检索结果-内蒙古大学图书馆

三核苷酸重复序列失稳定机制:重复序列形成non-B二级结构的必要性和细胞反式作用因子的作用(英文)

Acta Genetica Sinica 2006年第1期33卷 1-11页

作者：潘学峰英国爱丁堡大学细胞与分子生物学研究所

与三核苷酸重复序列CAG·CTG、CGG·CCG和GAA·TTC扩增和缺失有关的分子机制尚不能得到清楚的阐释。体外研究表明,上述疾病相关的重复序列可以在体外形成non-B二级结构,并介导重复序列扩增。然而,迄今为止,类似的观察尚... 详细信息

与三核苷酸重复序列CAG·CTG、CGG·CCG和GAA·TTC扩增和缺失有关的分子机制尚不能得到清楚的阐释。体外研究表明,上述疾病相关的重复序列可以在体外形成non-B二级结构,并介导重复序列扩增。然而,迄今为止,类似的观察尚未在体内研究过程中得以实现。利用模型生物大肠杆菌和酵母等进行的有关研究并不能模拟三核苷酸重复序列的扩增,这暗示三核苷酸重复序列的体内扩增可能与重复序列形成non-B二级结构关联性并不大。尽管理论上较长的三核苷酸重复序列可以在复制和后复制过程中较易形成non-B DNA二级结构,但这样的二级结构倾向于导致重复序列出现“脆性”,而不是扩增。事实上,患者所具有的三核苷酸重复序列扩增并非一定需要通过non-B二级结构的介导,这些重复序列的扩增是可以通过一种RNA转录诱导的局部DNA重复序列的复制和其后的DNA重排得以发生。

关键词：三核苷酸重复序列扩增和缺失脆性DNA 神经-肌肉疾病反式作用因子

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三日疟原虫表面抗原蛋白基因的初步研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1990年第2期8卷 81-83页

作者：邱持平 JohnG.Scaife 中国预防医学科学院寄生虫病研究所英国爱丁堡大学分子生物学系

用两种人工合成的寡核苷酸探针筛选三日疟原虫红内期DNA基因组库。结果表明,三日疟原虫无性期表面可能存在与恶性疟原虫表面类似的P190抗原蛋白,这一蛋白也呈多形型。筛选结果得到两个DNA基因克隆MSA-1和MSA-2,其大小分别为5.5kb和3.5k... 详细信息

用两种人工合成的寡核苷酸探针筛选三日疟原虫红内期DNA基因组库。结果表明,三日疟原虫无性期表面可能存在与恶性疟原虫表面类似的P190抗原蛋白,这一蛋白也呈多形型。筛选结果得到两个DNA基因克隆MSA-1和MSA-2,其大小分别为5.5kb和3.5kb。杂交分析证实它们分别类似于恶性疟原虫P190基因的MAD20型和K1型。对MSA-1和MSA-2限制性内切酶谱研究发现MSA-1基因段内有1个BglⅡ位点、1个EcoRⅠ位点、2个XbaⅠ位点、1个HindⅡ位点和1个PstⅠ位点;而MSA-2基因段中只有1个HindⅡ位点。

关键词：疟疾三日疟原虫表面抗原基因

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大鼠脑外伤时嘌呤受体P2X4受体的表达

引用

解剖学杂志 2003年第3期26卷 203-208页

作者：向正华吕军蒋平焦炳华 Burnstock G 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 英国伦敦大学学院自主神经科学研究所

目的:观察大鼠脑外伤后嘌呤受体亚型P2X4的表达水平。方法:免疫组织化学和半定量RT-PCR。结果:脑外伤后P2X4受体表达水平迅速升高,并在损伤后较长的时间内维持高的表达水平;脑外伤早期,损伤区P2X4免疫反应阳性细胞主要是圆形细胞,中后... 详细信息

目的:观察大鼠脑外伤后嘌呤受体亚型P2X4的表达水平。方法:免疫组织化学和半定量RT-PCR。结果:脑外伤后P2X4受体表达水平迅速升高,并在损伤后较长的时间内维持高的表达水平;脑外伤早期,损伤区P2X4免疫反应阳性细胞主要是圆形细胞,中后期主要以具有突起的细胞为主。结论:脑外伤早期,损伤区P2X4受体免疫反应阳性细胞主要为小胶质细胞,中后期可能星形胶质细胞为多;由此推测P2X4参与脑外伤时大脑生理或病理生理功能的调节。

关键词：大鼠脑外伤嘌呤受体 P2X4 免疫组织化学细胞免疫反应 RT-PCR

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黑曲霉(ASPERGILLUS NIGER)SG株三磷酸甘油醛脱氢酶基因的分离与初步鉴定

引用

应用与环境生物学报 1998年第1期4卷 88-91页

作者：苟兴华 JEENES D.J. ARCHERD.B. 张义正四川大学生物工程系分子生物学实验室英国BBSRC食品研究所Norwich实验室遗传及微生物系

黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｕｓｎｉｇｅｒ）在工业生产和科学研究中占有重要地位，因为许多黑曲霉菌株能产生有机酸和酶制剂，并能分泌大量蛋白质到细胞外［１，６］．三磷酸甘油醛脱氢酶（Ｇｌｙｃｅｒａｌｄｅｈｙｄｅ３ｐｈｏｓ... 详细信息

黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｕｓｎｉｇｅｒ）在工业生产和科学研究中占有重要地位，因为许多黑曲霉菌株能产生有机酸和酶制剂，并能分泌大量蛋白质到细胞外［１，６］．三磷酸甘油醛脱氢酶（Ｇｌｙｃｅｒａｌｄｅｈｙｄｅ３ｐｈｏｓｐｈａｔｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａ...

关键词：三磷酸甘油醛脱氢酶基因黑曲霉基因组文库

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P2X_2受体在大鼠胃肠系统肌间神经节中的分布

引用

解剖学杂志 2002年第3期25卷 245-248页

作者：向正华康志敏蔡文琴 GeoffreyBurnstock 第二军医大学生物化学与分子生物学教研室第二军医大学组织学与胚胎学教研室上海200433 第三军医大学组织学胚胎学教研室英国伦敦大学学院自主神经科学研究所

目的:研究P2X2受体在大鼠胃肠系统肌间神经节中的分布,为研究ATP作为神经递质对胃肠道肌间神经节节细胞的作用提供形态学基础。方法:免疫组织化学。结果:从胃到结肠均有P2X2受体阳性神经元和神经纤维分布,胃、小肠和结肠分别约60％、70... 详细信息

目的:研究P2X2受体在大鼠胃肠系统肌间神经节中的分布,为研究ATP作为神经递质对胃肠道肌间神经节节细胞的作用提供形态学基础。方法:免疫组织化学。结果:从胃到结肠均有P2X2受体阳性神经元和神经纤维分布,胃、小肠和结肠分别约60％、70％和50％的肌间神经节节细胞为P2X2受体阳性。结论:胃肠道系统多数肌间神经节节细胞都能通过ATP受体特别是P2X2受体对ATP产生反应。

关键词： P2X2受体大鼠胃肠系统肌间神经节分布嘌呤受体

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CR3的Ⅰ结构域的克隆和在CHO细胞中的表达及配体结合特性的研究

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徐州医学院学报 1998年第6期18卷 431-434页

作者：赵惠仁 LAW SKA CAI TQ WRIGHT S 英国牛津大学生物化学系ＭＲＣ免疫化学研究所美国洛克菲勒大学细胞生理和免疫学实验室生物化学与分子生物学研究中心

目的研究白细胞整合素ＣＲ３α亚基的Ⅰ结构域在配体结合中的作用。方法克隆ＣＤ１１ｂ的Ⅰ结构域，用重叠ＰＣＲ的方法将其与信号肽ＤＮＡ连接，克隆到表达载体ＰＥＥ６ＨＣＭＶ．ＧＳ，转化ＣＨＯ－Ｋ１细胞。表达的Ⅰ－结构域经ＳＰ... 详细信息

目的研究白细胞整合素ＣＲ３α亚基的Ⅰ结构域在配体结合中的作用。方法克隆ＣＤ１１ｂ的Ⅰ结构域，用重叠ＰＣＲ的方法将其与信号肽ＤＮＡ连接，克隆到表达载体ＰＥＥ６ＨＣＭＶ．ＧＳ，转化ＣＨＯ－Ｋ１细胞。表达的Ⅰ－结构域经ＳＰ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ和ｍｏｎｏ－Ｓ柱纯化后，与Ｃ３ｂｉ进行配体结合实验。结果用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得重组的Ⅰ结构域分子量为２９ｋＤ。重组的Ⅰ结构域可以与Ｃ３ｂｉ结合，Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析示结合常数为３００±１１３ｎｍｏｌ／Ｌ，这种结合可以被抗Ⅰ－结构域单克隆抗体ＬＰＭ１９Ｃ和ＥＤＴＡ抑制。结论Ⅰ结构域对于结合单体Ｃ３ｂｉ是必要的和充分的，结合需要二价阳离子。

关键词：整合素CR3 Ⅰ结构域 C3bi 配体结合 CHO细胞表达

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病理性瘢痕中IGF2基因的表达及意义

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广东医学 2007年第4期28卷 530-531页

作者：胡振富李薇宋艳斌李晓平南方医科大学南方医院急诊科广州510515 英国伦敦大学女王玛丽学院生物医学工程系南方医科大学分子生物学研究所广州510515 南方医科大学南方医院肝胆外科广州510515

目的研究印迹基因胰岛素样生长因子2(IGF2)在病理性瘢痕中的表达及其意义,探讨异常瘢痕发生的分子机制。方法应用人类基因表达谱芯片,检测增生性瘢痕和瘢痕疙瘩与正常皮肤组织中IGF2基因的差异表达情况。结果IGF2基因在增生性瘢痕和瘢... 详细信息

目的研究印迹基因胰岛素样生长因子2(IGF2)在病理性瘢痕中的表达及其意义,探讨异常瘢痕发生的分子机制。方法应用人类基因表达谱芯片,检测增生性瘢痕和瘢痕疙瘩与正常皮肤组织中IGF2基因的差异表达情况。结果IGF2基因在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩中的表达分别为正常皮肤组织的5.67倍和27.87倍,与正常皮肤组织中该基因的表达差异有显著性。结论印迹基因IGF2在病理性瘢痕中的异常表达,与病理性瘢痕的发生和发展关系密切,特别是在瘢痕疙瘩中的超量表达,可能与其细胞分裂增殖及类似于良性肿瘤的特性密切相关。

关键词：胰岛素样生长因子2 基因表达瘢痕基因芯片

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诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的实验研究

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重庆医学 2009年第10期38卷 1185-1187,I0001,I0002页

作者：陈小菊王嫣王兰左国伟寇小琴谭启华周兰冯涛重庆医科大学护理学院 400016 重庆市超声医学工程重点实验室 400016 英国剑桥大学生物工程学研究所重庆医科大学检验系 400016 重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室 400016

目的明确大鼠骨髓间充质干细胞(bone mensenchymal stem cells,BMSCs)在体外全骨髓培养条件下的生物学特性及其向成骨细胞分化的能力,探索更为简便有效的BMSCs体外培养方法。方法提取大鼠原代BMSCs,用αMEM完全培养基和成骨诱导条件培... 详细信息

目的明确大鼠骨髓间充质干细胞(bone mensenchymal stem cells,BMSCs)在体外全骨髓培养条件下的生物学特性及其向成骨细胞分化的能力,探索更为简便有效的BMSCs体外培养方法。方法提取大鼠原代BMSCs,用αMEM完全培养基和成骨诱导条件培养基体外培养,倒置相差显微镜和HE染色观察细胞形态;台盼蓝活细胞计数绘制细胞生长曲线;ALP检测试剂盒检测ALP含量变化和von Kossa染色检测细胞矿化结节,以判断细胞是否向成骨细胞分化。结果全骨髓培养法在体外培养的大鼠原代BMSCs贴壁生长,呈梭形或多角形;使用Dex-SaMEM向成骨诱导后的BMSCs具有与成骨细胞在体外培养时相似的特征,倍增时间延长;合成ALP能力显著增强(P<0.05),von Kossa染色出现阳性的棕褐色或棕黑色团块的钙化结节。结论全骨髓培养法取材方便,经成骨诱导培养的BMSCs表现出成骨细胞的形态特征和生物学特性,该方法可作为骨组织工程种子细胞培养的常规方法。

关键词：骨髓间充质干细胞成骨诱导组织工程

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藻酸钙影响骨髓间充质干细胞增殖活性的实验研究

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检验医学与临床 2009年第10期6卷 743-745页

作者：陈小菊王嫣王兰左国伟寇小琴谭启华周兰冯涛重庆医科大学护理学院 400016 重庆市超声医学工程重点实验室英国剑桥大学生物工程学研究所重庆医科大学检验系重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室

目的研究藻酸钙凝胶对骨髓间充质干细胞(bone mensenchymal stem cells,BMSCs)增殖活性的影响,为藻酸盐作为BMSCs在骨组织工程中的载体提供实验依据。方法将BMSCs种植在藻酸钙凝胶上,通过倒置相差显微镜和甲苯胺蓝染色观察细胞形态;四... 详细信息

目的研究藻酸钙凝胶对骨髓间充质干细胞(bone mensenchymal stem cells,BMSCs)增殖活性的影响,为藻酸盐作为BMSCs在骨组织工程中的载体提供实验依据。方法将BMSCs种植在藻酸钙凝胶上,通过倒置相差显微镜和甲苯胺蓝染色观察细胞形态;四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测细胞在藻酸盐凝胶上的增殖活性。结果MTT检测发现在培养板上和在藻酸盐凝胶上用SαMEM培养的两组BMSCs之间细胞的增殖活性差异无统计学意义(P>0.05);与之相似,在培养板上和在凝胶上用Dex-SαMEM诱导培养的两组BMSCs之间的增殖活性也无显著差异。结论BMSCs在藻酸钙凝胶中的增殖活性不受影响,是良好的骨组织工程支架材料。

关键词：骨髓间充质干细胞海藻胶增殖活性组织工程

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炎症诱导肝细胞内脂质堆积及载脂蛋白E基因敲除小鼠肪肝形成

炎症诱导肝细胞内脂质堆积及载脂蛋白E基因敲除小鼠肪肝形成

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2009年脂质代谢与器官损害国际学术研讨会

作者：马坤岭阮雄中 Stephen H.Powis 陈压西 John F.Moorhead Zac Varghese 东南大学肾脏病研究所英国伦敦大学学院皇家自由医学院肾脏病研究中心重庆医科大学感染性疾病分子生物学国家重点实验室、脂质研究中心

目的当前非酒精性脂肪肝(NAFLD)盛行的理论是"二次打击"学说。第一次打击主要是指由于肝细胞内脂质过多堆积造成的肝损伤,第二次打击是指系统性炎症进一步加速脂肪肝的形成和发展。本研究的目的是调查炎症是否诱导肝细胞脂质... 详细信息

目的当前非酒精性脂肪肝(NAFLD)盛行的理论是"二次打击"学说。第一次打击主要是指由于肝细胞内脂质过多堆积造成的肝损伤,第二次打击是指系统性炎症进一步加速脂肪肝的形成和发展。本研究的目的是调查炎症是否诱导肝细胞脂质堆积及其可能的分子机制。方法体外研究中我们以白介素-1β(IL-1β)作为炎症刺激因子干预肝细胞,体内研究中我们通过给载脂蛋白E基因敲除小鼠皮下注射络蛋白诱导系统性炎症。以油红O染色及胞内胆固醇定量测定观察炎症对胆固醇堆积的影响。应用实时PCR及蛋白免疫印迹技术检测胆固醇代谢相关分子的基因和蛋白表达。应用酶联免疫吸附法检测载脂蛋白E基因敲除小鼠血浆中炎症因子的产生。结果研究证实炎症增加原代肝细胞、HepG2肝细胞系及载脂蛋白E基因敲除小鼠肝细胞内胆固醇堆积。进一步分析显示炎症增加肝细胞低密度脂蛋白(LDLr)、固醇调节元件结合蛋白(SREBP)裂解激活蛋白(SCAP)及SREBP-2的表达。激光共聚焦显微镜证实IL-1β增加HepG2细胞中SCAP/SREBP-2复合物从内质网向高尔基体的转位,进而激活LDLr基因转录。此外,IL-1β及络蛋白诱导的小鼠系统性炎症尚可抑制三磷酸腺苷结合子转运蛋白-A1(ABCA1)、过氧化物酶增殖体激活受体-α(PPARα)、肝脏X受体-α(LXRα)的基因及蛋白表达,该抑制效应可能直接导致细胞内胆固醇外流的减少。结论我们通过体内、体外研究证实炎症上调LDLr介导的胆固醇内流并下调ABCA1介导的胆固醇外流,通过破坏胆固醇代谢稳态进而加速NAFLD进展,该效应可能在"二次打击"学说中的第二次打击时尤为显著。

关键词：胆固醇摄入胆固醇外流非酒精性脂肪肝核受体

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