检索结果-内蒙古大学图书馆

中国血吸虫病防治杂志 2016年第3期28卷 293-296,322页

作者：杨小迪贺文欣方强宋迪吴琦王小莉李楠齐琦万勇坤张慧周瑞陈兴智刘牧林李徽徽褚亮蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠23303 蚌埠医学院组织学与胚胎学教研室蚌埠医学院病理学教研室蚌埠医学院第一附属医院蚌埠医学院第二附属医院

目的探讨旋毛虫成虫排泄分泌蛋白（AES）对盲肠结扎穿孔术（CLP）诱导的小鼠脓毒症的抑制作用。方法将48只BALB/c小鼠随机分为3组,即假手术对照组（PBS＋sham组,A组）、脓毒症组（PBS＋CLP组,B组）、AES蛋白治疗组（AES＋CLP组,C组）。... 详细信息

目的探讨旋毛虫成虫排泄分泌蛋白（AES）对盲肠结扎穿孔术（CLP）诱导的小鼠脓毒症的抑制作用。方法将48只BALB/c小鼠随机分为3组,即假手术对照组（PBS＋sham组,A组）、脓毒症组（PBS＋CLP组,B组）、AES蛋白治疗组（AES＋CLP组,C组）。A组和B组于CLP术后经腹腔注射200μl PBS,C组术后经腹腔注射含25μg AES蛋白的等量PBS。每组随机抽取8只,建模后观察各组小鼠的一般情况及96 h生存率;每组其余8只小鼠于建模后12 h取肝、肺、肾,HE染色观察病理改变;以酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10及TGF-β细胞因子水平的变化。结果 3组小鼠96 h生存率差异有统计学意义（χ^2=21.16,P〈0.05）;与A组（100%）相比,B组小鼠生存率（0）降低（P〈0.05）,且肺、肝及肾脏损伤明显加重;经AES治疗后,C组存活率（75%）明显增加（P〈0.05）,小鼠肺脏、肝脏及肾脏病理损伤亦显著缓解。3组小鼠血清中的促炎因子TNF-α（F=27.11,P〈0.05）、IL-1β（F=18.75,P〈0.05）及IL-6（F=100.93,P〈0.05）水平差异均有统计学意义;B组小鼠的促炎因子水平均高于A组（P均〈0.05）;经AES治疗后,C组小鼠上述3种促炎因子水平较B组均显著下降（P均〈0.05）。3组小鼠血清中的调节性细胞因子IL-10（F=10.88,P〈0.05）及TGF-β（F=11.37,P〈0.05）水平差异亦有统计学意义;经AES治疗后,C组小鼠IL-10及TGF-β分泌水平较B组亦明显增加（P〈0.05）。结论旋毛虫AES对CLP诱导的BALB/c小鼠脓毒症有显著的缓解作用。

关键词：旋毛虫盲肠结扎穿孔术排泄分泌蛋白脓毒症小鼠促炎因子抑炎因子

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肺结核患者外周血中结核分枝杆菌耐热抗原特异性的TNF-α^＋ γδ T细胞数量和亚群分析

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细胞与分子免疫学杂志 2016年第11期32卷 1527-1531页

作者：唐洁陈策查成王兆华张晨曾林丽李柏青蚌埠医学院免疫学教研室安徽蚌埠233030 安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院科研中心安徽蚌埠233030 解放军123医院传染科安徽蚌埠233030 蚌埠市传染病医院安徽蚌埠233030 蚌埠医学院医学检验系安徽蚌埠233030

目的探讨结核分枝杆菌耐热抗原(MTB-HAg)刺激下,肺结核患者、潜伏性MTB感染者、健康者外周血γδT细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)产生细胞数量的差异。方法采集15例正常成人外周血,根据人MTB感染T细胞酶联免疫斑点诊断试剂盒检测结果分... 详细信息

目的探讨结核分枝杆菌耐热抗原(MTB-HAg)刺激下,肺结核患者、潜伏性MTB感染者、健康者外周血γδT细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)产生细胞数量的差异。方法采集15例正常成人外周血,根据人MTB感染T细胞酶联免疫斑点诊断试剂盒检测结果分为健康者(n=9)和潜伏性MTB感染者(n=6),另采集肺结核患者外周血(n=12),3组经密度梯度离心法获取外周血单个核细胞(PBMC),用MTB-HAg刺激20 h。收集细胞,流式细胞术检测TCRαβ+T细胞、TCRγδ+T细胞、CD4+αβT细胞、CD8+αβT细胞、TCR-Vδ2+T细胞亚群中产生TNF-α产生细胞的比例。结果肺结核患者外周血γδT细胞中TNF-α产生细胞比例显著低于潜伏性MTB感染者和健康者;肺结核患者外周血Vδ2T细胞中TNF-α产生细胞比例显著低于潜伏性MTB感染者和健康者;肺结核患者外周血中Vδ2T细胞在TNF-α+γδT细胞中所占比例显著低于潜伏性MTB感染者和健康者。结论肺结核患者外周血MTB-HAg特异性γδT细胞及其Vδ2亚群产生细胞因子TNF-α能力显著低于潜伏性MTB感染者和健康者。

关键词：结核分枝杆菌耐热抗原(MTB-HAg) 潜伏性MTB感染活动性肺结核 γδ T细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)

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miR-20b直接靶向3′-UTR负性调节VEGF的表达

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华中科技大学学报（医学版） 2016年第1期45卷 22-26页

作者：陶象男汪忆梦宋传旺蚌埠医学院第二附属医院检验科蚌埠233040 蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030

目的探讨miR-20b是否直接靶向VEGF 3′-非编码区(3′-UTR)而调控其表达。方法采用miRanda软件预测VEGF 3′-UTR是否存在miR-20b的结合位点;使用PCR方法扩增RAW264.7细胞VEGF基因3′-UTR序列,经双酶切后克隆到pmiR-RB-Report^(TM)质粒海... 详细信息

目的探讨miR-20b是否直接靶向VEGF 3′-非编码区(3′-UTR)而调控其表达。方法采用miRanda软件预测VEGF 3′-UTR是否存在miR-20b的结合位点;使用PCR方法扩增RAW264.7细胞VEGF基因3′-UTR序列,经双酶切后克隆到pmiR-RB-Report^(TM)质粒海肾荧光素酶的下游,得到pmiR-RB-Report TM-VEGF 3′-UTR双荧光素酶重组质粒,使用电泳法和测序法进行验证;将重组质粒或空质粒与miR-20b模拟物或其对照共转染HeLa细胞,24h后检测相应荧光素酶活性。结果 VEGF 3′-UTR存在miR-20b的结合位点;获得了含VEGF 3′-UTR的双荧光素酶报告载体;重组质粒与miR-20b模拟物共转染组HeLa细胞的荧光素酶活性明显低于空质粒转染组(P<0.05)。结论成功构建小鼠VEGF基因3′-UTR双荧光素酶报告载体,miR-20b可以直接靶向VEGF 3′-UTR而负性调控其表达。

关键词：血管内皮生长因子 3′-非编码区 miR-20b 双荧光素酶报告载体

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多模式教学法提升病原生物学青年教师教学能力的实践

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中国病原生物学杂志 2016年第9期11卷 I0004-I0004,F0003页

作者：杨小迪王媛媛陈兴智王小莉常雪莲李楠夏惠方强蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

教学质量是学校的立校之本,而青年教师的教学能力是保证教学质量及学校发展的前提。本文通过探索多种教学模式如案例式教学、PBL教学和微课教学相结合的方法,以期相应的提升病原生物学青年教师的教学能力,从而提高课堂教学效果,亦为基... 详细信息

教学质量是学校的立校之本,而青年教师的教学能力是保证教学质量及学校发展的前提。本文通过探索多种教学模式如案例式教学、PBL教学和微课教学相结合的方法,以期相应的提升病原生物学青年教师的教学能力,从而提高课堂教学效果,亦为基础医学的其他专业提供参考与借鉴。

关键词：病原生物学青年教师教学能力

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3种分枝杆菌耐热蛋白抗原对人γδT细胞的刺激活性研究

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中国病原生物学杂志 2016年第11期11卷 986-990页

作者：陈勇张涛刘勇管俊昌夏惠蚌埠医学院病原生物学教研室感染与免疫安徽省重点实验室安徽蚌埠233030

目的研究3种分枝杆菌耐热蛋白抗原体外对人γδT细胞的刺激活性。方法分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),分别使用人型结核分枝杆菌H37Ra耐热蛋白抗原(H37Ra-HAg)、牛型结核分枝杆菌BCG耐热蛋白抗原(BCG-HAg)和耻垢分枝杆菌耐热蛋白抗原... 详细信息

目的研究3种分枝杆菌耐热蛋白抗原体外对人γδT细胞的刺激活性。方法分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),分别使用人型结核分枝杆菌H37Ra耐热蛋白抗原(H37Ra-HAg)、牛型结核分枝杆菌BCG耐热蛋白抗原(BCG-HAg)和耻垢分枝杆菌耐热蛋白抗原(MS-HAg)进行刺激并持续培养12d,采用流式细胞仪检测增殖细胞中γδT细胞数量及CD4+T细胞所占比例。结果 H37Ra-HAg刺激组扩增细胞中γδT细胞的比例和数量均显著高于BCGHAg、MS-HAg刺激组和IL-2对照组[((50.52±5.40)%v.s(7.31±3.15)%、(5.82±3.42)%、(5.56±2.68)%);(9.63±1.64)×106v.s(0.69±0.36)×106、(0.57±0.22)×106、(0.34±0.18)×106))]。BCG-HAg刺激组扩增细胞中CD4+T细胞的比例和数量均显著高于H37Ra-HAg刺激组和IL-2对照组[(73.56±7.12%、66.93±7.65)%v.s(23.18±6.29)%、(52.61±5.37)%;(4.75±0.86)×106、(3.28±0.59)×106 v.s(2.71±0.65)×106、(1.63±0.45)×106]。而BCG-HAg刺激组和MS-HAg刺激组扩增细胞中γδT细胞的比例和数量和IL-2对照组相比并无显著性差异。结论 H37Ra-HAg具有促进γδT细胞增殖活性,BCG-HAg和MS-HAg具有促进CD4+T细胞增殖活性,BCG-HAg和MS-HAg无刺激γδT细胞增殖活性。

关键词：结核分枝杆菌卡介苗耻垢分枝杆菌 γδT细胞增殖流式细胞术

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上皮性卵巢癌中ALDH1和ABCG2的表达及其与微血管形成的关系

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中国病理生理杂志 2016年第10期32卷 1807-1814页

作者：俞岚宋文庆周蕾武世伍王丹娜蚌埠医学院第一附属医院病理科蚌埠医学院病理学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233000

目的:本文旨在探讨上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)中乙醛脱氢酶1(ALDH1)、腺苷三磷酸结合盒转运体G2(ABCG2)蛋白表达及微血管密度(microvessel density,MVD)之间的关系。方法:收集198例EOC术后标本和60例卵巢良性上皮性... 详细信息

目的:本文旨在探讨上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)中乙醛脱氢酶1(ALDH1)、腺苷三磷酸结合盒转运体G2(ABCG2)蛋白表达及微血管密度(microvessel density,MVD)之间的关系。方法:收集198例EOC术后标本和60例卵巢良性上皮性肿瘤标本,应用免疫组织化学法检测EOC和卵巢良性上皮性肿瘤组织中ALDH1、ABCG2及CD105蛋白(微血管标志物)的表达情况。结果:在EOC和卵巢良性上皮性肿瘤组织中,ALDH1和ABCG2的阳性表达率分别为64.1%、61.6%和8.3%、6.7%;MVD分别为22.6±9.7和5.03±3.35,差异均有统计学显著性(P<0.05);ALDH1和ABCG2的表达与EOC的组织学分化、FIGO分期、腹腔器官及淋巴结转移有关(P<0.05),MVD与EOC的组织学分化、FIGO分期、腹腔器官及淋巴结转移和腹水形成有关(P<0.05);MVD分别与ALDH1和ABCG2的表达呈正相关(P<0.01),同时,ALDH1和ABCG2的表达亦呈正相关(P<0.01)。Kaplan-Meier生存分析表明,ALDH1和ABCG2的过表达以及MVD的增加均与患者的生存率有关,ALDH1和ABCG2表达阳性及MVD≥23的患者生存率明显低于ALDH1和ABCG2表达阴性及MVD<23的患者(P<0.05)。多因素分析显示FIGO分期、ALDH1表达、ABCG2表达和MVD是影响EOC根治术后患者预后的独立因素(P<0.05)。结论:EOC组织中ALDH1和ABCG2过表达以及MVD与肿瘤的分化程度、转移和预后等因素相关,这些指标的联合检测可能作为对EOC的进展及患者预后判断的重要指标。

关键词：上皮性卵巢癌乙醛脱氢酶1 腺苷三磷酸结合盒转运体G2 微血管密度预后

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金丝桃素体外抗刚地弓形虫速殖子效果的观察

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2016年第3期34卷 203-207页

作者：杨小迪孙希萌王旗崔洁计永胜薛洪宝胡守锋苏胖胖李江艳孟令文乔继琛丁忆晗宋迪吴琦方强陈兴智蚌埠医学院病原生物学教研室、安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 首都医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室北京100069 安徽医科大学病原生物学教研室、安徽省人兽共患病重点实验室合肥230032 蚌埠医学院化学教研室蚌埠233030

目的观察金丝桃素对体外培养的刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)RH株速殖子的杀伤作用,探讨金丝桃素抗弓形虫的效果。方法将生理盐水(A组)和终浓度为5μg/ml(B组)、50μg/ml(C组)、500μg/ml(D组)的金丝桃素分别加入含弓形虫速殖子1×... 详细信息

目的观察金丝桃素对体外培养的刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)RH株速殖子的杀伤作用,探讨金丝桃素抗弓形虫的效果。方法将生理盐水(A组)和终浓度为5μg/ml(B组)、50μg/ml(C组)、500μg/ml(D组)的金丝桃素分别加入含弓形虫速殖子1×106个/孔的24孔培养板中,于2、4、6 h后收集虫体,台盼蓝染色检测速殖子着色率,吉氏染色观察速殖子形态和结构变化,透射电镜观察速殖子超微结构的变化,流式细胞仪检测相同处理的携带黄色荧光蛋白的弓形虫的存活情况。结果弓形虫速殖子经不同浓度金丝桃素作用2 h后,B组、C组和D组虫体的台盼蓝着色率分别为(11.0±3.6)%、(25.0±6.3)%和(40.0±2.7)%,D组着色率高于C组和B组(P<0.01),3组均高于A组(6.0±3.0)%,但B组和A组间差异无统计学意义(P>0.05)。作用4 h后,D组着色率为(97.0±2.0)%,高于C组(30.0±7.2)%、B组(20.0±3.0)%和A组(10.0±1.0)%(P<0.01);作用6 h后,D组着色率为(98.0±1.7)%,亦高于C组(42.7±5.5)%、B组(34.0±6.6)%和A组(19.3±4.9)%,两两比较,各组间差异均有统计学意义(P<0.01)。吉氏染色观察发现,随时间的延长和剂量的增高,虫体两端逐渐变圆、肿胀、坏死。透射电镜观察结果显示,随金丝桃素作用时间延长,虫体逐渐肿胀,胞膜与基质间出现明显空隙,虫体内空泡增多、变大,胞膜破裂,内部结构溶解。流式细胞仪检测结果表明,弓形虫速殖子存活率在金丝桃素作用后的各时间段内与对照组间差异有统计学意义(P<0.01);金丝桃素作用2 h后,D组无弓形虫存活,C组弓形虫存活率为(7.9±1.9)%,低于B组(38.1±5.5)%和A组(81.8±6.0)%(P<0.01);作用4 h后,C组无弓形虫存活;B组在作用4 h和6 h后,弓形虫存活率分别为(14.3±7.9)%和(1.4±1.8)%,均低于A组的(73.8±11.3)%和(64.1±14.4)%(P<0.01)。结论金丝桃素具有较强的体外抗弓形虫速殖子效果,且随剂量增高和作用时间延长抗虫效果更明显。

关键词：金丝桃素刚地弓形虫速殖子体外效果

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利用CRISPR/Cas9技术构建stk基因融合HA、TY1标签序列的恶性疟原虫虫株

利用CRISPR/Cas9技术构建stk基因融合HA、TY1标签序列的恶性疟原...

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第九届北京热带医学与寄生虫学论坛

作者：乔继琛李舟王伟伟夏惠戴雪喻方强蚌埠医学院病原生物学教研室感染与免疫安徽省重点实验室安徽省蚌埠市东海大道2600号蚌埠医学院中国科学院上海巴斯德研究所上海市徐汇区岳阳路320号

目的利用CRISPR/Cas9方法构建stk基因融合HA和TY1标签序列的恶性疟原虫虫株.方法针对stk基因设计sgRNA序列和左、右同源臂.通过搭桥PCR法将HA及TY1标签的编码序列插入左、右同源臂的中间作为供体DNA.将供体DNA 和sgRNA 序列连接到pL6c... 详细信息

目的利用CRISPR/Cas9方法构建stk基因融合HA和TY1标签序列的恶性疟原虫虫株.方法针对stk基因设计sgRNA序列和左、右同源臂.通过搭桥PCR法将HA及TY1标签的编码序列插入左、右同源臂的中间作为供体DNA.将供体DNA 和sgRNA 序列连接到pL6cs-hDHFR 载体,构建pL6cs-hDHFR-stk-HA-TY1-sgRNA质粒并酶切、测序鉴定.以pUF1-BSD-Cas9 质粒与pL6cs-hDHFR-stk-HA-TY1-sgRNA质粒同时电转恶性疟原虫3D7 虫株,加杀稻瘟菌素和WR99210 筛选.药物筛选成功的疟原虫以PCR测序、Western blotting鉴定,并以ant-TY1 为一抗免疫荧光法分析STK蛋白的亚细胞定位.结果经测序比对,成功构建了pL6cs-hDHFR-stk-HA-TY1-sgRNA质粒;PCR测序显示HA 和TY1 成功融合于stk基因,Western b1otting在预期位置显示特异性条带,免疫荧光显示STK蛋白在恶性疟原虫环状体、大滋养体、裂殖体位置相似,定位于细胞核内及环绕核膜的细胞质.结论成功利用CRISPR/Cas9 方法构建了stk基因融合HA 和TY1 标签序列的恶性疟原虫虫株,发现STK蛋白定位于细胞核内及环绕核膜的细胞质.

关键词：恶性疟原虫 CRISPR/Cas9 stk基因 HA标签 TY1标签

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不同刺激剂对健康人和结核患者外周血T细胞产生γ干扰素和肿瘤坏死因子-α的影响

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蚌埠医学院学报 2016年第3期41卷 288-291页

作者：徐志庆夏惠李柏青蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

目的：检测健康人和结核患者外周血经不同刺激剂刺激后T细胞亚群产生γ干扰素（IFN-γ）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的变化。方法：12名健康人和12例结核患者的外周血单个核细胞用佛波醇脂（PMA）＋钙离子霉素（IM）、结核杆菌耐热抗原... 详细信息

目的：检测健康人和结核患者外周血经不同刺激剂刺激后T细胞亚群产生γ干扰素（IFN-γ）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的变化。方法：12名健康人和12例结核患者的外周血单个核细胞用佛波醇脂（PMA）＋钙离子霉素（IM）、结核杆菌耐热抗原（Mtb-HAg）、植物血凝素（PHA）刺激,莫能霉素阻断,流式细胞仪检测产生IFN-γ和TNF-α的T细胞亚群比例。结果：PMA＋IM刺激健康人外周血αβT细胞产生IFN-γ的比例明显高于结核患者（P〈0.01）;PMA＋IM、Mtb-HAg和PHA刺激健康人外周血γδT细胞产生IFN-γ的比例高于结核患者（P〈0.05～P〈0.01）。PMA＋IM和PHA刺激健康人外周血αβT细胞产生TNF-α的比例均高于结核患者（P〈0.05）;PMA＋IM和PHA刺激健康人外周血γδT细胞产生TNF-α的比例均高于结核患者（P〈0.05）。结论：经不同刺激剂刺激后,健康人γδT细胞产生IFN-γ的比例高于结核患者γδT细胞产生IFN-γ的比例。经PMA和PHA刺激后,健康人αβT和γδT细胞产生TNF-α的比例高于结核患者。

关键词：结核分枝杆菌 T细胞亚群 γ-干扰素肿瘤坏死因子-α 流式细胞仪

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微小RNA表达调控机制的概述

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牡丹江医学院学报 2016年第6期37卷 109-111页

作者：王贺龙郭术俊宋传旺蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

微小RNAs（microRNAs/miRNAs）是广泛存在于真核生物中的一类非编码的单链RNA小分子（~22nt）,可在转录后水平调控基因的表达。miRNAs的表达受到前体miRNAs上游启动子的表达调控,启动子是RNA聚合酶特异性识别的基因序列,并和转录因子和... 详细信息

微小RNAs（microRNAs/miRNAs）是广泛存在于真核生物中的一类非编码的单链RNA小分子（~22nt）,可在转录后水平调控基因的表达。miRNAs的表达受到前体miRNAs上游启动子的表达调控,启动子是RNA聚合酶特异性识别的基因序列,并和转录因子和增强子共同控制基因表达的时间和程度。

关键词：微小RNA 启动子转录

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