两种蛋白作为底物在测定ADAMTS13活性中的应用价值。方法应用PCR的方法扩增vWFA2区内vWF73和vWF114的相... 详细信息

目的构建血管性血友病因子（vWF）A2区片段vWF73和vWF114的表达质粒，在大肠杆菌中表达两种谷胱甘肽S转移酶（GST）融合蛋白，并探讨两种蛋白作为底物在测定ADAMTS13活性中的应用价值。方法应用PCR的方法扩增vWFA2区内vWF73和vWF114的相应DNA片段，分别克隆至GST融合表达载体pGEX-6P-1进行诱导表达，Ni—NTA琼脂糖柱纯化可溶性蛋白部分。以Western blot法检测正常人血浆、血栓性血小板减少性紫癜（TTP）患者血浆和重组ADAMTS13（rADAMTS13）水解两种重组vWFA2区片段的情况，并以此为底物用抗GST和抗His两种抗体建立酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定血浆ADAMTS13活性的新方法。结果成功表达和纯化了ADAMTS13的两种可溶性小分子底物GST—vWF73-H和GST—vWF114-H，均能被rADAMTS13或正常人血浆有效地水解，而遗传性和特发性ttP患者血浆则无此作用。同时，以此为底物建立了测定ADAMTS13活性的ELISA方法。结论采用原核表达系统成功得到了vWFA2区片段vWF73和vWF114两种GST融合蛋白，可作为底物用于ADAMTS13活性的测定。

关键词：血管性血友病因子融合蛋白血管性血友病因子裂解酶紫癜,血栓性血小板减少性

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TNF-α及CTLA-4基因多态性与中国汉族血友病A患者血浆凝血因子Ⅷ抑制物发生的相关性研究

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中华血液学杂志 2011年第3期32卷 168-172页

作者：张露璐余自强张威曹丽娟苏健白霞阮长耿苏州大学附属第一人民医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室215006

目的探讨中国汉族血友病A（HA）患者肿瘤坏死因子d（TNF-α）-308基因多态性及细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4）-318基因多态性与凝血因子Ⅷ（FⅧ）抑制物的相关性。方法采用聚合酶链反应结合限制性内切酶片段长度多态性（PCR—RFL... 详细信息

目的探讨中国汉族血友病A（HA）患者肿瘤坏死因子d（TNF-α）-308基因多态性及细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4）-318基因多态性与凝血因子Ⅷ（FⅧ）抑制物的相关性。方法采用聚合酶链反应结合限制性内切酶片段长度多态性（PCR—RFLP），对140例经过FⅧ替代治疗的HA患者和108名正常对照者的TNF-α及CTLA4基因的单碱基多态性进行检测。所有HA患者样本均应用改良的Nijmegen方法检测FⅧ抑制物活性。结果在HA患者中，TNF-α-308G／G基因型118例（84．3％），G／A基因型18例（12．8％），A／A基因型4例（2．9％）；CTLA-4—318C／C基因型108例（77．2％），C／T基因型30例（21．4％），T／T基因型2例（1．4％）。TNF-α-308、CTLA-4—318等位基因频率在HA病例组与正常对照组间差异均无统计学意义（P〉0．05），关联分析显示携带TNF-α-308A等位基因HA患者发生FⅧ抑制物的风险是非A等位基因携带患者的7．519倍（OR=7．519，95％CI=3．168～17．844）；而携带TNF-α-308A等位基因重型HA患者发生FⅧ抑制物的风险是非A等位基因携带重型患者的8．163倍（OR=8．163，95％CI=2．521～26．434）。携带CTLA-4—318T等位基因血友病A患者发生FⅧ抑制物的风险与非T等位基因携带患者的差异无统计学意义（OR=1．586，95％CI=0．729～3．450）。结论TNF—α-308基因多态性与中国汉族人群重型HA患者发生FⅧ抑制物具有相关性，该基因可能为HA患者替代治疗产生抑制物的调节基因之一。

关键词：血友病A 凝血FⅧ抑制物 TNF-α CTLA4 基因多态性

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苏州大学学报（医学版） 2011年第4期31卷 624-627页

作者：王秀丽何广胜傅铮铮唐晓文仇惠英孙爱宁吴德沛苏州大学附属第一医院血液科江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的通过报道首例肝炎相关性重型再生障碍性贫血(HAAA)强化免疫抑制治疗(IST)后发生淋巴瘤及肺癌病例,结合文献复习,增强对HAAA病因、诊断及治疗的了解,并提高重型再生障碍性贫血(SAA)患者IST治疗后并发多重恶性肿瘤的认识。方法针对该... 详细信息

目的通过报道首例肝炎相关性重型再生障碍性贫血(HAAA)强化免疫抑制治疗(IST)后发生淋巴瘤及肺癌病例,结合文献复习,增强对HAAA病因、诊断及治疗的了解,并提高重型再生障碍性贫血(SAA)患者IST治疗后并发多重恶性肿瘤的认识。方法针对该例患者进行了病例分析及相关文献复习。结果患者在发生暴发性黄疸后出现急性再生障碍性贫血,以环孢菌素+抗人T淋巴细胞球蛋白(ATG)强化免疫抑制及抗肝炎病毒治疗后4个月发生弥漫大B细胞型淋巴瘤,虽经美罗华+COP方案化疗,迅速进展为骨髓浸润,并出现肺低分化腺癌。最终在患病10个月后因血象极其低下无法行化疗及无法控制的重症感染而死亡。结论对HAAA患者除治疗SAA外,还应积极抗肝炎病毒治疗;SAA患者经IST后除可并发淋巴细胞增殖性疾病外,还可能并发其他恶性疾病,是SAA免疫抑制治疗的一种严重并发症,应引起高度警惕。

关键词：重型再生障碍性贫血病毒性肝炎淋巴瘤肺癌

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地西他滨联合抗CD33单抗治疗难治性急性髓细胞性白血病(附2例报告)

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苏州大学学报（医学版） 2011年第2期31卷 272-275页

作者：唐晓文魏孝艾孙爱宁陈峰胡晓慧颜灵芝韩悦顾斌沈文红吴德沛苏州大学附属第一医院血液科江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的探讨地西他滨(DAC)联合抗CD33单抗(GO)治疗难治性急性髓细胞性白血病(AML)的疗效和安全性。方法对2例难治性AML(M4)患者均进行1个疗程的DAC联合GO治疗(具体剂量为DAC:20 mg.m-2.d-1×5 d,第1～5天,GO 9 mg/m2,第6天),应用骨髓... 详细信息

目的探讨地西他滨(DAC)联合抗CD33单抗(GO)治疗难治性急性髓细胞性白血病(AML)的疗效和安全性。方法对2例难治性AML(M4)患者均进行1个疗程的DAC联合GO治疗(具体剂量为DAC:20 mg.m-2.d-1×5 d,第1～5天,GO 9 mg/m2,第6天),应用骨髓涂片、定期监测血常规评价其疗效。结果经过1个疗程的DAC联合GO治疗后,1例患者未出现疾病进展,骨髓中原幼细胞由35%降至27.5%,巨核细胞由2个/片增加至(200个/片,血小板由减少改善为数量基本正常,临床上血小板恢复正常水平,一般情况良好。另1例在治疗期间高白细胞得以控制,治疗后第15天复查骨髓提示原幼细胞由38.5%降至12.5%,获得部分缓解。2例患者均未出现肝静脉闭塞病(VOD)及其他脏器功能损害表现。结论 DAC联合GO治疗难治性AML安全可行,尤其是对于一般情况差、不能耐受高剂量化疗或高剂量挽救化疗失败的患者,不失为一种新的治疗选择。

关键词：地西他滨抗CD33单抗难治性急性髓细胞性白血病

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vWF/ADAMTS13在慢性肾脏病中的临床意义

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江苏医药 2011年第13期37卷 1535-1537页

作者：沈蕾卢国元蒋丽琼马珍妮汪安友董宁征阮长耿苏州大学附属第一医院肾脏病科 215006 江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室

目的探讨血管性血友病因子(vWF)及其裂解蛋白酶(ADAMTS13)在慢性肾脏病中的临床意义。方法选取慢性肾脏病患者47例为实验组(A组),其中原发性肾小球疾病(A1组)24例,狼疮性肾炎(A2组)23例;另设体检健康成人30例为正常对照组(B组)。A1组患... 详细信息

目的探讨血管性血友病因子(vWF)及其裂解蛋白酶(ADAMTS13)在慢性肾脏病中的临床意义。方法选取慢性肾脏病患者47例为实验组(A组),其中原发性肾小球疾病(A1组)24例,狼疮性肾炎(A2组)23例;另设体检健康成人30例为正常对照组(B组)。A1组患者均行肾活检,其中非膜性肾病15例(C1组),膜性肾病9例(C2组)。ELISA法、FRETS-vWF73法分别检测血浆中vWF含量、ADAMTS13活性,免疫组化法检测vWF和ADAMTS13在肾脏的表达。结果与B组相比,A1、A2组血浆中ADAMTS13活性降低,而vWF浓度升高(P<0.01);A组患者血浆vWF/ADAMTS13与24-h尿蛋白定量呈正相关(r=0.477,P<0.01);C2组ADAMTS13的表达明显低于C1组(P<0.05)。结论血浆中vWF与ADAMTS13的平衡失调可能与慢性肾脏病的临床和病理类型有关。

关键词：血管性血友病因子血管性血友病因子裂解蛋白酶慢性肾脏病

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慢性肾脏病患者肾脏vWF和ADAMTS13表达改变及其意义

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苏州大学学报（医学版） 2011年第3期31卷 451-453,485页

作者：沈蕾卢国元蒋丽琼董宁征乔青李明阮长耿苏州大学附属第一医院肾内科江苏苏州215006 苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的观察血管性血友病因子(vWF)及其裂解酶ADAMTS13在慢性肾脏病不同病理类型中的表达以及与临床指标的相关性。方法采用免疫组织化学分析vWF和ADAMTS13在36例不同病理类型慢性肾炎患者肾脏中的表达,Image J图象分析软件测定vWF和ADAMT... 详细信息

目的观察血管性血友病因子(vWF)及其裂解酶ADAMTS13在慢性肾脏病不同病理类型中的表达以及与临床指标的相关性。方法采用免疫组织化学分析vWF和ADAMTS13在36例不同病理类型慢性肾炎患者肾脏中的表达,Image J图象分析软件测定vWF和ADAMTS13的阳性染色面积的比例。结果 (1)肾病综合征患者肾小球阳性染色面积vWF/ADAMTS13明显高于慢性肾炎组(P<0.05);(2)膜性肾病组ADAMTS13表达明显低于非膜性肾病组(P<0.05);(3)vWF/ADAMTS13阳性染色面积比与蛋白尿呈正相关(r=0.512,P<0.01)。结论慢性肾脏病局部vWF和ADAMTS13表达间平衡失调与慢性肾脏病的临床和病理类型有关,能在一定程度上反映肾脏微循环的变化。

关键词：血管性血友病因子 ADAMTS13 免疫组化慢性肾脏病

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动脉粥样硬化血栓形成中的血小板突触分子

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中国动脉硬化杂志 2011年第3期19卷 169-175页

作者：朱力苏州大学唐仲英血液学研究中心苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室苏州市215400

动脉粥样硬化血栓性疾病的特征是动脉粥样硬化脂质斑块的破裂和血栓形成,血小板活化和聚集对这一疾病的病理生理和临床表现起重要作用。血栓形成过程中血小板之间也形成类似神经突触或免疫突触的突触性结构,即血小板突触(p latelet syna... 详细信息

动脉粥样硬化血栓性疾病的特征是动脉粥样硬化脂质斑块的破裂和血栓形成,血小板活化和聚集对这一疾病的病理生理和临床表现起重要作用。血栓形成过程中血小板之间也形成类似神经突触或免疫突触的突触性结构,即血小板突触(p latelet synapse),在此微环境中进行着血小板间的信号传递,称为血小板接触依赖性事件(contact-dependent events),对动脉血栓的形成和稳定起重要作用。在参与这一过程的血小板突触分子中,轴突导向分子(如Ephrins和Sem aphorins)开始引起人们的关注。除轴突生长导向作用外,轴突导向分子已证明在免疫应答、肿瘤转移、血管新生、血栓形成等病理生理过程中发挥作用。更为重要的是其中某些分子(如Sem a4D)的敲除可降低血脂异常状态下的血小板的高反应性,延缓动脉粥样硬化斑块的发展。本文将回顾近十年来对此类分子在动脉粥样硬化血栓形成中作用机制的研究进展。

关键词：血小板动脉粥样硬化血栓形成轴突导向分子接触依赖性事件

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