检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：陈金明陈桂林韦永新谢学顺孙婷苏作鹏陈雄辉吴庭枫陈三送丁大冬曹广辉王君祥谭卫国冯鸣黄煜伦周幽心杜子威苏州大学附属第一医院神经外科暨脑神经研究室

目的建立稳定表达红色荧光蛋白（RFP）的人脑胶质瘤干细胞。方法用带有红色荧光蛋白基因的慢病毒转染人脑胶质瘤干细胞（SU2）,经流式细胞仪进行克隆筛选,荧光显微镜下观察RFP阳性细胞,PCR及DNA测序鉴定基因组中RFP的整合,并通过细胞荧... 详细信息

目的建立稳定表达红色荧光蛋白（RFP）的人脑胶质瘤干细胞。方法用带有红色荧光蛋白基因的慢病毒转染人脑胶质瘤干细胞（SU2）,经流式细胞仪进行克隆筛选,荧光显微镜下观察RFP阳性细胞,PCR及DNA测序鉴定基因组中RFP的整合,并通过细胞荧光免疫组化CD133,Nestin鉴定干细胞特性,加含胎牛血清培养基诱导干细胞分化,GFAP,S100,A2B5鉴定诱导分化后细胞特性,以及对转染后人脑胶质瘤干细胞形态学检查、细胞增殖能力测定及致瘤性评价等进行了转染人脑胶质瘤干细胞的生物学特性分析。结果慢病毒转染率高达95%以上,10次传代前后RFP表达无明显差异;通过流式细胞仪筛选,建立了一种稳定、长期表达RFP的人脑胶质瘤干细胞;PCR及DNA测序证实RFP基因已成功整合入人脑胶质瘤干细胞;生物学特性分析表明转染前后的人脑胶质瘤干细胞没有明显改变。结论以RFP为生物标记物的人脑胶质瘤干细胞成功建立,可为将来研究人脑胶质瘤干细胞的深入研究提供理想的材料。

关键词：胶质瘤干细胞荧光蛋白转染

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CXCR4/CXCL12在原发中枢神经系统淋巴瘤中的表达及其意义

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临床神经外科杂志 2011年第6期8卷 285-287页

作者：谭卫国冯鸣吴庭枫孙春明邵忠王中周幽心杜子威昆山市中医医院神经外科 215300 苏州大学附属第一医院神经外科暨脑神经研究室

目的探讨趋化因子受体CXCR4及其配体CXCL12在原发中枢神经系统淋巴瘤中的表达水平,分析它们在原发中枢神经系统淋巴瘤的发生、发展过程中的可能作用。方法采用免疫组化EnVision二步法检测CXCR4及CXCL12在5例原发中枢神经系统淋巴瘤、10... 详细信息

目的探讨趋化因子受体CXCR4及其配体CXCL12在原发中枢神经系统淋巴瘤中的表达水平,分析它们在原发中枢神经系统淋巴瘤的发生、发展过程中的可能作用。方法采用免疫组化EnVision二步法检测CXCR4及CXCL12在5例原发中枢神经系统淋巴瘤、10例正常脑组织细胞中的表达。采用半定量RT-PCR检测CXCR4和CXCL12在5例原发中枢神经系统淋巴瘤以及正常脑组织中的表达情况。结果免疫组化EnVision二步法:CXCR4在肿瘤标本中阳性表达率为100%(5/5),在正常脑组织标本中阳性表达率为0%(0/10);CXCL12在肿瘤标本中阳性表达率为100%(5/5),在正常脑组织标本中阳性表达率为100%(10/10)。半定量RT-PCR法检测标本中的CXCR4、CXCL12显示:在肿瘤标本中全部检出,而在正常脑组织标本中仅检出CXCL12的表达。结论 CXCR4/CXCL12信号通路在原发中枢神经系统淋巴瘤的发生、发展过程中起作用。

关键词：原发中枢神经系统淋巴瘤免疫组织化学 RT—PCR

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SHG-44绿色荧光裸鼠原位模型的实验研究

SHG-44绿色荧光裸鼠原位模型的实验研究

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第八届亚洲神经肿瘤学术大会( 8th ASNO Meeting)

作者：陈雄辉周幽心谢学顺苏作鹏陈金明曹广辉苏州大学附属第一医院神经外科苏州大学附属第一医院脑神经研究室

目的培育表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的转基因裸小鼠,建立SHG-44绿色荧光裸鼠脑内模型,初步探索肿瘤血管的生成、来源方法将C57BL/6J-EGFP转基因小鼠与nu/nu裸小鼠(遗传背景为BALB/C)进行交配,在继代时严格挑选都表达EGFP基因的无毛雄... 详细信息

目的培育表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的转基因裸小鼠,建立SHG-44绿色荧光裸鼠脑内模型,初步探索肿瘤血管的生成、来源方法将C57BL/6J-EGFP转基因小鼠与nu/nu裸小鼠(遗传背景为BALB/C)进行交配,在继代时严格挑选都表达EGFP基因的无毛雄鼠(♂)与有毛母鼠(♀)交配,通过肉眼、荧光显微镜和分子生物学等方法观察EGFP基因在裸小鼠全身各组织中的表达情况;用立体定向仪将人脑胶质瘤细胞系SHG-44注射于绿色荧光裸鼠的脑内制成肿瘤的原位模型,标本经常规HE和免疫组织化学染色,用普通光镜和荧光显微镜观察移植瘤的形态特征、侵袭播散情况及肿瘤血管的来源结果传至F6代的仔鼠,通过小动物活体成像系统出生后2天就可鉴别其是否表达EGFP基因,出生后4周肉眼就可以鉴别是否表达裸基因;绿色荧光裸鼠大体解剖无胸腺,器官及组织冰冻切片荧光显微镜下观察均见有绿色荧光;裸鼠EGFP基因PCR结果表明脑组织、皮下肌肉、鼠尾和脚趾全部表达EGFP基因;原位模型的瘤细胞依然具有人脑胶质瘤的基本特征,肿瘤血管在荧光显微镜下观察到强烈的绿色荧光;结论通过将C57BL/6J-EGFP转基因小鼠与nu/nu裸小鼠进行杂交能培育表达EGFP基因的裸小鼠;鼠尾EGFP基因的鉴定,在不处死鼠的情况下提供EGFP基因表达的分子生物学证据,既精确可信,又能体现对实验动物的人文关怀;表达EGFP的裸小鼠可用于肿瘤移植实验并可用颜色来鉴别肿瘤血管,对肿瘤血管的生成和来源的研究有重要意义。

关键词：绿色荧光蛋白裸鼠转基因动物鉴定血管

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离体胶质瘤干细胞选择性吸收对二羟基苯丙氨酸硼

离体胶质瘤干细胞选择性吸收对二羟基苯丙氨酸硼

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2011 International Conference on Biomedicine and Engineering

作者：孙婷周幽心陈金明陈桂林韦永新黄强杜子威苏州大学附属第一医院脑神经研究室苏州大学附属第二医院神经外科

胶质瘤干细胞在各方面的特性更加贴近脑内的肿瘤,其成为发现新药物和新疗法的有意义的靶向细胞。硼中子俘获治疗(BNCT)是一种治疗进展中的恶性胶质瘤的选择性放疗方法,能够有效地杀伤肿瘤细胞。靶细胞尤其是肿瘤干细胞能够吸收足够的硼... 详细信息

胶质瘤干细胞在各方面的特性更加贴近脑内的肿瘤,其成为发现新药物和新疗法的有意义的靶向细胞。硼中子俘获治疗(BNCT)是一种治疗进展中的恶性胶质瘤的选择性放疗方法,能够有效地杀伤肿瘤细胞。靶细胞尤其是肿瘤干细胞能够吸收足够的硼是试验成功的关键条件。以往的研究证实不同类型的细胞吸收硼的含量是有差异的。本研究的目的在于评估胶质瘤干细胞和普通胶质细胞吸收含硼化合物对二羟基苯丙氨酸硼(BPA)的能力差异。体外结果显示尽管胶质瘤干细胞摄取BPA的剂量小于普通胶质细胞,但其已达到BNCT的要求,这是BNCT成功的首要条件。这个实验证实了通过BPA给药应用BNCT治疗脑胶质瘤的可行性。

关键词：胶质瘤干细胞硼BPA

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人脑胶质瘤中IDH1突变的表达及其意义

人脑胶质瘤中IDH1突变的表达及其意义

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中华医学会神经外科学分会第九次学术会议

作者：周幽心王君祥苏作鹏孙婷陈桂林韦永新孙春明邵忠周岱杜子威苏州大学附属第一医院神经外科暨脑神经研究室

目的研究异柠檬酸脱氢酶同工酶1(IDH1)基因突变在不同类型胶质瘤中的表达情况及其临床意义。方法采用基因片段测序的方法检测92例人脑胶质瘤及10例其他中枢神经系统肿瘤的IDH1突变情况。

关键词：人脑胶质瘤星形细胞瘤

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PI3K、AKT、PTEN在脑胶质瘤中的表达及其临床意义

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中国神经肿瘤杂志 2010年第2期8卷 88-94页

作者：邓如明孙春明冯鸣王君祥周幽心苏州大学附属第一医院神经外科暨脑研究室江苏苏州215006

背景与目的:PI3K/AKT信号通路可能在人脑恶性胶质瘤的发生发展过程中起重要作用。本研究探讨人脑胶质瘤中PI3K/AKT通路相关蛋白PI3K、AKT、PTEN在脑胶质瘤中的表达及其与胶质瘤病理分级之间的关系。方法:采用免疫组化Envision二步法检测... 详细信息

背景与目的:PI3K/AKT信号通路可能在人脑恶性胶质瘤的发生发展过程中起重要作用。本研究探讨人脑胶质瘤中PI3K/AKT通路相关蛋白PI3K、AKT、PTEN在脑胶质瘤中的表达及其与胶质瘤病理分级之间的关系。方法:采用免疫组化Envision二步法检测PI3K、AKT、PTEN蛋白在42例不同级别脑胶质瘤、10例正常脑组织中的表达,计算阳性细胞百分率,用统计学方法分析人脑胶质瘤中PI3K、AKT、PTEN蛋白表达之间的相关性及其三者与胶质瘤不同分级之间的关系。结果:PI3K在人脑胶质瘤组织的阳性表达率是80.95%,而正常脑组织中表达率为20.00%,两者间差异有统计学意义(P<0.05);PI3K蛋白在低级别胶质瘤和高级别胶质瘤中的阳性率分别是66.67%、95.24%,两者之间差异有统计学意义(P<0.05)。胶质瘤组织与正常脑组织中AKT蛋白阳性率分别是85.71%与30.00%,两者差异有统计学意义(P<0.05);AKT蛋白在低级别胶质瘤和高级别胶质瘤中的阳性率分别是76.19%与95.24%,两者之间差异有统计学意义(P<0.05);胶质瘤组织与正常脑组织中PTEN蛋白阳性率分别是45.24%、100%,两者差异有统计学意义(P<0.01);PTEN蛋白在低级别胶质瘤中的阳性率52.38%,而高级别胶质瘤表达率为38.10%,两者之间差异有显著性(P<0.05);PTEN与PI3K、AKT蛋白在脑胶质瘤中的表达分别呈负相关(P<0.01);PI3K与AKT蛋白的阳性表达呈正相关(P<0.01)。结论:(1)在人脑胶质瘤组织中PI3K、AKT蛋白表达明显增高,且PI3K、AKT蛋白阳性表达与胶质瘤恶性程度正相关,说明了PI3K/AKT信号通路在胶质瘤的恶性转化中发挥着重要作用。(2)胶质瘤组织中PTEN蛋白的阳性表达率明显低于其在正常脑组织中的表达,与胶质瘤的恶性程度负相关,提示了PTEN蛋白的表达下降或缺失导致其抑癌功能减弱甚至丧失,其与胶质瘤的发生发展密切相关。(3)在人脑胶质瘤组织中,PTEN与PI3K、AKT蛋白表达呈负相关,揭示了在胶质瘤的发生发展中PTEN与PI3K、AKT的作用可能互相拮抗,PTEN蛋白的表达下降或缺失与PI3K、AKT的过度表达可能共同促进了胶质瘤的恶性进展。

关键词：胶质瘤 PI3K AKT PTEN 免疫组织化学

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离体胶质瘤干细胞选择性吸收对二羟基苯丙氨酸硼

离体胶质瘤干细胞选择性吸收对二羟基苯丙氨酸硼

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2010 First International Conference on Cellular,Molecular Biology, Biophysics and Bioengineering(CMBB 2010)

作者：孙婷周幽心陈金明陈桂林韦永新黄强杜子威苏州大学附属第一医院脑神经研究室苏州大学附属第二医院神经外科

关键词：胶质瘤干细胞硼 BPA

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成体基因工程鼠中神经干细胞的克隆与鉴定

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中华实验外科杂志 2009年第3期26卷 400-400页

作者：李英斌陈骅黄强夏春林苏州大学衰老与神经疾病实验室及博习临床解剖学研究所 215123 南京医科大学附属南京第一医院神经外科苏州大学附属第二医院神经外科暨脑肿瘤研究室

我们从成体转基因肿瘤小鼠中成功分离鉴定转基因成体神经干细胞为研究成体神经干细胞在脑肿瘤发生启动阶段中的作用，探讨其是否是肿瘤的起源细胞。

关键词：成体神经干细胞分离鉴定基因工程鼠克隆肿瘤发生肿瘤小鼠转基因源细胞

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脑脊液对骨髓基质细胞作用的动态观察

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江苏医药 2006年第1期32卷 52-53,F0002页

作者：单立冬惠国桢蒋星红龚珊苏州大学医学院神经生物学研究室 215007 苏州大学附属第一医院神经外科

目的动态观察脑脊液对骨髓基质细胞向神经元方向分化的作用。方法采用Percoll液分离大鼠骨髓基质细胞，体外扩增。当第2或第3代细胞生长达60％～70％融合时，加入不同病人脑脊液，分别于不同时间观察其形态学改变，取诱导后的细胞作... 详细信息

目的动态观察脑脊液对骨髓基质细胞向神经元方向分化的作用。方法采用Percoll液分离大鼠骨髓基质细胞，体外扩增。当第2或第3代细胞生长达60％～70％融合时，加入不同病人脑脊液，分别于不同时间观察其形态学改变，取诱导后的细胞作免疫细胞化学鉴定。结果在颅咽管病人脑脊液中骨髓基质细胞的分化速度较快，且发生政变的程度较大；而在脑外伤积水的病人脑脊液中骨髓基质细胞的分化速度相对较慢，且发生改变的细胞数较前者少。免疫细胞化学染色NSE呈弱阳性，NF呈弱阳性。结论脑脊液可诱导骨髓基质细胞向神经元方向分化。

关键词：骨髓基质细胞诱导分化脑脊液神经元样细胞

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胶质瘤细胞对血管内皮细胞迁移的影响

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中华实验外科杂志 2006年第4期23卷 598-600页

作者：林志雄黄强杨丽娟林建华福建医科大学附属第一医院神经外科福州350005 苏州大学附属第二医院神经外科福建医科大学附属第一医院药理学教研室福州350005 福建医科大学附属第一医院肿瘤侵袭微生态系统研究室福州350005

目的探讨胶质瘤细胞对血管内皮细胞迁移行为的影响。方法利用体外快速侵袭力测定法检测C6细胞对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)迁移的影响;ELISA方法分析迁移诱导剂中血管内皮细胞生长因子(VEGF)的浓度;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫细... 详细信息

目的探讨胶质瘤细胞对血管内皮细胞迁移行为的影响。方法利用体外快速侵袭力测定法检测C6细胞对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)迁移的影响;ELISA方法分析迁移诱导剂中血管内皮细胞生长因子(VEGF)的浓度;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫细胞化学方法检测 C6细胞上纤维连接蛋白(FN)的基因转录及蛋白的表达情况。结果以C6细胞和HUVECs的共培养上清液为HUVECs迁移诱导剂组及以C6细胞+共培养上清液为诱导剂组孵育24 h后未见 HUVECs迁移,而以0．1％BSA+RPMI 1640+C6细胞为诱导剂组孵育24 h后可见HUVECs迁移,且这种迁移可被VEGF抗体所封闭(P<0．05),但不被FN抗体所封闭;单纯共培养上清液组、 0．1％BSA+RPMI 1640+C6细胞组及C6细胞+共培养上清液组的VEGF浓度分别为0 ng／L, (261．333±50．013)ng／L,(32．667±15．011)ng／L;C6细胞经和HUVECs共培养后出现FN的 mRNA转录和蛋白表达的下调。结论 C6细胞通过VEGF的作用促进血管内皮细胞向肿瘤细胞迁移。

关键词：胶质瘤纤维连接蛋白血管内皮生长因子

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