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伴4号染色体三体异常的t（8；21）急性髓系白血病c-kit基因突变的发生及患者预后

白血病．淋巴瘤 2016年第6期25卷 330-335页

作者：季诗梦孙爱宁陈苏宁曾招薛胜利沈宏杰解珺丹吴德沛苏州大学附属第一医院血液科江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心 215006

目的探讨伴有4号染色体三体异常的t（8；21）急性髓系白血病（AML）c－kit基因突变的发生率及患者预后。方法回顾性分析2005年2月至2013年1月145例初治t（8；21）AML患者的实验室及临床资料。所有骨髓样本均采用R显带技术进行核型分析... 详细信息

目的探讨伴有4号染色体三体异常的t（8；21）急性髓系白血病（AML）c－kit基因突变的发生率及患者预后。方法回顾性分析2005年2月至2013年1月145例初治t（8；21）AML患者的实验室及临床资料。所有骨髓样本均采用R显带技术进行核型分析。采用PCR方法检测c—kit基因8号、17号外显子突变情况，并分析患者的临床预后。结果145例t（8；21）AML患者中，12例（813％）伴有4号染色体三体异常，其c－kit基因突变发生率为91．7％（11／12），明显高于其他患者[26．3％（35／133）]（P〈0．01）。生存分析显示，伴有4号染色体三体异常的t（8；21）AML患者的3年总体生存（OS）率及无病生存（DFS）率（15％、0）均低于其他t（8；21）AML患者（56％、51％）（P〈0．01）。同时伴有4号染色体三体及c－kif基因突变的t（8；21）AML患者的OS率及DFS率均较不伴有或不同时伴有4号染色体三体及c－kit基因突变的患者低（均／P〈0．05）。结论伴有4号染色体三体异常的t（8；21）AML患者***基因突变发生率高，且预后不佳。4号染色体三体异常或联合c—kit基因突变是影响t（8；21）AML患者生存的主要因素。

关键词：白血病髓样急性 4号染色体三体 c-kit t(8 21) 预后

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抗ADAMTS13单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

抗ADAMTS13单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

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第十三届江浙沪儿科学术会议暨2016年浙江省医学会儿科学学术年会

作者：凌婧马珍妮沈飞谢丽倩赵云霄阮长耿苏州大学附属儿童医院血液科苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室

目的:建立分泌抗ADAMTS13单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备针对ADAMTS13不同结构域的单克隆抗体,为研究ADAMTS13功能、血栓形成的机制以及研究TTP治疗的新方法的提供有力的研究工具。方法:首先,我们构建了稳定表达截短型ADAMTS13-T7蛋白的... 详细信息

目的:建立分泌抗ADAMTS13单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备针对ADAMTS13不同结构域的单克隆抗体,为研究ADAMTS13功能、血栓形成的机制以及研究TTP治疗的新方法的提供有力的研究工具。方法:首先,我们构建了稳定表达截短型ADAMTS13-T7蛋白的HeLa细胞株,并扩大培养,收集无血清培养上清。通过Ni-NTA Agarose将浓缩后上清纯化,然后通过SDS-PAGE电泳后进行考马斯亮蓝染色和western blot鉴定,以全长ADAMTS13为对照。然后,我们用真核表达的截短型ADAMTS13-T7蛋白采用皮下多点注射免疫8周龄Balb/c雌性小鼠,并用纯蛋白液直接经尾静脉注射加强免疫。末次免疫后第3天眼球采血,分离上述小鼠抗血清,用ELISA方法测定免疫小鼠与ADAMTS13-T7蛋白的抗血清效价。用未免疫的正常小鼠血清作为阴性对照。用重组ADAMTS13-T7蛋白包板,ELISA检测免疫后:balb/c雌性小鼠抗血清效价。取小鼠脾脏,制成单细胞悬液与SP2/0骨髓瘤细胞以10:1的比例混合,进行细胞的融合。将融合杂交瘤细胞稀释至96孔板后置于37%、5%C02培养箱中培养。两周后观察96孔板中是否有克隆,选生长良好的克隆孔检测,阳性克隆孔扩大培养并再次检测。结果:构建了稳定表达截短型血管性血友病因子裂解蛋白酶ADAMTS13-T7的HeLa细胞株,收集上清纯化后获得重组ADA:MTS13-T7。利用真核表达的截短型ADAMTS13-T7蛋白免疫balb/c雌性小鼠,ELISA检测免疫后抗血清效价约为1:20000。利用杂交瘤技术通过融合,获得多株分泌抗重组ADAMTS13抗体的杂交瘤单克隆细胞株。将其中的30株转入液氮中冻存,以备进一步分选及功能研究。结论:使用真核表达的截短型ADAMTS13-T7蛋白,作为免疫抗原免疫ba1b/c雌性小鼠,并通过杂交瘤技术,融合获得多株分泌抗重组ADAMTS13抗体的杂交瘤单克隆细胞株,为进一步筛选出具有一定功能活性的单克隆抗体,从而为ADA:MTS13结构及功能的研究提供更多的有力工具奠定良好基础。

关键词： ADAMTS13 真核表达杂交瘤单克隆抗体

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地西他滨联合维甲酸、三氧化二砷治疗急性早幼粒细胞白血病自体移植后复发患者1例并文献复习

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医学信息（医学与计算机应用） 2016年第30期29卷 285-286页

作者：张桂芳仇惠英沙信山周敏常熟市第一人民医院血液科江苏常熟215500 苏州大学附属第一医院血液科、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215000

目的:探讨急性早幼粒细胞白血病(APL)患者二次复发后的诊治及预后。方法回顾性分析1例APL二次复发后的临床资料并复习相关文献。结果该例患者第一次复发后再诱导达二次缓解,后行自体造血干细胞移植,但1月余后患者再次复发,予地西他滨、... 详细信息

目的:探讨急性早幼粒细胞白血病(APL)患者二次复发后的诊治及预后。方法回顾性分析1例APL二次复发后的临床资料并复习相关文献。结果该例患者第一次复发后再诱导达二次缓解,后行自体造血干细胞移植,但1月余后患者再次复发,予地西他滨、维甲酸、三氧化二砷联合治疗后骨髓能获得缓解,但是患者骨髓抑制时间长,后又合并中枢神经系统白血病(CNSL)、颅内出血等情况而死亡。结论地西他滨治疗急性早幼粒细胞白血病二次复发有一定疗效,但其骨髓抑制时间长,长期疗效有待进一步研究。

关键词：地西他滨急性早幼粒细胞白血病复发自体移植

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EVI1基因阳性急性髓系白血病的临床特点与预后分析

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实用临床医药杂志 2016年第9期20卷 32-36页

作者：李娟谢静李和兰石培民孙爱宁扬州大学附属泰兴市人民医院血液科江苏泰兴225400 苏州大学附属第一医院血液科江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215000

目的探讨EVI1基因阳性急性髓系白血病(AML)患者的临床特点、预后并与EVI1基因阴性AML患者进行比较。方法观察309例AML病例,分析EVI1基因阳性AML患者的临床特征、细胞形态学、融合基因、早期死亡(ED)、CR率、总体生存率(OS)、无复发生存... 详细信息

目的探讨EVI1基因阳性急性髓系白血病(AML)患者的临床特点、预后并与EVI1基因阴性AML患者进行比较。方法观察309例AML病例,分析EVI1基因阳性AML患者的临床特征、细胞形态学、融合基因、早期死亡(ED)、CR率、总体生存率(OS)、无复发生存率(RFS)、造血干细胞移植效果等,并与EVI1基因阴性AML患者进行比较。结果 EVI1基因阳性AML患者白细胞数显著增高(P<0.05),FAB分型中M4/M5比例偏高(P<0.05)。EVI1阳性患者的染色体核型主要为预后较差的11q23(MLL基因阳性)、inv(3)/t(3;3)、-7等重现性染色体异常,而一些预后较好的核型如t(15;17)、t(8;21)、inv(16)发生率较低。EVI1基因阳性AML患者CR率明显低于EVI1基因阴性者(54.3%∶74.1%)(P<0.05)。allo-HSCT可明显提高EVI1基因阳性AML患者OS(P<0.05)。结论 EVI1基因阳性AML白细胞数高,生存期短,化疗效果差,预后不良。

关键词： EVI1基因急性髓系白血病异基因造血干细胞移植

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替加环素治疗107例粒细胞缺乏合并感染血液病患者的临床观察

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中华血液学杂志 2015年第7期36卷 583-586页

作者：胡星星孙爱宁郑佳佳张彤彤仇惠英高苏冯宇峰吴德沛苏州大学附属第一医院血液科、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室215006

目的观察替加环素治疗粒细胞缺乏合并感染血液病患者的疗效和安全性.方法回顾性分析107例使用替加环素治疗粒细胞缺乏并感染血液病患者的临床资料,替加环素初始剂量100mg,维持剂量50 mg,每12h1次,30～60 min静脉滴注完毕,患者体温正常... 详细信息

目的观察替加环素治疗粒细胞缺乏合并感染血液病患者的疗效和安全性.方法回顾性分析107例使用替加环素治疗粒细胞缺乏并感染血液病患者的临床资料,替加环素初始剂量100mg,维持剂量50 mg,每12h1次,30～60 min静脉滴注完毕,患者体温正常5～7 d后开始予抗菌药物降阶梯治疗或停药.结果 107例患者住院期间共分离出病原菌104株,其中多重药耐菌株（MDR）60株,泛耐药菌株（XDR）2株.全部107例患者中,30例单用替加环素,21例初始单用替加环素后联合其他抗菌药物,56例初始即替加环素联合其他抗菌药物,3组患者治疗有效率分别为63.3％、61.9％及62.5％,差异无统计学意义（P=0.994）,替加环素治疗总有效率为62.6％.39例分离出MDR的患者中,22例体温得到控制,8例体温未得到控制,9例死亡,临床有效率为56.4％.替加环素起效的中位时间为3d.不良反应以恶心（11.2％）、呕吐（8.4％）为主,均可以耐受.结论替加环素治疗粒细胞缺乏血液病患者耐药菌感染具有较好的疗效,引发的不良反应少,安全可耐受.

关键词：替加环素粒细胞缺乏感染治疗结果

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替代供体来源非全相合造血干细胞移植治疗血液系统疾病的单中心回溯性分析

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中国实验血液学杂志 2015年第1期23卷 159-165页

作者：王婧周进郑慧菲王攀峰傅琤琤苏州大学附属第一医院血液科江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215000

目的:异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)是治疗血液病的重要手段,然而仅1/4的患者可能找到HLA全相合的同胞供体。为扩大供者来源,本研究比较脐血移植(UCBT)、单倍体相合移植(haplo identical,hi-HSCT)、非全相合非亲缘供者移植(MMUDT)3... 详细信息

目的:异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)是治疗血液病的重要手段,然而仅1/4的患者可能找到HLA全相合的同胞供体。为扩大供者来源,本研究比较脐血移植(UCBT)、单倍体相合移植(haplo identical,hi-HSCT)、非全相合非亲缘供者移植(MMUDT)3种造血干细胞移植的特点。方法:回顾性分析了2010年1日至2012年6月共计93例造血干细胞移植的病历资料,其中UCBT组22例,hi-HSCT组42例,M M UDT组29例,比较3组造血重建、急性移植物抗宿主病(a GVHD)、复发率、生存时间。结果:UCBT、hi-HSCT、MMUDT 3组造血重建时间(ANC>1.0×109)分别是19、12、12 d,UCBT组粒细胞重建明显延迟(P<0.05);3组植入时间(STR>95%)分别是15、26、20d,hi-HSCT组植入时间相对较晚;3组植入失败率分别是26%、5%、3%,UCBT组植入失败率较高(P<0.05)。3组a GVHD发生率无统计学差异,分别是50%、57.1%、72.4%,3组Ⅲ-Ⅵa GVHD发生率亦无统计学差异,分别是27.3%、28.6%、17.2%;UCBT组的慢性移植物抗宿主病(c GVHD)发生率最低,3组分别是19%、45.5%、58.3%;3组移植后100 d内的移植相关死亡率(TRM)分别是23.8%、20%、11.1%;3组2年的总体生存率分别是79.9%、80.9%、88.0%。结论:UCBT组c GVHD发生率最低,但造血重建缓慢;hi-HSCT组尽管干细胞来源广泛并且可以支持后续细胞免疫治疗,但TRM较高;而较高的a GVHD及c GVHD发生率是MMUDT组需要解决的首要问题。

关键词：造血干细胞移植脐血干细胞移植单倍体相合造血干细胞移植非亲缘供体非全相合造血干细胞移植

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PDD与PAD方案治疗初治多发性骨髓瘤患者的疗效和安全性比较

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中华血液学杂志 2015年第4期36卷 340-343页

作者：马玲傅琤琤刘辉金松顾斌颜霜王攀峰徐云薛胜利李渭阳孙爱宁吴德沛苏州大学附属第一医院血液科江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室215006

多发性骨髓瘤（multiplemyeloma，MM）患者通常对很多细胞毒性药物敏感，但疗效比较短暂。近年来，随着新药的应用，大大提高了MM患者总体反应率和生存时间。2013年NCCN指南中，将PAD（硼替佐米、阿霉素及地塞米松）方案列为适合移植治... 详细信息

多发性骨髓瘤（multiplemyeloma，MM）患者通常对很多细胞毒性药物敏感，但疗效比较短暂。近年来，随着新药的应用，大大提高了MM患者总体反应率和生存时间。2013年NCCN指南中，将PAD（硼替佐米、阿霉素及地塞米松）方案列为适合移植治疗的MM患者的一类推荐主要治疗方案。

关键词：多发性骨髓瘤治疗方案 PAD 患者疗效安全性 PDD 初治

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急性白血病患者异基因造血干细胞移植后Epstein-Barr病毒血症的检测和临床分析

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临床血液学杂志 2016年第1期29卷 20-23页

作者：宋铁梅张翔吴德沛孙爱宁徐静徐杨王荧常惠荣朱子玲冯宇锋陈峰陈佳苏州大学附属第一医院血液科江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室血液学协同创新中心苏州215006 苏州工业园区娄葑医院血液科

目的:观察急性白血病患者接受异基因造血干细胞移植后Epstein-Barr病毒(EBV)血症的发生率,筛选其发生的高危因素,并评估EBV血症对移植预后的影响。方法:收集2012-01-2014-06于本中心接受异基因移植的急性白血病患者共501例的临床资料进... 详细信息

目的:观察急性白血病患者接受异基因造血干细胞移植后Epstein-Barr病毒(EBV)血症的发生率,筛选其发生的高危因素,并评估EBV血症对移植预后的影响。方法:收集2012-01-2014-06于本中心接受异基因移植的急性白血病患者共501例的临床资料进行统计学分析,EBV血症检测采用实时定量PCR法检测外周血标本。结果:急性白血病患者移植后EBV血症2年累积发生率为22.1%±1.9%,不同类型白血病间发生率差异无统计学意义(P=0.406)。多因素分析结果显示,预处理中应用抗胸腺细胞球蛋白和单倍型供体是影响EBV血症发生率的独立危险因素。移植后EBV血症阴性和阳性患者2年总生存率分别为64.1%±2.3%和67.7%±5.7%,无白血病生存率分别为61.6%±2.3%和63.1%±6.0%,复发率分别为19.2%±2.1%和18.9%±5.3%,非复发死亡率分别为28.0%±2.2%和23.3%±4.3%,差异均无统计学意义。结论:EBV血症是急性白血病患者异基因移植后较为常见的并发症,预处理中应用抗胸腺细胞球蛋白和单倍型供体可显著升高EBV血症的发生率。通过积极监测及治疗,EBV血症不会显著降低移植预后。

关键词：白血病,急性异基因造血干细胞移植 Epstein-Barr病毒

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异基因造血干细胞移植后CMV重激活与闭塞性细支气管炎相关性探讨

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中华血液学杂志 2015年第5期36卷 389-392页

作者：徐静陈广华宋铁梅朱子玲冯宇锋常惠荣陈峰马骁吴德沛苏州大学附属第一医院娄葑分院血液科 215006 苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室

目的探讨异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）术后CMV重激活与闭塞性细支气管炎（BO）的相互关系.方法 2011年1月至2013年12月行allo-HSCT的769例患者,通过荧光定量PCR方法检测CMV-DNA水平,免疫荧光染色白细胞PP65抗原血症两种检测方法... 详细信息

目的探讨异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）术后CMV重激活与闭塞性细支气管炎（BO）的相互关系.方法 2011年1月至2013年12月行allo-HSCT的769例患者,通过荧光定量PCR方法检测CMV-DNA水平,免疫荧光染色白细胞PP65抗原血症两种检测方法诊断CMV感染,将CMV感染患者出现BO与未发生CMV感染患者出现BO进行比较,分析CMV感染与BO相关性,并将符合CMV感染患者中出现BO与未出现BO者进行对照分析.结果诊断CMV感染259例患者中出现BO 32例（12.35％）,而未感染CMV的510例患者发生BO 8例（1.56％）,二者差异有统计学意义（P＜0.001）.将诊断CMV感染259例患者,发生BO 32例与未发生BO 227例的二组临床资料进行CMV相关临床分析比较.CMV病毒载量在105拷贝数/ml较低病毒载量102拷贝数/ml出现BO差异有统计学意义.结论在allo-HSCT后导致BO的风险因素中,CMV感染是值得注意的相关因素之一,其中高病毒载量和CMV重激活和CMV肺炎是可能危险因素.

关键词：造血干细胞移植巨细胞病毒重激活细支气管炎闭塞性

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乌索酸对T细胞淋巴瘤细胞株Hut-78细胞体外增殖的影响及其机制研究

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中华血液学杂志 2015年第2期36卷 153-157页

作者：杨力施文瑜王信峰周鹭蔡奕峰刘红吴德沛苏州大学附属第一医院血液科、江苏省血液研究所卫生部血栓和止血实验室 215006 南通大学附属医院血液科

目的探讨乌索酸对T细胞淋巴瘤细胞株Hut-78细胞体外增殖的影响及其作用机制.方法采用MTT法观察不同浓度（10、20、40、80 μmol/L）乌索酸作用不同时间（4、12、24、48、72 h）对Hut-78细胞增殖的抑制作用,并采用流式细胞术分析其早... 详细信息

目的探讨乌索酸对T细胞淋巴瘤细胞株Hut-78细胞体外增殖的影响及其作用机制.方法采用MTT法观察不同浓度（10、20、40、80 μmol/L）乌索酸作用不同时间（4、12、24、48、72 h）对Hut-78细胞增殖的抑制作用,并采用流式细胞术分析其早期凋亡的情况.采用免疫印迹法检测乌索酸作用后Hut-78细胞细胞核因子-κB（NF-κB）p65、p50、p52和p100亚基蛋白,以及caspase-8、3、9蛋白表达变化,采用逆转录PCR法检测血管内皮生长因子（VEGF）和环氧合酶-2（COX-2）mRNA表达水平.结果与不加药对照组比较,不同浓度的乌索酸作用组Hut-78细胞的增殖均受抑制（P值均＜0.05）;AnnexinⅤ＋/pI-细胞比例均升高（P值均＜0.05）;经10、20、40、80 μmol/L乌索酸处理Hut-78细胞72 h后,Hut-78细胞NF-κBp65、p50蛋白和VEGF、COX-2 mRNA表达水平均下降（P值均＜0.05）,caspase-8、3、9蛋白表达均增加（P值均＜0.05）;NF-κBp100、p52蛋白表达差异均无统计学意义（P值均＞0.05）.上述作用均呈剂量和（或）时间依赖性（P值均＜0.05）.结论乌索酸抑制Hut-78细胞增殖,作用可能与促其凋亡有关,经过死亡受体和线粒体途径完成;影响NF-κB经典信号路径可能是其机制之一,VEGF和COX-2可能也参与其中.

关键词：淋巴瘤,T细胞,皮肤 NF-κB 血管内皮生长因子A 乌索酸

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