检索结果-内蒙古大学图书馆

出血与血栓性疾病的诊断和治疗进展

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中国输血杂志 2010年第10期23卷 753-755页

作者：阮长耿苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

出血与血栓性疾病由于严重威胁人类健康,正日益受到临床各科的重视。本文就出血与血栓性疾病的发生机制以及近年来在诊疗方面有所进展的相关疾病,如遗传性出血性疾病、血栓性血小板减少性紫癜、血栓性疾病等作一综述。

关键词：出血性疾病血栓性疾病生理性止血遗传性出血性疾病血小板减少性紫癫

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人血小板膜糖蛋白GPIbα(H1-V289)的原核表达及其生物活性研究

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苏州大学学报（医学版） 2010年第6期30卷 1151-1155页

作者：马珍妮董宁征白霞杨剑峰谢丽倩阮长耿苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的获得重组的血小板膜糖蛋白GPIbα的N端片段(1-289氨基酸),进一步研究其在血栓与止血过程中的生物功能。方法利用质粒pCMV3(编码GPIbαH1-V289)设计引物,构建pQE30-GPIbα(H1-V289)表达载体,转化大肠杆菌M15,IPTG诱导表达蛋白。用Ni-... 详细信息

目的获得重组的血小板膜糖蛋白GPIbα的N端片段(1-289氨基酸),进一步研究其在血栓与止血过程中的生物功能。方法利用质粒pCMV3(编码GPIbαH1-V289)设计引物,构建pQE30-GPIbα(H1-V289)表达载体,转化大肠杆菌M15,IPTG诱导表达蛋白。用Ni-NTA琼脂糖层析柱不同pH值梯度淋洗法纯化蛋白,SDS-PAGE和Western blot鉴定纯化产品纯度和免疫学活性,并观察重组蛋白对瑞斯托霉素和ADP诱导血小板聚集的影响。结果成功获得纯度较高的重组GPIbα(H1-V289)蛋白,浓度为0.6 mg/ml。Western blot检测结果显示,抗GPIbα单抗SZ2能在34 kd区域显示条带。而且纯品能有效抑制瑞斯托霉素诱导的血小板聚集,对ADP诱导的反应无抑制作用。结论重组蛋白具有较好的免疫原性和生物活性,并可以大量获得,为开发抗血栓药物奠定了基础。

关键词：血小板膜糖蛋白GPIbα 血小板聚集瑞斯托霉素

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特发性血小板减少性紫癜患者幽门螺杆菌尿素酶B检测及抗幽门螺杆菌治疗效果分析

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苏州大学学报（医学版） 2010年第2期30卷 343-346页

作者：赵静王兆钺白艳艳曹丽娟苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的分析特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者的幽门螺杆菌(Hp)感染情况,探讨抗Hp治疗对Hp感染阳性ITP患者的疗效。方法 ITP组45例,正常对照组32例,利用双抗夹心ELISA法检测两组Hp感染情况,对Hp感染阳性的ITP患者在治疗ITP的同时加用抗Hp治... 详细信息

目的分析特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者的幽门螺杆菌(Hp)感染情况,探讨抗Hp治疗对Hp感染阳性ITP患者的疗效。方法 ITP组45例,正常对照组32例,利用双抗夹心ELISA法检测两组Hp感染情况,对Hp感染阳性的ITP患者在治疗ITP的同时加用抗Hp治疗,与ITP组中Hp阴性病例治疗后的血小板数进行比较。结果 ITP组及正常对照组的Hp检出阳性率分别为66.7%与43.8%,ITP组Hp阳性率明显较高(P<0.05);25例Hp阳性的ITP患者经抗Hp治疗后,转阴21例的血小板数明显高于ITP组中Hp阴性组(P<0.05);Hp根除后的21例中,有12例血小板计数明显上升或恢复正常。结论 ITP患者Hp感染阳性率高于正常人;抗Hp治疗可以提高Hp感染的部分ITP患者血小板数量;Hp感染可能与ITP发病有关。

关键词：幽门螺杆菌特发性血小板减少性紫癜治疗

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CD40L在特发性血小板减少性紫癜患者中的表达及其意义

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苏州大学学报（医学版） 2010年第6期30卷 1224-1225,1252页

作者：戴兰王兆钺张日朱明清沈文红何杨阮长耿苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的研究特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者血浆中可溶性CD40配体(sCD40L)及T、B淋巴细胞和血小板上CD40L的变化,探讨CD40分子在ITP中的作用。方法应用酶联免疫吸附法检测患者血浆中sCD40L的变化;流式细胞术检测不同细胞上CD40L的表达水... 详细信息

目的研究特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者血浆中可溶性CD40配体(sCD40L)及T、B淋巴细胞和血小板上CD40L的变化,探讨CD40分子在ITP中的作用。方法应用酶联免疫吸附法检测患者血浆中sCD40L的变化;流式细胞术检测不同细胞上CD40L的表达水平。结果 ITP患者血浆中的sCD40L浓度明显高于正常对照组(P<0.05),且血小板计数对血浆中sCD40L浓度有一定程度的影响(r=0.58,P<0.05);ITP患者T淋巴细胞上CD40L的表达率较正常对照组明显升高(P<0.05)。结论 ITP患者血浆及T细胞上CD40L升高,淋巴细胞表面的CD40-CD40L相互作用可能与ITP的发病有关。

关键词：特发性血小板减少性紫癜 CD40L

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KIR/HLA受配体模式及抑制性KIR的表达对单倍体造血干细胞移植的影响

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苏州大学学报（医学版） 2010年第4期30卷 781-785页

作者：周丽娜孙爱宁何军李渭阳鲍晓晶王荧仇惠英吴德沛苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体/人类白细胞抗原(KIR/HLA)受配体模式及移植后抑制性杀伤免疫球蛋白类受体(iKIR)的表达对单倍体造血干细胞移植预后的影响。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应(SSP-PCR)方法,对14对HLA半相合供/受者... 详细信息

目的探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体/人类白细胞抗原(KIR/HLA)受配体模式及移植后抑制性杀伤免疫球蛋白类受体(iKIR)的表达对单倍体造血干细胞移植预后的影响。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应(SSP-PCR)方法,对14对HLA半相合供/受者移植前进行KIR与HLA分型,同时分析KIR/HLA的受配体模式,用四色流式细胞技术对其中8例患者在移植后检测CD158a(KIR2DL1)、CD158b(KIR2DL2)、CD158e(KIR3DL1)的表达。结果 3例受者表达供者所有iKIR相应配体HLA-C2、C1、Bw4,此3对供受者即为KIR配体相合组;另外11对存在KIR配体缺失的供受者则为KIR配体迷失组。KIR配体迷失组患者移植后中性粒细胞及血小板重建时间较KIR配体相合组均较晚,但差异无统计学意义(P>0.05)。KIR配体迷失组患者移植后2年持续缓解率和2年总生存率高于KIR配体相合组,但差异无统计学意义(P>0.05)。移植后监测iKIR发现受者均表达供者型iKIR,4例患者复发时监测NK细胞及iKIR表达明显降低。结论在HLA半相合造血干细胞移植中,移植后动态监测iKIR的表达可预示复发,KIR/HLA受配体错配可能有助于提高移植后缓解率和总生存率。

关键词：杀伤细胞免疫球蛋白样受体人类白细胞抗原抑制性杀伤细胞免疫球蛋白样受体单倍体移植

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抗人凝血因子Ⅷ-C1C2区单克隆抗体的制备及鉴定

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苏州大学学报（医学版） 2010年第1期30卷 106-109页

作者：张婷婷赵益明李振宇沈飞阮长耿苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

目的制备抗人凝血因子Ⅷ(FⅧ)C1C2区单克隆抗体(mAb),并对其进行生化和生物学鉴定。方法采用基因重组技术表达FⅧ-C1C2区蛋白(rFⅧ-C1C2),以rFⅧ-C1C2免疫8周龄Balb/C小鼠,小鼠脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合后,ELISA法筛选阳性克隆,制... 详细信息

目的制备抗人凝血因子Ⅷ(FⅧ)C1C2区单克隆抗体(mAb),并对其进行生化和生物学鉴定。方法采用基因重组技术表达FⅧ-C1C2区蛋白(rFⅧ-C1C2),以rFⅧ-C1C2免疫8周龄Balb/C小鼠,小鼠脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合后,ELISA法筛选阳性克隆,制备稳定分泌抗rFⅧ-C1C2mAb的细胞株,并对mAb进行生化和免疫学鉴定。结果获得一株抗rFⅧ-C1C2区单克隆抗体阳性克隆2B11,命名为SZ-133。琼脂糖双扩散鉴定为IgG1类,Westernblot法证实SZ-133可与rFⅧ-C1C2区蛋白及重组的全长FⅧ特异性结合,但不影响FⅧ的凝血活性。结论表达了rFⅧ-C1C2,并制备出了抗人凝血因子Ⅷ的单克隆抗体SZ-133,它能特异识别血浆及重组的FⅧ,有可能用于基础和临床应用研究。

关键词：人凝血因子Ⅷ(FⅧ)C1C2区原核表达单克隆抗体鉴定

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转录抑制因子GFI1在白血病中的表达及意义的研究

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中国实验血液学杂志 2010年第4期18卷 834-837页

作者：王甜甜陈子兴岑建农何军沈宏杰姚利苏州大学附属第一人民医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室苏州215006

本研究初步探讨转录抑制因子GFI1(growth-factor independence 1)在不同类型白血病中的表达水平及转录抑制因子GFI1表达变化在白血病发病机制中的作用。收集65例初诊白血病患者骨髓细胞标本,其中急性髓系白血病(AML)24例,慢性髓系白血病... 详细信息

本研究初步探讨转录抑制因子GFI1(growth-factor independence 1)在不同类型白血病中的表达水平及转录抑制因子GFI1表达变化在白血病发病机制中的作用。收集65例初诊白血病患者骨髓细胞标本,其中急性髓系白血病(AML)24例,慢性髓系白血病(CML)18例,急性淋巴细胞白血病(ALL)6例,慢性髓系白血病急变期患者17例。缺铁性贫血患者13例作为对照组。采用半定量和实时定量RT-PCR方法检测gfi1的转录表达水平。结果表明:白血病患者组gfi1表达明显高于对照组,差异具有统计学意义(p<0.01),其中初诊CML组gfi1表达显著高于初诊AML组、初诊ALL组及CML急变组,差异具有统计学意义(p<0.01)。CML急变组中,急淋变组gfi1表达明显高于非急淋变组,两组间有显著性差异(p=0.004)。结论:gfi1表达异常可能参与白血病的发生与发展,gfi1表达上调可能促进淋巴系肿瘤的发生。

关键词： GFI1 转录因子白血病 PCR

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黄芪多糖对浆细胞样树突状细胞功能及成熟的影响

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中国免疫学杂志 2010年第8期26卷 712-715页

作者：刘立民张彦明陆沭华孙雨梅何广胜徐州医学院附属淮安医院淮安市第二人民医院血液科淮安223002 苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室苏州213001

目的:通过体外实验研究黄芪多糖(Astragalus polysaccharide,APS)对浆细胞样树突状细胞(Plasmacytoid dendritic cell,pDC)功能及成熟的影响,为进一步阐明黄芪多糖的免疫学活性提供依据。方法:从健康志愿者外周血分离单个核细胞,流式细... 详细信息

目的:通过体外实验研究黄芪多糖(Astragalus polysaccharide,APS)对浆细胞样树突状细胞(Plasmacytoid dendritic cell,pDC)功能及成熟的影响,为进一步阐明黄芪多糖的免疫学活性提供依据。方法:从健康志愿者外周血分离单个核细胞,流式细胞仪分选pDC,加入0、50、100、200mg/L的黄芪多糖共孵育,24小时后收集上清液,应用酶联免疫吸附试验检测pDC分泌的IFN-α、TNF-α、IL-6量,5天后收集细胞,应用流式细胞仪检测树突状细胞(Dendritic cell,DC)表型CD11c、CD80、CD86阳性率、光镜观察DC的形态、扫描电镜观察DC的超微结构。结果:黄芪多糖显著提高pDC分泌的IFN-α、TNF-α、IL-6量,并且呈黄芪多糖浓度依赖性(P<0.05);黄芪多糖可促进pDC向DC的分化和成熟,并呈黄芪多糖浓度依赖性(P<0.05)。结论:黄芪多糖能够增强pDC的功能,并促进其向DC的分化和成熟。

关键词：黄芪多糖浆细胞样树突状细胞成熟

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KIR2DS4等位基因在无关全相合异基因造血干细胞移植中的作用

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中华血液学杂志 2010年第11期31卷 726-731页

作者：鲍晓晶何军孙爱宁邱桥成袁晓妮陈子兴张学光苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室、中国造血干细胞捐献者资料库HLA高分辨配型定点实验室 215006 苏州大学生命科学学院免疫研究所

目的研究中国南方汉族人群中KIR2DS4等位基因分布及2DS4基因对无关供者全相合造血干细胞移植（HSCT）的影响.方法采用基因测序（Sequenee-based testing,SBT）和TOPO-TA 克隆相结合的方法 ,对接受HSCT的75对HLA-A、-B、-Cw、-DRB1、-D... 详细信息

目的研究中国南方汉族人群中KIR2DS4等位基因分布及2DS4基因对无关供者全相合造血干细胞移植（HSCT）的影响.方法采用基因测序（Sequenee-based testing,SBT）和TOPO-TA 克隆相结合的方法 ,对接受HSCT的75对HLA-A、-B、-Cw、-DRB1、-DQB1高分辨全相合的供、受者进行KIR2DS4等位基因分型,150名供、受者均为中国南方汉族人群,75例受者中急性淋巴细胞白血病（ALL）29例,慢性粒细胞白血病（CML）24例,急性髓系白血病（AML）19例,其他恶性血液病3例.结果 150名供、受者中139例（92.7%）存在KIR2DS4基因,对2DS4基因全长测序后发现4个2DS4等位基因：KIR2DS4＊00101、＊003、＊004和＊007;109例（78.4%）存在2DS4＊00101;2DS4缺失型（具有1个或缺失2DS4＊00101基因）与完整型（具有两个2DS4＊00101基因）的存在比率为1：2;发现3个KIR2DS4新基因.当供者KIR分型为B/x（40例）时,移植后总体生存率明显高于供者为A/A组（35例）[RR=3.1（95%CI 1.1～8.6）,P=0.007];当供者为完整型（36例）时,移植后总体生存率低于供者为缺失型（39例）（P=0.031）;在A/A组中,当供者为完整型（14例）时,移植后急性移植物抗宿主病（GVHD）的发生率明显高于供者为缺失型（21例）[RR=9.0（95%CI 1.2～66.9）,P=0.010],并以Ⅲ～Ⅳ度aGVHD尤为明显（P=0.006）.结论 SBT与TOPO-TA基因克隆的高分辨分型方法可用于研究KIR基因家族多态性,并且移植前在HLA分型的基础上对供受者进行KIR2DS4基因分型,可能对临床选择合适的供者提供有利的依据.

关键词：造血干细胞移植自然杀伤细胞等位基因 KIR2DS4 移植物抗宿主病

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Notch信号通路相关基因的mRNA在急性B淋巴细胞白血病中的表达

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肿瘤防治研究 2010年第8期37卷 897-901页

作者：周亚南陈子兴小池健一坂下一夫岑建农姚利苏州大学附属第一医院江苏省血液病研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006 日本信州大学附属病院

目的检测Notch信号通路相关基因的mRNA在B-ALL(急性B淋巴细胞白血病)中的表达水平,并探讨其在B-ALL中的作用。方法建立实时定量RT-PCR方法,采用ABI PRISM7 700 PCR仪检测了16例初诊B-ALL患者骨髓(原始+幼稚淋巴细胞≥80%)和11例正常供... 详细信息

目的检测Notch信号通路相关基因的mRNA在B-ALL(急性B淋巴细胞白血病)中的表达水平,并探讨其在B-ALL中的作用。方法建立实时定量RT-PCR方法,采用ABI PRISM7 700 PCR仪检测了16例初诊B-ALL患者骨髓(原始+幼稚淋巴细胞≥80%)和11例正常供者骨髓中Notch1、Notch2、Jagged1、Delta1和Hes1及内参GAPDH的表达水平,以检测基因=(检测基因拷贝数/GAPDH拷贝数)×106计算检测基因的表达水平。结果 B-ALL组骨髓中Jagged1基因的mRNA表达水平明显低于对照组,分别为(76.7±23.8)和(2192.3±971.6)(P=0.000),Delat1基因mRNA表达水平B-ALL组明显高于对照组,分别为(60316.6±8713.5)和(2189.8±802.3)(P=0.002),差异有统计学意义。Notch1、Notch2和Hes1基因的mRNA表达水平B-ALL组分别为(6167.6±1661.3)、(95318.6±9437.5)和(258.2±96.2),对照组分别为(1735.5±936.6)、(52078.2±8746.3)和(1006.2±806.0)(P值分别为0.089、0.815和0.786),此三个基因在B-ALL组与对照组之间表达差异没有统计学意义。结论 Jagged1在B-ALL中低表达,Delta1在B-ALL中高表达,提示B-ALL发病与Notch信号途径中配基的异常表达有关。

关键词： Notch 实时定量 RT-PCR 白血病 B淋巴细胞急性

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