检索结果-内蒙古大学图书馆

中华血液学杂志 2018年第7期39卷 558-562页

作者：蒋淑慧侯畅陈楠陈思帆仇惠英徐杨陈苏宁吴德沛苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所、卫生部血栓与止血实验室、血液学协同创新中心、苏州大学造血干细胞移植研究所 215006

目的研究混合谱系白血病（MLL）基因重排阳性急性髓系白血病（AML）患者行异基因造血十细胞移植（allo—HSCT）的预后特点。方法回顾性分析2009年9月至2016年5月于苏州大学附属第一医院行allo-HSCT的47例MLL基因重排阳性AML患者的临床... 详细信息

目的研究混合谱系白血病（MLL）基因重排阳性急性髓系白血病（AML）患者行异基因造血十细胞移植（allo—HSCT）的预后特点。方法回顾性分析2009年9月至2016年5月于苏州大学附属第一医院行allo-HSCT的47例MLL基因重排阳性AML患者的临床资料。结果全部47例MLL重排阳性AML患者中男24例，女23例，中位年龄30（15-58）岁，M4／M5共36例（76．6％）。移植后2年总生存（OS）率为（64．4±8．4）％，无病生存（DFS）率为（47．3±9．3）％，复发率为41．0％，移植相关死亡率为17．9％。45例患者检出11q23易位，2例染色体核型正常患者检mMLL部分串联重复。t（6：11）组（16例）、t（9；11）组（15例）、其他类型组（16例）的2年OS率差异无统计学意义（χ^2=1．509，P=0．472）。多因素分析显示，移植时年龄〉45岁是影响OS的独立危险冈素[HR=4．454（95％CI1．314-15．099），P=0．016]，移植前MRD阳性是影响患者DFS[HR=4．236（95％CI1．238-14．495），P=0．021]、复发[HR=5．491（95％C11．371-21．995），P=0．016]的独立不良预后因素，移植前疾病处于非CR状态患者移植相关死亡风险增高[HR=10．370（95％CI1．043—103．110），P=0．046]。结论移植时年龄〉45岁、移植前疾病处于非CR状态、移植前MRD阳性为影响allo—HSCT治疗MLL基因重排阳性AML患者预后的危险因素。

关键词：白血病,髓样,急性混合谱系白血病异基因造血干细胞移植预后

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C57BL/6J小鼠黑色素瘤肺转移模型的构建

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中国实验动物学报 2018年第2期26卷 139-144页

作者：孟星君李孝东刘俊周康熙崔庆亚胡仁萍闫荣戴克胜苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心江苏苏州215006

目的探讨建立C57BL/6 J小鼠黑色素瘤肺转移模型的影响因素,包括肿瘤的接种方式、细胞接种数量和成瘤周期。方法体外培养小鼠黑色素瘤细胞B16F10。1)取6~8周龄,雄性小鼠18只,随机分三组,每组6只,分别采取尾静脉注射、腹腔注射和皮下注射... 详细信息

目的探讨建立C57BL/6 J小鼠黑色素瘤肺转移模型的影响因素,包括肿瘤的接种方式、细胞接种数量和成瘤周期。方法体外培养小鼠黑色素瘤细胞B16F10。1)取6~8周龄,雄性小鼠18只,随机分三组,每组6只,分别采取尾静脉注射、腹腔注射和皮下注射方式,每只小鼠注射100μL(3×10~6个细胞)B16F10细胞悬液,2周后,解剖小鼠并观察黑色素瘤的生长和转移情况;2)分3组,同上,经尾静脉分别注射3×10~6个细胞、1×10~6个细胞、3×10~5个细胞,2周后,解剖小鼠并观察黑色素瘤的生长和转移情况;3)分3组,同上,尾静脉注射1×10~6个细胞,分别于1周、2周、3周解剖小鼠,观察黑色素瘤的生长和转移情况。结果 1)尾静脉注射小鼠黑色素瘤细胞,小鼠发生肺转移的成功率为100%,而腹腔注射和皮下注射未发生肺转移。2)接种小鼠黑色素瘤细胞数量为1×10~6时,发生肺部转移的黑色素瘤细胞数量适中;接种细胞数量为3×10~6时,发生肺部转移的黑色素瘤细胞数量过多;接种细胞数量为3×10~5时,发生肺部转移的黑色素瘤细胞数量较少。3)尾静脉注射1×10~6个小鼠黑色素瘤细胞,饲养2周后,可以观察到黑色素瘤细胞明显的肺部转移,且不会导致小鼠死亡;饲养3周,黑色素瘤细胞肺部转移数量过多,且小鼠死亡过半;饲养1周,黑色素瘤细胞肺部转移数量较少。结论经尾静脉注射1×10~6个小鼠黑色素瘤细胞,生长2周时间,为构建C57BL/6 J小鼠黑色素瘤肺转移模型的推荐方法。

关键词： C57BL/6 J小鼠小鼠黑色素瘤细胞B16F10 肺转移肿瘤模型

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人外周血来源的过度生长内皮细胞的分离、培养及鉴定

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中国实验血液学杂志 2014年第6期22卷 1711-1715页

作者：殷杰马珍妮赵小娟阮长耿苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所、卫生部血栓与止血重点实验室、血液学协同创新中心江苏苏州215006 江苏省苏北人民医院血液科江苏扬州225006

与内皮干细胞相比,外周血来源的过度生长内皮细胞(blood outgrowth endothelial cells,BOECs)富含血管新生和细胞黏附所需的蛋白,生物学特性更像内皮细胞;同时它克服了成熟的人脐血内皮细胞体外培养扩增量少和表型易发生改变的缺点,成... 详细信息

与内皮干细胞相比,外周血来源的过度生长内皮细胞(blood outgrowth endothelial cells,BOECs)富含血管新生和细胞黏附所需的蛋白,生物学特性更像内皮细胞;同时它克服了成熟的人脐血内皮细胞体外培养扩增量少和表型易发生改变的缺点,成为一种研究血管异常相关性疾病的新工具。本研究旨在建立从人外周血中体外培养、扩增BOECs,并进行鉴定的方法。采集外周血,梯度离心获得单个核细胞,接种于胶原铺板的细胞培养皿上,EGM-2培养4周。观察BOECs的形态学特征,流式细胞术分析细胞表面抗原表达。血管性血友病因子(von Willebrand factor,v WF)多聚体分析BOECs上清v WF多聚体分布,荧光共聚焦显微镜鉴定细胞内v WF的贮存及v WF的刺激分泌。结果表明,体外诱导培养4周左右,出现克隆性生长的细胞集落,BOECs呈现"铺路石"样外观。经过3周左右的扩增后,过度生长的内皮细胞表达CD31、CD34、EPCR阳性,CD14、CD45、CD133阴性。收集BOECs上清,进行v WF多聚体分析,与正常血浆相比v WF多聚体分布无差异。在荧光共聚焦显微镜下观察,BOECs内贮存v WF,加入佛波酯(phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)刺激后,细胞内v WF增加,细胞表面可见v WF丝状结构。结论:本研究运用该实验方法在国内首次实现了人BOECs的体外培养、扩增及鉴定。该方法可以为血管性血友病病人发病机制的探讨提供天然的细胞模型,并可能为病人基因治疗提供新工具。

关键词：外周血过度生长内皮细胞细胞表型血管性血友病因子

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血小板铺展的主要影响因素

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中国实验血液学杂志 2022年第3期30卷 919-923页

作者：袁柳霞叶红磊杨梦楠葛鑫鑫闫荣戴克胜苏州大学医学部江苏省血液研究所苏州大学第一附属医院卫生部血栓与止血重点实验室放射医学与防护国家重点实验室血液学协同创新中心江苏苏州215006

目的:探索血小板铺展的主要影响因素,为相关疾病研究奠定基础。方法:体外分离C57BL/6J小鼠的血小板(2×10^(7)/ml),室温静置1-2 h后,将血小板样本均匀的铺在纤维蛋白原包被的载玻片上,利用鬼笔环肽标记骨架蛋白F-actin,封片后通过... 详细信息

目的:探索血小板铺展的主要影响因素,为相关疾病研究奠定基础。方法:体外分离C57BL/6J小鼠的血小板(2×10^(7)/ml),室温静置1-2 h后,将血小板样本均匀的铺在纤维蛋白原包被的载玻片上,利用鬼笔环肽标记骨架蛋白F-actin,封片后通过荧光共聚焦显微镜观察血小板铺展状态,分析不同浓度的纤维蛋白原和激动剂等因素对血小板铺展的影响。实验中纤维蛋白原浓度为10、30和100μg/ml,激动剂为凝血酶(0.01、0.05和0.1 U/ml)、ADP(5、10和20μmol/L)和U46619(0.125、0.25和0.5μmol/L)。若激动剂处理后的血小板呈树突状并且铺展率较高,则说明血小板铺展的方法构建成功。结果:与10和100μg/ml的纤维蛋白原组相比,在包被了30μg/ml纤维蛋白原的载玻片上粘附的血小板数目最优;另外,在凝血酶、ADP和U46619的刺激下,血小板铺展与刺激剂浓度呈正相关(ADP:r=0.925,U46619:r=0.937)。结论:血小板的铺展受到很多因素的影响,30μg/ml的纤维蛋白原、0.1 U/ml的凝血酶、20μmol/L的ADP和0.5μmol/L的U46619可成功诱导2×10^(7)/ml血小板的铺展。

关键词：粘附纤维蛋白原整合素铺展

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蛋白激酶A活化对血小板聚集功能的影响

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中国实验血液学杂志 2020年第3期28卷 899-903页

作者：江梦枭刘俊周康熙叶红磊胡仁萍闫荣阮长耿戴克胜苏州大学医学部江苏省血液学研究所、苏州大学第一附属医院血液学协同创新中心放射医学与防护国家重点实验室卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的:研究蛋白激酶A(Protein kinase A,PKA)对体外血小板聚集功能的影响。方法:收集健康成年人外周血并获取洗涤血小板;采用PKA活化剂Forskolin体外处理洗涤血小板;利用瑞斯托霉素(Ristocetin),凝血酶(Thrombin),胶原(Collagen),二磷酸... 详细信息

目的:研究蛋白激酶A(Protein kinase A,PKA)对体外血小板聚集功能的影响。方法:收集健康成年人外周血并获取洗涤血小板;采用PKA活化剂Forskolin体外处理洗涤血小板;利用瑞斯托霉素(Ristocetin),凝血酶(Thrombin),胶原(Collagen),二磷酸腺苷(ADP)诱导血小板聚集,利用血小板聚集仪检测血小板聚集情况。结果:与对照组相比较,5μmol/L的Forskolin可显著抑制ADP和Collagen诱导的血小板聚集(P<0.001);对Thrombin诱导的血小板聚集也具有一定抑制作用(P<0.05)。而2.5-10μmol/L的Forskolin对Ristocetin诱导的血小板聚集无明显抑制作用(P>0.05);对ADP和Collagen诱导的血小板聚集也具有显著抑制作用(P<0.001)。结论:蛋白激酶A活化能抑制血小板的聚集功能。

关键词：血小板聚集蛋白激酶A 诱导剂

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非去T细胞半相合造血干细胞移植术后植入失败的初步分析

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实用医学杂志 2016年第20期32卷 3401-3404页

作者：顾斌陈广华马骁傅琤琤韩悦唐晓文金正明苗瞄仇惠英孙爱宁吴德沛苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心215006

目的:总结非去T细胞半相合造血干细胞移植术(HCT)后植入失败的临床特征,并探讨其原因与治疗方案。方法:回顾性分析2012年1月至2013年12月期间我院实施非去T细胞半相合HCT的174例患者,移植前监测患者外周血供体特异性HLA抗体(DSA),阳性... 详细信息

目的:总结非去T细胞半相合造血干细胞移植术(HCT)后植入失败的临床特征,并探讨其原因与治疗方案。方法:回顾性分析2012年1月至2013年12月期间我院实施非去T细胞半相合HCT的174例患者,移植前监测患者外周血供体特异性HLA抗体(DSA),阳性者给予丙种球蛋白或血浆置换。结果:3例急性髓细胞白血病患者发生植入失败,发生率为1.72%。1例原发性植入失败给予同胞半相合二次HCT后仍未植入,白血病未复发,但血象三系持续低下,二次移植后8月死于肺部感染。2例继发性植入失败,一例给予粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员的供体外周血单个核细胞(PBMNC)输注后16 d获得完全植入,至今无病存活30个月;另一例发生植入失败前监测到DSA阳性,平均荧光强度(MFI)值15 000,给予美罗华后MFI转阴,并输注G-CSF动员的供体PBMNC,输注后14d获得再次完全植入,至今无病存活41个月。结论:植入失败是非去T细胞半相合HCT少见却致命的并发症,美罗华后输注供体PBMNC是治疗DSA相关性植入失败的有效措施,值得进一步研究。

关键词：非去T细胞半相合造血干细胞移植植入失败

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不同浓度PKA抑制剂对血小板凋亡的诱导作用及机制

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中国实验血液学杂志 2020年第5期28卷 1694-1698页

作者：张素勤赵丽丽成斌戴克胜苏州大学医学部江苏省血液学研究所、苏州大学第一附属医院血液学协同创新中心放射医学与防护国家重点实验室卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的:探讨不同浓度PKA抑制剂H89对血小板凋亡的诱导作用和机制。方法:取健康志愿者外周静脉血分离血小板,选择不同浓度梯度的PKA抑制剂H89与经洗涤的血小板共同孵育,应用酶联免疫吸附试验、流式细胞术等检测不同浓度PKA抑制剂H89对血小... 详细信息

目的:探讨不同浓度PKA抑制剂H89对血小板凋亡的诱导作用和机制。方法:取健康志愿者外周静脉血分离血小板,选择不同浓度梯度的PKA抑制剂H89与经洗涤的血小板共同孵育,应用酶联免疫吸附试验、流式细胞术等检测不同浓度PKA抑制剂H89对血小板线粒体膜电位(Mitochondrial membrane potential,Δψm)、磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)和活性氧(Reactive oxygen species,ROS)的影响。结果:不同浓度PKA抑制剂H89均能诱导血小板发生Δψm去极化和PS暴露,但高浓度(100μmol/L)PKA抑制剂H89可诱导血小板产生ROS,而中低浓度则不会诱导血小板内ROS的产生,并且多种ROS抑制剂均可抑制高浓度H89诱导的凋亡。结论:高浓度的PKA抑制剂H89能诱导血小板凋亡,但是作用机制不同于中低浓度。

关键词：血小板凋亡活性氧

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基因突变检测在骨髓增生异常综合征诊疗中的应用

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天津医药 2018年第8期46卷 808-810页

作者：陈苏宁喻艳苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心215006

骨髓增生异常综合征(MDS)是一种由遗传学异常驱动的克隆性造血干细胞或祖细胞性疾病,通常表现为全血细胞减少、病态造血及向白血病转化的高风险。细胞形态学和细胞遗传学异常是目前确立MDS诊断的主要参数。近年来,随着基因测序技术,尤... 详细信息

骨髓增生异常综合征(MDS)是一种由遗传学异常驱动的克隆性造血干细胞或祖细胞性疾病,通常表现为全血细胞减少、病态造血及向白血病转化的高风险。细胞形态学和细胞遗传学异常是目前确立MDS诊断的主要参数。近年来,随着基因测序技术,尤其是二代测序技术的快速发展和广泛应用,大多数MDS患者可检出基因突变。本文就基因突变在MDS诊断、分型、危险度分层和治疗中的应用作一评述。

关键词：骨髓增生异常综合征二代测序克隆性造血基因突变

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采用全自动标准化方法检测正常人血浆VWF水平及其影响因素分析

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中华血液学杂志 2017年第2期38卷 146-152页

作者：张平余自强张晓辉张威白霞曹丽娟苏健沙萍萍王兆钺阮长耿苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心215006 北京大学人民医院北京大学血液病研究所

目的采用全自动标准化方法检测正常人血管性血友病因子（vwF）各指标并分析其影响因素。方法采用全自动、标准化检测仪及配套试剂测定70名正常人vwF抗原（vwF：Ag）、vwF瑞斯托霉素辅因子活性（vwF：Rco）、vwF胶原结合试验（vwF：CB）... 详细信息

目的采用全自动标准化方法检测正常人血管性血友病因子（vwF）各指标并分析其影响因素。方法采用全自动、标准化检测仪及配套试剂测定70名正常人vwF抗原（vwF：Ag）、vwF瑞斯托霉素辅因子活性（vwF：Rco）、vwF胶原结合试验（vwF：CB）、凝血因子FⅧ活性（FⅧ：C），比较年龄、ABO血型、性别及地域因素对正常人vwF各指标的影响。对英国国家生物标准与检定所（NIBSC）确认的8个标准血浆样本（2名正常人、6例2型VWD）进行vwF各项指标检测。结果①70名正常人血浆vwF：Ag为（95．4±544．9）％，VWF：Rco为（105．9±35．4）％，vwF：CB为（89．8±28．4）％；vwF：RcoNWF：Ag比值为1．18±0．25，VwF：CB／VWF：Ag比值为1．034-0．29。②年龄≥30岁组与〈30岁组比较，血浆vwF各指标差异均无统计学意义（P〉0．05）。③O型血组VWF：Rco、VWF：CB低于非O型血组（t=-2．074，P=0．042；t=-3．949，P=0．001），VWF：Ag、VWF：RcoNWF：Ag、VWF：CB／VWF：Ag比值差异无统计学意义（P〉0．05）。④男、女性组vwF各指标差异无统计学意义（P〉0．05）。⑤北方（淮河以北地区）组VWF：Ag、VWF：CB高于南方（苏州地区）组（t=-4．525，P=-0．001；t=-3．214，P=0．002），VWF：Rco／VWF：Ag、VWF：CB／VWF：Ag比值低于南方组（t=-6．373，P=0．001；t=2．902，P=0．005），VWF：Rco差异无统计学意义（t=1．598，P〉0．115）。⑥8个标准血浆样本各项vwF指标检测结果符合已知诊断。结论通过使用全自动标准化检测设备首次获得较完整的正常人血浆vwF水平检测数据；ABO血型和地域因素对VWF水平有显著影响，而年龄和性别的影响不显著。

关键词： von Willebrand因子血管性血友病 ABO血型系统性别因素参考值

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活性氧对血小板活化和凋亡的调控作用

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中国实验血液学杂志 2024年第5期32卷 1503-1508页

作者：杨标赵丽丽杜佳豪闫妍戴克胜苏州大学苏州医学院江苏省血液研究所苏州大学附属第一医院卫生部血栓与止血重点实验室放射医学与防护国家重点实验室血液学协同创新中心江苏苏州215006

目的:探讨活性氧(ROS)如何调控血小板活化和凋亡信号转导,并探明血小板活化和凋亡之间的关系。方法:通过凝血酶直接刺激血小板或用ROS抑制剂NAC预处理血小板后再加入凝血酶刺激血小板,使用流式细胞仪检测凝血酶和NAC对血小板P-selectin... 详细信息

目的:探讨活性氧(ROS)如何调控血小板活化和凋亡信号转导,并探明血小板活化和凋亡之间的关系。方法:通过凝血酶直接刺激血小板或用ROS抑制剂NAC预处理血小板后再加入凝血酶刺激血小板,使用流式细胞仪检测凝血酶和NAC对血小板P-selectin表达、αⅡbβ3活化、线粒体膜电位去极化、PS外翻、ROS表达水平和血小板聚集功能的影响。结果:凝血酶能够诱导血小板内ROS产生,并呈浓度和时间依赖性。0.01 U凝血酶会诱导血小板出现ROS依赖性的高程度的整合素αⅡbβ3活化、P-selectin表达和血小板聚集。用不同浓度梯度的凝血酶诱导血小板,均会出现ROS依赖性的线粒体膜电位去极化变化和PS外翻。血小板受凝血酶诱导30 min后整合素αⅡbβ3活化达到最大值,60 min后血小板内线粒体膜电位去极化达到最大值。而经ROS抑制剂NAC预处理后再加入凝血酶进行诱导,血小板P-selectin表达、线粒体膜电位去极化、血小板聚集功能均会受到一定程度的抑制。结论:凝血酶诱导血小板时,ROS先调控血小板发生活化,而后调控血小板发生凋亡现象,血小板活化和凋亡现象都依赖于血小板ROS的产生,且活化和凋亡信号有序发生,而抑制血小板内ROS信号可以有效抑制血小板的活化和凋亡现象。

关键词：活性氧血小板活化凋亡

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