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单倍体相合造血干细胞移植治疗中危NPM1wt/non-CEBPAdm/FLT3-ITD^neg急性髓系白血病的疗效分析

中国实验血液学杂志 2020年第3期28卷 731-736页

作者：陈淳戚嘉乾楚甜甜王虹吴德沛阮长耿韩悦苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室苏州大学造血干细胞移植研究所江苏苏州215006

目的:探讨三阴性(NPM1wt/non-CEBPAdm/FLT3-ITD^neg)中危急性髓系白血病患者(acute myeloid leukemia, AML)诱导化疗达首次缓解(complet remission,CR1)后不同治疗方式的疗效。方法:回顾性分析了2009年10月至2016年5月苏州大学附属第一医院血液科收治的268名中危NPM1wt/non-CEBPAdm/FLT3-ITD^neg急性髓系白血病患者的临床资料,对移植疗效及预后相关因素进行统计学分析。结果:化疗组、同胞全相合造血干细胞移植组及单倍体相合造血干细胞移植组的2年总体生存(OS)率分别为63.7%、71.7%和75.5%(P<0.05);2年无复发生存(RFS)率分别为52.8%、67.1%和71. 3%(P<0.001);累积复发率(CIR)分别为24.7%、16.9%和14.4%(P<0.05);非复发死亡率(NRM)分别为26.2%、17.3%、14.4%(P>0.05)。移植相关不良事件分析显示,MSD-HSCT组与haploidentical-HSCT组Ⅱ-Ⅳ度aGVHD分别为48.9%和45.6%(P>0.05);广泛c GVHD分别为21.6%和8.8%(P<0.05)。结论:中危NPM1wt/non-CEBPAdm/FLT3-ITD^neg急性髓系白血病患者首次缓解后行同胞全相合或单倍体相合造血干细胞移植的效果优于单纯巩固化疗。单倍体相合造血干细胞移植与同胞全相合造血干细胞移植在巩固治疗效果和移植相关死亡率上均无明显差异。

关键词：中危急性髓系白血病 CEBPA FLT3-ITD NPM1 单倍体移植

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信号通路抑制剂XL765对人白血病KG-1细胞株的抑制效应研究

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中国实验血液学杂志 2019年第3期27卷 729-734页

作者：吴品陈苏宁王谦何川张日苏州大学附属第一医院血液科江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心

目的:探讨PI3K/mTOR信号通路抑制剂XL765(SAR245409, Voxtalisib)对人急性髓系白血病细胞株KG-1细胞的抑制效应及可能的作用机制。方法:应用CCK-8法检测XL765对KG-1细胞增殖的影响;平板集落形成实验检测XL765对KG-1细胞集落形成的抑制情... 详细信息

目的:探讨PI3K/mTOR信号通路抑制剂XL765(SAR245409, Voxtalisib)对人急性髓系白血病细胞株KG-1细胞的抑制效应及可能的作用机制。方法:应用CCK-8法检测XL765对KG-1细胞增殖的影响;平板集落形成实验检测XL765对KG-1细胞集落形成的抑制情况;Annexin V/PI双染色流式细胞术检测XL765对细胞凋亡的影响;实时荧光定量PCR检测细胞凋亡相关基因的表达;Western blot法检测凋亡相关蛋白的表达水平及信号通路分子磷酸化水平的变化。结果:XL765能有效抑制KG-1细胞的增殖,抑制率呈剂量依赖性增加;与DMSO处理组相比,加入XL765后,KG-1细胞的集落形成能力显著下降(P=0.0002);XL765能有效诱导细胞凋亡(P<0.001);XL765作用KG-1细胞48 h后,细胞的凋亡相关基因BCL-2表达下调,BAX及Caspase3表达上调,其差异均有统计学意义(P<0.05);与DMSO组对比,实验组BAX及Caspase3活化蛋白表达上调,同时BCL-2蛋白表达下调,信号蛋白PI3K、AKT及S6K磷酸化表达下调,其差异均有统计学意义(P值均<0.005)。结论:XL765能有效抑制KG-1细胞增殖及集落形成,并诱导细胞凋亡,其机制可能与调节凋亡蛋白BCL2、BAX及Caspase3水平及抑制PI3K、AKT及S6K磷酸化水平相关。

关键词：急性髓系白血病 KG-1细胞 XL765 信号通路抑制剂

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412例骨髓增殖性肿瘤的JAK2V617F突变检测及其临床意义

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中华肿瘤杂志 2009年第7期31卷 510-514页

作者：晁红颖范峥张日沈益民陈婉费海荣朱子玲冯宇峰陈子兴薛永权苏州大学附属第一人民医院江苏省血液病研究所卫生部血栓与止血重点实验室 215006

目的研究JAK2V617F突变在慢性骨髓增殖性肿瘤（MPN）中的发生率及其与临床表现和并发症间的相关性。方法采用等位基因特异性PCR方法，检测MPN中JAK2V617F的发生情况。结果412例MPN患者中，JAK2V617F突变277例。JAK2V617F在原发性血小板... 详细信息

目的研究JAK2V617F突变在慢性骨髓增殖性肿瘤（MPN）中的发生率及其与临床表现和并发症间的相关性。方法采用等位基因特异性PCR方法，检测MPN中JAK2V617F的发生情况。结果412例MPN患者中，JAK2V617F突变277例。JAK2V617F在原发性血小板增多症（ET）、特发性骨髓纤维化（IMF）和不能分类的骨髓增殖性疾病（MPD—U）中发生率分别为55．9％、66．7％和52．4％（P〉0．05），均低于真性红细胞增多症（PV，95．6％），差异有统计学意义（P〈0．05）。JAK2突变型患者的平均年龄高于野生型患者（P〈0．01）；JAK2突变型患者的白细胞计数和血红蛋白水平均高于野生型患者（P〈0．05）；JAK2突变型患者中血管事件的发生率高于野生型患者（P〈0．05）；JAK2突变型的MPD—U患者较野生型患者更易进展为典型MPN（P〈0．05）；在301例行染色体检查的患者中，未发现核型异常与JAK2V617F表达之间存在相关性。结论检测MPD—U患者中JAK2V617F的突变情况对疾病发展有提示作用；JAK2V617F突变与MPN患者年龄、外周血细胞计数及血管事件并发症相关。

关键词：骨髓增殖性肿瘤 JAK2V617F 等位基因特异性PCR

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影响造血干细胞移植的骨髓增生异常综合征患者生存期的因素分析

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中国实验血液学杂志 2020年第4期28卷 1283-1291页

作者：蒋煜新张灵陈子兴岑建农陈苏宁祁小飞邱桥成王元元苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心江苏苏州215006

目的:分析进行造血干细胞移植的骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)患者的临床特点、常规实验室检查及相关基因突变对总生存期(overall survival,OS)的影响。方法:选取并回顾性分析2013年10月至2018年8月在苏州大学附属... 详细信息

目的:分析进行造血干细胞移植的骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)患者的临床特点、常规实验室检查及相关基因突变对总生存期(overall survival,OS)的影响。方法:选取并回顾性分析2013年10月至2018年8月在苏州大学附属第一医院诊断MDS并进行造血干细胞移植(hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)的患者121例,收集患者基本信息,并检测患者血细胞、初诊骨髓原始细胞、染色体核型及基因突变情况。用统计学方法分析不同因素对生存期的影响。结果:Kaplan-Meier单因素分析发现,不同年龄段之间OS有明显差异,患者年龄越高,3年OS率越低,0-29岁患者3年OS率为(83.3±7.7)%;30-49岁患者3年OS率为(58.1±7.7)%;50-69岁患者均3年OS率为(31.0±22.6)%,且各组之间OS率统计学差异显著(P<0.05)。不同移植类型对患者OS也有显著影响,3年OS率:同胞全相合HSCT>非血缘全相合HSCT>单倍体相合HSCT>微移植。骨髓原始细胞≥10%的患者OS率低于<10%的患者,但差异没有统计学意义。染色体核型复杂异常患者3年OS率为(47.7±11.5)%,非复杂异常患者的3年OS率为(80±4.2)%(P<0.05)。DNMT3A、NRAS、TP53、GATA2基因非突变患者比基因突变的患者移植后OS期长,差异有统计学意义(P<0.05)。COX多因素分析结果显示,年龄、染色体核型、DNMT3A、TET2、GATA2、NRAS对MDS移植后OS有独立影响,且差异具有统计学意义。结论:患者年龄,造血干细胞移植供体选择,患者初诊染色体核型,DNMT3A、NRAS、TP53、GATA2、TET2基因突变均是影响MDS移植后生存期的独立因素。因此对MDS移植患者生存期的评估需要综合多方面考虑。

关键词：骨髓增生异常综合征实验室检查基因突变造血干细胞移植总生存期

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组织因子微颗粒的检测及其在出凝血异常中的临床意义

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中国实验血液学杂志 2012年第4期20卷 937-940页

作者：周莉莉韩悦朱倩胡璐萍赵世香朱明清戴兰沈文红陈黎吴德沛苏州大学附属第一医院血液科江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

本研究应用流式细胞术(FCM)建立组织因子微颗粒的检测方法,并探讨其在出凝血异常中的临床意义。应用特异性荧光抗体CD142-PE标记组织因子,采用FCM建立组织因子微颗粒的检测方法。测定20例血栓性疾病患者及25例初治急性早幼粒细胞白血病(... 详细信息

本研究应用流式细胞术(FCM)建立组织因子微颗粒的检测方法,并探讨其在出凝血异常中的临床意义。应用特异性荧光抗体CD142-PE标记组织因子,采用FCM建立组织因子微颗粒的检测方法。测定20例血栓性疾病患者及25例初治急性早幼粒细胞白血病(APL)患者治疗前后的组织因子微颗粒,观察组织因子微颗粒在各组患者中的变化。结果表明,20例血栓性疾病患者组织因子微颗粒〔(123.28±197.03)/μl〕明显高于20例健康对照组〔(33.27±16.14)/μl,P<0.05〕;25例APL患者治疗前组织因子微颗粒为(75.24±104.58)/μl,亦高于正常对照组(P<0.05),经过诱导治疗缓解后组织因子微颗粒水平明显下降至(34.24±25.20)/μl(P<0.01)。在这25例APL患者中,18例合并弥散性血管内凝血(DIC)患者的组织因子微颗粒在治疗前后有明显差异(P<0.05),7例未合并DIC患者治疗前后的组织因子微颗粒水平未见明显变化。结论:采用流式细胞术检测组织因子微颗粒可对血栓性疾病的诊断提供帮助,并对APL的DIC状况与疾病预后做出评估。

关键词：组织因子微颗粒急性早幼粒细胞白血病血栓性疾病流式细胞技术

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异基因造血干细胞移植治疗急性早前T淋巴细胞白血病23例临床观察

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中华血液学杂志 2019年第12期40卷 1021-1025页

作者：朱原辛朱明清戴海萍刘思宁尹佳李正崔庆亚朱霞明吴德沛唐晓文苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室国家血液病临床医学研究中心215006

目的探讨异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗急性早前T淋巴细胞白血病(ETP-ALL)的疗效及预后。方法回顾性分析2010-2018年在苏州大学附属第一医院接受allo-HSCT的23例ETP-ALL患者的疗效、相关并发症及预后。ETP-ALL根据流式细胞术免... 详细信息

目的探讨异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗急性早前T淋巴细胞白血病(ETP-ALL)的疗效及预后。方法回顾性分析2010-2018年在苏州大学附属第一医院接受allo-HSCT的23例ETP-ALL患者的疗效、相关并发症及预后。ETP-ALL根据流式细胞术免疫表型检测结果诊断。结果23例患者男18例,女5例,中位年龄26(12~47)岁,7例接受同胞全相合移植,4例接受无关供者全相合移植,12例接受单倍型移植,移植前19例患者为完全缓解(CR)状态,4例处于未缓解(NR)状态。ETP-ALL的临床特征:23例患者中,5例初诊时WBC>100×109/L,14例合并脾大,19例合并外周淋巴结肿大,5例合并胸腺受累,11例伴髓系突变,7例具有预后不良核型。所有患者确诊后接受诱导化疗,其中14例在初次化疗后即获得CR,5例经多次化疗后获得CR,4例患者在多次化疗后仍未获得CR。移植结果:22例患者完全植入,其中中性粒细胞和血小板植入中位时间分别为12(9~14)d及19(10~85)d,1例患者于+14 d死于移植相关性感染。中位随访11(1~33)个月,移植后18个月总生存(OS)率为(55.0±14.4)%,无复发生存(RFS)率为(48.1±14.7)%,移植相关死亡率为4.3%。移植前处于CR状态的患者中位OS时间为20个月,NR状态下的患者中位OS时间仅为13个月。19例移植前获得CR的患者中,单倍型移植和同胞全相合移植的OS及RFS差异无统计学意义(P=0.460,P=0.420)。结论allo-HSCT可以改善部分ETP-ALL患者的预后,挽救性移植的ETP-ALL患者仍然预后不佳,单倍型移植以及同胞全相合移植治疗ETP-ALL的疗效相仿。

关键词：异基因造血干细胞移植急性早前T淋巴细胞白血病预后

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蛋白质二硫键异构酶对血小板膜蛋白Ibα酶切的调控作用

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中国实验血液学杂志 2015年第4期23卷 1069-1074页

作者：吴夏闫荣赵丽丽戴克胜苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心江苏苏州215006

目的:本研究旨在探讨蛋白质二硫键异构酶(Protein disulfide isomerase,PDI)在血小板膜蛋白(glycoprotein,GP)Ibα酶切过程中的调控作用。方法:从健康志愿者静脉血分离得到血小板。PDI抑制剂短杆菌肽(bacitracin)预处理血小板后,用佛波... 详细信息

目的:本研究旨在探讨蛋白质二硫键异构酶(Protein disulfide isomerase,PDI)在血小板膜蛋白(glycoprotein,GP)Ibα酶切过程中的调控作用。方法:从健康志愿者静脉血分离得到血小板。PDI抑制剂短杆菌肽(bacitracin)预处理血小板后,用佛波酯(phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)、二丁卡因(dibucaine)、胶原(collagen)刺激血小板。Western blot检测血小板悬液中血小板GPIbα的酶切片段糖萼蛋白(glycocalicin,GC),流式细胞术检测血小板GPIbα的表达量和血小板内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的变化。结果:健康人洗涤血小板在PDI抑制剂bacitracin单独温育后,不会引起血小板悬液中GPIbα的酶切片段和血小板GPIbα膜表达量的改变(P>0.05),但是刺激剂诱导下的PDI抑制剂预处理与对照组相比,血小板GPIbα酶切产物增加、GPIbα膜表达减少(P<0.05)、胞内ROS水平增加(P<0.05)。结论:在诱导的血小板GPIbα酶切过程中,PDI可能参与并通过改变ROS水平进而影响血小板GPIbα胞外段酶切。

关键词：血小板蛋白质二硫键异构酶血小板膜蛋白Ibα

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单倍体造血干细胞联合脐血输注治疗白血病的临床研究

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白血病．淋巴瘤 2014年第2期23卷 88-91页

作者：马超李彩霞刘红叶璐吴小津陈广华余晓马金凤吴德沛苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室 215000

目的分析单倍体造血干细胞联合第三方脐血输注治疗白血病的疗效及安全性.方法对苏州大学附属第一医院2011年1月至2012年5月44例采用单倍体造血干细胞联合第三方脐血输注治疗的白血病患者进行回顾性分析,其中急性淋巴细胞白血病（ALL）... 详细信息

目的分析单倍体造血干细胞联合第三方脐血输注治疗白血病的疗效及安全性.方法对苏州大学附属第一医院2011年1月至2012年5月44例采用单倍体造血干细胞联合第三方脐血输注治疗的白血病患者进行回顾性分析,其中急性淋巴细胞白血病（ALL） 16例、急性髓系白血病（AML）24例、慢性粒细胞白血病（CML）3例、T淋巴母细胞淋巴瘤1例.结果 44例白血病患者回输的单倍体供体移植物中CD34＋细胞中位数为3.14×106/kg（1.68×106/kg ～ 8.32× 106/kg）,回输的第三方脐血中CD34＋细胞中位数为1.03×105/kg（0.31×105/kg～5.32×105/kg）.42例（95.45％）患者造血重建,中性粒细胞造血重建时间为14d（10～29 d）,血小板造血重建时间为23d（11～89d）.对42例植入成功的患者长期监测供受体嵌合率（STR）,除5例（11.90％）患者在移植后3～13个月复发,其余37例（88.10％）患者STR均≥95％.17例（40.47％）患者发生不同程度的急性移植物抗宿主病（aGVHD）,发生Ⅱ～Ⅳ度aGVHD的患者共8例（19.05％）,发生Ⅲ～Ⅳ度aGVHD的患者为4例（9.52％）.23例（54.76％）发生慢性移植物抗宿主病（cGVHD）,其中局限型17例（40.47％）,广泛型6例（14.29％）.1年总生存（OS）率为70.84％,1年无事件生存（EFS）率为63.34％.结论初步研究证实单倍体造血于细胞联合第三方脐血输注治疗白血病安全有效,从而为异基因造血干细胞的移植提供了新的方法.

关键词：白血病单倍体造血干细胞脐血移植物抗宿主病

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单中心22例获得性血友病的回顾性临床研究

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中华血液学杂志 2015年第2期36卷 107-111页

作者：杨春晨余自强张威曹丽娟苏健沙萍萍白霞王兆钺阮长耿苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心215006

目的探讨获得性血友病的病因、临床表现、临床诊断与治疗.方法对2010年3月至2014年6月诊断的22例获得性血友病患者的临床资料进行回顾性分析.结果 22例患者中,获得性血友病A（AHA）20例（90.9％）,获得性血友病B（AHB）2例（9.1％）.... 详细信息

目的探讨获得性血友病的病因、临床表现、临床诊断与治疗.方法对2010年3月至2014年6月诊断的22例获得性血友病患者的临床资料进行回顾性分析.结果 22例患者中,获得性血友病A（AHA）20例（90.9％）,获得性血友病B（AHB）2例（9.1％）.AHA患者中,男、女各10例,中位年龄37.5（2～95）岁,中位凝血因子Ⅷ活性（FⅧ∶C）为1.9％（0.5％～39.0％）,以肌肉软组织血肿（80.0％）、皮肤瘀斑（75.0％）为主要临床表现;2例AHB患者均为男性儿童（1、3岁各1例）,临床症状轻微,凝血因子Ⅸ活性（FⅨ∶C）分别为5.0％、16.0％.22例患者中,7例（31.8％）存在相关病因.所有患者均APTT延长,PT正常,APTT纠正试验不能纠正或检出抑制物（滴度值2～32 BU）,狼疮抗凝物及抗心磷脂抗体阴性.19例患者接受血制品止血治疗,7例患者单独使用肾上腺糖皮质激素清除抑制物,11例患者接受肾上腺糖皮质激素联合其他免疫抑制剂清除抑制物,3例患者接受利妥昔单抗治疗.20例AHA患者中19例（95.0％）急性出血控制,8例（40.0％）患者抑制物消失且FⅧ∶C＞50％[中位治疗时间42.5（21～145）d],因出血死亡1例.2例AHB患者分别在治疗48、60 d后FⅨ∶C达到35％、24％.结论获得性血友病并非罕见,可见于各年龄段,临床表现异质性高,儿童患者症状较轻.

关键词：获得性血友病自身抗体免疫抑制剂回顾性研究

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成人急性T淋巴细胞白血病JAK1基因突变

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江苏医药 2011年第8期37卷 908-910页

作者：王文娟孙爱宁陈广华吴德沛李渭阳常伟荣丁子轩苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室 215006

目的分析成人急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)患者骨髓细胞JAK1基因突变特征。方法提取骨髓单个核细胞总DNA,采用PCR及直接测序方法分析40例初诊的成人T-ALL患者骨髓单个核细胞JAK1基因的全部外显子的突变。结果 40例T-ALL患者中,JAK1突变2... 详细信息

目的分析成人急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)患者骨髓细胞JAK1基因突变特征。方法提取骨髓单个核细胞总DNA,采用PCR及直接测序方法分析40例初诊的成人T-ALL患者骨髓单个核细胞JAK1基因的全部外显子的突变。结果 40例T-ALL患者中,JAK1突变2例(5%),分别为点突变及插入突变,导致氨基酸序列发生变化,且这两种突变类型均位于国外文献未报道过的外显子区域。结论初诊成人急性T淋巴细胞白血病中,JAK1基因突变率为5%左右,低于国外报道。

关键词：急性T淋巴细胞白血病 JAK1基因基因突变

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