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中国实验血液学杂志 2015年第6期23卷 1673-1678页

作者：周莉莉韩悦朱倩赵世香王倩朱明清戴兰沈文红吴德沛苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心江苏苏州215006

目的:探讨微颗粒(microparticles,MP)在异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)过程中的改变及其临床意义,寻找移植后血栓性并发症的早期诊断指标。方法:对我院94例allo-HSCT患者,根据移植后首先出现的并发症情况分为4组:急性移植物抗宿主病(acute graft versus host disease,a GVHD)组27例(Ⅱ度以上10例)、血栓组9例、感染组41例和平稳组17例。采集患者移植预处理前(-10d)、预处理结束(0 d)、造血干细胞回输后(+10 d,+20 d)4个不同时间段的血浆标本,以流式细胞术检测组织因子微颗粒(tissue factor positive microparticles,TF+M P)和内皮细胞微颗粒(endothelial microparticles,EM P)水平,动态观察TF+M P和EM P在allo-HSCT过程中的变化及意义。回顾性分析这两种微颗粒指标与预处理、移植后血栓病变、a GVHD及感染之间的关系。结果:1 all-HSCT患者预处理前TF+M P和EM P水平分别较正常对照组明显升高(P<0.01),随后在各个时间段虽然呈现不同的波动,但没有明显的统计学差异(P>0.05)。虽然TF+M P和EM P水平在预处理结束较预处理前有所升高,但是并不存在统计学差异。2 TF+M P和EM P水平在血栓组中升高明显,升高水平大于a GVHD组和感染组(P<0.05)。3血栓组中的TF+M P和EM P水平在各个时间段与其他观察组相比均有明显差异(P<0.05),而a GVHD组与感染组中的TF+M P和EM P水平较平稳组无明显差异(P>0.05)。结论:血浆TF+M P和EM P水平的增高可能与移植后相关血栓病变有关,提示肝静脉闭塞病(HVOD)等血栓并发症的发生。因此,动态监测TF+M P和EM P水平有望预测血栓性病变的发生,为移植后血栓性疾病的诊断提供帮助。

关键词：微颗粒血栓移植相关并发症造血干细胞移植

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单中心22例获得性血友病的回顾性临床研究

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中华血液学杂志 2015年第2期36卷 107-111页

作者：杨春晨余自强张威曹丽娟苏健沙萍萍白霞王兆钺阮长耿苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心215006

目的探讨获得性血友病的病因、临床表现、临床诊断与治疗.方法对2010年3月至2014年6月诊断的22例获得性血友病患者的临床资料进行回顾性分析.结果 22例患者中,获得性血友病A（AHA）20例（90.9％）,获得性血友病B（AHB）2例（9.1％）.... 详细信息

目的探讨获得性血友病的病因、临床表现、临床诊断与治疗.方法对2010年3月至2014年6月诊断的22例获得性血友病患者的临床资料进行回顾性分析.结果 22例患者中,获得性血友病A（AHA）20例（90.9％）,获得性血友病B（AHB）2例（9.1％）.AHA患者中,男、女各10例,中位年龄37.5（2～95）岁,中位凝血因子Ⅷ活性（FⅧ∶C）为1.9％（0.5％～39.0％）,以肌肉软组织血肿（80.0％）、皮肤瘀斑（75.0％）为主要临床表现;2例AHB患者均为男性儿童（1、3岁各1例）,临床症状轻微,凝血因子Ⅸ活性（FⅨ∶C）分别为5.0％、16.0％.22例患者中,7例（31.8％）存在相关病因.所有患者均APTT延长,PT正常,APTT纠正试验不能纠正或检出抑制物（滴度值2～32 BU）,狼疮抗凝物及抗心磷脂抗体阴性.19例患者接受血制品止血治疗,7例患者单独使用肾上腺糖皮质激素清除抑制物,11例患者接受肾上腺糖皮质激素联合其他免疫抑制剂清除抑制物,3例患者接受利妥昔单抗治疗.20例AHA患者中19例（95.0％）急性出血控制,8例（40.0％）患者抑制物消失且FⅧ∶C＞50％[中位治疗时间42.5（21～145）d],因出血死亡1例.2例AHB患者分别在治疗48、60 d后FⅨ∶C达到35％、24％.结论获得性血友病并非罕见,可见于各年龄段,临床表现异质性高,儿童患者症状较轻.

关键词：获得性血友病自身抗体免疫抑制剂回顾性研究

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异基因造血干细胞移植治疗慢性粒-单核细胞白血病的临床分析

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中国实验血液学杂志 2015年第6期23卷 1667-1672页

作者：王彤李渭阳祁小飞张日金正明仇惠英韩悦马骁付琤琤唐晓文陈苏宁孙爱宁吴德沛苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心江苏苏州215006

目的:回顾性分析异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗慢性粒-单核细胞白血病(CMML)的疗效。方法:通过观察13例CMML患者在接受allo-HSCT后造血植入、移植物抗宿主病(GVHD)、感染、复发及生存情况,分析allo-HSCT治疗CMML的临床疗效。结果... 详细信息

目的:回顾性分析异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗慢性粒-单核细胞白血病(CMML)的疗效。方法:通过观察13例CMML患者在接受allo-HSCT后造血植入、移植物抗宿主病(GVHD)、感染、复发及生存情况,分析allo-HSCT治疗CMML的临床疗效。结果:13例患者中,男性10例,女性3例;中位年龄38(21-50)岁,其中非亲缘相合移植4例,同胞相合移植6例,亲缘单倍体相合移植3例。13例患者全部获得供者型植入,粒系植入中位时间12(11-18)d,巨核系植入中位时间15(10-55)d,其中8例患者发生急性GVHD,中位随访时间13(6-29)个月,总体生存率53.8%,无病生存率53.8%,复发率7.7%。结论:Allo-HSCT可以改善CMML患者的生存,是治疗CMML的有效手段。

关键词：白血病粒-单核细胞造血干细胞移植

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血管性血友病的研究进展

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中华血液学杂志 2015年第7期36卷 616-619页

作者：殷杰阮长耿苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心215006

血管性血友病（von Willebrand disease,VWD）是最常见的遗传性出血性疾病.近年来,世界各地的学者就VWD的发病机制、诊断和治疗进行了深入的研究.

关键词：血管性血友病遗传性出血性疾病发病机制 VWD

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自体和异基因造血干细胞移植治疗60例高危外周T细胞淋巴瘤患者的疗效比较

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中华血液学杂志 2016年第11期37卷 952-956页

作者：王强力黄海雯金正明唐晓文仇惠英傅琤琤韩悦苗瞄常惠荣孙爱宁吴德沛苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心 215006

目的比较自体造血干细胞移植（auto-HSCT）和异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）治疗高危外周T细胞淋巴瘤（PTCL）疗效的差异。方法回顾性分析苏州大学附属第一医院60例接受HSCT治疗的高危PTCL患者临床资料。结果60例PTCL患者均为高危... 详细信息

目的比较自体造血干细胞移植（auto-HSCT）和异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）治疗高危外周T细胞淋巴瘤（PTCL）疗效的差异。方法回顾性分析苏州大学附属第一医院60例接受HSCT治疗的高危PTCL患者临床资料。结果60例PTCL患者均为高危组患者（IVI评分≥3分），接受移植时中位年龄31（12～58）岁。包括PTCL非特指型22例、ALK阴性的间变大细胞淋巴瘤22例、血管免疫母细胞淋巴瘤16例。其中接受auto-HSCT的有39例（63．5％），接受allo-HSCT的有21例（36．5％）。移植前40例完全缓解（CR），2例部分缓解（PR），18例未缓解（NR）。40例CR患者中10例接受allo-HSCT，30例接受auto-HSCT。20例PR＋NR患者中11例接受allo-HSCT，9例接受auto-HSCT。移植后中位随访时间为39（1-96）个月，auto-HSCT和allo-HSCT组的5年无进展生存率分别为61％和60％（P=0．724）。auto-HSCT和allo-HSCT组的5年总生存率分别为62％和61％（P=0．724）。auto-HSCT和allo-HSCT组的5年移植相关死亡率分别为22．7％和41．8％（P=0．250）。截至末次随访时间，auto-HSCT中7例患者复发，allo-HSCT组中2例复发，auto-HSCT和allo-HSCT组的5年累计复发率分别为37．2％和10．1％（P=0．298）。结论高危PTCL患者选择auto-HSCT或allo-HSCT治疗长期生存无明显差异，但allo-HSCT组患者移植前多为NR状态，表明对于NR患者，allo-HSCT效果可能较好。

关键词：淋巴瘤 T细胞外周造血干细胞移植疗效比较研究

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急性早幼粒细胞白血病诱导分化综合征个体化预测模型列线图初探

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中华血液学杂志 2016年第11期37卷 961-965页

作者：鲍协炳胡晓慧田长玉姬玉涵陈苏宁仇惠英孙爱宁吴德沛苏州大学附属第一医院、江苏血液研究所、卫生部血栓与止血重点实验室、血液学协同创新中心 215006

目的对初诊急性早幼粒细胞白血病（APL）诱导治疗期间出现分化综合征（DS）进行危险因素分析，建立DS发生预测模型列线图，并验证其准确度。方法2011年1月1日至2013年12月31日收治的130例确诊的典型APL患者组成建模组。经单因素筛选临... 详细信息

目的对初诊急性早幼粒细胞白血病（APL）诱导治疗期间出现分化综合征（DS）进行危险因素分析，建立DS发生预测模型列线图，并验证其准确度。方法2011年1月1日至2013年12月31日收治的130例确诊的典型APL患者组成建模组。经单因素筛选临床变量后，应用Logistic回归模型进行多因素分析，确立进入最终模型变量；然后应用R软件建立预测模型列线图，运用Bootstrap法内部验证，一致性指数（C-index）用来评价模型准确度，并绘制出实际观察和列线图预测的DS发生率校准曲线。结果130例APL患者中DS发生率为30．0％，多因素分析显示体重指数（BMI）924kg／m2及诱导治疗期间未用激素预防DS为DS的独立危险因素。列线图预测DS发生率C-index为0．818（95％CI0．741-0．895），校准曲线显示列线图预测与实际观察的DS发生率有良好的一致性。结论成功构建APL诱导治疗期间DS发生率个体预测列线图，此系统与临床实际观察有良好的一致性且更具准确性及盲观性。

关键词：白血病早幼粒细胞急性分化综合征危险因素列线图预测模型

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他克莫司对血小板功能影响的体外研究

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中华血液学杂志 2014年第10期35卷 905-908页

作者：杜春蔚王秀娟赵丽丽戴克胜苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心215006

目的观察他克莫司在体外对血小板功能的影响.方法取18～25岁、2周内未服用抗血小板药物的健康志愿者静脉血,制备洗涤血小板,分别加入0.06、0.6、6、60、120、240 μmol/L他克莫司,37℃孵育2h,用流式细胞术检测血小板线粒体跨膜电位和P... 详细信息

目的观察他克莫司在体外对血小板功能的影响.方法取18～25岁、2周内未服用抗血小板药物的健康志愿者静脉血,制备洗涤血小板,分别加入0.06、0.6、6、60、120、240 μmol/L他克莫司,37℃孵育2h,用流式细胞术检测血小板线粒体跨膜电位和P-选择素变化,用Western blot方法检测血小板凋亡蛋白的表达,用血小板聚集仪检测血小板聚集功能的改变.结果 0.06 μmol/L他克莫司可以促进胶原蛋白诱导的血小板聚集、抑制凝血酶诱导的血小板聚集,对瑞斯托霉素和血管性血友病因子诱导的血小板聚集没有影响.120、240 μmol/L他克莫司引起血小板线粒体膜电位降低和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase-3）凋亡蛋白的表达.结论高浓度的他克莫司可引起血小板凋亡;0.06μmol/L（相当于50 ng/ml血药浓度）的他克莫司按刺激剂不同对血小板聚集功能的影响不同.

关键词：他克莫司流式细胞术血小板聚集细胞凋亡

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遗传性血小板病研究与治疗进展

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中华血液学杂志 2018年第10期39卷 877-880页

作者：王兆钺阮长耿苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心215006

血小板在初期止血中起着重要的作用。血小板在损伤血管的表面发生黏附和聚集，同时激活凝血系统，促进凝血酶的生成与纤维蛋白凝块的形成。此外，血小板也参与炎症与免疫反应过程[1]。遗传性血小板病是一类少见的遗传性疾病，大多数呈... 详细信息

血小板在初期止血中起着重要的作用。血小板在损伤血管的表面发生黏附和聚集，同时激活凝血系统，促进凝血酶的生成与纤维蛋白凝块的形成。此外，血小板也参与炎症与免疫反应过程[1]。遗传性血小板病是一类少见的遗传性疾病，大多数呈常染色体隐性遗传，表现为血小板数量减少和／或功能异常，往往自幼即有出血倾向。这类疾病的诊断较为复杂，临床上极易误诊或漏诊。

关键词：遗传性疾病血小板病常染色体隐性遗传血小板数量治疗纤维蛋白凝块损伤血管凝血系统

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Ph阳性急性淋巴细胞白血病异基因造血干细胞移植后无白血病生存的危险因素分析

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中国实验血液学杂志 2017年第6期25卷 1787-1792页

作者：鲍协炳蔡文治何雪峰陈苏宁仇惠英孙爱宁吴德沛苏州大学附属第一医院、江苏血液研究所、卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心江苏苏州215006

目的:探讨移植前BCR-ABL基因转录本水平对接受异基因造血干细胞移植的Ph阳性急性淋巴细胞白血病(Ph^+ALL)移植后无白血病生存率(LFS)和预后的影响。方法:收集2006年07月至2014年11月在我院住院治疗并接受异基因造血干细胞移植的107例Ph^... 详细信息

目的:探讨移植前BCR-ABL基因转录本水平对接受异基因造血干细胞移植的Ph阳性急性淋巴细胞白血病(Ph^+ALL)移植后无白血病生存率(LFS)和预后的影响。方法:收集2006年07月至2014年11月在我院住院治疗并接受异基因造血干细胞移植的107例Ph^+ ALL患者临床资料,分析移植前有关临床因素对移植后LFS的影响。结果:107例Ph^+ ALL患者中,男性64例,女性43例,移植中位年龄为30(7-54)岁;总复发率为35.5%(38/107),复发中位时间为移植后6.9(1.5-40.7)个月;总死亡率为36.4%(39/107),51.3%(20/39)患者死于复发,25.6%(10/39)患者死于感染,中位随访时间为移植后19.8(3.6-83.7)个月。107例中,49例移植前BCR-ABL阴性,49例移植前BCR-ABL阳性,9例BCR-ABL资料丢失。阴性患者组5年估计累积复发率(CIR)、非复发死亡率(NRM)及总体生存率(OS)分别为26.5%、29.5%及41.6%。阳性患者组5年估计CIR、NRM及OS分别为64.4%、8.9%及48.9%。移植前基因阴性组CIR显著低于阳性组(P<0.001),NRM高于阳性组(P=0.030),两组OS相近(41.6%对48.9%,P=0.497)。多因素分析提示移植前BCR-ABL+(P=0.016)及疾病状态≥CR2(P<0.001)为LFS独立危险因素,而移植年龄为影响移植后总生存主要因素(P<0.001)。结论:复发与感染为Ph^+ ALL异基因造血干细胞移植后主要死因,疾病状态≥CR2以下移植及移植前BCR-ABL+均为Ph^+ ALL异基因造血干细胞移植后LFS独立预后危险因素。

关键词：急性淋巴细胞白血病 Ph染色体异基因造血干细胞移植无白血病生存率

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针对CD4膜蛋白的CAR-T细胞抗T细胞淋巴瘤的活性研究

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中华血液学杂志 2018年第2期39卷 148-152页

作者：陈广华黄海雯王易刘慧文徐良静马骁薛胜利何雪峰王荧顾斌李彩霞仇惠英唐晓文金正明苗瞄孙爱宁吴德沛苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心215006

【摘要】目的探讨针对CD4膜蛋白的CAR—T细胞对CD4＋T细胞淋巴瘤细胞的靶向特异性杀伤作用。方法采用重组DNA技术构建含4．1BB共刺激分子的第二代针对CD4的CAR慢病毒载体，应用293T细胞包装慢病毒，采用流式细胞术检测T细胞的转染效率及... 详细信息

【摘要】目的探讨针对CD4膜蛋白的CAR—T细胞对CD4＋T细胞淋巴瘤细胞的靶向特异性杀伤作用。方法采用重组DNA技术构建含4．1BB共刺激分子的第二代针对CD4的CAR慢病毒载体，应用293T细胞包装慢病毒，采用流式细胞术检测T细胞的转染效率及T细胞亚群动态变化，采用流式细胞术微球法检测培养上清中IFN-γ浓度。结果①构建的慢病毒载体转染激活的T细胞后CAR膜蛋白阳性率达到50．O％～70．0％。T细胞激活后部分CD8＋T细胞弱表达（dim）CD4膜蛋白。T细胞转染针对CD4的CAR慢病毒后CD4＋T细胞、CD8＋CD4dimT细胞逐渐被清除。②CAR-T细胞、对照组T细胞（空载体转染的T细胞）以8：1效靶比分别与CD4＋人T细胞淋巴瘤细胞株KARPAS299细胞共培养24h，杀伤效率分别为（96．9±2．1）％和（11．2±3．1）％，前者明显高于后者（t=7．137，P=0．028）。③CAR-T细胞单独培养，与转染慢病毒载体表达人CD4的K562细胞（K562-CD4细胞）、K562细胞共培养后上清中IFN—γ浓度分别为（1785±268）、（15648±2168）、（1978±354）pg／ml，CAR-T细胞与***4细胞共培养上清IFN-γ浓度明显高于其他两组，差异有统计学意义（P〈O．01）。结论CD4特异性CAR—T细胞效应细胞免疫表型为CD8＋CD4＋T细胞，在体外具有杀伤正常CD4＋T细胞和CD4＋T细胞淋巴瘤细胞的活性，对于CD4dimT细胞也有较好的清除活性。

关键词：抗原,CD4+ 淋巴瘤,T细胞嵌合抗原受体修饰的T细胞

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