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安徽医科大学学报 2016年第2期51卷 185-189页

作者：牛朝霞张秀芝陈洁杨红梅王黎裴瑞河南医学高等专科学校病理生理学教研室郑州451191

目的应用RNA干扰(RNAi)技术沉默食管癌细胞Eca-109内源性survivin的表达,探讨survivin基因在食管癌细胞侵袭与迁移过程中的作用。方法构建靶向survivin基因的siRNA表达载体并借助脂质体稳定转染食管癌细胞;Western blot检测survivin蛋... 详细信息

目的应用RNA干扰(RNAi)技术沉默食管癌细胞Eca-109内源性survivin的表达,探讨survivin基因在食管癌细胞侵袭与迁移过程中的作用。方法构建靶向survivin基因的siRNA表达载体并借助脂质体稳定转染食管癌细胞;Western blot检测survivin蛋白表达水平观察基因沉默效果,同法观察细胞内基质金属蛋白酶-2(MMP2)、基质金属蛋白酶-9(MMP9)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白水平的变化;Transwell小室法检测细胞侵袭能力的变化,细胞划痕实验观察细胞迁移能力的改变。结果与对照组相比,干扰组survivin蛋白表达水平明显降低,抑制率可达85%;干扰组细胞MMP2、MMP9和VEGF蛋白表达受到明显抑制(P<0.05),同时观察到干扰组细胞的侵袭与迁移能力也明显下降(P<0.05)。结论 survivin基因与食管癌细胞的侵袭迁移潜能相关,特异性沉默survivin基因可能通过下调MMP2、MMP9和VEGF的表达显著抑制食管癌细胞Eca-109的侵袭与迁移能力。

关键词： RNA干扰 survivin 侵袭与迁移 Eca-109

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卵巢交界性粘液性囊腺癌的MRI诊断及病理对照分析

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中国CT和MRI杂志 2017年第7期15卷 117-119页

作者：潘龙牛朝霞河南省信阳市第三人民医院影像科河南信阳464000 河南医学高等专科学校病理生理学教研室河南郑州451191

目的卵巢交界性粘液性囊腺瘤的MRI诊断及病理对照分析。方法回顾性分析我院35例经病理证实的卵巢交界性粘液性囊腺瘤的临床资料及MRI检查资料,观察的肿瘤部位、形态、大小,分房数目、囊液信号、结节或乳头状突起、囊壁及分隔厚度等情况... 详细信息

目的卵巢交界性粘液性囊腺瘤的MRI诊断及病理对照分析。方法回顾性分析我院35例经病理证实的卵巢交界性粘液性囊腺瘤的临床资料及MRI检查资料,观察的肿瘤部位、形态、大小,分房数目、囊液信号、结节或乳头状突起、囊壁及分隔厚度等情况,将其结果与病理对照分析。结果经病理对照,MRI发现了全部肿瘤,共37个,对肿瘤检出率为100%;肿瘤以完全囊性及囊性为主。35例患者中,左侧16例,右侧17例,双侧2例;肿瘤呈类椭圆形30个,分叶状7个。MRI对肿瘤大小诊断结果与病理结果比较无统计学意义(P>0.05)。结论 MRI可较好地诊断卵巢交界性粘液性囊腺瘤,显示其肿瘤位置、大小形态及病理特征,蜂窝状子房、T2WI含低信号囊液、T1WI含高信号囊液、结节或乳头状突起(≥5mm)及囊壁或分隔不规则增厚(≥5mm)5个MRI征象对其鉴别诊断有重要价值,可为临床治疗提供影像学依据。

关键词：卵巢交界性粘液性囊腺癌 MRI 病理

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抑郁小鼠模型脑突触体中突触蛋白表达的变化

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解剖学杂志 2016年第1期39卷 53-56页

作者：吴琼张小玲宋靖方常全忠漯河医学高等专科学校病理生理学教研室漯河462000 漯河医学高等专科学校医疗系漯河462000 漯河医学高等专科学校生理学教研室漯河462000

目的：研究抑郁症发病过程中突触蛋白表达的变化。方法：小鼠随机分为对照组和造模组，使用社会失败模型对造模组小鼠造模，之后将其分为对抑郁症敏感组及对抑郁症不敏感组。将以上3组小鼠分别断头取前额叶皮层、海马、纹状体并提取突... 详细信息

目的：研究抑郁症发病过程中突触蛋白表达的变化。方法：小鼠随机分为对照组和造模组，使用社会失败模型对造模组小鼠造模，之后将其分为对抑郁症敏感组及对抑郁症不敏感组。将以上3组小鼠分别断头取前额叶皮层、海马、纹状体并提取突触小体，通过免疫印迹检测突触小体内突触后致密蛋白95（PSD-95）、桥尾蛋白（gephyrin）及突触蛋白1（synapsin-1）蛋白表达的变化。结果：与对照组相比，在前额叶皮层，对抑郁症敏感组及对抑郁症不敏感组小鼠的PSD-95水平下降，而对抑郁症敏感组小鼠的synapsin-1表达增多；在海马，对抑郁症敏感组及对抑郁症不敏感组小鼠的PSD-95水平下降；在纹状体，对抑郁症不敏感的小鼠gephyrin、synapsin-1蛋白表达显著增加。结论：在抑郁症发病中突触体内兴奋性及抑制性蛋白发生了变化，这些可能与突触功能的紊乱相关。

关键词：抑郁症脑突触体突触后致密蛋白95 桥尾蛋白突触蛋白1

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抑郁小鼠大脑GABA及谷氨酸囊泡转运蛋白表达变化

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重庆医学 2016年第11期45卷 1470-1472页

作者：吴琼宋靖方张小玲蔡弘扬常全忠漯河医学高等专科学校病理生理学教研室河南漯河462002 漯河医学高等专科学校医疗系河南漯河462002 漯河医学高等专科学校生理学教研室河南漯河462002

目的研究抑郁症发病中GABA及谷氨酸囊泡转运蛋白表达的变化。方法小鼠随机分为对照组和造模组,使用社会失败模型对对照组小鼠造模,之后将其分为对抑郁症敏感组及对抑郁症不敏感组。将3组小鼠分别提取突触蛋白,并使用Western blot检测VGA... 详细信息

目的研究抑郁症发病中GABA及谷氨酸囊泡转运蛋白表达的变化。方法小鼠随机分为对照组和造模组,使用社会失败模型对对照组小鼠造模,之后将其分为对抑郁症敏感组及对抑郁症不敏感组。将3组小鼠分别提取突触蛋白,并使用Western blot检测VGAT及VGLUT1表达丰度。结果对抑郁症敏感组小鼠与对照组小鼠相比,在接触区域的停留时间显著降低,且在角落区域的停留时间显著增加,差异有统计学意义(P<0.05);在前额叶皮层、海马中和对照组与对抑郁症不敏感组比较,对抑郁症敏感组VGLUT1及VGAT的表达水平显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。对抑郁症不敏感组与对照组相比其VGAT及VGLUT1水平的表达差异均无统计学意义(P>0.05)。在纹状体,虽然对抑郁症敏感组的小鼠VGAT及VGLUT1的表达水平均有增加(P<0.05),但是对抑郁症不敏感的小鼠这些蛋白表达也显著增加。结论在抑郁症发病中前额叶皮层及海马兴奋性与抑制性囊泡转运异常,这可能与抑郁症神经递质紊乱有关。

关键词：抑郁症谷氨酸囊泡转运蛋白 γ-氨基丁酸囊泡转运蛋白

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重金属污染物镉通过EMT机制加强结肠癌细胞株HCT-116的恶性生物学行为

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世界华人消化杂志 2016年第30期24卷 4185-4192页

作者：钱燕陈丹蕾任海风王仕清于丹丹汪思应安徽医科大学基础医学院病理生理学教研室安徽省合肥市230032 安庆医药高等专科学校生理病理教研室安徽省安庆市246052

目的探讨重金属污染物镉(cadmium,Cd)对人结肠癌细胞株HCT-116的恶性生物学行为的影响及其相关机制.方法选用低浓度Cd诱导的人类结肠癌稳定细胞株HCT-116和未诱导的细胞株HCT-116为研究对象.通过MTT实验、平板克隆形成实验、黏附实验、T... 详细信息

目的探讨重金属污染物镉(cadmium,Cd)对人结肠癌细胞株HCT-116的恶性生物学行为的影响及其相关机制.方法选用低浓度Cd诱导的人类结肠癌稳定细胞株HCT-116和未诱导的细胞株HCT-116为研究对象.通过MTT实验、平板克隆形成实验、黏附实验、Tran swell细胞迁移和侵袭实验等,观察HCT-116细胞的恶性生物学行为的变化;蛋白免疫印迹法检测E-cadherin、Vimentin、E-盒结合锌指蛋白1、MMP-3、MMP-9等上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白的表达水平.结果与对照组相比,Cd诱导组细胞的恶性生物学行为增强(P<0.05),且转化后的细胞间呈间充质样链接;相较于对照组,Cd诱导24 h后,间质样标志物Vimentin蛋白的相对表达量明显增加(2.20±0.11 vs 1.03±0.08,P<0.01)、MMP-3(5.76±0.20 vs 1.00±0.09,P<0.01)、MMP-9(3-46±0.05 vs 0.99±0.04,P<0.01)的蛋白相对表达量也上升,而上皮样标志物E-cadherin蛋白的相对表达显著下降(0.30±0.03 vs 1.0l±0.05,P<0.01),且他们均呈现时司依赖性结论形态学和分子生物学都提示HCT-116细胞在慢性低剂量Cd暴露后会引起EMT机制.

关键词：镉结直肠癌上皮-间质转化钙黏附蛋白E 波形蛋白

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RNA干扰survivin基因对Eca-109细胞体内增殖的影响

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新乡医学院学报 2016年第5期33卷 352-355页

作者：牛朝霞陈洁彭蕤蕤秦紫芳河南医学高等专科学校病理生理学教研室河南郑州451191

目的利用RNA干扰抑制Eca-109细胞survivin基因表达,观察survivin沉默后对食管癌细胞Eca-109体内增殖的影响。方法构建靶向survivin基因的小干扰RNA(siRNA)真核表达载体,利用LipofectamineTM2000脂质体转染Eca-109细胞,建立稳定转染干扰... 详细信息

目的利用RNA干扰抑制Eca-109细胞survivin基因表达,观察survivin沉默后对食管癌细胞Eca-109体内增殖的影响。方法构建靶向survivin基因的小干扰RNA(siRNA)真核表达载体,利用LipofectamineTM2000脂质体转染Eca-109细胞,建立稳定转染干扰组细胞Eca-109/si-survivin;同法建立阴性对照组细胞Eca-109/si-control,并以Eca-109为空白对照组细胞;通过Western blot检测survivin基因沉默效果;借助裸鼠移植瘤模型分析survivin干扰前后裸鼠成瘤时间及瘤结节质量的改变,比较各组Eca-109细胞的体内增殖速度;通过末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记技术法检测移植瘤细胞凋亡的变化。结果干扰组细胞survivin蛋白表达显著低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05),而阴性对照组细胞survivin蛋白表达与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。干扰组裸鼠平均瘤结节质量显著低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05),而阴性对照组与空白对照组裸鼠的平均瘤结节质量差异均无统计学意义(P>0.05)。干扰组裸鼠移植瘤细胞凋亡指数明显高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05),而阴性对照组与空白对照组裸鼠移植瘤细胞凋亡指数比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论靶向survivin的siRNA能特异性沉默survivin基因表达,诱导细胞凋亡,进而抑制人食管癌Eca-109细胞的体内增殖。

关键词： RNA干扰 survivin基因 Eca-109细胞细胞增殖食管癌

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靶向survivin基因的小干扰RNA对食管癌细胞Eca-109化疗敏感性的影响

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安徽医药 2016年第4期20卷 683-686页

作者：牛朝霞彭蕤蕤陈洁秦紫芳裴瑞河南医学高等专科学校病理生理学教研室河南郑州451191

目的利用RNAi(RNA interference,RNAi)技术抑制食管癌Eca-109细胞survivin基因表达,观察survivin基因沉默后对Eca-109细胞化疗敏感性的影响。方法构建靶向survivin基因特定序列的小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)真核表达载体并转染Eca-109细胞,筛选得到稳定转染的survivin干扰组细胞Eca-109/si-survivin,同时设转染无关干扰质粒的Eca-109细胞为阴性对照组,未转染的Eca-109细胞为空白对照组;通过Western Blot法检测干扰前后survivin基因沉默抑制效果;随后将各组细胞与不同浓度的氟尿嘧啶(5-Fu)作用,MTT法检测各组细胞对5-Fu的半数抑制浓度(IC50),流式细胞仪分析各组细胞的凋亡率。结果干扰组Eca-109/si-survivin细胞survivin蛋白表达水平(18.75±3.12)较阴性对照组Eca-109/si-control(44.17±3.15)及空白对照组Eca-109(46.20±2.62)明显下调(P<0.05);联合应用5-Fu的Eca-109/si-survivin干扰组细胞IC50为(18.75±1.53)mg·L-1,显著低于空白对照组(39.65±1.75)mg·L-1和阴性对照组(38.95±1.34)mg·L-1,差异具有统计学意义(P<0.05);联合应用5-Fu的Eca-109/si-survivin干扰组细胞凋亡率为(37.35±1.52)%,明显高于空白对照组(11.26±1.21)%和阴性对照组(12.34±1.32)%,差异具有显著性(P<0.05)。结论靶向survivin的siRNA能特异性沉默survivin基因表达,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,并增强人食管癌Eca-109细胞对5-Fu的化疗敏感性。

关键词：小干扰RNA survivin基因 Eca-109细胞化疗敏感性

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Survivin与食管癌早期诊断治疗及预后的关系

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新乡医学院学报 2016年第3期33卷 246-248,F0003页

作者：牛朝霞河南医学高等专科学校病理生理学教研室河南郑州451191

食管癌是消化系统常见的恶性肿瘤之一,其发病率与病死率在我国呈逐年上升趋势。但由于缺乏诊断早期食管癌的典型临床症状与体征,致使患者一经发现大多处于中晚期,从而错失了最佳临床治疗期,严重影响患者的预后。Survivin是近年来研究新... 详细信息

食管癌是消化系统常见的恶性肿瘤之一,其发病率与病死率在我国呈逐年上升趋势。但由于缺乏诊断早期食管癌的典型临床症状与体征,致使患者一经发现大多处于中晚期,从而错失了最佳临床治疗期,严重影响患者的预后。Survivin是近年来研究新发现的凋亡抑制基因,在食管癌组织中有较高表达,而在正常食管组织中低表达甚至不表达,因此,Survivin有可能成为食管癌早期诊断的肿瘤分子标志物及食管癌基因治疗的新靶点。本文就Survivin与食管癌早期诊断、治疗及预后的关系进行综述。

关键词：食管癌 Survivin 早期诊断基因治疗预后

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高职高专护理专业病理学与病理生理学教学改革和思考

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医学信息（医学与计算机应用） 2016年第28期29卷 22-23页

作者：刘伟程亚黄玉涛季晓辉韩秀芳马丽亚高伟王钟辉商丘医学高等专科学校基础医学部病理学与病理生理学教研室河南商丘476900

病理学与病理生理学作为一门重要的桥梁学科,在高职高专的三年制医学生教育中起着至关重要的作用。传统的病理课教学模式难以适应课时减少的现状,为此我们将教学内容调整作为此次病理学教学改革的重点,通过改革优化病理学与病理生理学... 详细信息

病理学与病理生理学作为一门重要的桥梁学科,在高职高专的三年制医学生教育中起着至关重要的作用。传统的病理课教学模式难以适应课时减少的现状,为此我们将教学内容调整作为此次病理学教学改革的重点,通过改革优化病理学与病理生理学教学内容,促进以学生为主体、教师为主导的教学观念转变,总结成果发现不足,使我校病理学与病理生理学教学质量得到提高。

关键词：病理学与病理生理学教学改革教学研究

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内分泌和化疗对乳腺肿瘤患者干细胞的影响

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中国组织工程研究 2016年第32期20卷 4751-4757页

作者：赵艳丽刁建华吴彩琴张彩霞贾焕霞牛朝霞许昌学院医学院河南省许昌市461000 许昌市中心医院内分泌科河南省许昌市461000 河南医学高等专科学校病理生理学教研室河南省郑州市451191

背景:肿瘤干细胞是恶性肿瘤复发及转移的根源,不同治疗方法对肿瘤中肿瘤干细胞的影响是临床研究的重点。目的:探讨内分泌和化疗对乳腺肿瘤患者干细胞的影响。方法:(1)对雌激素受体阳性人乳腺癌细胞株MCF-7进行复苏和培养,选取第3代对数... 详细信息

背景:肿瘤干细胞是恶性肿瘤复发及转移的根源,不同治疗方法对肿瘤中肿瘤干细胞的影响是临床研究的重点。目的:探讨内分泌和化疗对乳腺肿瘤患者干细胞的影响。方法:(1)对雌激素受体阳性人乳腺癌细胞株MCF-7进行复苏和培养,选取第3代对数期细胞分为对照组、雌二醇组和雌二醇+三苯氧胺组。对照组培养基中添加等量无水乙醇,雌二醇组分为1×10^(-7),1×10^(-8),1×10^(-9)mol/L三个亚组,分别在培养基中加入1×10^(-7),1×10^(-8),1×10^(-9)mol/L雌二醇。雌二醇+三苯氧胺组按雌二醇浓度的差异分为三个亚组,培养基中分别加入1×10^(-7),1×10^(-8),1×10^(-90mol/L雌二醇,3个亚组均同时加入1×10^(-6)mol/L的三苯氧胺。(2)晚期复发转移乳腺癌女性患者15例为雌激素受体阳性复发转移乳腺癌组,接受化疗治疗。另取15名健康志愿者作为健康对照组。结果与结论:(1)雌二醇组和雌二醇+三苯氧胺组CD44+CD24-/low细胞亚群比例均显著高于对照组(P<0.05),雌二醇组CD44+CD24-/low细胞亚群比例显著高于同浓度雌二醇+三苯氧胺组(P<0.05)。各组培养10 d和20 d时的CD44+CD24-/low细胞亚群比例接近(P>0.05)。(2)不同化疗药物均对MCF-7细胞的增殖产生一定的抑制作用,且呈现出剂量-效应依赖现象。MCF-7经不同化疗药物干预24 h后,细胞中CD44+CD24-/low细胞亚群的比例均明显增加(P<0.05);但干预20 d后仅紫杉醇和阿霉素组细胞中CD44^+CD24^(-/low)细胞亚群比例高于对照组(P<0.05)。(3)健康者外周血CD44+CD24-/low细胞亚群比例显著低于雌激素受体阳性复发转移乳腺癌患者(P<0.05)。在15例雌激素受体阳性复发转移乳腺癌患者中,9例疾病稳定,5例部分缓解,1例化疗无效,疾病进展。化疗有效者化疗后的外周血CD45-CD44+CD24-/low细胞亚群比例均显著低于化疗前(P<0.05)。(5)结果说明内分泌治疗与化疗会对雌激素受体阳性乳腺癌的CD44^+CD24^(-/low)细胞亚群产生一定的影响。MCF-7细胞中CD44^+CD24^(-/low)细胞亚群会对一定的化疗药物产生抵抗能力,经化疗有效的患者外周血CD45-CD44^+CD24^(-/low)细胞比例会出现下降。

关键词：受体,雌激素抗肿瘤联合化疗方案组织工程干细胞肿瘤干细胞乳腺肿瘤内分泌治疗雌激素受体化疗复发转移

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