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下调RNF138基因对胶质瘤细胞株U251增殖、凋亡及细胞周期影响的研究

临床神经外科杂志 2013年第2期10卷 93-96页

作者：陈三送吴庭枫谢学顺周幽心杜子威苏州大学附属第一医院神经外科暨脑神经研究室 215006

目的探讨RNA干扰下调胶质瘤细胞株高表达基因RNF138对胶质瘤细胞株U251体外增殖、凋亡以及细胞周期的影响。方法构建下调RNF138基因的siRNA,通过慢病毒转染导入胶质瘤细胞株U251,设立阴性干扰对照组及空白对照组,荧光显微镜观察转染效率... 详细信息

目的探讨RNA干扰下调胶质瘤细胞株高表达基因RNF138对胶质瘤细胞株U251体外增殖、凋亡以及细胞周期的影响。方法构建下调RNF138基因的siRNA,通过慢病毒转染导入胶质瘤细胞株U251,设立阴性干扰对照组及空白对照组,荧光显微镜观察转染效率;实时荧光定量PCR检测敲减效率;运用Cellomics仪器连续检测U251体外增殖情况;流式细胞仪检测U251凋亡及细胞周期变化情况。结果慢病毒载体高效、稳定转染U251细胞,靶向RNF138的siRNA有效抑制RNF138基因表达,使RNF138mRNA表达减少60%,U251体外增殖明显减缓,凋亡明显增加,细胞阻滞在G2/M期。结论 RNA干扰抑制RNF138基因表达可以明显抑制胶质瘤细胞株U251体外增殖,促进其凋亡,影响细胞周期,阻滞细胞分裂。

关键词： RNA干扰增殖凋亡细胞周期 RNF138

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脑胶质瘤易感性与ERCC2基因第751号密码子多态性的关系

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中华神经外科杂志 2013年第1期29卷 90-93页

作者：张新祁震宇王中惠国桢顾少华谢毅苏州大学附属第一医院神经外科 215006 上海复旦大学遗传工程国家重点实验室

目的探讨ERCC2基因第751密码子多态性和胶质瘤易感性的关系。方法提取ERCC2基因751密码子多态性与脑胶质瘤易感性的关系的数据，筛选出符合条件的数据，应用Meta分析技术的各个软件对各项数据进行异质性检验，计算合并O尺值及95％可信... 详细信息

目的探讨ERCC2基因第751密码子多态性和胶质瘤易感性的关系。方法提取ERCC2基因751密码子多态性与脑胶质瘤易感性的关系的数据，筛选出符合条件的数据，应用Meta分析技术的各个软件对各项数据进行异质性检验，计算合并O尺值及95％可信区间，并行发表偏倚的评估。结果本研究中共有5组符合条件的数据，病例组2307例、对照组3455例。Meta分析合并结果显示13181A等位基因能够降低高加索人脑胶质瘤的发病风险（P=0．02，OR=0．91；95％C10．84—0．98，P_heterogeneity=0．28）。结论ERCC2基因第751号密码子的多态性能够降低高加索人的脑胶质瘤的发病风险。

关键词： ERCC2 神经胶质瘤多态性 Meta分析

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miR-16调控NF-κ B1和MMP9表达抑制胶质瘤的侵袭和生长

miR-16调控NF-κ B1和MMP9表达抑制胶质瘤的侵袭和生长

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中华中青年神经外科交流协会第二届学术大会

作者：杨天权吴庭枫赵朝辉陈桂林郭凌川周幽心杜子威 215006 苏州大学附属第一医院神经外科暨脑神经研究室苏州大学附属第一医院病理科

目的：探讨miR-16在人脑胶质瘤表达以及与胶质瘤细胞株SHG4、U87和U373侵袭和生长的相关性,为miR-16作为治疗人脑胶质瘤的靶点奠定基础.方法：利用定量PCR检测miR-16、NF-κ B1在非瘤脑组织和不同级别人脑胶质瘤中的表达.采用Lipofectam...

目的：探讨miR-16在人脑胶质瘤表达以及与胶质瘤细胞株SHG4、U87和U373侵袭和生长的相关性,为miR-16作为治疗人脑胶质瘤的靶点奠定基础.方法：利用定量PCR检测miR-16、NF-κ B1在非瘤脑组织和不同级别人脑胶质瘤中的表达.采用Lipofectamine2000脂质体法将化学合成的mir-16寡核苷酸随机序列分别转染上述细胞系.利用划痕试验Transwell小室模型观察miR-16对胶质瘤细胞株SHG44、U87和U373侵袭的影响,并通过western blot分别检测蛋白NF-κB1、MMP2和MMP9的表达.将稳定转染miR-16的U87细胞接种到裸鼠颅内和皮下,观察miR-16对胶质瘤生长,侵袭的影响.结果：定量PCR显示：mir-16在人脑胶质瘤及胶质瘤细胞株SHG44、U87和U373中表达明显低于非瘤脑组织并且随着肿瘤恶性程度的不断增加miR-16表达逐渐降低(P＜0.05),NF-κ B1在人脑胶质瘤中表达却与之相反.划痕试验和Transwell小室模型显示miR-16过表达能明显降低人脑胶质瘤细胞SHG44、U87和U373的侵袭性(P＜0.01).定量PCR显示miR-16能够明显抑制NF-κ Bl mRNA的表达,Western blot检测进一步证实蛋白NF-κ B1和MMP9的表达均有明显减弱.免疫组化提示miR-16对NF-κ B1,MMP9和Ki-67均有明显抑制.HE染色和免疫荧光检测miR-16明显抑制了胶质瘤的生长和侵袭.结论： miR-16通过调控NF-κ B1,MMP9的表达从而抑制胶质瘤细胞侵袭和生长.

关键词：

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人脑胶质瘤异柠檬酸脱氢酶同工酶1突变的表达及意义

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临床误诊误治 2013年第11期26卷 85-88页

作者：王君祥褚荣涛姜华冯鸣周幽心常熟市第二人民医院扬州大学第五临床医学院神经外科江苏常熟215500 苏州大学附属第一医院神经外科暨脑神经实验室江苏苏州215006

目的研究异柠檬酸脱氢酶同工酶1(IDH1)基因突变在人脑胶质瘤不同亚型中的表达及意义。方法采用基因片段测序和免疫组织化学检测人脑胶质瘤标本125份(观察组)、其他中枢神经系统肿瘤组织标本11例(对照1组)及脑外伤行手术治疗的内减压脑... 详细信息

目的研究异柠檬酸脱氢酶同工酶1(IDH1)基因突变在人脑胶质瘤不同亚型中的表达及意义。方法采用基因片段测序和免疫组织化学检测人脑胶质瘤标本125份(观察组)、其他中枢神经系统肿瘤组织标本11例(对照1组)及脑外伤行手术治疗的内减压脑组织标本10份(对照2组)中IDH1的突变表达情况。结果观察组在弥漫性星形细胞瘤、少支胶质细胞瘤、少支星形细胞瘤、间变性星形细胞瘤、间变性少支胶质细胞瘤、间变性少支星形细胞瘤、胶质母细胞瘤中可检测到IDH1突变。而在毛细胞星形细胞瘤、室管膜瘤、间变性室管膜瘤、髓母细胞瘤、对照1组及对照2组中未检测到IDH1突变。原发性胶质母细胞瘤与继发性胶质母细胞瘤、弥漫性星形细胞瘤与毛细胞星形细胞瘤IDH1突变率比较差异有统计学意义(P=0.02,P=0.007)。结论 IDH1基因突变具有体细胞特异性,只在胶质瘤的某些亚型中发生,可作为胶质瘤基因亚分型的分子标志物。

关键词：脑肿瘤异柠檬酸脱氢酶同工酶1 突变免疫组织化学

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人脑胶质瘤GDNF基因启动子Ⅰ区H_3组蛋白乙酰化修饰情况

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现代生物医学进展 2013年第35期13卷 6818-6821页

作者：刘泽昊虞正权高殿帅贾阳陈传新苏州大学附属第一医院神经外科江苏苏州215006 徐州医学院神经生物实验室江苏徐州221002

目的:明确GDNF启动子Ⅰ区在人脑胶质瘤中H3赖氨酸残基9位乙酰化(H3K9Ac)情况,探讨其对于GDNF在胶质瘤中表达的影响。方法:RT-PCR检测各组中GDNF mRNA的表达;建立基于Real-time PCR分析的染色质免疫共沉淀(ChIP)方法,检测12例胶质瘤与6... 详细信息

目的:明确GDNF启动子Ⅰ区在人脑胶质瘤中H3赖氨酸残基9位乙酰化(H3K9Ac)情况,探讨其对于GDNF在胶质瘤中表达的影响。方法:RT-PCR检测各组中GDNF mRNA的表达;建立基于Real-time PCR分析的染色质免疫共沉淀(ChIP)方法,检测12例胶质瘤与6例正常脑组织中GDNF基因启动子Ⅰ区H3组蛋白乙酰化情况。结果:Real-time PCR验证人脑胶质瘤GDNF mRNA的表达,转录水平随级别的增高而增高,且低级别组、高级别组与正常组之间存在显著的统计学差异(P<0.05)。启动子Ⅰ区的H3组蛋白乙酰化水平,正常组与低级别组和高级别组之间比较均有显著性差异(P<0.05),且低级别与高级别之间也有显著性差异。结论:在人脑胶质瘤组织中,GDNF启动子Ⅰ区发生了H3组蛋白高乙酰化修饰,这种修饰很可能会影响GDNF基因的表达。

关键词：胶质瘤胶质细胞源性神经营养因子启动子乙酰化

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SHG-44绿色荧光裸鼠原位模型的建立

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中华实验外科杂志 2012年第5期29卷 966-968,F0004页

作者：陈雄辉周幽心谢学顺陈金明苏作鹏苏州大学附属第一医院神经外科暨脑神经研究室 215006

目的建立SHG-44绿色荧光裸鼠原位模型。方法将C57BL／6J-增强绿色荧光蛋白（EGFP）转基因小鼠与裸小鼠进行交配，在继代时严格挑选都表达EGFP基因的无毛雄鼠（6）与有毛母鼠（早）交配，通过肉眼、荧光显微镜和分子生物学等方法观察EGF... 详细信息

目的建立SHG-44绿色荧光裸鼠原位模型。方法将C57BL／6J-增强绿色荧光蛋白（EGFP）转基因小鼠与裸小鼠进行交配，在继代时严格挑选都表达EGFP基因的无毛雄鼠（6）与有毛母鼠（早）交配，通过肉眼、荧光显微镜和分子生物学等方法观察EGFP基因在裸小鼠全身各组织中的表达；将胶质瘤细胞株SHG-44（15μl，含1×10^5个细胞）注射于绿色荧光裸鼠的脑内制成原位模型。结果每只种鼠平均产仔7～8只，其中纯合裸仔鼠有3～4只，比例接近1：1；每代仔鼠通过小动物活体成像系统出生后2d就可鉴别其是否表达EGFP基因；器官及组织冰冻切片荧光显微镜下观察均见有绿色荧光；聚合酶链反应（PCR）结果表明脑组织、皮下肌肉、鼠尾和脚趾全部表达EGFP基因；原位模型的成瘤率达100％，瘤细胞依然具有人脑胶质瘤的基本特征。结论表达EGFP基因的裸小鼠可用于肿瘤移植实验。

关键词：绿色荧光蛋白裸鼠转基因动物

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硼中子俘获治疗人脑胶质母细胞瘤的前景和困惑

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中国工程科学 2012年第8期14卷 82-84页

作者：周幽心孙婷杨伟廉杜子威苏州大学附属第一医院神经外科暨脑神经研究室江苏苏州215006

硼中子俘获疗法是一种可以选择性杀伤肿瘤细胞的放射疗法,其产生的α粒子对临床治疗新诊断和复发的脑胶质母细胞瘤有较好的疗效。发达国家20世纪五六十年代就已进入临床试验,但一直受到硼携带载体和中子源发展的限制。现就其治疗脑胶质... 详细信息

硼中子俘获疗法是一种可以选择性杀伤肿瘤细胞的放射疗法,其产生的α粒子对临床治疗新诊断和复发的脑胶质母细胞瘤有较好的疗效。发达国家20世纪五六十年代就已进入临床试验,但一直受到硼携带载体和中子源发展的限制。现就其治疗脑胶质母细胞瘤的前景做一综述。

关键词：硼中子俘获疗法多形性胶质母细胞瘤胶质瘤干细胞

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脑干海绵状血管瘤显微外科手术治疗的初步探讨

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中国神经肿瘤杂志 2012年第3期10卷 169-172页

作者：丁大冬孙春明邵忠冯鸣刘建刚高薇叶明黄煜伦祁震宇周幽心苏州大学附属第一医院神经外科暨脑神经研究室江苏苏州215006

背景和目的：目前海绵状血管瘤以手术切除为主，脑干海绵状血管瘤由于位于生命的中枢，手术治疗风险和难度较高。本文探讨显微手术切除脑干海绵状血管瘤的可行性及预后。方法：对2002年12月至2011年6期间收治的12例行显微手术治疗的脑... 详细信息

背景和目的：目前海绵状血管瘤以手术切除为主，脑干海绵状血管瘤由于位于生命的中枢，手术治疗风险和难度较高。本文探讨显微手术切除脑干海绵状血管瘤的可行性及预后。方法：对2002年12月至2011年6期间收治的12例行显微手术治疗的脑干海绵状血管瘤患者的临床资料及手术效果进行分析，肿瘤位于中脑2例，中脑脑桥交界8例，延髓2例。结果：10例全切除，2例次全切除，病理结果均证实为海绵状血管瘤，随访6～24个月，未见肿瘤再出血，早期神经功能改善6例，4例同手术前，加重2例。结论：严格掌握手术指征，对有手术指征的脑于海绵状血管瘤，积极的显微外科手术治疗可获得满意的治疗效果。

关键词：海绵状血管瘤脑干显微手术

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脑胶质瘤易感性与p53基因第72号密码子多态性的关系

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中华实验外科杂志 2012年第6期29卷 1137-1140页

作者：宋志旺祁震宇王中顾少华谢毅苏州大学附属第一医院神经外科 215006 上海复旦大学遗传工程国家重点实验室

目的探讨p53基因第72密码子多态性和胶质瘤易感性的关系。方法提取p53基因72密码子多态性与脑胶质瘤易感性关系的数据，筛选出符合条件的数据，应用Meta分析技术软件对各项数据进行异质性检验，计算合并相对危险度（OR）值及95％可信区... 详细信息

目的探讨p53基因第72密码子多态性和胶质瘤易感性的关系。方法提取p53基因72密码子多态性与脑胶质瘤易感性关系的数据，筛选出符合条件的数据，应用Meta分析技术软件对各项数据进行异质性检验，计算合并相对危险度（OR）值及95％可信区间（CI），并行敏感性分析和发表便宜的评估。结果本研究中共有9组符合条件的数据，病例组2319例、对照组3682例。Meta分析合并结果显示，12139C等位基因能够增加高加索人脑胶质瘤的发病风险（P=0．04，OR=1．25；95％CI1．01～1．55，Pheterogeneity=0．002）。敏感性分析表明合并结果不受单个研究的影响。结论p53基因第72号密码子的多态性能够增加高加索人脑胶质瘤的发病风险。

关键词： p53 胶质瘤多态性 meta分析

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胶质瘤中GDNF基因启动子Ⅱ区甲基化修饰发生变化

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中国现代医学杂志 2012年第30期22卷 21-25页

作者：王建村任庆先高殿帅徐州医学院附属医院神经外科江苏徐州221002 苏州大学附属第一医院神经外科江苏苏州215006 徐州医学院神经生物实验室江苏徐州221002

目的检测胶质瘤组织中神经胶质细胞源性的神经营养因子(GDNF)基因启动子Ⅱ区甲基化修饰水平,以期探讨其与目的基因在胶质瘤组织中高转录的关系。方法基因测序技术检测胶质瘤组织中GDNF基因启动子Ⅱ区碱基序列是否发生突变;采用BSP检测G... 详细信息

目的检测胶质瘤组织中神经胶质细胞源性的神经营养因子(GDNF)基因启动子Ⅱ区甲基化修饰水平,以期探讨其与目的基因在胶质瘤组织中高转录的关系。方法基因测序技术检测胶质瘤组织中GDNF基因启动子Ⅱ区碱基序列是否发生突变;采用BSP检测GDNF基因启动子Ⅱ区的甲基化修饰水平;通过qPCR检测胶质瘤组织中GDNF基因mRNA的表达水平。结果胶质瘤组织中GDNF基因启动子Ⅱ区没有发生有意义的突变位点;启动子Ⅱ区总甲基化修饰率在正常组、低级别、高级别胶质瘤中分别为:25.57%,15.42%,42.19%,各组间比较均有明显差异(P<0.05);在低级别组中增强子的甲基化水平最低,而高级别组中沉默子甲基化水平最高;qPCR结果显示胶质瘤组织中GDNF mRNA水平较正常脑组织显著升高。结论在胶质瘤组织中,GDNF基因启动子Ⅱ区甲基化修饰水平发生显著变化,此甲基化修饰形式的变化可能参与目的基因在胶质瘤组织中的高表达机制。

关键词：胶质瘤细胞胶质细胞源性神经营养因子启动子甲基化顺式作用元件转录因子

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