检索结果-内蒙古大学图书馆

中国人群耐药Ph阳性急性淋巴细胞白血病高比例ABL激酶区G∶C→A∶T突变和尿嘧啶-N-糖基化酶异常表达研究

中国实验血液学杂志 2014年第4期22卷 889-893页

作者：沈宏杰陈子兴何军岑建农邱桥成丁子轩姚利陈艳陈苏宁薛永权苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所、卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

大多数费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病(Ph+ALL)患者在使用酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗后常表现为复发时间短及易出现ABL激酶区突变现象。为进一步研究Ph+ALL患者使用TKI治疗后易复发特点,本研究采用直接测序法检测了35例TKI耐药Ph+AL... 详细信息

大多数费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病(Ph+ALL)患者在使用酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗后常表现为复发时间短及易出现ABL激酶区突变现象。为进一步研究Ph+ALL患者使用TKI治疗后易复发特点,本研究采用直接测序法检测了35例TKI耐药Ph+ALL患者ABL激酶区突变。结果发现,77.1%(27/35)患者存在ABL激酶区突变,其中T315I突变患者占ABL激酶区突变患者55.6%,特别是首次发现G:C→A:T突变Ph+ALL患者占总ABL激酶区突变Ph+ALL患者77.8%(21/27),包括T315I、E255K和E459K。其次,8例具有两种或两种以上ABL激酶区突变Ph+ALL患者染色体均为复杂核型,5例染色体由初诊单纯t(9;22)进展为复杂核型的TKI耐药Ph+ALL均出现ABL激酶区突变;并且,尿嘧啶-N-糖基化酶2(UNG2)在耐药Ph+ALL组中转录水平表达显著低于初诊组,具有统计学差异(P<0.05),而细胞核内UNG2缺失能增加G:C→A:T突变几率。结论:中国人群TKI耐药Ph+ALL具有高比例ABL激酶区G:C→A:T突变和高度基因组不稳定性。耐药Ph+ALL患者低表达UNG2可能是耐药Ph+ALL患者发生高比例ABL激酶区G:C→A:T突变的因素之一。

关键词：中国人群急性淋巴细胞白血病 ABL激酶区 DNA突变分析尿嘧啶-N-糖基化酶

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重组人平足蛋白基因在中国仓鼠卵巢细胞的稳定表达

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细胞与分子免疫学杂志 2016年第1期32卷 25-28,33页

作者：曲乐赵星鹏傅建新夏利军戴兰阮长耿赵益明苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的构建平足蛋白(PDPN)真核表达质粒PDPN-pEGFP-N1,建立稳定高表达重组人PDPN的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞株并对其进行生物学活性研究。方法通过反转录PCR和DNA重组技术从HEK293细胞中克隆PDPN cDNA,插入带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标... 详细信息

目的构建平足蛋白(PDPN)真核表达质粒PDPN-pEGFP-N1,建立稳定高表达重组人PDPN的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞株并对其进行生物学活性研究。方法通过反转录PCR和DNA重组技术从HEK293细胞中克隆PDPN cDNA,插入带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的真核表达载体pEGFP-N1中。通过PCR、酶切及测序等方法鉴定重组载体;进而将该重组载体转染至CHO细胞中,通过荧光显微镜检测EGFP的表达,Western blot法检测PDPN在CHO细胞中的表达,流式细胞术分选高表达PDPN的CHO细胞,运用血小板聚集实验检测分选后细胞株的生物学活性。结果 DNA测序和酶切鉴定证明PDPN基因正确克隆至pEGFP-N1载体中,重组载体稳定转染CHO细胞后,在荧光显微镜下观察到绿色荧光,流式细胞术分选后的细胞高表达PDPN;Western blot结果显示转染后CHO细胞膜表面表达PDPN蛋白;过表达PDPN的CHO细胞可以诱导人血小板聚集。结论成功构建了稳定高表达PDPN蛋白的CHO细胞株,该细胞株可表达PDPN,并诱导血小板聚集。

关键词：平足蛋白真核表达 pEGFP-N1 CHO细胞血小板聚集

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非血缘关系与单倍型相合供者造血干细胞移植治疗恶性血液病疗效比较

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中华血液学杂志 2008年第2期29卷 83-86页

作者：陈峰吴德沛孙爱宁马骁唐晓文仇惠英苗瞄傅琤琤金正明王荧吴晓津陈苏宁何广旺王秀丽薛胜利赵晔常伟荣苏州大学附属第一医院血液科、江苏省血液研究所、卫生部血栓与止血重点实验室 215006

目的比较非血缘关系供者造血干细胞移植（URD—HSCT）与单倍型相合供者移植（Hi—HSCT）的临床疗效。方法接受URD—HSCT和Hi—HSCT的血液病患者分别为25例和30例，以改良BUCY方案或TBI／CY方案预处理，以环孢素联合甲氨蝶呤及霉酚酸酯... 详细信息

目的比较非血缘关系供者造血干细胞移植（URD—HSCT）与单倍型相合供者移植（Hi—HSCT）的临床疗效。方法接受URD—HSCT和Hi—HSCT的血液病患者分别为25例和30例，以改良BUCY方案或TBI／CY方案预处理，以环孢素联合甲氨蝶呤及霉酚酸酯为基础方案预防急性移植物抗宿主病（aGVHD），部分患者加用抗胸腺细胞球蛋白（ATG）或抗淋巴细胞球蛋白（ALG）及CD25单抗。结果URD-HSCT组均获造血重建，中位随访13个月，3年无病生存率（DFS）（54．1±11．9）％；Hi—HSCT组29例造血重建，中位随访10．3个月，3年DFS（43．1±9．1）％（P=0．13）。两组累积Ⅲ-Ⅳ度aGVHD发生率分别为40．0％（10例）和37．9％（11例）（P〉0．05）。血液病复发各2例（复发率8．0％和6．0％，P〉0．05），移植相关死亡率分别为40．0％（10例）和56．7％（17例）（P〉0．05），死因依次为重度aGVHD合并感染、重症肺部感染和血液病复发。结论URD—HSCT及Hi—HSCT均为治疗难治及高危恶性血液病的有效手段，应个体化选择最适供者，重度aGVHD和继发感染仍需要更积极有效的预防措施。

关键词：非血缘关系单倍型相合供者造血干细胞移植恶性血液病疗效

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替加环素治疗107例粒细胞缺乏合并感染血液病患者的临床观察

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中华血液学杂志 2015年第7期36卷 583-586页

作者：胡星星孙爱宁郑佳佳张彤彤仇惠英高苏冯宇峰吴德沛苏州大学附属第一医院血液科、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室215006

目的观察替加环素治疗粒细胞缺乏合并感染血液病患者的疗效和安全性.方法回顾性分析107例使用替加环素治疗粒细胞缺乏并感染血液病患者的临床资料,替加环素初始剂量100mg,维持剂量50 mg,每12h1次,30～60 min静脉滴注完毕,患者体温正常... 详细信息

目的观察替加环素治疗粒细胞缺乏合并感染血液病患者的疗效和安全性.方法回顾性分析107例使用替加环素治疗粒细胞缺乏并感染血液病患者的临床资料,替加环素初始剂量100mg,维持剂量50 mg,每12h1次,30～60 min静脉滴注完毕,患者体温正常5～7 d后开始予抗菌药物降阶梯治疗或停药.结果 107例患者住院期间共分离出病原菌104株,其中多重药耐菌株（MDR）60株,泛耐药菌株（XDR）2株.全部107例患者中,30例单用替加环素,21例初始单用替加环素后联合其他抗菌药物,56例初始即替加环素联合其他抗菌药物,3组患者治疗有效率分别为63.3％、61.9％及62.5％,差异无统计学意义（P=0.994）,替加环素治疗总有效率为62.6％.39例分离出MDR的患者中,22例体温得到控制,8例体温未得到控制,9例死亡,临床有效率为56.4％.替加环素起效的中位时间为3d.不良反应以恶心（11.2％）、呕吐（8.4％）为主,均可以耐受.结论替加环素治疗粒细胞缺乏血液病患者耐药菌感染具有较好的疗效,引发的不良反应少,安全可耐受.

关键词：替加环素粒细胞缺乏感染治疗结果

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TCF3-PBX1融合基因阳性成人急性淋巴细胞白血病的临床和实验研究

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中华血液学杂志 2010年第1期31卷 16-20页

作者：郑积富仇惠英潘金兰岑建农吴亚芳张俊吴德沛薛永权苏州大学附属第一医院血液科、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室215006

目的探讨TCF3-PBX1融合基因阳性的成人急性淋巴细胞白血病（ALL）的形态学、免疫学、细胞遗传学和临床特点。方法采用R显带技术进行常规核型（CC）分析，间期荧光原位杂交（FISH）技术和RT—PCR技术检测TCF3-PBX1融合基因，流式细胞术（... 详细信息

目的探讨TCF3-PBX1融合基因阳性的成人急性淋巴细胞白血病（ALL）的形态学、免疫学、细胞遗传学和临床特点。方法采用R显带技术进行常规核型（CC）分析，间期荧光原位杂交（FISH）技术和RT—PCR技术检测TCF3-PBX1融合基因，流式细胞术（FCM）检测细胞免疫表型；分析19例TCF3-PBX1融合基因阳性成人ALL的临床和实验率特征并进行长期随访。结果本组19例TCF3-PBX1融合基因阳性ALL占同期成人ALL的3．13％；其中L1 12例，L2 7例。细胞遗传学检测7例为t（1；19）平衡易位，10例为der（19）t（1；19）不平衡易位，2例为正常核型。9例经RT—PCR检测的病例均有TCF3-PBX1融合基因转录本，17例经间期FISH检测TCF3-PBX1融合基因均为阳性。18例行FCM检测的患者中16例为B淋系抗原表达，2例为T淋系抗原表达。17例患者有不同程度的肝、脾、淋巴结等髓外浸润。本组患者经1个疗程诱导化疗后17例获得完全缓解（CR），CR率为94．7％，中位无复发生存时间为3．2个月，中位总生存期为7．2个月。结论TCF3-PBX1融合基因阳性成人ALL有着独特的临床和实验室特点；治疗缓解率高，但短期内易复发，总生存期短，应该采取更积极的治疗以改善预后；间期双色FISH联合CC及RT—PCR可以提高TCF3-PBX1融合基因的检出率。

关键词： TCF3-PBX1融合基因白血病淋巴细胞急性原位杂交荧光预后

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非血缘异基因造血干细胞移植治疗高危难治急性髓系白血病的疗效分析

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中国实验血液学杂志 2013年第3期21卷 696-701页

作者：叶凡唐晓文孙爱宁仇惠英金正明付铮铮陈峰吴德沛苏州大学附属第一医院血液科江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

本研究探讨非血缘异基因造血干细胞移植(URD-HSCT)治疗高危急性髓系白血病(AML)的疗效。22例接受URD-HSCT的高危难治性AML患者纳入研究,采用改良马利兰+环磷酰胺(20例)或全身放疗+环磷酰胺(2例)的清髓性预处理方案行URD-HSCT,术后采用... 详细信息

本研究探讨非血缘异基因造血干细胞移植(URD-HSCT)治疗高危急性髓系白血病(AML)的疗效。22例接受URD-HSCT的高危难治性AML患者纳入研究,采用改良马利兰+环磷酰胺(20例)或全身放疗+环磷酰胺(2例)的清髓性预处理方案行URD-HSCT,术后采用环孢素A(CsA)+甲氨蝶呤(MTX)+骁悉(MMF)+ATG预防急性移植物抗宿主病(aGVHD)。结果表明:22例患者中21例(95.5%)获得植入,中性粒细胞和血小板植活的中位时间分别是12(10-19)d和14(5-22)d;中位随访时间18(3-135.5)月,2年的总体生存率(OS)和无白血病生存率(LFS)分别为(53.9±12.2)%和(49.1±10.7)%;移植后8例患者发生aGVHD,累积发生率为(39.1±10.6)%,其中6例为I-II度aGVHD,2例为III-IV度aGVHD;在19例可评估的患者中,慢性GVHD(cGVHD)6例(4例为局限型,2例广泛型),累积发生率为(28.8±9.6)%;复发7例,2年的累积复发率为(35.8±11)%;死亡原因分析显示,9例死亡中1例死于败血症,1例死于肺部感染,6例死于复发,另外1例复发予化疗联合供体淋巴细胞输注(DLI)治疗缓解后发生IV度aGVHD而死亡;预后因素分析显示,复发是影响生存的主要因素(P<0.001),而性别、年龄、移植方式、aGVHD、感染等对生存无明显影响,cGVHD患者生存率高于未发生者(83.3%vs 37%,P=0.152)。结论:单中心样本研究结果显示,URD-HSCT是治疗无合适血缘供体高危AML患者的有效手段,cGVHD患者预后较好,复发是影响患者生存的主要因素,移植后通过过继免疫治疗如DLI可以预防复发并改善预后以获得长期生存。

关键词：非血缘异基因造血干细胞移植急性髓系细胞白血病移植物抗宿主病

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30例早期骨髓增殖性疾病疑似患者JAK2V617F和MPLW515L／K突变基因的表达

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中华血液学杂志 2008年第9期29卷 611-614页

作者：范峥张日沈益民费海荣朱子玲岑建农江苏省血液研究所、苏州大学附属第一医院血液科、卫生部血栓与止血重点实验室 215006

目的探讨BPC及Hb水平轻微升高，但未达真性红细胞增多症（PV）或原发性血小板增多症（ET）诊断标准的患者JAK2V617F及MPLW515L的表达情况与某些临床特征的相关性在早期骨髓增殖性疾病（MPD）中的诊断价值。方法、采用等位基因特异性PCR... 详细信息

目的探讨BPC及Hb水平轻微升高，但未达真性红细胞增多症（PV）或原发性血小板增多症（ET）诊断标准的患者JAK2V617F及MPLW515L的表达情况与某些临床特征的相关性在早期骨髓增殖性疾病（MPD）中的诊断价值。方法、采用等位基因特异性PCR方法，检测30例BPC或Hb值偏高的早期MPD疑似患者JAK2V617F和MPLW515L／K基因表达，并定期随访其病情进展。结果30例患者中有14例（46．7％）存在JAK2V617F突变，且此14例患者中有5例（35．7％）曾有血栓史；30例患者中无一例存在MPLW515L表达；有效随访22例，JAK2V617F阳性12例，阴性10例，12例阳性患者经过6至24个月后均发展为典型的MPD，而10例阴性患者只有2例发展成MPD。结论JAK2V617F阳性表达有可能作为诊断早期MPD的重要依据。

关键词：基因 JAK2V617F MPLW515L/K 突变骨髓增殖性疾病

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人血管性血友病因子裂解蛋白酶pEGFP-N1真核表达载体的构建及其在HeLa细胞中的表达

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中国实验血液学杂志 2013年第1期21卷 126-129页

作者：凌婧马珍妮苏建阮长耿苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所、卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

本研究旨在构建人血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13)的pEGFP-N1真核表达载体,为进一步研究ADAMTS13在细胞内合成及其分泌提供有力工具。通过PCR方法获取目的基因片段,并在目的基因两端加上限制性酶切位点。限制性内切酶酶切后,连接... 详细信息

本研究旨在构建人血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13)的pEGFP-N1真核表达载体,为进一步研究ADAMTS13在细胞内合成及其分泌提供有力工具。通过PCR方法获取目的基因片段,并在目的基因两端加上限制性酶切位点。限制性内切酶酶切后,连接至pEGPF-N1真核表达载体。连接后获得质粒进行酶切鉴定及DNA测序验证,并转染HeLa细胞。通过荧光显微镜检测绿色荧光蛋白表达,Western blot方法鉴定所得蛋白。结果表明,酶切鉴定及DNA测序确认目的基因与载体正确连接,在荧光显微镜下观察到绿色荧光。Western blot显示,转染后HeLa细胞表达ADAMTS13蛋白。结论:成功构建了ADAMTS13-pEGFP-N1真核表达载体,为进一步研究ADAMTS13合成、分泌及其代谢的生理学机制提供了研究工具。

关键词： ADAMTS13 pEGFP-N1载体载体构建 HeLa细胞

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15例成人Ph染色体和/或BCR-ABL阳性混合表型急性白血病的临床及实验室特征分析

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中国实验血液学杂志 2013年第5期21卷 1116-1120页

作者：颜灵芝陈苏宁平娜娜王琴荣刘红丁子轩朱明清梁建英刘丹丹岑建农潘金兰仇惠英孙爱宁吴德沛苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

本研究总结成人Ph染色体和/或BCR-ABL融合基因阳性的混合表型急性白血病(Ph+MPAL)患者的临床和实验室特征。回顾性分析2009年1月-2012年9月在我院诊治的15例Ph+MPAL的特征及细胞形态学、免疫学、细胞遗传学和分子生物学检测以及临床随... 详细信息

本研究总结成人Ph染色体和/或BCR-ABL融合基因阳性的混合表型急性白血病(Ph+MPAL)患者的临床和实验室特征。回顾性分析2009年1月-2012年9月在我院诊治的15例Ph+MPAL的特征及细胞形态学、免疫学、细胞遗传学和分子生物学检测以及临床随访结果。Ph+MPAL的诊断采用WHO-2008分类标准。结果表明,Ph+在同时期总MPAL群体中的检出率为17.2%(15/87)。15例患者中男性7例、女性8例;中位年龄为51(16-81)岁;初诊时中位WBC计数为69(12.7-921)×109/L。形态学检查显示为急性髓系白血病(AML)者2例(13.3%),急性淋巴细胞白血病(ALL)者6例(40.0%)、杂合型白血病(HAL)者7例(46.7%)。免疫学分析表明,此15例患者均为B淋系和髓系混合表达,93.3%患者的白血病细胞表面有CD34的表达,其中64.3%(9/14)的患者CD34表达率在60%以上。染色体R显带技术检测显示,正常核型者2例(13.3%),单纯Ph+者8例(53.3%),Ph+伴附加异常者5例(33.3%)。附加的染色体异常分别为-7(2例)、+Ph(1例)、dic(7;9)(1例)、i(8q)和-16(1例);有残余正常分裂相者4例。多重巢式PCR检测发现,e1a2型融合基因6例(40.0%)、b2a2或b3a2型共9例(60.0%)。7例Ph+MPAL患者中有4例检测到IKZF1基因缺失。本组中10例患者诱导治疗一疗程后完全缓解(CR)率为70.0%,其中联合酪氨酸激酶抑制剂(TKI)组的CR率(83.3%;5/6),优于单纯化疗组(50.0%;2/4),但差异无统计学意义(P>0.05)。随访至今,6例患者由于疾病复发或进展而死亡(60.0%;6/10)。异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)组患者总生存优于单纯化疗组(P=0.004)。结论:Ph+MPAL主要为B淋系和髓系混合表达,多数年龄较大,高表达CD34抗原。在BCR-ABL融合基因亚型和基因突变方面类似于Ph+急性白血病。初诊时WBC计数是独立的预后因素,复发进展仍是此类患者死亡的主要原因。联合TKI和allo-HSCT或许能改善预后,有必要进行前瞻性、多中心的临床试验来验证。

关键词： Ph染色体 BCR-ABL融合基因混合表型急性白血病

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移植和一些临床因素对弥漫大B细胞淋巴瘤患者预后影响

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中国实验血液学杂志 2013年第3期21卷 623-627页

作者：赵世香韩悦朱倩王倩张文娟陈晓晨孙爱宁金正明仇惠英唐晓文傅琤琤何广胜苗瞄马骁吴德沛苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

本研究回顾性分析经正规R-CHOP方案治疗弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者的生存状况,探讨自体造血干细胞移植(auto-HSCT)、病理类型、国际预后指数(IPI)等因素对预后的影响。收集2004-2011年在本院接受R-CHOP21≥6次化疗的DLBCL患者116例... 详细信息

本研究回顾性分析经正规R-CHOP方案治疗弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者的生存状况,探讨自体造血干细胞移植(auto-HSCT)、病理类型、国际预后指数(IPI)等因素对预后的影响。收集2004-2011年在本院接受R-CHOP21≥6次化疗的DLBCL患者116例。分析单纯化疗及化疗联合自体造血干细胞移植取得的疗效,以及不同免疫病理类型、临床观察指标如IPI、超敏C反应蛋白(HSCRP)、a-羟丁酸脱氨酶(HBDH)等因素对DLBCL患者预后的影响,包括对总体生存率(OS)、无进展生存率(PFS)的系统观察。结果表明,接受R-CHOP21方案治疗的116例DLBCL患者5年OS为72.4%,其中30例患者接受自体造血干细胞移植(Ann Arbor分期均为Ⅲ-Ⅳ期)。30例移植组患者预后较86例单纯化疗组好(5年OS为82.5%vs 69.0%,5年PFS为77.1%vs 68.3%)(P<0.05);生发中心(GCB)型组患者预后较活化亚型(ABC)组好(P<0.05);IPI 3-5分、年龄≥60岁、B症状、LDH升高、HSCRP升高、HBDH升高是预后不良因素(P<0.05),其中LDH升高、年龄≥60岁、B症状是本研究患者的独立危险因素(P<0.05)。结论:自体造血干细胞移植联合R-CHOP治疗方案能明显改善DLBCL患者的预后,GCB型患者预后优于ABC型,B症状、IPI评分、LDH、HSCRP、HBDH是预后的影响因素。

关键词：弥漫大B细胞淋巴瘤自体造血干细胞移植 R-CHOP方案

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