检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2009年第2期29卷 146-150页

作者：武文娟耿英华唐洁李柏青蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室 233030 安徽省感染与免疫重点实验室免疫学教研室蚌埠医学院附属医院血液科

目的探讨蛋白激酶Cθ（PKCθ）信号转导途径在γδT细胞表达L-选择素（CD62L）中的调控作用。方法用结核分枝杆菌抗原（Mtb-Ag）刺激人外周血单个核细胞（PBMC）并培养6～8d，获得富含γδT细胞的结核分枝杆菌活化T细胞（MtbAT），作为... 详细信息

目的探讨蛋白激酶Cθ（PKCθ）信号转导途径在γδT细胞表达L-选择素（CD62L）中的调控作用。方法用结核分枝杆菌抗原（Mtb-Ag）刺激人外周血单个核细胞（PBMC）并培养6～8d，获得富含γδT细胞的结核分枝杆菌活化T细胞（MtbAT），作为γδT细胞来源，分别加佛波醇酯（PMA）、PMA＋离子霉素（IMN）培养3、6、12、24h，或用培养8d的MtbAT细胞分别加入Mtb—Ag、Rottlerin＋Mtb-Ag、PMA、Rottlerin＋PMA刺激4h，收集细胞用荧光抗体染色后，流式细胞术（FCM）检测CD62L在18T细胞表面的表达。结果体外激活培养6～8d的18T细胞表面CD62L的表达率为75．0％～87．0％。PMA刺激78T细胞3～12h时CD62L表达逐渐下调，表达率为42．3％～25．5％；但在刺激后24h时，又明显回升至53．2％。而PMA＋IMN刺激3、6h时，18T细胞CD62L表达也下调，表达率分别为52．1％、39．3％；但在刺激12h和24h时CD62L表达率分别为52．9％和35．3％。在PMA刺激γδT细胞同时加入Rottlerin，则CD62L的表达率（47．9％）明显高于PMA单独刺激组（31．8％）；MtbAT用Mtb—Ag再刺激4h后，γδT细胞CD62L的表达率由70．0％降为54．8％，而在***再刺激时加入Rottlerin，则CD62L表达率增加到63．1％。结论γδT细胞在PMA或Mtb-Ag刺激后CD62L的表达下调可被PKCθ特异性抑制剂部分阻断，表明CD62L在γδT细胞表面的表达可能与PKCθ信号转导途径的调控相关。

关键词： L-选择素 γδT细胞蛋白激酶C

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我国旋毛虫病流行病学诊断治疗及防治措施研究进展

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中国血吸虫病防治杂志 2020年第5期32卷 448-452,458页

作者：杨小迪徐常艳王舒颖高宏宇梁金宝蚌埠医学院病原生物学教研室蚌埠233030 安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠医学院第一附属医院

旋毛虫病是一种呈世界性分布的人兽共患寄生虫病,人和多种动物(包括肉食动物、草食动物甚至某些禽鸟类)均可被感染,人因生食或半生食含有活幼虫囊包的肉类或肉制品而感染。在中国,该病主要流行于西南、东北和中原地区,危害人数多、社会... 详细信息

旋毛虫病是一种呈世界性分布的人兽共患寄生虫病,人和多种动物(包括肉食动物、草食动物甚至某些禽鸟类)均可被感染,人因生食或半生食含有活幼虫囊包的肉类或肉制品而感染。在中国,该病主要流行于西南、东北和中原地区,危害人数多、社会影响大。该病暴发所导致的突发性公共卫生事件,严重威胁着人民健康和社会稳定。本文就我国旋毛虫病流行状况、诊断、治疗和防控措施等作一概述,旨在为进一步做好我国旋毛虫病防治工作提供参考。

关键词：旋毛虫病流行病学诊断治疗防控措施

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毛细管电泳法检测结核杆菌蛋白多肽类抗原活性成分研究

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化学研究与应用 2014年第10期26卷 1545-1550页

作者：张晖薛洪宝陈勇李柏青梁丽丽陶兆林蚌埠医学院化学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院感染与免疫安徽省重点实验室安徽蚌埠233030

采用毛细管电泳法分离检测结核杆菌耐热抗原样品中的活性成分。熔融石英毛细管55cm(40cm处检测窗口)×50μm i.d.;缓冲液:0.15mol·L-1硼酸盐(含5g·L-1PEG-4000,pH=10.92);分离电压:+12 kV;进样压力:0.5 psi(3.45 kPa),进... 详细信息

采用毛细管电泳法分离检测结核杆菌耐热抗原样品中的活性成分。熔融石英毛细管55cm(40cm处检测窗口)×50μm i.d.;缓冲液:0.15mol·L-1硼酸盐(含5g·L-1PEG-4000,pH=10.92);分离电压:+12 kV;进样压力:0.5 psi(3.45 kPa),进样时间3.0s;分离温度:25℃;UV-Vis检测器检测波长:200nm。本方法能分离溶菌酶标准蛋白和牛血清白蛋白标准品,根据分子量大小能有效分离结核杆菌耐热抗原样品活性成分,线性回归方程相关系数r2在0.99673以上,定量限在19.47μg·mL-1左右。样品加标回收率在96.09%左右,相对标准偏差小于8.13%,本方法与快速蛋白液相色谱法结果一致。该方法简便、灵敏、快速、可靠、重现性好,能用于结核杆菌耐热抗原样品中活性成分测定。

关键词：毛细管电泳法( CE) 结核杆菌耐热抗原( Mtb-Ag) 活性成分快速蛋白液相色谱法( FPLC)

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亚硝基铁氰化钠来源的外源性NO体外杀伤旋毛虫肌幼虫作用研究

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中国血吸虫病防治杂志 2015年第2期27卷 166-169页

作者：王小莉杨小迪常雪莲王媛媛崔洁朱伟夏惠方强蚌埠医学院病原生物学教研室、安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 蚌埠医学院显微形态实验中心

目的探讨亚硝基铁氰化钠(SNP)来源的NO体外杀伤旋毛虫肌幼虫的作用及其相关机制。方法制作浓度为1 000条/ml的旋毛虫肌幼虫悬液。培养板每孔加入0.1 ml肌幼虫悬液,再加入SNP,使其终浓度分别为0.02、0.05、0.10、0.20、0.50 mmol/L和1.00... 详细信息

目的探讨亚硝基铁氰化钠(SNP)来源的NO体外杀伤旋毛虫肌幼虫的作用及其相关机制。方法制作浓度为1 000条/ml的旋毛虫肌幼虫悬液。培养板每孔加入0.1 ml肌幼虫悬液,再加入SNP,使其终浓度分别为0.02、0.05、0.10、0.20、0.50 mmol/L和1.00 mmol/L,并设空白对照组,37℃5%CO2培养箱中孵育4 d后收集各孔肌幼虫,镜检计数,计算并比较各组肌幼虫死亡率。另于培养板中每孔加入0.1 ml肌幼虫悬液,分别设A组(对照组,1.00 mmol/L SNP)、B组(0.15 mmol/L Fe SO4+1.00 mmol/L SNP)、C组(1.00 mmol/L L-半胱氨酸+1.00 mmol/L SNP)、D组(0.15 mmol/L Fe SO4+1.00mmol/L L-半胱氨酸+1.00 mmol/L SNP)、E组(0.15 mmol/L Hb+1.00 mmol/L SNP),培养、检测方法同前,计算并比较各组肌幼虫死亡率。结果 0.02 mmol/L SNP组与空白对照组的旋毛虫肌幼虫死亡率分别为(5.50±1.80)%和(4.93±0.25)%(P>0.05)。0.05、0.10、0.20、0.50、1.00 mmol/L SNP组虫体死亡率分别为(20.19±2.71)%、(29.21±2.12)%、(41.81±2.03)%、(47.85±3.79)%和(60.98±5.19)%,与空白对照组比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。旋毛虫肌幼虫死亡率与SNP浓度呈正相关(rs=0.875,P<0.05)。B、C、D、E组肌幼虫死亡率分别为(49.48±1.34)%、(47.29±2.79)%、(26.28±1.37)%和(17.93±3.49)%,均较A组(60.98±5.19)%有所下降(P均<0.05)。结论 SNP来源NO对体外培养的旋毛虫肌幼虫具有杀伤作用,而血红蛋白、硫酸亚铁、L-半胱氨酸对该杀伤具有抑制作用,以血红蛋白抑制效果最显著。

关键词：旋毛虫肌幼虫亚硝基铁氰化钠一氧化氮体外研究

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安徽省中北部淡色库蚊对多种杀虫剂抗性及其kdr基因突变研究

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中国血吸虫病防治杂志 2016年第4期28卷 406-410页

作者：魏星杨小迪王小莉李江艳王媛媛夏惠常雪莲方强蚌埠医学院病原生物学教研室、安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 蚌埠医学院公共课程部

目的了解安徽省中北部地区淡色库蚊对多种杀虫剂的抗药性现状及其kdr基因突变情况。方法 2014年6-9月在淮北市、蚌埠市和滁州市3地采集淡色库蚊幼虫,带回实验室饲养至成虫,采用WHO成蚊接触筒药膜滤纸接触法对其进行0.05%溴氰菊酯、5%马... 详细信息

目的了解安徽省中北部地区淡色库蚊对多种杀虫剂的抗药性现状及其kdr基因突变情况。方法 2014年6-9月在淮北市、蚌埠市和滁州市3地采集淡色库蚊幼虫,带回实验室饲养至成虫,采用WHO成蚊接触筒药膜滤纸接触法对其进行0.05%溴氰菊酯、5%马拉硫磷、0.1%噁虫威、4%DDT抗性生物测定。以PCR扩增经溴氰菊酯抗性测定的库蚊抗性相关kdr基因并进行测序,统计L1014位点突变情况。结果上述3个地区淡色库蚊对溴氰菊酯、马拉硫磷、噁虫威、DDT 4种杀虫剂都产生了不同程度的抗药性,对DDT产生的抗性较高;虽然3地淡色库蚊接触DDT后的死亡率差异无统计学意义(F=1.027,P>0.05);但接触溴氰菊酯、马拉硫磷、噁虫威后的死亡率差异均有统计学意义(F=23.823、33.955、128.841,P均<0.01)。3地淡色库蚊种群的kdr基因1014位点均存在L1014F、L1014S这2种非同义突变;L1014F突变频率与溴氰菊酯抗性水平呈正相关(r2=0.718,P<0.01)。结论安徽省中北部地区淡色库蚊对溴氰菊酯、马拉硫磷、噁虫威、DDT均产生了较强的抗性,kdr基因L1014F突变频率与溴氰菊酯抗性水平呈正相关;各地区卫生部门需加强对媒介蚊虫抗性的动态监测。

关键词：淡色库蚊杀虫剂抗药性溴氰菊酯马拉硫磷噁虫威 kdr基因突变安徽省

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血吸虫及其衍生物调节免疫失调性疾病的研究进展

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2023年第1期41卷 85-91页

作者：栗根孙同骏钱亚云李倩倩杨小迪安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院第一附属医院儿科安徽蚌埠233030 蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233030

血吸虫是一种人及哺乳动物体内寄生的蠕虫,在与宿主共进化过程中,通过调控宿主固有及适应性免疫应答以诱导其免疫逃逸,营造有利于其长久寄生的微环境。近年来,血吸虫及其虫源性成分对过敏性、自身免疫性和代谢性疾病等多种免疫失调性疾... 详细信息

血吸虫是一种人及哺乳动物体内寄生的蠕虫,在与宿主共进化过程中,通过调控宿主固有及适应性免疫应答以诱导其免疫逃逸,营造有利于其长久寄生的微环境。近年来,血吸虫及其虫源性成分对过敏性、自身免疫性和代谢性疾病等多种免疫失调性疾病的药理效应成为研究热点。本文综述了血吸虫及其衍生物在各种免疫失调性疾病中的调节作用和相关机制,以期为临床治疗提供实验基础和理论依据。

关键词：血吸虫衍生物免疫调节免疫失调性疾病

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猪囊尾蚴期特异性抗原cC1的克隆与高效可溶性原核表达

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南方医科大学学报 2010年第2期30卷 206-209页

作者：方强骆江坤崔琢齐文娟胡元生沈继龙蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院免疫学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院第一附属医院安蚌埠233004 安徽医科大学病原生物学教研室安徽合肥230032

目的克隆猪囊尾蚴期特异性抗原cC1基因,并进行高效可溶性原核表达。方法利用PT-PCR从猪囊尾蚴中获得cC1编码基因,T-A克隆后,将cC1插入原核表达载体pET28a中,经酶切、测序鉴定后将其转入宿主菌*** BL21(DE3)中,通过IPTG诱导表达并优化表... 详细信息

目的克隆猪囊尾蚴期特异性抗原cC1基因,并进行高效可溶性原核表达。方法利用PT-PCR从猪囊尾蚴中获得cC1编码基因,T-A克隆后,将cC1插入原核表达载体pET28a中,经酶切、测序鉴定后将其转入宿主菌*** BL21(DE3)中,通过IPTG诱导表达并优化表达条件,表达的融合蛋白Ni+-亲和层析柱纯化后经快速液相蛋白层析分离系统检测其纯度。采用SDS-PAGE和Western-blotting对目的蛋白进行分析和鉴定。结果RT-PCR扩增出的片段长度为1056bp,构建的重组表达质粒经PCR、酶切验证,和预期的结果一致,测序鉴定与Genbank中cC1基因相比于423位存在1个同义突变。转化有重组质粒的E. coli BL21(DE3)经过0.05mmol/LIPTG 37℃诱导6h高效表达了占菌体蛋白总量60%的可为囊虫病患者血清识别的相对分子质量约为40000的可溶性融合蛋白,经Ni+-亲和层析柱纯化后纯度达94%。结论成功克隆并高效可溶性原核表达了猪囊尾蚴期特异性抗原cC1,为其进一步研究和应用奠定了基础。

关键词：猪囊尾蚴,抗原cC1 克隆原核表达条件优化

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系统性红斑狼疮患者外周血CD14^+单核细胞表达PD-L1的分析和意义

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第4期28卷 429-432页

作者：谢长好王元元李志军唐洁李柏青蚌埠医学院第一附属医院风湿免疫科安徽蚌埠233004 蚌埠医学院组织与胚胎学教研室安徽蚌埠233004 蚌埠医学院感染与免疫省重点实验室安徽蚌埠233004

目的:探讨PD-L1在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单核细胞(Mo)上的表达及临床意义。方法:应用流式细胞仪检测51例SLE患者和38例健康对照者外周血CD14+Mo表面PD-L1表达水平,比较SLE不活动组、活动组和健康对照组以及狼疮肾炎组和无狼疮... 详细信息

目的:探讨PD-L1在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单核细胞(Mo)上的表达及临床意义。方法:应用流式细胞仪检测51例SLE患者和38例健康对照者外周血CD14+Mo表面PD-L1表达水平,比较SLE不活动组、活动组和健康对照组以及狼疮肾炎组和无狼疮肾炎组之间CD14+Mo表面PD-L1表达的百分比,并分析其与临床表现及实验室检查数据的相关性。结果:SLE活动组和稳定组CD14+PD-L1+Mo百分率均高于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。狼疮肾炎患者CD14+PD-L1+Mo百分率高于无狼疮肾炎患者(P<0.05)。SLE患者CD14+PD-L1+Mo百分率与SLEDAI评分、尿蛋白定量呈正相关。SLE患者中抗dsDNA抗体、抗Sm抗体、抗U1snRNP抗体、抗核小体抗体阳性组外周血CD14+PD-L1+单核细胞百分率均高于对应阴性组,且均有统计学意义(均P<0.05)。结论:SLE患者外周血CD14+Mo细胞表达PD-L1异常,与病情活动性和抗体产生有关。

关键词：系统性红斑狼疮 PD-L1 单核细胞

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蛋白激酶Cθ信号途径在结核分枝杆菌抗原激活人γδT细胞增殖和分化中的作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2008年第10期28卷 934-938页

作者：朱安友陈礼文王凤超李兴武葛鑫唐洁李柏青蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室 233030 蚌埠医学院第一附属医院检验科

目的研究蛋白激酶Cθ（protein kinase Cθ，PKCθ）信号途径在结核分枝杆菌抗原（Mycobacterium tubemulosis antigen，Mtb—Ag）激活人γδT细胞增殖和分化中的作用。方法健康人外周血单个核细胞（PBMC）用Mtb—Ag和IL-2优势刺激和扩... 详细信息

目的研究蛋白激酶Cθ（protein kinase Cθ，PKCθ）信号途径在结核分枝杆菌抗原（Mycobacterium tubemulosis antigen，Mtb—Ag）激活人γδT细胞增殖和分化中的作用。方法健康人外周血单个核细胞（PBMC）用Mtb—Ag和IL-2优势刺激和扩增γδT细胞，或预先用5．0umol／L Rottlerin（楸毒素）预处理，培养不同时间后，用流式细胞术（FCM）检测γδT细胞表面活化分子和细胞因子表达；同时采用活体染料羧基荧光素乙酰乙酸（CFSE）标记细胞，流式细胞术分析Mtb—Ag刺激γδT细胞后的增殖和各子代细胞百分率。结果PBMC经Mtb—Ag刺激后3d，γδT细胞CD69和CD25表达分别为46．2％和45．6％，而Rottlerin预处理显著地抑制了CD69和CD25表达（P〈0．01）；PBMC经Mtb—Ag激活培养5、10和15d，培养扩增细胞中的γδT细胞比例分别为9．6％、54．6％和82．4％，其中第5天已有少部分1趼细胞发生增殖，第10天和第15天时几乎全部γδT细胞分裂都在6代以上，用Rotderin预处理，显著抑制了γδT细胞增殖反应，但在培养第10天后仍有少部分γδT细胞发生增殖反应；同时在培养第7天、14天和21天，用PMA（佛波酯）＋Ionomyein（离子霉素）再刺激后，产生IFN-γ的γδT细胞均在80％左右；培养21d时，有2．6％的γδT细胞表达IL-4。在Rottlerin预处理组产生TH1型细胞因子IFN-γ的γδT细胞均显著减少（P〈0．05），而γδT细胞表达TH2型细胞因子IL-4则几乎完全抑制（P〈0．01）。结论PKCθ信号途径在Mtb—Ag刺激γδT细胞的增殖和分化中均起重要作用。

关键词： γδT细胞蛋白激酶Cθ 增殖结核分枝杆菌抗原

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晚期非小细胞肺癌患者外周血固有样淋巴细胞亚群比例变化和临床意义

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细胞与分子免疫学杂志 2016年第5期32卷 671-675页

作者：魏婷婷韩啸夏晓影马芳姚春艳蚌埠医学院医学检验系免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠医学院医学第一附属医院肿瘤内科蚌埠医学院医学检验系临床检验诊断学教研室安徽蚌埠233000

目的检测固有样淋巴细胞、αβT细胞、B2细胞在非小细胞肺癌(NSCLC)患者和正常人体内的分布情况及相关性。方法收集16例正常对照和5例NSCLC初诊患者和15例病情稳定患者外周血,采用流式细胞术检测外周血淋巴细胞中,恒定型自然杀伤T(i NKT... 详细信息

目的检测固有样淋巴细胞、αβT细胞、B2细胞在非小细胞肺癌(NSCLC)患者和正常人体内的分布情况及相关性。方法收集16例正常对照和5例NSCLC初诊患者和15例病情稳定患者外周血,采用流式细胞术检测外周血淋巴细胞中,恒定型自然杀伤T(i NKT)细胞、γδT细胞、B1细胞及αβT细胞、B2细胞的比例。结果病情稳定组的i NKT细胞比例显著低于对照组和初诊患者组,而αβT细胞比例显著高于对照人群;初诊患者组的γδT细胞显著高于病情稳定组;初诊患者组B1细胞比例明显低于对照组。病情稳定组i NKT细胞和γδT细胞呈正相关;病情稳定组和对照组B1和B2细胞呈正相关。结论NSCLC患者外周血固有样淋巴细胞亚群失衡。

关键词：非小细胞肺癌固有样淋巴细胞流式细胞术

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