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江苏省第二十次血液学学术会议

作者：顾彩红李彩霞董吉王童邹璆杨丹陈晓晨吴德沛苏州大学附属第一医院 215006 江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室苏州大学附属第一医院 215006

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ADAMTS13和血管性血友病因子在血栓性血小板减少性紫癜中的作用

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中国血液流变学杂志 2016年第4期26卷 493-499页

作者：马珍妮凌婧殷杰苏健阮长耿苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心江苏苏州215006

血栓性血小板减少性紫癜（thrombotic thrombocytopenic purpura,TTP）的发病机制直到ADAMTS13的发现才揭开了超过半世纪的谜底.ADAMTS13主要合成于肝脏,它主要的功能是特异性切割锚定在内皮细胞表面、血液循环中以及血管损伤部位的血... 详细信息

血栓性血小板减少性紫癜（thrombotic thrombocytopenic purpura,TTP）的发病机制直到ADAMTS13的发现才揭开了超过半世纪的谜底.ADAMTS13主要合成于肝脏,它主要的功能是特异性切割锚定在内皮细胞表面、血液循环中以及血管损伤部位的血管性血友病因子（von Willebrand factor,VWF）.当由于ADAMTS13基因突变或存在ADAMTS13自身抗体而导致血浆中ADAMTS13活性缺失（〈10%）能引起遗传性或获得性（特发性）TTP.在其他形式如继发引起（造血干细胞移植、感染和弥漫性恶性肿瘤）的血栓性微血管病或溶血性尿毒症综合征（hemolytic uremic syndrome,HUS）中ADAMTS13活性通常为正常或中度减少（〉20%）.现今初治方案仍然选择血浆输注或血浆置换,但新的治疗方法如重组的ADAMTS13和基因治疗仍在研制中.另外ADAMTS13活性的缺失已经被认为是发展为心肌梗死、中风、脑型疟疾和先兆子痫的一个风险因素.

关键词：金属蛋白酶动脉血栓形成血栓性血小板减少性紫癜突变自身抗体

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伴4号染色体三体异常的t（8；21）急性髓系白血病c-kit基因突变的发生及患者预后

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白血病．淋巴瘤 2016年第6期25卷 330-335页

作者：季诗梦孙爱宁陈苏宁曾招薛胜利沈宏杰解珺丹吴德沛苏州大学附属第一医院血液科江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心 215006

目的探讨伴有4号染色体三体异常的t（8；21）急性髓系白血病（AML）c－kit基因突变的发生率及患者预后。方法回顾性分析2005年2月至2013年1月145例初治t（8；21）AML患者的实验室及临床资料。所有骨髓样本均采用R显带技术进行核型分析... 详细信息

目的探讨伴有4号染色体三体异常的t（8；21）急性髓系白血病（AML）c－kit基因突变的发生率及患者预后。方法回顾性分析2005年2月至2013年1月145例初治t（8；21）AML患者的实验室及临床资料。所有骨髓样本均采用R显带技术进行核型分析。采用PCR方法检测c—kit基因8号、17号外显子突变情况，并分析患者的临床预后。结果145例t（8；21）AML患者中，12例（813％）伴有4号染色体三体异常，其c－kit基因突变发生率为91．7％（11／12），明显高于其他患者[26．3％（35／133）]（P〈0．01）。生存分析显示，伴有4号染色体三体异常的t（8；21）AML患者的3年总体生存（OS）率及无病生存（DFS）率（15％、0）均低于其他t（8；21）AML患者（56％、51％）（P〈0．01）。同时伴有4号染色体三体及c－kif基因突变的t（8；21）AML患者的OS率及DFS率均较不伴有或不同时伴有4号染色体三体及c－kit基因突变的患者低（均／P〈0．05）。结论伴有4号染色体三体异常的t（8；21）AML患者***基因突变发生率高，且预后不佳。4号染色体三体异常或联合c—kit基因突变是影响t（8；21）AML患者生存的主要因素。

关键词：白血病髓样急性 4号染色体三体 c-kit t(8 21) 预后

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抗ADAMTS13单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

抗ADAMTS13单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

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第十三届江浙沪儿科学术会议暨2016年浙江省医学会儿科学学术年会

作者：凌婧马珍妮沈飞谢丽倩赵云霄阮长耿苏州大学附属儿童医院血液科苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室

目的:建立分泌抗ADAMTS13单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备针对ADAMTS13不同结构域的单克隆抗体,为研究ADAMTS13功能、血栓形成的机制以及研究TTP治疗的新方法的提供有力的研究工具。方法:首先,我们构建了稳定表达截短型ADAMTS13-T7蛋白的... 详细信息

目的:建立分泌抗ADAMTS13单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备针对ADAMTS13不同结构域的单克隆抗体,为研究ADAMTS13功能、血栓形成的机制以及研究TTP治疗的新方法的提供有力的研究工具。方法:首先,我们构建了稳定表达截短型ADAMTS13-T7蛋白的HeLa细胞株,并扩大培养,收集无血清培养上清。通过Ni-NTA Agarose将浓缩后上清纯化,然后通过SDS-PAGE电泳后进行考马斯亮蓝染色和western blot鉴定,以全长ADAMTS13为对照。然后,我们用真核表达的截短型ADAMTS13-T7蛋白采用皮下多点注射免疫8周龄Balb/c雌性小鼠,并用纯蛋白液直接经尾静脉注射加强免疫。末次免疫后第3天眼球采血,分离上述小鼠抗血清,用ELISA方法测定免疫小鼠与ADAMTS13-T7蛋白的抗血清效价。用未免疫的正常小鼠血清作为阴性对照。用重组ADAMTS13-T7蛋白包板,ELISA检测免疫后:balb/c雌性小鼠抗血清效价。取小鼠脾脏,制成单细胞悬液与SP2/0骨髓瘤细胞以10:1的比例混合,进行细胞的融合。将融合杂交瘤细胞稀释至96孔板后置于37%、5%C02培养箱中培养。两周后观察96孔板中是否有克隆,选生长良好的克隆孔检测,阳性克隆孔扩大培养并再次检测。结果:构建了稳定表达截短型血管性血友病因子裂解蛋白酶ADAMTS13-T7的HeLa细胞株,收集上清纯化后获得重组ADA:MTS13-T7。利用真核表达的截短型ADAMTS13-T7蛋白免疫balb/c雌性小鼠,ELISA检测免疫后抗血清效价约为1:20000。利用杂交瘤技术通过融合,获得多株分泌抗重组ADAMTS13抗体的杂交瘤单克隆细胞株。将其中的30株转入液氮中冻存,以备进一步分选及功能研究。结论:使用真核表达的截短型ADAMTS13-T7蛋白,作为免疫抗原免疫ba1b/c雌性小鼠,并通过杂交瘤技术,融合获得多株分泌抗重组ADAMTS13抗体的杂交瘤单克隆细胞株,为进一步筛选出具有一定功能活性的单克隆抗体,从而为ADA:MTS13结构及功能的研究提供更多的有力工具奠定良好基础。

关键词： ADAMTS13 真核表达杂交瘤单克隆抗体

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抗磷脂综合症发病机制与临床诊治的进展

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血栓与止血学 2016年第4期22卷 473-475页

作者：王兆钺苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心苏州215006

抗磷脂综合症（antiphospholipid syndrome，APS）是一种由抗磷脂结合蛋白自身抗体引起的自身免疫性疾病，临床特点为反复静脉或动脉血栓，和／或习惯性流产或死胎。

关键词：抗磷脂综合症妊娠静脉血栓栓塞诊断治疗

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孤立性髓系肉瘤15例临床分析

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中国血液流变学杂志 2016年第2期26卷 172-175页

作者：汪清源范祎韩悦吴德沛苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心江苏苏州215006

目的探讨孤立性髓系肉瘤（MS）患者的一般临床特征、治疗方法及预后，以加深对该病的认识。方法回顾性分析15例孤立性Ms患者临床资料，包括临床特征、治疗等并进行评估。结果15例孤立性MS患者平均发病年龄44（13～52）岁，好发于中青年... 详细信息

目的探讨孤立性髓系肉瘤（MS）患者的一般临床特征、治疗方法及预后，以加深对该病的认识。方法回顾性分析15例孤立性Ms患者临床资料，包括临床特征、治疗等并进行评估。结果15例孤立性MS患者平均发病年龄44（13～52）岁，好发于中青年群体，发病部位广泛，较常见于乳腺、子宫、皮肤、胃肠系统等。在病理学免疫分析结果中，绝大部分表达MPO、LCA和CD43，显示髓细胞系来源。治疗方法包括手术、放化疗及干细胞移植治疗等。15例患者有6例患者截止随访日期仍存活，中位生存期30．5（4～100）个月。结论孤立性Ms发病率低，具有白血病进展倾向，髓系白血病化疗方案可取得较好的临床疗效，在早期（未进展至白血病时）进行造血干细胞移植可能提高患者总体生存率。

关键词：孤立性髓系肉瘤临床特点疗效评价

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顽固性ITP的原因与治疗

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临床血液学杂志 2016年第2期29卷 248-251页

作者：王兆钺苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心江苏苏州215006

免疫性血小板减少症（ITP）是一种较常见的免疫性疾病,主要发病机制是由于抗血小板自身抗体引起的血小板破坏并有血小板生成受限。ITP可发生于任何年龄,在儿童多数呈急性经过,自发缓解率高;而90%成人患者为慢性,其中15%对各种治疗不敏感... 详细信息

免疫性血小板减少症（ITP）是一种较常见的免疫性疾病,主要发病机制是由于抗血小板自身抗体引起的血小板破坏并有血小板生成受限。ITP可发生于任何年龄,在儿童多数呈急性经过,自发缓解率高;而90%成人患者为慢性,其中15%对各种治疗不敏感。1 ITP治疗现状ITP患者在血小板计数明显降低特别是有出血倾向时都需要治疗,临床上一般分为一线治疗与二线治疗。

关键词：免疫性血小板减少症,顽固性原因治疗

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《低剂量阿糖胞苷、阿克拉霉素联合粒细胞集落刺激因子组成的CAG预激方案与CVAD方案在复发/难治性Ph染色体阴性的急性淋巴细胞白血病挽救性再诱导治疗中疗效的比较》解读

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临床血液学杂志 2016年第2期29卷 177-180页

作者：薛胜利吴德沛苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心江苏苏州215006

本文最初发表于2015年《Leukemia Research》杂志第39卷,题录为:Liu L,Jiao W,Zhang Y,et *** of low-dose cytarabine and aclarubicin in combination with granulocyte colony-stimulating factor(CAG regimen)compared to Hyper-CVAD regimen as salvage chemotherapy in relapsed/refractory Philadelphia chromosome-negative acute lymphoblastic leukemia[J].Leuk Res,2015,39:323-328。文章表明CAG预激方案对复发/难治性ALL的再诱导缓解效能与Hyper-CVAD方案相仿,且毒副作用少,安全性高;此外,与B淋系复发/难治性ALL相比,CAG预激方案对T淋系复发/难治性ALL的疗效更为突出。该结果为CAG预激方案应用于复发/难治性ALL的再诱导缓解治疗提供了临床实践依据。经通信作者的许可,再次通过佳文解读的方式阐明这一治疗方案,供各位赏析。

关键词：白血病,淋巴细胞,急性 CAG预激方案 CVAD方案

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原发心脏弥漫大B细胞淋巴瘤1例并文献复习

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中国血液流变学杂志 2016年第3期26卷 303-305页

作者：吴小霞孙爱宁金正明吴德沛苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心江苏苏州215006

目的探讨原发心脏弥漫大B细胞淋巴瘤的临床特征、诊疗及预后。方法报道1例原发心脏弥漫大B细胞淋巴瘤的诊疗结果，结合文献复习，探讨该疾病的临床表现、诊疗及预后。结果患者，女，27岁，病初表现为反复心悸、呼吸困难，行心脏肿瘤切... 详细信息

目的探讨原发心脏弥漫大B细胞淋巴瘤的临床特征、诊疗及预后。方法报道1例原发心脏弥漫大B细胞淋巴瘤的诊疗结果，结合文献复习，探讨该疾病的临床表现、诊疗及预后。结果患者，女，27岁，病初表现为反复心悸、呼吸困难，行心脏肿瘤切除术，术后病理示弥漫大B细胞性淋巴瘤，予R-CHOP方案化疗6次，随访至2016年9月患者病情处于稳定状态。结论原发性心脏弥漫大B细胞淋巴瘤较少见，临床表现无明显特异性，诊断主要依靠病理及免疫组化，治疗仍以化疗为主，但总体预后较差。

关键词：淋巴瘤心脏弥漫性原发性

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血栓性微血管病鉴别诊断与治疗的进展

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中华血液学杂志 2015年第3期36卷 254-257页

作者：王兆钺苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室

血栓性微血管病（thrombotic microangiopathy,TMA）是一组少见而重要的临床综合病征,年发病率5～53/100万[1].其主要特征为微血管病性溶血性贫血、血小板减少以及微循环血栓造成的器官受损.TMA中最主要的疾病为血栓性血小板减少性紫癜... 详细信息

血栓性微血管病（thrombotic microangiopathy,TMA）是一组少见而重要的临床综合病征,年发病率5～53/100万[1].其主要特征为微血管病性溶血性贫血、血小板减少以及微循环血栓造成的器官受损.TMA中最主要的疾病为血栓性血小板减少性紫癜（thrombotic thrombocytopenic purpura,TTP）、溶血尿毒综合征（hemolytic uremic syndrome,HUS）与非典型性HUS（aHUS）.三种疾病的病理特征与临床表现相似,鉴别诊断有一定的困难,并且在发病时都可用血浆置换治疗,因此曾经有人主张统称为TTP-HUS综合征.近10年来对TTP、HUS与aHUS的病因、发病机制、临床特点与治疗的研究有了新的突破,鉴别TTP、HUS与aHUS对提高治疗效果与改善预后具有重要的意义.

关键词：血栓性微血管病血浆置换治疗鉴别诊断血栓性血小板减少性紫癜微血管病性溶血性贫血溶血尿毒综合征年发病率临床表现

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