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苏州大学学报（医学版） 2010年第1期30卷 106-109页

作者：张婷婷赵益明李振宇沈飞阮长耿苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的制备抗人凝血因子Ⅷ(FⅧ)C1C2区单克隆抗体(mAb),并对其进行生化和生物学鉴定。方法采用基因重组技术表达FⅧ-C1C2区蛋白(rFⅧ-C1C2),以rFⅧ-C1C2免疫8周龄Balb/C小鼠,小鼠脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合后,ELISA法筛选阳性克隆,制... 详细信息

目的制备抗人凝血因子Ⅷ(FⅧ)C1C2区单克隆抗体(mAb),并对其进行生化和生物学鉴定。方法采用基因重组技术表达FⅧ-C1C2区蛋白(rFⅧ-C1C2),以rFⅧ-C1C2免疫8周龄Balb/C小鼠,小鼠脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合后,ELISA法筛选阳性克隆,制备稳定分泌抗rFⅧ-C1C2mAb的细胞株,并对mAb进行生化和免疫学鉴定。结果获得一株抗rFⅧ-C1C2区单克隆抗体阳性克隆2B11,命名为SZ-133。琼脂糖双扩散鉴定为IgG1类,Westernblot法证实SZ-133可与rFⅧ-C1C2区蛋白及重组的全长FⅧ特异性结合,但不影响FⅧ的凝血活性。结论表达了rFⅧ-C1C2,并制备出了抗人凝血因子Ⅷ的单克隆抗体SZ-133,它能特异识别血浆及重组的FⅧ,有可能用于基础和临床应用研究。

关键词：人凝血因子Ⅷ(FⅧ)C1C2区原核表达单克隆抗体鉴定

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Notch信号通路相关基因的mRNA在急性B淋巴细胞白血病中的表达

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肿瘤防治研究 2010年第8期37卷 897-901页

作者：周亚南陈子兴小池健一坂下一夫岑建农姚利苏州大学附属第一医院江苏省血液病研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006 日本信州大学附属病院

目的检测Notch信号通路相关基因的mRNA在B-ALL(急性B淋巴细胞白血病)中的表达水平,并探讨其在B-ALL中的作用。方法建立实时定量RT-PCR方法,采用ABI PRISM7 700 PCR仪检测了16例初诊B-ALL患者骨髓(原始+幼稚淋巴细胞≥80%)和11例正常供... 详细信息

目的检测Notch信号通路相关基因的mRNA在B-ALL(急性B淋巴细胞白血病)中的表达水平,并探讨其在B-ALL中的作用。方法建立实时定量RT-PCR方法,采用ABI PRISM7 700 PCR仪检测了16例初诊B-ALL患者骨髓(原始+幼稚淋巴细胞≥80%)和11例正常供者骨髓中Notch1、Notch2、Jagged1、Delta1和Hes1及内参GAPDH的表达水平,以检测基因=(检测基因拷贝数/GAPDH拷贝数)×106计算检测基因的表达水平。结果 B-ALL组骨髓中Jagged1基因的mRNA表达水平明显低于对照组,分别为(76.7±23.8)和(2192.3±971.6)(P=0.000),Delat1基因mRNA表达水平B-ALL组明显高于对照组,分别为(60316.6±8713.5)和(2189.8±802.3)(P=0.002),差异有统计学意义。Notch1、Notch2和Hes1基因的mRNA表达水平B-ALL组分别为(6167.6±1661.3)、(95318.6±9437.5)和(258.2±96.2),对照组分别为(1735.5±936.6)、(52078.2±8746.3)和(1006.2±806.0)(P值分别为0.089、0.815和0.786),此三个基因在B-ALL组与对照组之间表达差异没有统计学意义。结论 Jagged1在B-ALL中低表达,Delta1在B-ALL中高表达,提示B-ALL发病与Notch信号途径中配基的异常表达有关。

关键词： Notch 实时定量 RT-PCR 白血病 B淋巴细胞急性

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血液病医院感染病原菌特点及利奈唑胺在粒细胞缺乏感染治疗中的应用

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中华医院感染学杂志 2010年第11期20卷 1589-1591页

作者：王秀丽吴德沛孙爱宁仇惠英金正明苗瞄唐晓文何广胜傅铮铮韩悦苏州大学附属第一医院血液科江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的探讨血液病患者医院感染病原菌特点及利奈唑胺在可疑革兰阳性球菌感染的粒细胞缺乏患者疗效。方法统计2005-2008年苏州大学附属第一医院血液科医院感染患者资料,分析100例可疑革兰阳性球菌感染的粒细胞缺乏患者临床特点及利奈唑胺... 详细信息

目的探讨血液病患者医院感染病原菌特点及利奈唑胺在可疑革兰阳性球菌感染的粒细胞缺乏患者疗效。方法统计2005-2008年苏州大学附属第一医院血液科医院感染患者资料,分析100例可疑革兰阳性球菌感染的粒细胞缺乏患者临床特点及利奈唑胺抗感染的临床疗效。结果 4年医院感染发病率平均为36.5%;以呼吸道感染为主,病原菌仍以革兰阴性杆菌为主,大肠埃希菌为第1位致病菌(22.2%),其次为表皮葡萄球菌(16.2%);金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及凝固酶阴性葡萄球菌的耐药菌株比例分别为61.3%、81.3%及83.5%,检出2例耐万古霉素肠球菌(VRE);100例患者应用利奈唑胺,98例可评估患者的总有效率为90.8%,其中检出革兰阳性球菌者痊愈率(92.6%)明显高于革兰阴性杆菌者(35.3%)(χ2=11.6,P=0.001)及病原学检查阴性者(55.8%)(χ2=10.3,P=0.001);感染初始即应用利奈唑胺者(45例)比后来换用者(40例)体温控制所需中位时间更短,分别为3.4d及6.6d。结论医院血液病患者医院感染致病菌仍以革兰阴性杆菌为主,以大肠埃希菌最多;革兰阳性球菌耐药比例高达60%～80%;对革兰阳性球菌感染的粒细胞缺乏血液病患者,尽早应用利奈唑胺可取得非常好的抗感染效果。

关键词：血液病感染革兰阳性球菌革兰阴性杆菌利奈唑胺疗效

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自体造血干细胞移植治疗T细胞淋巴瘤20例疗效分析

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苏州大学学报（医学版） 2010年第1期30卷 155-156页

作者：汪颖吴德沛吴小津徐杨孙爱宁仇惠英苏州大学附属第一医院血液科江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的分析自体造血干细胞移植对T细胞淋巴瘤的疗效及预后。方法回顾性分析20例确诊的T细胞淋巴瘤的临床资料,20例患者均采用自体干细胞移植,MAG方案动员干细胞,BEAM方案预处理。结果(1)所有患者移植后造血功能均顺利重建,中性粒细胞恢复... 详细信息

目的分析自体造血干细胞移植对T细胞淋巴瘤的疗效及预后。方法回顾性分析20例确诊的T细胞淋巴瘤的临床资料,20例患者均采用自体干细胞移植,MAG方案动员干细胞,BEAM方案预处理。结果(1)所有患者移植后造血功能均顺利重建,中性粒细胞恢复至0.5×109/L,需时(10.50±1.93)d,血小板恢复至20×109/L,需时(12.05±3.03)d;(2)3年疾病预期无进展生存率为88%,无移植治疗相关死亡病例,复发率15%。(3)具有高LDH、IPI≥2分、结外侵犯等危险因素的患者在自体干细胞移植后3年的无疾病进展生存率都比不具有以上高危因素的低。结论自体干细胞移植治疗高危T细胞淋巴瘤安全有效,造血重建顺利。

关键词：淋巴瘤自体造血干细胞移植外周T细胞淋巴瘤

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流式细胞术检测微小残留病变在急性白血病造血干细胞移植中的应用

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苏州大学学报（医学版） 2010年第3期30卷 517-520页

作者：施晓兰唐晓文吴德沛孙爱宁王荧朱明清苏州大学附属第一医院血液科江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的探讨流式细胞术(FCM)检测微小残留病变(MRD)在急性白血病(AL)造血干细胞移植(HSCT)中的应用。方法采用以CD45与侧向散射光(CD45/SSC)设门的三色及四色荧光标记流式细胞术检测114例AL患者移植前后的MRD水平,回顾性分析MRD与预后的关... 详细信息

目的探讨流式细胞术(FCM)检测微小残留病变(MRD)在急性白血病(AL)造血干细胞移植(HSCT)中的应用。方法采用以CD45与侧向散射光(CD45/SSC)设门的三色及四色荧光标记流式细胞术检测114例AL患者移植前后的MRD水平,回顾性分析MRD与预后的关系。结果移植前MRD高于10-4尤其是高于10-3者和移植后MRD持续高于10-3者移植后复发率明显增高,移植前MRD高于10-3者其无事件生存率和无复发生存率明显低下(均P<0.05)。首次检出MRD高于10-3的时间比临床诊断复发提前3个月。结论采用FCM动态监测AL患者HSCT前后的MRD水平,可有效评估患者预后,从而指导临床早期干预性治疗,降低移植后复发率。

关键词：微小残留病变急性白血病造血干细胞移植流式细胞术

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转录抑制因子GFI1在白血病中的表达及意义的研究

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中国实验血液学杂志 2010年第4期18卷 834-837页

作者：王甜甜陈子兴岑建农何军沈宏杰姚利苏州大学附属第一人民医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室苏州215006

本研究初步探讨转录抑制因子GFI1(growth-factor independence 1)在不同类型白血病中的表达水平及转录抑制因子GFI1表达变化在白血病发病机制中的作用。收集65例初诊白血病患者骨髓细胞标本,其中急性髓系白血病(AML)24例,慢性髓系白血病... 详细信息

本研究初步探讨转录抑制因子GFI1(growth-factor independence 1)在不同类型白血病中的表达水平及转录抑制因子GFI1表达变化在白血病发病机制中的作用。收集65例初诊白血病患者骨髓细胞标本,其中急性髓系白血病(AML)24例,慢性髓系白血病(CML)18例,急性淋巴细胞白血病(ALL)6例,慢性髓系白血病急变期患者17例。缺铁性贫血患者13例作为对照组。采用半定量和实时定量RT-PCR方法检测gfi1的转录表达水平。结果表明:白血病患者组gfi1表达明显高于对照组,差异具有统计学意义(p<0.01),其中初诊CML组gfi1表达显著高于初诊AML组、初诊ALL组及CML急变组,差异具有统计学意义(p<0.01)。CML急变组中,急淋变组gfi1表达明显高于非急淋变组,两组间有显著性差异(p=0.004)。结论:gfi1表达异常可能参与白血病的发生与发展,gfi1表达上调可能促进淋巴系肿瘤的发生。

关键词： GFI1 转录因子白血病 PCR

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IL-10基因修饰骨髓间充质干／祖细胞治疗小鼠急性移植物抗宿主病模型的疗效观察及机制研究

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中华血液学杂志 2010年第5期31卷 338-341页

作者：陈峰吴德沛孙爱宁符粤文常惠荣冯宇锋朱子玲朱明清李佩霞陈列松阮长耿苏州大学附属第一医院血液科、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室 215006 河南省肿瘤医院血液科苏州大学附属第二医院放疗科

间充质干细胞（MSC）除在造血微环境的形成及造血调控（如促进造血干细胞归巢及定植等）中起重要作用外，近年其免疫学特性也颇受重视。有报道显示MSC可减低移植物抗宿主病（GVHD）发生率及严重程度，但部分Ⅱ期研究与体外及动物实验的... 详细信息

间充质干细胞（MSC）除在造血微环境的形成及造血调控（如促进造血干细胞归巢及定植等）中起重要作用外，近年其免疫学特性也颇受重视。有报道显示MSC可减低移植物抗宿主病（GVHD）发生率及严重程度，但部分Ⅱ期研究与体外及动物实验的结论并不一致。除偏倚因素外，

关键词：急性移植物抗宿主病骨髓间充质 IL-10 疗效观察细胞治疗基因修饰造血干细胞归巢模型

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KIR2DS4等位基因在无关全相合异基因造血干细胞移植中的作用

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中华血液学杂志 2010年第11期31卷 726-731页

作者：鲍晓晶何军孙爱宁邱桥成袁晓妮陈子兴张学光苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室、中国造血干细胞捐献者资料库HLA高分辨配型定点实验室 215006 苏州大学生命科学学院免疫研究所

目的研究中国南方汉族人群中KIR2DS4等位基因分布及2DS4基因对无关供者全相合造血干细胞移植（HSCT）的影响.方法采用基因测序（Sequenee-based testing,SBT）和TOPO-TA 克隆相结合的方法 ,对接受HSCT的75对HLA-A、-B、-Cw、-DRB1、-D... 详细信息

目的研究中国南方汉族人群中KIR2DS4等位基因分布及2DS4基因对无关供者全相合造血干细胞移植（HSCT）的影响.方法采用基因测序（Sequenee-based testing,SBT）和TOPO-TA 克隆相结合的方法 ,对接受HSCT的75对HLA-A、-B、-Cw、-DRB1、-DQB1高分辨全相合的供、受者进行KIR2DS4等位基因分型,150名供、受者均为中国南方汉族人群,75例受者中急性淋巴细胞白血病（ALL）29例,慢性粒细胞白血病（CML）24例,急性髓系白血病（AML）19例,其他恶性血液病3例.结果 150名供、受者中139例（92.7%）存在KIR2DS4基因,对2DS4基因全长测序后发现4个2DS4等位基因：KIR2DS4＊00101、＊003、＊004和＊007;109例（78.4%）存在2DS4＊00101;2DS4缺失型（具有1个或缺失2DS4＊00101基因）与完整型（具有两个2DS4＊00101基因）的存在比率为1：2;发现3个KIR2DS4新基因.当供者KIR分型为B/x（40例）时,移植后总体生存率明显高于供者为A/A组（35例）[RR=3.1（95%CI 1.1～8.6）,P=0.007];当供者为完整型（36例）时,移植后总体生存率低于供者为缺失型（39例）（P=0.031）;在A/A组中,当供者为完整型（14例）时,移植后急性移植物抗宿主病（GVHD）的发生率明显高于供者为缺失型（21例）[RR=9.0（95%CI 1.2～66.9）,P=0.010],并以Ⅲ～Ⅳ度aGVHD尤为明显（P=0.006）.结论 SBT与TOPO-TA基因克隆的高分辨分型方法可用于研究KIR基因家族多态性,并且移植前在HLA分型的基础上对供受者进行KIR2DS4基因分型,可能对临床选择合适的供者提供有利的依据.

关键词：造血干细胞移植自然杀伤细胞等位基因 KIR2DS4 移植物抗宿主病

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细胞因子联合治疗对急性放射病比格狗造血干/祖细胞的影响

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江苏医药 2010年第13期36卷 1562-1565页

作者：赵建治李明邢爽黄海潇熊国林罗庆良谢玲张日吴伟林缪竞诚朱南康张学光苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室 215006 军事医学科学院放射与辐射研究所苏州大学医学院

目的探讨重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)和重组人白细胞介素11(rhIL-11)联合治疗对重度骨髓型急性放射病(ARS)比格狗干/祖细胞数量和质量的影响。方法用4.5Gy60Coγ射线照射比格狗建立重度骨髓型ARS模型,随机分为三组:A组5犬,不予... 详细信息

目的探讨重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)和重组人白细胞介素11(rhIL-11)联合治疗对重度骨髓型急性放射病(ARS)比格狗干/祖细胞数量和质量的影响。方法用4.5Gy60Coγ射线照射比格狗建立重度骨髓型ARS模型,随机分为三组:A组5犬,不予任何治疗;B组5犬,予输血、抗感染等对症治疗;C组6犬,在B组基础上加用rhG-CSF和rhIL-113周。观察外周血CD34+细胞数和骨髓中CD34+细胞的比例、骨髓涂片骨髓增生程度、骨髓和外周血造血祖细胞集落数及端粒酶活性。结果与A、B组比较,C组外周血CD34+细胞数照射后早期增高(P<0.05),骨髓CD34+细胞比例各个时间点差异无统计学意义(P>0.05);照射后45d,C组骨髓增生程度、外周血红细胞集落形成单位(CFU-E)、骨髓混合细胞集落形成单位(CFU-Mix)和骨髓端粒酶活性均明显高于B组(P<0.05)。结论联合使用细胞因子可保护部分造血干/祖细胞的增殖能力,保持端粒酶较高的活性,促进CD34+的早期释放,有利于骨髓造血功能较快恢复。

关键词：急性放射病重组人粒细胞集落刺激因子重组人白细胞介素11 造血干/祖细胞

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黄芪多糖对浆细胞样树突状细胞功能及成熟的影响

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中国免疫学杂志 2010年第8期26卷 712-715页

作者：刘立民张彦明陆沭华孙雨梅何广胜徐州医学院附属淮安医院淮安市第二人民医院血液科淮安223002 苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室苏州213001

目的:通过体外实验研究黄芪多糖(Astragalus polysaccharide,APS)对浆细胞样树突状细胞(Plasmacytoid dendritic cell,pDC)功能及成熟的影响,为进一步阐明黄芪多糖的免疫学活性提供依据。方法:从健康志愿者外周血分离单个核细胞,流式细... 详细信息

目的:通过体外实验研究黄芪多糖(Astragalus polysaccharide,APS)对浆细胞样树突状细胞(Plasmacytoid dendritic cell,pDC)功能及成熟的影响,为进一步阐明黄芪多糖的免疫学活性提供依据。方法:从健康志愿者外周血分离单个核细胞,流式细胞仪分选pDC,加入0、50、100、200mg/L的黄芪多糖共孵育,24小时后收集上清液,应用酶联免疫吸附试验检测pDC分泌的IFN-α、TNF-α、IL-6量,5天后收集细胞,应用流式细胞仪检测树突状细胞(Dendritic cell,DC)表型CD11c、CD80、CD86阳性率、光镜观察DC的形态、扫描电镜观察DC的超微结构。结果:黄芪多糖显著提高pDC分泌的IFN-α、TNF-α、IL-6量,并且呈黄芪多糖浓度依赖性(P<0.05);黄芪多糖可促进pDC向DC的分化和成熟,并呈黄芪多糖浓度依赖性(P<0.05)。结论:黄芪多糖能够增强pDC的功能,并促进其向DC的分化和成熟。

关键词：黄芪多糖浆细胞样树突状细胞成熟

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