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中华医学会血液学分会第十三届全国血栓与止血学术会议暨“血栓栓塞性疾病（血栓与止血）基础与临床研究进展”

作者：江明华王兆钺苏健曹丽娟李建琴孙雄华白霞张剑阮长耿苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室温州医学院附属第二医院检验科

研究背景:Wiskott-Aldrich综合征(WAS)为一种罕见的血小板减少伴小血小板,湿疹及免疫缺陷疾病,由WASP突变所致的X连锁隐性遗传疾病,易于误诊误治。方法:6例来自无血缘关系家族的WAS患儿,年龄0.5-5岁,仅1例有家族史。检测淋巴细胞标记与... 详细信息

研究背景:Wiskott-Aldrich综合征(WAS)为一种罕见的血小板减少伴小血小板,湿疹及免疫缺陷疾病,由WASP突变所致的X连锁隐性遗传疾病,易于误诊误治。方法:6例来自无血缘关系家族的WAS患儿,年龄0.5-5岁,仅1例有家族史。检测淋巴细胞标记与免疫球蛋白。PCR扩增WASP基因并做测序分析。结果:6例患者具有血小板减少伴小血小板,反复感冒及高热,反复或持续难治的湿疹,

关键词：综合征分子机理研究 Wiskott-Aldrich

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细胞因子活化的供体淋巴细胞输注治疗异基因造血干细胞移植术后血液学复发的急性白血病患者

细胞因子活化的供体淋巴细胞输注治疗异基因造血干细胞移植术后血...

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第13届全国实验血液学会议

作者：唐晓文金正明叶春梅傅铮铮施晓兰胡晓慧王荧彭碧云周倩兰朱子玲冯宇峰常惠荣孙爱宁吴德沛苏州大学附属第一医院血液科江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室苏州工业园区娄葑医院血液科

背景:异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)是目前治疗甚至治愈急性白血病(AL)的有效手段,但移植后复发是导致移植失败的主要原因,目前临床上治疗移植后复发的手段十分有限,特别是发生血液学复发的AL,国内外至今仍缺乏有效的治疗手段,预后... 详细信息

背景:异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)是目前治疗甚至治愈急性白血病(AL)的有效手段,但移植后复发是导致移植失败的主要原因,目前临床上治疗移植后复发的手段十分有限,特别是发生血液学复发的AL,国内外至今仍缺乏有效的治疗手段,预后恶劣。目的:探索细胞因子活化的供体淋巴细胞输注(aDLI)治疗异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)术后复发的急性白血病的疗效。

关键词：急性白血病供体淋巴细胞输注异基因造血干细胞移植术细胞因子

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PEI修饰的磁性纳米颗粒用于基因治疗及MRI监测

PEI修饰的磁性纳米颗粒用于基因治疗及MRI监测

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第二十届中国国际医用仪器设备展览会暨技术交流会、中放磁共振年会暨国际磁共振研讨会

作者：李勇刚马新星郭亮刘光洪若瑜顾宏伟江淼苏州大学附属第一医院放射科 215006 苏州大学材料与化学化工学部江苏省有机材料合成重点实验室苏州大学附属第一医院江苏省血液病研究所卫生部血栓与止血重点实验室

目的：研究阳离子高分子基因载体PEI修饰的氧化铁-质粒DNA磁性纳米颗粒用于磁性基因转染及基因释放MRI监测的可行性与价值。方法：采用阳离子聚合物PEI修饰超顺磁性氧化铁纳米颗粒(PEI-MNPs)，通过正负电荷相吸法结合绿色荧光蛋白质粒DN... 详细信息

目的：研究阳离子高分子基因载体PEI修饰的氧化铁-质粒DNA磁性纳米颗粒用于磁性基因转染及基因释放MRI监测的可行性与价值。方法：采用阳离子聚合物PEI修饰超顺磁性氧化铁纳米颗粒(PEI-MNPs)，通过正负电荷相吸法结合绿色荧光蛋白质粒DNA，构建氧化铁-质粒DNA磁性纳米颗粒(DNA-MNPs)。观察PEI-MNPs及DNA-MNPs形态、粒径及Zeta电位，PEI-MNPs傅立叶转换红外光吸收值、不同pH及盐浓度下PEI-MNPs的流体粒径及饱和磁化强度。采用磁性基因转染法，将DNA-MNPs体外转染人肝癌Be17402细胞，并与常规转染法对照，比较2种转染方法绿色荧光蛋白基因表达的差异。采用MRI测量两组转染细胞悬液不同时间点的T2弛豫率。结论：PEI修饰的氧化铁-质粒DNA磁性纳米颗粒用于磁性转染能显著提高基因转染效率，同时，DNA-MNPs颗粒在细胞内释放质粒DNA前后所引起的T2弛豫率变化能被MRI监测。

关键词：磁性纳米颗粒基因治疗磁共振监测磁性转染技术

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脂质体两性霉素B引起血小板减少合并脑梗死后出血一例

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江苏医药 2011年第9期37卷 1111-1111页

作者：任永亚韩悦叶春梅徐静胡璐萍周莉莉孙爱宁吴德沛阮长耿苏州大学附属第一医院血液病科江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室 215006

患者,男,66岁,2010年3月初因＂发热伴乏力3 d＂入院,经我院骨髓穿刺检查确诊为急性髓系白血病（acute myelogenous leukemia,AML）-M1,染色体正常核型,多重聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）阴性。遂给予去甲氧柔红霉素... 详细信息

患者,男,66岁,2010年3月初因＂发热伴乏力3 d＂入院,经我院骨髓穿刺检查确诊为急性髓系白血病（acute myelogenous leukemia,AML）-M1,染色体正常核型,多重聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）阴性。遂给予去甲氧柔红霉素联合阿糖胞苷（IA）方案化疗1个疗程，复查骨髓穿刺检查显示AML-M1达完全缓解；

关键词：脂质体两性霉素B 血小板减少后出血脑梗死多重聚合酶链反应骨髓穿刺检查急性髓系白血病去甲氧柔红霉素

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一种改良的VWF多聚体电泳的建立及其应用

一种改良的VWF多聚体电泳的建立及其应用

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中华医学会血液学分会第十三届全国血栓与止血学术会议暨“血栓栓塞性疾病（血栓与止血）基础与临床研究进展”

作者：张敬宇马珍妮杨琳董宁征罗建民阮长耿苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室河北医科大学第二医院血液科河北省血液病研究所

目的:建立一种采用垂直电泳且不经转膜的血管性血友病因子(VWF)多聚体电泳方法,用于血管性血友病(VWD)的分型诊断和血栓性血小板减少性紫癜(TTP)的辅助诊断。方法:采用SDS-1.5%琼脂糖凝胶垂直电泳体系,电泳2-3小时后将琼脂糖凝胶直接转... 详细信息

目的:建立一种采用垂直电泳且不经转膜的血管性血友病因子(VWF)多聚体电泳方法,用于血管性血友病(VWD)的分型诊断和血栓性血小板减少性紫癜(TTP)的辅助诊断。方法:采用SDS-1.5%琼脂糖凝胶垂直电泳体系,电泳2-3小时后将琼脂糖凝胶直接转移至琼脂糖凝胶支撑介质—GelBond(?)Film上,应用真空泵或直接风吹干燥凝胶,然后直接用粘贴于GelBond(?)Film上并已干燥的凝胶与辣根过氧化物酶标记的兔抗人VWF多克隆抗体

关键词：多聚体分型诊断 VWF

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敲除Sema4D导致血小板功能缺陷并使心肌缺血梗死面积减小

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中国动脉硬化杂志 2011年第3期19卷 240-240页

作者：刘晓辉卢穹宇朱鹏飞杨飞汤晓蓉朱力苏州大学唐仲英血液学研究中心苏州大学附属第一医院血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏省苏州市215400

目的缺血心肌再灌注早期血小板即被激活,可加重缺血/再灌注损伤。我们最近发现除T细胞外,血小板也表达轴突导向分子Sema4D。Sema4D为细胞表面蛋白,其受体在B细胞、单核细胞、内皮细胞及血小板表达。小鼠Sema4D表达缺失,导致血小板胶原受... 详细信息

目的缺血心肌再灌注早期血小板即被激活,可加重缺血/再灌注损伤。我们最近发现除T细胞外,血小板也表达轴突导向分子Sema4D。Sema4D为细胞表面蛋白,其受体在B细胞、单核细胞、内皮细胞及血小板表达。小鼠Sema4D表达缺失,导致血小板胶原受体(GPVI)下游信号受损,其血小板功能在体内、体外均受到抑制,并降低血小板在血脂异常环境中的高反应性。鉴于血小板、白细胞及内皮细胞在再灌注损伤中所起的作用,本研究拟证明Sema4D表达缺失是否可减小心肌缺血的损伤程度,保护心脏。方法小鼠麻醉后,结扎冠状动脉左前降支45 min,再灌注48 h后,再度麻醉小鼠并注射2,3,5-三苯基氯化四氮唑以评估损伤面积。荧光微球体用来划定危险区域。Sema4D(-/-)敲除鼠和野生型小鼠均由Sema4D(+/-)杂合子繁殖而来,用于缺血心肌再灌注损伤面积的对比性研究。结果尽管Sema4D(-/-)鼠与野生鼠在心脏大小及危险区域方面无明显差别,但我们发现Sema4D缺失小鼠(n=7)心肌缺血再灌注损伤面积与野生型小鼠(n=9)相比减少了57%(P<0.05)。由于Sema4D在活化的血小板表面及T细胞上均被非金属蛋白酶ADAM17切割,产生具有生物活性的可溶性细胞外片段,因此,我们接下来证明Sema4D敲除对缺血再灌注损伤的这种保护作用是由于缺乏细胞相关性Sema4D还是缺乏可溶性Sema4D所致。理论上,Sema4D切割酶ADAM17敲除小鼠是证明该问题的最佳动物模型,然而ADAM17敲除小鼠不能存活,因此,我们制备了ADAM17嵌合小鼠,即造血系统无ADAM17功能,而在体内其他组织ADAM17功能正常。其方法为Se-ma4D(+/+)小鼠接受幅照后,移植无ADAM17功能的小鼠胎肝细胞,重建其造血系统,从而得到ADAM17缺陷嵌合小鼠。我们进行了ADAM17缺陷和ADAM17正常嵌合小鼠的缺血再灌注损伤的对比研究,结果发现ADAM17缺陷嵌合小鼠与AD-AM17正常嵌合小鼠的梗死面积无明显差异。结论本研究证明抑制小鼠Sema4D的表达可保护心肌的缺血再灌注损伤;阻止具有生物活性的可溶性Sema4D的生成,对心肌的缺血再灌注损伤无保护作用;对Sema4D心肌缺血再灌注损伤保护作用机制的进一步研究将使其有可能成为治疗和干预的重要靶点。

关键词：心肌缺血再灌注损伤 Sema4D 基因敲除小鼠

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VWF,VWD & TTP

VWF,VWD & TTP

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2011年浙江省血液病学术年会暨浙江省医学会血液病学分会成立50周年庆典

作者：阮长耿苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室

在临床血液病中,出血性疾病约占30%,主要分为以下几类:(1)血管壁功能异常;(2)血小板异常:血小板减少或增多、血小板功能异常;(3)遗传性或继发性凝血功能异常(4)遗传性或继发性纤维蛋白溶解亢进;(5)DIC、循环抗凝物质增多等其它因素导致... 详细信息

在临床血液病中,出血性疾病约占30%,主要分为以下几类:(1)血管壁功能异常;(2)血小板异常:血小板减少或增多、血小板功能异常;(3)遗传性或继发性凝血功能异常(4)遗传性或继发性纤维蛋白溶解亢进;(5)DIC、循环抗凝物质增多等其它因素导致的出血。血管性疾病与凝血性疾病出血的特点有所不同,依赖于不同的实验室诊断项目来区分。在众多遗传性出血性疾病中,我们苏州所关注的是比血友病还多见的血管性血友病。它是由于VWF

关键词： TTP VWF,VWD ADAMTS

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基质金属蛋白酶家族的表达对急性单核细胞白血病细胞体外侵袭力的影响

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中华血液学杂志 2010年第12期31卷 798-803页

作者：王春玲陈子兴李振江岑建农苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室215006

目的研究基质金属蛋白酶家族（TIMP-2、MT1-MMP、MMP-2）的表达对急性单核细胞白血病细胞体外侵袭力的影响.方法以急性单核细胞白血病细胞株SHI-1细胞为研究对象,用定量PCR、Western blot法分别检测TIMP-2、MT1-MMP、MMP-2 mRNA和蛋... 详细信息

目的研究基质金属蛋白酶家族（TIMP-2、MT1-MMP、MMP-2）的表达对急性单核细胞白血病细胞体外侵袭力的影响.方法以急性单核细胞白血病细胞株SHI-1细胞为研究对象,用定量PCR、Western blot法分别检测TIMP-2、MT1-MMP、MMP-2 mRNA和蛋白表达,并以NB4、K562、THP-1等人类其他白血病细胞株细胞为对照,进行比较.构建TIMP-2逆转录病毒载体,转染SHI-1细胞,G418筛选,有限稀释法挑选出单克隆S1、S2、S3细胞.RNA干扰（RNAi）法干扰SHI-1细胞TIMP-2、MT1-MMP、MMP-2表达.明胶酶谱法测定不同细胞和骨髓基质细胞（BMSC）共培养24 h后上清中MMP-2的表达,细胞侵袭实验测定SHI-1细胞侵袭人工基质膜的能力.结果 SHI-1细胞的TIMP-2、MT1-MMP、MMP-2 mRNA表达和蛋白表达均显著高于其他细胞（P＜0.05）.SHI-1细胞和BMSC共培养上清中的MMP-2酶原和活化的MMP-2含量及细胞体外侵袭率均高于其他细胞（P＜0.05）.单克隆S1、S2、S3细胞TIMP-2 mRNA表达水平分别是SHI-1细胞的3.0倍、2.0倍和1.5倍（P＜0.05）,蛋白表达水平分别上调2.6倍、1.5倍和1.3倍（P＜0.01）,体外侵袭率增加1.5～2.5倍（P＜0.05）,活化的MMP-2含量增加1.5～3.0倍（P＜0.01）.RNA干扰基因沉默效率为85%～98%.SHI-1细胞TIMP-2、MMP-2、MT1-MMP表达沉默后,细胞侵袭率分别下降60%～70%、50%～60%、40%～50%（P＜0.05）.RNA干扰后的细胞培养上清中检测不到活化的MMP-2.结论 SHI-1细胞在mRNA水平和蛋白水平均高表达TIMP-2、MT1-MMP、MMP-2 mRNA,SHI-1细胞和BMSC共培养后这些分子的高表达促进MMP-2的活化,增强细胞的体外侵袭力.TIMP-2表达增加1.5～2.5倍对SHI-1细胞MMP-2的活化和细胞的体外侵袭力发挥的是增强作用,而不是抑制作用.

关键词：白血病,单核细胞,急性白血病浸润基质金属蛋白酶抑制剂2 基质金属蛋白酶类

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ADAMTS13蛋白C-末端结构调节其酶活性的研究

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中华血液学杂志 2010年第12期31卷 830-834页

作者：汪安友刘芳马珍妮董宁征张敬宇阮长耿苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室215006

目的初步研究并探讨ADAMTS13蛋白C-末端结构域变化在调节其酶活性方面的作用.方法将人全长野生型及缺失C-末端TSP8和CUB结构域的截短型重组ADAMTS13基因转染Hela细胞并稳定表达.分别在静态尿素变性条件及蜗旋装置提供的高剪切力条件... 详细信息

目的初步研究并探讨ADAMTS13蛋白C-末端结构域变化在调节其酶活性方面的作用.方法将人全长野生型及缺失C-末端TSP8和CUB结构域的截短型重组ADAMTS13基因转染Hela细胞并稳定表达.分别在静态尿素变性条件及蜗旋装置提供的高剪切力条件下观察这两种ADAMTS13蛋白酶切血管性血友病因子（vWF）的差异,同时利用Western blot技术及残余胶原结合实验对结果进行检测,另外利用ELISA法直接检测这两种ADAMTS13蛋白静态条件下结合vWF的能力.结果在Hela细胞真核表达载体表达并纯化了全长野生型及缺失C-末端TSP8和CUB结构域的截短型ADAMTS13蛋白,分别利用鼠抗His-Tag单抗（抗载短型ADAMS113单）及兔抗人ADAMTS13多抗Western blot法鉴定了其特异性.静态尿素变性条件下,截短型ADAMTS13蛋白酶活性显著高于野生型,且静态条件下在结合vWF的能力方面,截短型也显著高于野生型;但在高剪切力作用下,只有全长野生型ADAMTS13可以对vWF进行剪切.结论 ADAMTS13蛋白C-末端TSP8和CUB结构域在不同条件下可以调节ADAMTS13蛋白结合vWF的能力,从而调节其酶活性的发挥,ADAMTS13蛋白C-末端在高剪切力作用条件下对ADAMTS13酶活性的发挥至关重要.

关键词：蛋白酶类ADAMTS13 血管性血友病因子酶活性

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高剂量化疗和自体干细胞移植治疗T细胞淋巴瘤的疗效比较

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中华肿瘤杂志 2010年第4期32卷 298-299页

作者：汪颖吴德沛吴小津徐杨孙爱宁仇惠英唐晓文付铮铮韩悦金正明苗瞄马骁刘跃均何广胜薛胜利王秀丽王荧苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室 215006

T细胞淋巴瘤是T淋巴细胞来源的一类有着不同生物学行为和临床过程的异质性疾病，与B细胞非霍奇金淋巴瘤相比，其表现为侵袭性强，化疗敏感性差，易复发，预后不良。目前，T细胞淋巴瘤的治疗仍处于探索阶段，尚无统一、标准的治疗方法，... 详细信息

T细胞淋巴瘤是T淋巴细胞来源的一类有着不同生物学行为和临床过程的异质性疾病，与B细胞非霍奇金淋巴瘤相比，其表现为侵袭性强，化疗敏感性差，易复发，预后不良。目前，T细胞淋巴瘤的治疗仍处于探索阶段，尚无统一、标准的治疗方法，而自体干细胞移植和高剂量化疗可能是目前治疗T细胞淋巴瘤的两种较好方法。

关键词：淋巴瘤 T细胞造血干细胞移植药物疗法联合

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