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遵义医科大学学报 2021年第4期44卷 535-539页

作者：谭道鹏郭振虎何莉秦琳何芋岐遵义医科大学药学院贵州遵义563009 贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550014 贵州黄果树立爽药业有限公司贵州贵阳550014 贵州苗药生物技术有限公司贵州铜仁554300

目的建立分离纯化大风艾中黄酮苷类成分的方法。方法目标成分可以通过高速逆流色谱,以水-甲醇-乙酸乙酯-正己烷(5∶1∶5∶1,v/v/v/v)两相溶剂系统进行分离。结果经一次分离纯化可获得9.3 mg金丝桃苷(纯度97.1%)、5.7 mg紫云英苷(纯度82.... 详细信息

目的建立分离纯化大风艾中黄酮苷类成分的方法。方法目标成分可以通过高速逆流色谱,以水-甲醇-乙酸乙酯-正己烷(5∶1∶5∶1,v/v/v/v)两相溶剂系统进行分离。结果经一次分离纯化可获得9.3 mg金丝桃苷(纯度97.1%)、5.7 mg紫云英苷(纯度82.8%)和7.6 mg槲皮苷(纯度98.8%),以上3个化合物经ESI-MS,1H NMR鉴定。结论本研究建立的方法可用于大风艾中黄酮苷类成分的分离和纯化。

关键词：高速逆流色谱分离纯化大风艾黄酮

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离体外翻肠囊法研究白及提取物中6种成分的肠吸收特性

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天然产物研究与开发 2019年第8期31卷 1452-1460页

作者：孙慧园王昌权夏涛梅朝叶李月婷潘洁黄勇贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/药用植物功效与利用国家重点实验室贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵州医科大学药学院贵阳550004

为研究白及提取物中4-(葡萄糖氧基)-肉桂酸葡萄糖氧基苄酯(B12)、2-异丁基苹果酸(B6)、1-[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯(B17)、1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯(B14)、二氢菲1(B19)和1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异... 详细信息

为研究白及提取物中4-(葡萄糖氧基)-肉桂酸葡萄糖氧基苄酯(B12)、2-异丁基苹果酸(B6)、1-[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯(B17)、1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯(B14)、二氢菲1(B19)和1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯-2-[4-O-肉桂酰基-6-O-乙酰基]葡萄糖苷(B23)6个成分在大鼠小肠中的吸收动力学特性。实验采用大鼠离体外翻肠囊模型考察各成分在不同浓度、不同肠段的吸收特性,建立超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱联用仪(UPLC-MS/MS)法测定各成分含量,计算累计吸收量和吸收速率常数。结果表明,除B6成分的低浓度外,各成分在不同浓度、不同肠段下均表现为线性吸收,其回归相关系数(R)均达到0.9以上,符合一级吸收速率,且吸收速率常数随着浓度的增加而增加,提示各成分吸收机制为被动吸收;在同一浓度下不同肠段的总体吸收趋势为十二指肠的吸收要大于回肠、结肠和空肠。综上,白及提取物中6种成分在小肠中均有吸收,但小肠对各成分的吸收具有选择性。本研究可为白及提取物的药物临床开发,确定药物剂型方面提供了一定的实验参考。

关键词：白及提取物体外翻肠囊模型吸收吸收速率常数

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CYP3A4和CYP1A2及CYP2E1快速免疫印迹检测方法的建立

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贵州医科大学学报 2020年第10期45卷 1117-1122页

作者：何俊奇杨畅陆定艳李靖刘欢王永林刘亭贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室&省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550004 贵州医科大学药学院贵州贵阳550025

目的:建立细胞色素P450酶3A4(CYP3A4)、1A2(CYP1A2)及2E1(CYP2E1)的快速免疫印迹(Western blot)检测方法。方法:培养HepG2细胞并提取总蛋白,饲养大鼠并制备肝组织匀浆液、S9以及微粒体,以4种标本为对象分别以不同的封闭时间、抗体孵育... 详细信息

目的:建立细胞色素P450酶3A4(CYP3A4)、1A2(CYP1A2)及2E1(CYP2E1)的快速免疫印迹(Western blot)检测方法。方法:培养HepG2细胞并提取总蛋白,饲养大鼠并制备肝组织匀浆液、S9以及微粒体,以4种标本为对象分别以不同的封闭时间、抗体孵育时间和分离胶类型等常规Western blot条件设置A、B、C、D、E及F组用以考察CYP3A4的最佳检测条件;使用Western blot快速孵育仪,分别以不同的Western blot封闭和抗体孵育时间条件设置A、B、C和D、E、F及G、H、I组分别用以考察CYP3A4、CYP1A2及CYP2E1的最佳检测条件。结果:常规Western blot不同条件下,对CYP3A4的检测中C组检测灵敏度在HepG2、肝微粒体样品检测中高于A、B、D、E及F组(P<0.05),在组织匀浆、S9样品检测中C组检测灵敏度高于A、B、E组(P<0.05);在使用Western blot快速孵育仪孵育条件下,对CYP3A4的检测C组灵敏度在HepG2、肝组织匀浆及S9样品检测中高于A、B组(P<0.05),在肝微粒体样品检测中高于B组(P<0.05);对CYP1A2的各组样品检测中,F组的检测背景干净、条带的均一性均优于D、E组;对CYP2E1检测显示,在肝组织匀浆、S9及肝微粒体样品中I组的检测灵敏度高于G、H组(P<0.05)。结论:与常规检测条件相比,改进后的Western blot封闭孵育方式能够有效地对CYP3A4、CYP1A2及CYP2E1进行快速检测,缩短了封闭孵育的时间。

关键词：印迹法,蛋白质细胞色素类细胞色素CYP3A4 细胞色素CYP2E1 细胞色素CYP1A2 Western blot快速孵育仪

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基于综合评分法优选玄参产地加工方法

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贵州科学 2020年第4期38卷 6-11页

作者：张浪严福林刘晓龙王志威任得强黄久艳魏升华贵州中医药大学药学院贵州贵阳550000 贵州医科大学药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550000

目的优选玄参产地加工工艺。方法采用高效液相色谱法,以水分、浸出物、哈巴苷、哈巴俄苷为指标,综合评分优选最佳产地加工方法。结果 32种不同加工方法的玄参药材水分含量在9.54%~18.48%之间;浸出物含量在59.16%~70.67%之间;哈巴苷及哈... 详细信息

目的优选玄参产地加工工艺。方法采用高效液相色谱法,以水分、浸出物、哈巴苷、哈巴俄苷为指标,综合评分优选最佳产地加工方法。结果 32种不同加工方法的玄参药材水分含量在9.54%~18.48%之间;浸出物含量在59.16%~70.67%之间;哈巴苷及哈巴苷的总含量在0.69%~1.39%之间。加工方法为直接发汗6 d,80℃烘干时,综合评分(0.6136)最高。结论直接发汗6 d,80℃烘干为玄参的最佳产地加工方法,该方法可较好的保证玄参的质量。

关键词：玄参产地加工浸出物哈巴苷哈巴俄苷

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刺梨黄酮对高脂血症小鼠血脂的影响及其分子机制

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贵州医科大学学报 2025年第3期50卷 325-335页

作者：唐嘉琦徐丽霞张青张紫麒宋萍萍付凌云贵州医科大学生物与工程学院贵州贵安新区561113 贵州医科大学药用植物功能与应用国家重点实验室贵州贵安新区561113 贵州医科大学药学院&天然药物资源最佳利用重点实验室贵州贵安新区561113

目的通过建立高脂血症(hyperlipidemia,HLP)小鼠模型,利用转录组学探索刺梨黄酮对HLP小鼠血脂和肝功能的影响及其潜在分子机制。方法将96只6周龄C57BL/6J雄性小鼠随机均分为12组,包括对照组(C组)、HLP模型组(M组)、阳性药物组(PC组)和9... 详细信息

目的通过建立高脂血症(hyperlipidemia,HLP)小鼠模型,利用转录组学探索刺梨黄酮对HLP小鼠血脂和肝功能的影响及其潜在分子机制。方法将96只6周龄C57BL/6J雄性小鼠随机均分为12组,包括对照组(C组)、HLP模型组(M组)、阳性药物组(PC组)和9组刺梨黄酮组[槲皮素(quercetin,QU)、杨梅素(myricetin,MY)和山奈素(kaempferol,KA)3种黄酮,各低、中、高3个浓度],分别进行相应的饮食和灌胃;6周后检测小鼠眼球血清中TG、TC、HDL、LDL、AST和ALT水平,确定各黄酮的相对最佳作用浓度;使用HE染色和油红O染色分析肝脏组织变化和肝细胞脂质积累程度;转录组分析刺梨黄酮作用下与脂质代谢相关的差异表达基因及其可能信号通路;RT-PCR和Western blot技术对关键基因和蛋白进行验证。结果血脂结果显示刺梨黄酮降血脂效果的最佳浓度,QU_(M)为200 mg/(kg·d)、MY_(M)为75 mg/(kg·d)和KA_(H)为100 mg/(kg·d);与C组相比,M组血清TG、TC、LDL和ALT水平显著上升且HDL显著降低(P<0.01),肝细胞中出现大量脂肪空泡并伴随着脂肪变性;相较于M组,QU_(M)组、MY_(M)组和KA_(H)组的TG、LDL及ALT水平降低(P<0.05),QU_(M)组的TC水平下降(P<0.05);血脂和肝功能结果显示,QU_(M)组效果优于MY_(M)组和KA_(H)组,且肝细胞内脂质沉积也得到明显改善;转录组分析揭示PPARα通路上的CYP4A14是3种刺梨黄酮共同影响的关键基因;RT-PCR和Western blot分析结果为3个黄酮组的CYP4A14表达均高于M组、且QU_(M)组>KA_(H)组>MY_(M)组(P<0.01)。结论刺梨3种黄酮成分均具有不同程度的降血脂作用,并能相应改善小鼠肝细胞脂质积累与脂肪变性,其共同机制可能与调节PPARα通路上关键基因CYP4A14的表达有关。

关键词：高脂血症刺梨黄酮转录组分析槲皮素杨梅素山奈素

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马来酸氯苯那敏合成工艺改进

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中国药物化学杂志 2020年第4期30卷 217-222页

作者：杨林丽曾晓萍梁光义徐必学贵州大学药学院贵州贵阳550025 贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550014 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室/贵州省天然药物工程研究中心贵州贵阳550014

目的优化马来酸氯苯那敏的合成工艺。方法以4-氯苯乙腈和2-溴吡啶为起始原料,经偶联反应得到2-(4-氯苯基)-2-(吡啶-2-基)乙腈,再与二甲氨基氯乙烷盐酸盐反应得到中间体2-(4-氯苯基)-2-(吡啶-2-基)-4-(N,N-二甲氨基)丁腈,该中间体脱去氰... 详细信息

目的优化马来酸氯苯那敏的合成工艺。方法以4-氯苯乙腈和2-溴吡啶为起始原料,经偶联反应得到2-(4-氯苯基)-2-(吡啶-2-基)乙腈,再与二甲氨基氯乙烷盐酸盐反应得到中间体2-(4-氯苯基)-2-(吡啶-2-基)-4-(N,N-二甲氨基)丁腈,该中间体脱去氰基得到氯苯那敏,最后与马来酸成盐制得马来酸氯苯那敏。结果与结论中间体和目标产物的结构经NMR、ESI-MS谱确证。目标产物的总收率为35.2%(以2-溴吡啶计),纯度达到99.5%以上(HPLC面积归一化法)。该合成工艺所用原料易得、操作简单、无需柱色谱纯化、产物纯度较高,适合工业化生产。

关键词：马来酸氯苯那敏抗组胺药物合成工艺改进

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新型L-酪氨酸二肽衍生物的合成及其抗肿瘤活性

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合成化学 2020年第3期28卷 167-173页

作者：曹盼曾晓萍梁光义徐必学贵州中医药大学贵州贵阳550025 贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州贵阳550014 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室/贵州省天然药物工程研究中心贵州贵阳550014

以L-酪氨酸甲酯盐酸盐和对羟基苯甲酸(PHBA)为原料,经缩合、水解和亲核取代反应,设计并合成了9个新型的L-酪氨酸二肽衍生物(3b和4a^4h),其结构经1 H NMR、13 C NMR和MS(ESI)表征。采用MTT法评价了化合物对白血病细胞(K562)、人肺癌细胞(... 详细信息

以L-酪氨酸甲酯盐酸盐和对羟基苯甲酸(PHBA)为原料,经缩合、水解和亲核取代反应,设计并合成了9个新型的L-酪氨酸二肽衍生物(3b和4a^4h),其结构经1 H NMR、13 C NMR和MS(ESI)表征。采用MTT法评价了化合物对白血病细胞(K562)、人肺癌细胞(A549)和人肝癌细胞(HepG2)的体外抑制活性。结果表明:N-[N-(4-苄氧基-苯甲酰基)-O-二甲氨基丙基-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇(4e)对HepG2和K542细胞的抑制活性均高于阳性对照药阿霉素,IC 50分别为0.41和11.77μmol·L^-1。

关键词： L-酪氨酸二肽对羟基苯甲酸缩合反应合成 MTT法抗肿瘤活性

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烟曲霉GZWMJZ-152茶粕发酵代谢产物

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菌物学报 2019年第2期38卷 264-271页

作者：左明星周彦伶许言超刘文朱伟明王立平省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵州医科大学贵州贵阳550014 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵州贵阳550014

在茶粕培养基摇床培养条件下,烟曲霉GZWMJZ-152将茶粕中的山茶苷A (1)和山茶苷B (2)代谢为山奈酚-3-O-芸香糖苷(3);在茶粕培养基静置发酵条件下,从发酵提取物中分离得到5个化合物,分别为山奈酚(4)、(-)Chaetominine (5)、trypacidin (6)... 详细信息

在茶粕培养基摇床培养条件下,烟曲霉GZWMJZ-152将茶粕中的山茶苷A (1)和山茶苷B (2)代谢为山奈酚-3-O-芸香糖苷(3);在茶粕培养基静置发酵条件下,从发酵提取物中分离得到5个化合物,分别为山奈酚(4)、(-)Chaetominine (5)、trypacidin (6)、1,2-seco-trypacidin (7)、(-)-丁香脂素(8)。测试了8个化合物的α-葡萄糖苷酶抑制活性和DPPH自由基清除活性,其中化合物1–3,5–8具有较好的α-葡萄糖苷酶抑制活性,IC_(50)值在133.9–308.6μg/mL;化合物1,4,8具有较好的自由基清除活性,IC_(50)值在0.43–5.06μg/mL。

关键词：烟曲霉茶粕培养基 α-葡萄糖苷酶自由基清除

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色胺酮通过丝裂原活化蛋白激酶信号通路对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响

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中国药学杂志 2019年第9期54卷 693-698页

作者：周威曾庆芳 Donna Lai Junlae Cho 张晓燕沈祥春贵州医科大学药学院药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550025 悉尼大学医学院悉尼NSW2006澳大利亚

目的探讨色胺酮对人乳腺癌MCF-7细胞的增殖作用及对丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路的影响。方法将人乳腺癌MCF-7细胞进行体外培养,采用不同浓度色胺酮(0. 1,0. 5,1,5,10,25,50,100μmol·L^-1)... 详细信息

目的探讨色胺酮对人乳腺癌MCF-7细胞的增殖作用及对丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路的影响。方法将人乳腺癌MCF-7细胞进行体外培养,采用不同浓度色胺酮(0. 1,0. 5,1,5,10,25,50,100μmol·L^-1)和ERK,p38MAPK,JNK通路抑制剂处理MCF-7细胞24,48,72 h,MTT法检测细胞增殖活性,Western blot法考察ERK,p-ERK,p38,p-p38,JNK和p-JNK蛋白表达水平。结果低、中、高剂量色胺酮明显抑制MCF-7细胞增殖活力。不同浓度色胺酮处理MCF-7细胞24,48,72 h时,药物浓度与细胞增殖抑制率呈一定相关性(r=0. 904,r=0. 793,r=0. 770,均P <0. 05)。25μmol·L^-1色胺酮处理MCF-7细胞24 h后显著抑制MCF-7细胞增殖活力(P <0. 01);色胺酮联合ERK抑制剂组、色胺酮联合p38 MAPK抑制剂组、色胺酮联合JNK抑制剂组细胞增殖活力与单用色胺酮组比较差异有统计学意义(P <0. 01或P <0. 001);6. 25,12. 5,25μmol·L^-1色胺酮处理MCF-7细胞后,p-ERK和p-JNK表达明显增加(P <0. 05或P <0. 01);25μmol·L^-1色胺酮处理MCF-7细胞后p-p38 MAPK表达明显增加(P <0. 05);ERK,p38 MAPK,JNK表达均未发现明显变化。结论色胺酮可抑制MCF-7细胞的增殖活力,且其作用机制可能与MAPK信号通路激活关系密切。

关键词：色胺酮乳腺癌 MCF-7细胞丝裂原活化蛋白激酶

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延安产野生乌拉尔甘草品质鉴定

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江西中医药 2021年第9期52卷 62-65页

作者：曾云飞李䶮延安市中医药研究所陕西延安716000 贵州医科大学药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550014 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室/贵州省天然药物工程研究中心贵阳550014

本文测试内蒙、甘肃、新疆、宁夏、延安产乌拉尔甘草及延安产乌拉尔甘草茎中甘草酸和甘草苷的含量,结果显示延安产乌拉尔甘草的甘草酸和甘草苷的含量最高,分别为6.6277%和2.4939%,其次为内蒙产乌拉尔甘草,甘草酸和甘草苷的含量分别为3.5... 详细信息

本文测试内蒙、甘肃、新疆、宁夏、延安产乌拉尔甘草及延安产乌拉尔甘草茎中甘草酸和甘草苷的含量,结果显示延安产乌拉尔甘草的甘草酸和甘草苷的含量最高,分别为6.6277%和2.4939%,其次为内蒙产乌拉尔甘草,甘草酸和甘草苷的含量分别为3.5143%和1.1794%。2个产区的野生乌拉尔甘草中甘草酸和甘草苷的含量远高于《中药药典》的规定,属于一等品。但延安产乌拉尔甘草茎中的甘草酸和甘草苷含量分别为0.2465%和0.0269%,远远低于规定的最低值,故甘草茎不可代替根作为药材使用。该结果证实了延安产野生乌拉尔甘草的优良品质,也为准确评价延安产野生乌拉尔甘草提供依据。

关键词：野生乌拉尔甘草甘草酸甘草苷鉴定

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