检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学杂志 2006年第23期86卷 1604-1609页

作者：季晓燕黄强董军朱玉德王爱东兰青苏州大学附属第二医院神经外科暨脑肿瘤研究室 215004

目的探讨脑肿瘤干细胞(BTSC)在体外分化过程中的细胞形态、分化相关标志物表达和增殖动力学变化,为进一步研究BTSC分化走向提供实验依据。方法取同一病例初发和复发的间变性室管膜瘤患者的肿瘤手术标本,用CD133免疫磁珠分离出CD133+细胞... 详细信息

目的探讨脑肿瘤干细胞(BTSC)在体外分化过程中的细胞形态、分化相关标志物表达和增殖动力学变化,为进一步研究BTSC分化走向提供实验依据。方法取同一病例初发和复发的间变性室管膜瘤患者的肿瘤手术标本,用CD133免疫磁珠分离出CD133+细胞,加血清分化,相差显微镜下观察其形态,在未分化和分化后第3、7、10、21天收集细胞,流式细胞术检测细胞CD133+、神经上皮干细胞蛋白(Nestin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、β-微管蛋白(Tubulinβ-)Ⅲ的表达。在未分化和分化第7天做增殖周期测定。取正常神经干细胞(NSC)作为对照。结果(1)形态:BTSC由圆形到短梭形和多角形、再到长梭形及少量星形,第7天以后细胞形态往短梭形和圆形回复,出现细胞聚集成球重新飘浮在培养基中;NSC按固有规律分化。(2)标志物:BTSC和NSC未分化时CD133+和Nestin均高表达,BTSC分化后CD133+和Nestin全程表达,且先降后升,第7天表达率分别为(3·65±0·17)%和(28·99±1·26)%,第21天分别为(14·63±1·16)%和(45·46±1·27)%;GFAP和β-TubulinⅢ表达量一直偏低,但GFAP阳性表达率相对高于β-TubulinⅢ;NSC在分化第10天时失去了CD133+和Nestin的表达,GFAP和β-TubulinⅢ表达量明显增加,分别为(88·94±1·23)%和(11·94±0·36)%。(3)增殖周期及倍体:BTSC分化前为亚二倍体,分化后有少量二倍体和大量亚二倍体及超二倍体,处于G2-M期和S期的细胞比例大于NSC,复发BTSC分化后细胞组成比原发BTSC复杂;神经干细胞分化前后都为整二倍体,主要处于G0-G1期。结论细胞形态、标志物的表达、增殖周期及倍体变化反映出脑肿瘤干细胞分化走向和神经干细胞不同,前者存在明显的分化障碍。

关键词：干细胞脑肿瘤抗原,分化细胞周期

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抗人脑胶质瘤重组免疫毒素SZ39(ScFv)-PE40的基因构建及表达

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肿瘤 2002年第6期22卷 466-469页

作者：罗良生王爱东黄强苏州大学附属第二医院脑肿瘤研究室

目的　构建抗人脑胶质瘤重组免疫毒素SZ39(ScFv) PE4 0并在大肠杆菌中表达。方法　从质粒pVC85中克隆出PE4 0基因 ,与抗胶质瘤单链抗体SZ39 ScFv基因进行拼接 ,构建出重组免疫毒素SZ39(ScFv) PE4 0基因 ,并将其克隆于表达载体pET2 0b(... 详细信息

目的　构建抗人脑胶质瘤重组免疫毒素SZ39(ScFv) PE4 0并在大肠杆菌中表达。方法　从质粒pVC85中克隆出PE4 0基因 ,与抗胶质瘤单链抗体SZ39 ScFv基因进行拼接 ,构建出重组免疫毒素SZ39(ScFv) PE4 0基因 ,并将其克隆于表达载体pET2 0b(+) ,在大肠杆菌Bl2 1(DE3)pLysS中以IPTG诱导表达。结果　SDS PAGE分析显示表达产物主要以包涵体的形式存在 ,分子量为 6 8kD左右 ,与SZ39(ScFv) PE4 0的分子量理论推算值相符 ;Westernblot显示在 6 8kD处出现特异性显色印迹 ;凝胶灰度扫描显示其表达量占菌体总蛋白的 2 0 %。结论　重组免疫毒素SZ39(ScFv) PE4 0可经原核表达载体 ,pET2 0b(+)在大肠杆菌BL2 1(DE3)pLysS中以包涵体形式得到较高效率的表达。

关键词： SZ39(ScFv)-PE40 基因构建胶质瘤免疫毒素基因重组绿脓杆菌外毒素

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人脑胶质瘤细胞对诱导分化药物敏感性的研究

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中国药科大学学报 2002年第5期33卷 419-423页

作者：孙立军黄强王爱东兰青杜子威苏州大学附属第二医院神经外科暨脑肿瘤研究室苏州215004

目的优选人脑胶质瘤细胞诱导分化剂。方法应用MTT法、形态学、GFAP免疫荧光等方法鉴定环已亚甲基二乙酰胺、二甲基甲酰胺、丁酸钠、二丁酰杯AMP、苯乙酸钠、苯丁酸钠、亚砷酸钠等7种诱导剂对人脑胶质瘤细胞系SHG-44的诱导分化效果。结... 详细信息

目的优选人脑胶质瘤细胞诱导分化剂。方法应用MTT法、形态学、GFAP免疫荧光等方法鉴定环已亚甲基二乙酰胺、二甲基甲酰胺、丁酸钠、二丁酰杯AMP、苯乙酸钠、苯丁酸钠、亚砷酸钠等7种诱导剂对人脑胶质瘤细胞系SHG-44的诱导分化效果。结果亚砷酸钠、苯乙酸钠抑制肿瘤细胞增殖效果较差,苯丁酸钠、二丁酰环AMP、丁酸钠在1-2mM即可明显诱导人脑胶质瘤细胞多分化,表现为增殖抑制,胞突增长,GFAP表达升高现象。结论人脑胶质瘤细胞对诱导分化剂苯丁酸钠、二丁酰环AMP和丁酸钠较为敏感,值得深入研究。

关键词：药物敏感性胶质瘤诱导细胞分化苯丁酸钠二丁酰环AMP

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人脑胶质瘤组织中分离与培养肿瘤干细胞

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中华肿瘤杂志 2006年第5期28卷 331-333页

作者：黄强董军朱玉德张全斌季晓燕王爱东兰青苏州大学附属第二医院神经外科暨脑肿瘤研究室 215004

目的从胶质瘤组织中培养、分离肿瘤干细胞,并初步探讨其生物学特性。方法采集8例人脑胶质瘤手术标本,剪碎、胰酶消化,滤网过滤收集细胞。淋巴细胞分离液除去其中的红细胞,用含EGF、LIF和bFGF的无血清培养液培养,形成细胞球体后经免疫磁... 详细信息

目的从胶质瘤组织中培养、分离肿瘤干细胞,并初步探讨其生物学特性。方法采集8例人脑胶质瘤手术标本,剪碎、胰酶消化,滤网过滤收集细胞。淋巴细胞分离液除去其中的红细胞,用含EGF、LIF和bFGF的无血清培养液培养,形成细胞球体后经免疫磁珠分离获取CD133+细胞, 用有限稀释法继续在上述无血清培养基中培养得到肿瘤细胞球后连续传代培养。取第5代肿瘤干细胞,用含10％FBS培养液诱导分化。分化前后用Nestin、MAP2、GFAP免疫细胞化学染色检测肿瘤干细胞及其分化细胞的相应标志物。结果在1例间变性星形细胞、室管膜细胞混合瘤中克隆到了 CD133+细胞,这些细胞在体外培养时,能稳定维持于球形生长状态(3个月,14代),在适合的环境中随时能自我更新和增殖,并分化成MAP2+的瘤性神经元和GFAP+的瘤性胶质细胞,而CD133-细胞则无此特性。结论在胶质瘤组织中有肿瘤干细胞存在,这些细胞在体外能长期培养和传代,可为进一步研究胶质瘤的细胞生物学和分子生物学特征开拓新途径。

关键词：肿瘤干细胞胶质瘤免疫细胞化学体外培养脑胶质瘤

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对荷人脑胶质瘤裸鼠血管生成模式的研究

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肿瘤 2007年第6期27卷 437-440页

作者：魏子龙黄强储亮刁艺董军王爱东兰青苏州大学附属第二医院神经外科暨脑肿瘤研究室苏州215004

目的:探讨干细胞标志物ABCG2与肿瘤血管生成相关蛋白VEGF、CD34、VLA-2α在荷人脑胶质瘤裸小鼠移植瘤中的表达,同时运用CD34-PAS双染法观察移植瘤中的血供模式。方法:建立人脑胶质瘤裸小鼠皮下移植瘤模型30例。所有标本同时行HE染色和... 详细信息

目的:探讨干细胞标志物ABCG2与肿瘤血管生成相关蛋白VEGF、CD34、VLA-2α在荷人脑胶质瘤裸小鼠移植瘤中的表达,同时运用CD34-PAS双染法观察移植瘤中的血供模式。方法:建立人脑胶质瘤裸小鼠皮下移植瘤模型30例。所有标本同时行HE染色和免疫组化检测,以正常人脑组织6例作为对照。光镜下检测上述基因的表达率和表达部位,并观察移植瘤中的血管生成模式。结果:ABCG2、VEGF、VLA-2α在移植瘤组织中阳性表达率均为100%,平均阳性细胞占有率分别为(3.93±1.438)%、(34.84±6.212)%、(30.33±4.428)%;CD34标记的微血管密度(MVD)计数平均达29.78±5.88个;内皮细胞被覆的血管、马赛克血管及拟态血管三种血供模式在移植瘤组织中均存在。结论:ABCG2高表达的细胞有亲血管分布趋向,VEGF、VLA-2α在移植瘤血管生成中起重要作用;恶性程度较高的移植瘤组织中存在着三种不同的血供模式。

关键词：神经胶质瘤肿瘤移植小鼠,裸免疫组织化学马赛克血管拟态血管

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神经胶质细胞神经干细胞和肿瘤干细胞之间依赖微生态环境而转化的假设

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中华肿瘤杂志 2010年第1期32卷 76-78页

作者：黄强杜子威苏州大学附属第二医院神经外科暨脑肿瘤研究室 215004

我们于20世纪70年代开始进行人脑胶质瘤的研究，建立了至今仍在应用的中国第一株人脑胶质瘤体外细胞系SHG44及其裸小鼠皮下移植瘤模型NHG-1，

关键词：神经胶质瘤肿瘤干细胞

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丙戊酸钠诱导人脑胶质瘤细胞分化的靶细胞与靶分子研究

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中华外科杂志 2007年第16期45卷 1121-1124页

作者：王爱东季晓燕黄强王重韧董军兰青苏州大学附属第二医院神经外科暨脑肿瘤研究室 215004

目的探讨丙戊酸钠诱导人脑胶质瘤细胞分化时作用的靶细胞和靶分子。方法丙戊酸钠治疗位于裸小鼠皮下的可移植性人脑胶质瘤,半定量 RT-PCR 检测移植瘤中 HDAC1和 Tob 的表达;CD133免疫磁珠分离胶质瘤组织中的 CD133^+细胞,在分别含血清... 详细信息

目的探讨丙戊酸钠诱导人脑胶质瘤细胞分化时作用的靶细胞和靶分子。方法丙戊酸钠治疗位于裸小鼠皮下的可移植性人脑胶质瘤,半定量 RT-PCR 检测移植瘤中 HDAC1和 Tob 的表达;CD133免疫磁珠分离胶质瘤组织中的 CD133^+细胞,在分别含血清或不含血清加生长因子培养的条件下,加丙戊酸钠作用21 d,流式细胞仪检测和共聚焦显微镜观察分化标志物表达。结果丙戊酸钠能明显抑制位于裸小鼠皮下移植瘤的增殖(P<0.05),使 HDAC1表达下降(P<0.01),Tob 表达升高(P<0.05)。流式细胞仪检测丙戊酸钠作用21 d 的细胞,在含血清条件下,GFAP 或β-tubulin Ⅲ阳性细胞数显著增加(P<0.01),而无血清加生长因子条件下两标志物表达均无显著差异(P>0.05);共聚焦显微镜观察显示上述的 GFAP^+或β-tubulin Ⅲ^+细胞共表达 Nestin。结论丙戊酸钠逆转人脑胶质瘤细胞分化抑制的靶分子有 HDAC1和 Tob,靶细胞为处于分化过程中的脑肿瘤干细胞。

关键词：神经胶质瘤细胞分化丙戊酸钠靶细胞靶分子

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肿瘤起源细胞学说与争论

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癌症 2006年第6期25卷 779-784页

作者：陈骅黄强董军兰青苏州大学附属第二医院神经外科暨脑肿瘤研究室江苏苏州215004

肿瘤干细胞学说认为大部分肿瘤来源于已转化成肿瘤起源细胞的单个细胞(肿瘤干细胞),只有肿瘤干细胞具有无限增殖、多向分化和体内外形成肿瘤的能力。然而对于肿瘤干细胞的起源仍有争论。肿瘤干细胞与正常干细胞具有许多相似的特征和信... 详细信息

肿瘤干细胞学说认为大部分肿瘤来源于已转化成肿瘤起源细胞的单个细胞(肿瘤干细胞),只有肿瘤干细胞具有无限增殖、多向分化和体内外形成肿瘤的能力。然而对于肿瘤干细胞的起源仍有争论。肿瘤干细胞与正常干细胞具有许多相似的特征和信号通路,因而认为正常干细胞是肿瘤干细胞起源的最佳候选细胞。此外,细胞融合是发育和组织修复中必需的生理过程,它与肿瘤的基本特征有着紧密的联系,可能在肿瘤干细胞的发生过程中也起着重要的作用。

关键词：肿瘤/病因学肿瘤干细胞细胞分化细胞融合

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可移植性人脑胶质瘤组织裸小鼠脑内移植及其MR显像研究

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癌症 2007年第9期26卷 937-941页

作者：李如军刁艺黄强沈钧康兰青苏州大学附属第二医院神经外科暨脑肿瘤研究室江苏苏州215004

背景与目的:文献报道的胶质瘤动物原位移植模型,大多数是将细胞悬液立体定向接种于鼠脑内,操作繁杂,耗时长,难以在短时间内完成批量实验。本研究接种可移植性人脑胶质瘤组织于裸小鼠脑内,探讨建立人脑胶质瘤裸小鼠原位移植模型及其MR活... 详细信息

背景与目的:文献报道的胶质瘤动物原位移植模型,大多数是将细胞悬液立体定向接种于鼠脑内,操作繁杂,耗时长,难以在短时间内完成批量实验。本研究接种可移植性人脑胶质瘤组织于裸小鼠脑内,探讨建立人脑胶质瘤裸小鼠原位移植模型及其MR活体成像的可行性。方法:在套管针内,置入位于裸小鼠皮下生长的可移植性人脑胶质瘤组织2mm3,经微型颅钻钻颅孔后经套管针推入裸小鼠右尾状核内,第30天在配有小鼠专用micro-23微线圈的1.5TMR机上进行头颅扫描和专用软件测量显像的肿瘤体积。继而取全脑作连续冰冻切片,HE染色,在光学显微镜下观察肿瘤病理特征,在体视显微镜目镜下用测微尺测量肿瘤。然后将上述两种方法测得的数据进行统计学分析,评价荷瘤鼠活体MR显像计算肿瘤体积的可行性。结果:经MR扫描的15只颅内接种肿瘤的小鼠,有14只的尾状核区域见到肿瘤显像;在脑切片上,与MR像相同部位见到了肿瘤组织。经脑切片测得的肿瘤体积[(23.19±10.18)mm3]和经MRI测得的肿瘤体积[(23.45±11.64)mm3]比较差异无统计学意义(P>0.05)。肿瘤模型制作成功率为93%(14/15),肿瘤模型MR显像成功率为100%(14/14)。结论:经套管针定量植入胶质瘤组织于裸小鼠尾状核,制作可移植性裸小鼠人脑胶质瘤原位模型,具有操作便捷、省时、便于批量制作、致瘤率高等优点。配有小鼠专用微型线圈的1.5TMR机可用于荷瘤裸小鼠的头颅成像、在活体上对移植瘤进行定位和体积测量等研究。

关键词：脑肿瘤/胶质瘤裸小鼠原位移植模型 MR活体显像

来源：评论

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胶质瘤恶性进展相关基因的生物信息学分析

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癌症 2003年第3期22卷 225-229页

作者：孙继勇黄强王爱东董军邵耐远兰青苏州大学附属第二医院神经外科暨脑肿瘤研究室江苏苏州215004

背景与目的:利用基因芯片技术和生物信息学分析基因在系统水平的调控机制,是当前功能基因组学的重要研究手段,它明显优于过去的单一基因研究模式,可以在整体的、基因组的水平对基因的表达调控网络机制,进行系统、全面地分析。本研究利... 详细信息

背景与目的:利用基因芯片技术和生物信息学分析基因在系统水平的调控机制,是当前功能基因组学的重要研究手段,它明显优于过去的单一基因研究模式,可以在整体的、基因组的水平对基因的表达调控网络机制,进行系统、全面地分析。本研究利用生物信息学技术对我们建立的胶质瘤恶性进展相关基因表达谱作系统的聚类分析,并对候选基因作初步的数据库检索,目的在于筛选与肿瘤恶性进展相关的基因,为进一步克隆其全长及研究其功能提供依据。方法:首先对基因表达谱做聚类分析,在数据分析时我们取双点之间的变异系数<0.33的数据进行分析,以便尽量减少实验误差。又取至少3组比值差异均在2倍以上、双点之间变异系数<0.33的基因,据此从16363个基因数据中筛选出368个做聚类分析。进而选取在3份肿瘤样品中基因表达呈现逐步升高的11条基因和逐步降低的6条基因,进一步做生物信息学数据库的检索,去分析它们对应的结构和功能。结果:得到了两大类基因。第一类都是从WHOⅡ级、WHOⅢ级、WHOIV级胶质瘤中表达逐步升高,有11条;另一大类则相反,是表达逐步递减的,有6条。生物信息学分析从中找到3条基因X55987(EDN,嗜酸细胞来源的神经毒素)、AB011097(ARTS-1,肿瘤坏死因子受体调节因子-1)和M85085(CStF,剪切刺激因子)可能是胶质瘤恶性?

关键词：胶质瘤基因表达谱生物信息学聚类分析

来源：评论

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