检索结果-内蒙古大学图书馆

小分子酪氨酸激酶抑制剂AG-490对人慢性髓系白血病急变细胞株K562细胞增殖凋亡的影响

苏州大学学报（医学版） 2011年第2期31卷 234-238页

作者：李林萌陈子兴王元元岑建农沈宏杰姚利苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的探讨酪氨酸激酶抑制剂AG-490对人慢性髓系白血病急变细胞株K562细胞的增殖及凋亡的影响。方法采用MTT法观察AG-490在体外对人慢性髓系白血病急变细胞株K562细胞增殖的影响,光学显微镜下观察AG-490对K562细胞形态的变化,流式细胞术检... 详细信息

目的探讨酪氨酸激酶抑制剂AG-490对人慢性髓系白血病急变细胞株K562细胞的增殖及凋亡的影响。方法采用MTT法观察AG-490在体外对人慢性髓系白血病急变细胞株K562细胞增殖的影响,光学显微镜下观察AG-490对K562细胞形态的变化,流式细胞术检测AG-490对K562细胞凋亡及细胞周期的影响,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及实时荧光定量PCR技术检测AG-490作用后K562细胞bcr/abl融合基因及凋亡相关基因c-myc mRNA的表达水平。结果 AG-490可明显抑制K562细胞的增殖,并随药物作用时间的延长和浓度的增加,抑制作用越明显(P<0.05);AG-490可使细胞周期阻滞于G1期,促使其凋亡(P<0.05)。AG-490作用于K562细胞48 h后bcr/abl融合基因的表达无明显改变(P>0.05),而c-myc的表达水平明显降低(P<0.05)。结论 AG-490可能通过阻断JAK2信号通路而下调c-myc的表达,使K562细胞阻滞于G1期,从而抑制K562细胞增殖,促使其凋亡。

关键词：酪氨酸激酶抑制剂 AG-490 K562细胞细胞增殖细胞凋亡

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抗CD33单抗联合化疗药物治疗复发或难治性急性髓系白血病的疗效观察

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苏州大学学报（医学版） 2011年第2期31卷 317-320页

作者：王谦仇惠英吴德沛孙爱宁金正明苗瞄唐晓文傅铮铮韩悦何广胜苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的评价抗CD33单克隆抗体(GO)联合化疗药物对复发(或难治性)急性髓系白血病(AML)的疗效和安全性。方法应用GO联合化疗药物治疗16例复发或难治性AML患者。治疗方法:GO 9 mg/m2,第1天;联合FLAG、HAA、CAG、合用地西他滨等化疗方案。在治... 详细信息

目的评价抗CD33单克隆抗体(GO)联合化疗药物对复发(或难治性)急性髓系白血病(AML)的疗效和安全性。方法应用GO联合化疗药物治疗16例复发或难治性AML患者。治疗方法:GO 9 mg/m2,第1天;联合FLAG、HAA、CAG、合用地西他滨等化疗方案。在治疗过程中同时应用前列腺素E以及保肝药物保护性治疗。结果 16例中,难治性AML11例,复发性AML5例,白血病细胞CD33表达中位数为93.9%。GO联合化疗1个疗程后复查骨髓象,达完全缓解(CR)7例,部分缓解(PR)3例,CR率为43.8%,PR率为18.8%,总有效率为62.6%。随访截至2010年3月1日,中位无复发生存时间为3.5(1.1～70)个月,中位总生存时间9(3～77)个月。在化疗过程中5例出现一过性高胆红素血症及转氨酶升高,化疗结束后有3例在异基因造血干细胞移植过程中出现肝静脉闭塞综合征,1例经抗凝、溶栓、保肝及对症支持治疗后症状得到控制,2例死亡。结论 GO联合化疗治疗复发、难治性AML患者可获得较高的CR率,为部分患者行异基因造血干细胞移植提供了契机,可作为伴有CD33高表达复发或难治性AML患者一种较为有效的治疗方法。

关键词：抗CD33单克隆抗体难治复发急性髓系白血病

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大鼠抗小鼠重组膜联蛋白A2单克隆抗体的制备与鉴定

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苏州大学学报（医学版） 2011年第6期31卷 879-882,892页

作者：江淼沈飞包红雨张丽意谢丽倩赵益明阮长耿苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的建立能够分泌特异性抗小鼠膜联蛋白A2(AnxA2)的大鼠-小鼠融合单克隆抗体杂交瘤细胞系。方法利用重组小鼠AnxA2蛋白作为抗原免疫Wistar大鼠,通过细胞融合和杂交瘤筛选技术建立特异分泌抗小鼠AnxA2蛋白的大鼠-小鼠融合单抗杂交瘤细胞... 详细信息

目的建立能够分泌特异性抗小鼠膜联蛋白A2(AnxA2)的大鼠-小鼠融合单克隆抗体杂交瘤细胞系。方法利用重组小鼠AnxA2蛋白作为抗原免疫Wistar大鼠,通过细胞融合和杂交瘤筛选技术建立特异分泌抗小鼠AnxA2蛋白的大鼠-小鼠融合单抗杂交瘤细胞株。采用酶联免疫吸附方法确定单克隆抗体亚型,免疫印迹和流式细胞术验证所筛选的单克隆抗体的特异性。结果通过对30多个分泌抗体的融合细胞克隆的筛选,获得一株分泌特异性抗小鼠AnxA2的大鼠-小鼠融合单克隆抗体杂交瘤细胞系SZ-158,连续培养传代后染色体分析证实,Wistar大鼠脾细胞与小鼠SP2/0细胞稳定融合;免疫印迹和流式细胞术显示该单克隆抗体可以特异识别小鼠AnxA2重组蛋白。结论该研究所获得的大鼠-小鼠融合单克隆抗体特异性针对小鼠AnxA2蛋白,可用于AnxA2转基因小鼠中AnxA2表达的检测,为深入研究AnxA2的功能提供了物质保障。

关键词：单克隆抗体杂交瘤细胞系膜联蛋白A2

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异基因造血干细胞移植治疗慢性粒细胞白血病的疗效及预后因素分析

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山东医药 2011年第49期51卷 88-90页

作者：徐明珠孙爱宁吴德沛仇惠英唐晓文傅琤琤金正明苗瞄韩悦苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的探讨异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗慢性粒细胞白血病(CML)的疗效及预后因素分析。方法选择104例CML患者,采用Bu+Cy、改良Bu+Cy、TBI+CY及非清髓方案预处理后行allo-HSCT治疗。结果除1例未植活外,其余均持久性植活。3年无病... 详细信息

目的探讨异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗慢性粒细胞白血病(CML)的疗效及预后因素分析。方法选择104例CML患者,采用Bu+Cy、改良Bu+Cy、TBI+CY及非清髓方案预处理后行allo-HSCT治疗。结果除1例未植活外,其余均持久性植活。3年无病生存率(DFS)为74.5%,5年累积生存率(OS)为70%。CML慢性期移植、Ⅰ～Ⅱ度急性移植物抗宿主病(GVHD)患者3年DFS分别高于CML加速期/急变期移植、Ⅲ～Ⅳ度急性GVHD患者。多因素Cox回归分析显示,疾病状态、移植类型、急性GVHD的严重程度是异基因HSCT患者长期生存的独立影响因素。结论慢性期且有HLA相合同胞供者的CML患者行allo-HSCT可获得较高长期生存率。

关键词：粒细胞白血病慢性造血干细胞移植异基因预后因素

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抗VWF-A3区特异性单抗SZ-123单链抗体的构建和表达

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苏州大学学报（医学版） 2011年第6期31卷 874-878页

作者：王菲菲赵益明江淼姚拾秀李雪美阮长耿苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的以能与vWF-A3区特异结合的单克隆抗体SZ-123为模板,构建其单链抗体,为深入研究vWF-A3结构与功能的关系提供有力的工具。方法通过逆转录及多聚酶链反应,扩增并克隆单抗SZ-123的可变区基因VH、VL,经测序后加入连接肽,构建成SZ-123单... 详细信息

目的以能与vWF-A3区特异结合的单克隆抗体SZ-123为模板,构建其单链抗体,为深入研究vWF-A3结构与功能的关系提供有力的工具。方法通过逆转录及多聚酶链反应,扩增并克隆单抗SZ-123的可变区基因VH、VL,经测序后加入连接肽,构建成SZ-123单链抗体(SZ-123 ScFV),并在大肠杆菌中进行表达。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western blot方法验证SZ-123 ScFV的免疫原性。结果 VH、VL可变区基因符合小鼠抗体可变区特征,SZ-123 ScFV基因拼接正确。表达产物除少量为分泌型外,主要以包涵体形式存在,表达量占菌体蛋白的20%。经过变性和复性后,获得具有生物活性的高纯度单链抗体片段。结论成功表达了SZ-123单链抗体,该小分子抗体具有特异结合vWF-A3区的能力。

关键词： vWF-A3区单链抗体(ScFv) 原核表达

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雷帕霉素治疗伊马替尼耐药的难治性慢性髓系白血病急髓变

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中华血液学杂志 2011年第8期32卷 553-554页

作者：谢静张翔方宝枝何广胜赵昀吴德沛苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室 215006 苏州大学唐仲英血液学研究中心

伊马替尼是治疗慢性髓系白血病（CML）有效的药物，但其耐药性的产生以及微量残留病的存在严重影响了伊马替尼的疗效。耐药性的产生与几种不同的机制有关。

关键词：慢性髓系白血病伊马替尼耐药性雷帕霉素治疗难治性微量残留病

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双色荧光原位杂交技术检测B系急性淋巴细胞白血病IgH基因重排

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苏州大学学报（医学版） 2011年第6期31卷 946-949,971页

作者：董莎莎仇惠英陈苏宁王谦吴丽丽潘金兰吴亚芳张俊苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的研究急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)中免疫球蛋白重链基因(IgH)重排的发生率,并分析其临床特点及其他细胞遗传学特征。方法选取158例初诊B-ALL患者的骨髓标本,应用短期培养法制备染色体悬液,采用R显带技术进行核型分析。选用位于14q32 ... 详细信息

目的研究急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)中免疫球蛋白重链基因(IgH)重排的发生率,并分析其临床特点及其他细胞遗传学特征。方法选取158例初诊B-ALL患者的骨髓标本,应用短期培养法制备染色体悬液,采用R显带技术进行核型分析。选用位于14q32 IgH基因两端的序列特异性探针,应用荧光原位杂交技术(FISH)对158例患者的染色体悬液进行IgH基因重排检测。结果 158例中,检出IgH基因重排阳性11例(6.9%),其阳性细胞比例为10.5%～88.2%。结合染色体核型分析发现,11例中同时伴随染色体核型异常的有9例,其中8例为复杂异常。9例染色体异常病例中明确累及14q32的有5例。不同染色体核型异常患者IgH基因重排阳性率差异有统计学意义(P<0.05),其中染色体复杂异常患者IgH基因重排阳性率(14.5%)高于正常核型(3.8%)及非复杂异常(1.9%)。而不同性别、年龄及不同白细胞、血红蛋白、血小板水平患者IgH基因重排阳性率差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 IgH基因重排在B-ALL中有较高的发生率。FISH技术以其较高的敏感性和特异性对提高IgH基因重排的检出率起着重要的作用。

关键词：白血病淋巴细胞性 IgH基因重排荧光原位杂交

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血管性血友病因子vWF73和vWF114片段的表达及其在ADAMTS13活性测定中的应用

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中华血液学杂志 2011年第5期32卷 337-341页

作者：张敬宇马珍妮董宁征胡璐萍苏健王兆钺阮长耿苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室215006 河北医科大学第二医院血液科 050000

目的构建血管性血友病因子（vWF）A2区片段vWF73和vWF114的表达质粒，在大肠杆菌中表达两种谷胱甘肽S转移酶（GST）融合蛋白，并探讨两种蛋白作为底物在测定ADAMTS13活性中的应用价值。方法应用PCR的方法扩增vWFA2区内vWF73和vWF114的相... 详细信息

目的构建血管性血友病因子（vWF）A2区片段vWF73和vWF114的表达质粒，在大肠杆菌中表达两种谷胱甘肽S转移酶（GST）融合蛋白，并探讨两种蛋白作为底物在测定ADAMTS13活性中的应用价值。方法应用PCR的方法扩增vWFA2区内vWF73和vWF114的相应DNA片段，分别克隆至GST融合表达载体pGEX-6P-1进行诱导表达，Ni—NTA琼脂糖柱纯化可溶性蛋白部分。以Western blot法检测正常人血浆、血栓性血小板减少性紫癜（TTP）患者血浆和重组ADAMTS13（rADAMTS13）水解两种重组vWFA2区片段的情况，并以此为底物用抗GST和抗His两种抗体建立酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定血浆ADAMTS13活性的新方法。结果成功表达和纯化了ADAMTS13的两种可溶性小分子底物GST—vWF73-H和GST—vWF114-H，均能被rADAMTS13或正常人血浆有效地水解，而遗传性和特发性ttP患者血浆则无此作用。同时，以此为底物建立了测定ADAMTS13活性的ELISA方法。结论采用原核表达系统成功得到了vWFA2区片段vWF73和vWF114两种GST融合蛋白，可作为底物用于ADAMTS13活性的测定。

关键词：血管性血友病因子融合蛋白血管性血友病因子裂解酶紫癜,血栓性血小板减少性

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苏州大学学报（医学版） 2011年第4期31卷 624-627页

作者：王秀丽何广胜傅铮铮唐晓文仇惠英孙爱宁吴德沛苏州大学附属第一医院血液科江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的通过报道首例肝炎相关性重型再生障碍性贫血(HAAA)强化免疫抑制治疗(IST)后发生淋巴瘤及肺癌病例,结合文献复习,增强对HAAA病因、诊断及治疗的了解,并提高重型再生障碍性贫血(SAA)患者IST治疗后并发多重恶性肿瘤的认识。方法针对该... 详细信息

目的通过报道首例肝炎相关性重型再生障碍性贫血(HAAA)强化免疫抑制治疗(IST)后发生淋巴瘤及肺癌病例,结合文献复习,增强对HAAA病因、诊断及治疗的了解,并提高重型再生障碍性贫血(SAA)患者IST治疗后并发多重恶性肿瘤的认识。方法针对该例患者进行了病例分析及相关文献复习。结果患者在发生暴发性黄疸后出现急性再生障碍性贫血,以环孢菌素+抗人T淋巴细胞球蛋白(ATG)强化免疫抑制及抗肝炎病毒治疗后4个月发生弥漫大B细胞型淋巴瘤,虽经美罗华+COP方案化疗,迅速进展为骨髓浸润,并出现肺低分化腺癌。最终在患病10个月后因血象极其低下无法行化疗及无法控制的重症感染而死亡。结论对HAAA患者除治疗SAA外,还应积极抗肝炎病毒治疗;SAA患者经IST后除可并发淋巴细胞增殖性疾病外,还可能并发其他恶性疾病,是SAA免疫抑制治疗的一种严重并发症,应引起高度警惕。

关键词：重型再生障碍性贫血病毒性肝炎淋巴瘤肺癌

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TNF-α及CTLA-4基因多态性与中国汉族血友病A患者血浆凝血因子Ⅷ抑制物发生的相关性研究

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中华血液学杂志 2011年第3期32卷 168-172页

作者：张露璐余自强张威曹丽娟苏健白霞阮长耿苏州大学附属第一人民医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室215006

目的探讨中国汉族血友病A（HA）患者肿瘤坏死因子d（TNF-α）-308基因多态性及细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4）-318基因多态性与凝血因子Ⅷ（FⅧ）抑制物的相关性。方法采用聚合酶链反应结合限制性内切酶片段长度多态性（PCR—RFL... 详细信息

目的探讨中国汉族血友病A（HA）患者肿瘤坏死因子d（TNF-α）-308基因多态性及细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4）-318基因多态性与凝血因子Ⅷ（FⅧ）抑制物的相关性。方法采用聚合酶链反应结合限制性内切酶片段长度多态性（PCR—RFLP），对140例经过FⅧ替代治疗的HA患者和108名正常对照者的TNF-α及CTLA4基因的单碱基多态性进行检测。所有HA患者样本均应用改良的Nijmegen方法检测FⅧ抑制物活性。结果在HA患者中，TNF-α-308G／G基因型118例（84．3％），G／A基因型18例（12．8％），A／A基因型4例（2．9％）；CTLA-4—318C／C基因型108例（77．2％），C／T基因型30例（21．4％），T／T基因型2例（1．4％）。TNF-α-308、CTLA-4—318等位基因频率在HA病例组与正常对照组间差异均无统计学意义（P〉0．05），关联分析显示携带TNF-α-308A等位基因HA患者发生FⅧ抑制物的风险是非A等位基因携带患者的7．519倍（OR=7．519，95％CI=3．168～17．844）；而携带TNF-α-308A等位基因重型HA患者发生FⅧ抑制物的风险是非A等位基因携带重型患者的8．163倍（OR=8．163，95％CI=2．521～26．434）。携带CTLA-4—318T等位基因血友病A患者发生FⅧ抑制物的风险与非T等位基因携带患者的差异无统计学意义（OR=1．586，95％CI=0．729～3．450）。结论TNF—α-308基因多态性与中国汉族人群重型HA患者发生FⅧ抑制物具有相关性，该基因可能为HA患者替代治疗产生抑制物的调节基因之一。

关键词：血友病A 凝血FⅧ抑制物 TNF-α CTLA4 基因多态性

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