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蠕虫或蠕虫衍生物诱导的免疫细胞过继转移调控过敏性和自身免疫性疾病的研究进展

中国动物学会寄生虫学专业委员会第十五次全国学术会议暨第六次国际寄生虫学学术研讨会

作者：丁忆晗张莉莉慈叶芳陈海龙宋迪汪倩刘维鑫吴琦杨小迪蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省省级感染与免疫重点实验室

研究显示:寄生蠕虫或虫源性分子可通过诱导免疫细胞的活化,释放调节性细胞因子,缓解病理性的损伤,从而抑制过敏性及自身免疫性疾病的发生及发展。目前大量的动物实验表明过继回输由蠕虫或其衍生物活化的淋巴细胞如巨噬细胞(Mφ)、调节性... 详细信息

研究显示:寄生蠕虫或虫源性分子可通过诱导免疫细胞的活化,释放调节性细胞因子,缓解病理性的损伤,从而抑制过敏性及自身免疫性疾病的发生及发展。目前大量的动物实验表明过继回输由蠕虫或其衍生物活化的淋巴细胞如巨噬细胞(Mφ)、调节性T细胞(Treg)、B细胞(Breg)及树突状细胞(DC)等,可介导免疫调节反应,对免疫失调性疾病具有预防或治疗作用,体现出潜在的临床应用价值。本文对过继转移在蠕虫调控过敏性及自身免疫性疾病方面的进展作一综述。

关键词：蠕虫过继转移过敏性和自身免疫性疾病

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空腹血糖和糖化血红蛋白联合检测在健康体检中的应用研究

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蚌埠医学院学报 2015年第6期40卷 792-794页

作者：金齐力李曦光韩玮玮韦莉蚌埠医学院第二附属医院检验科安徽蚌埠233040 蚌埠医学院感染与免疫安徽省重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233030

目的：探讨空腹血糖（FPG）和糖化血红蛋白（HbAlc）水平联合检测在健康体检中的应用价值。方法：选择263名健康体检者作为研究对象，分别检测其FPG和HbAlc水平，对两者进行相关性分析。结果：263例中HbAlc〈5．5％者139例，5．5％-6．... 详细信息

目的：探讨空腹血糖（FPG）和糖化血红蛋白（HbAlc）水平联合检测在健康体检中的应用价值。方法：选择263名健康体检者作为研究对象，分别检测其FPG和HbAlc水平，对两者进行相关性分析。结果：263例中HbAlc〈5．5％者139例，5．5％-6．5％者88例，〉6．5％者36例。HbAlc〉6．5％体检者FPG均明显高于HbAlc〈5．5％和5．5％～6．5者（P〈0．01）。相关分析显示，263名研究对象的HbAlc水平与FPG之间呈正相关关系（P〈0．01）。结论：FPG和HbAlc联合检测在健康体检中对糖尿病的筛查有重要价值，适宜在实际工作中推广应用。

关键词：血糖糖化血红蛋白糖尿病健康体检

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结核分枝杆菌感染对小鼠树突状细胞功能的影响

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蚌埠医学院学报 2015年第9期40卷 1145-1147,1151页

作者：金齐力孙悝吕小艳韦莉蚌埠医学院第二附属医院检验科安徽蚌埠233040 蚌埠医学院感染与免疫安徽省重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233030

目的：探讨结核分枝杆菌（ Mycobacterium tuberculosis,Mtb）感染对小鼠骨髓来源的树突状细胞（ DC）功能的影响。方法：将DC分为4组,即脂多糖（ LPS）感染组、Mtb感染组、灭活Mtb感染组和正常细胞对照组。以LPS、Mtb及灭活的Mtb与小... 详细信息

目的：探讨结核分枝杆菌（ Mycobacterium tuberculosis,Mtb）感染对小鼠骨髓来源的树突状细胞（ DC）功能的影响。方法：将DC分为4组,即脂多糖（ LPS）感染组、Mtb感染组、灭活Mtb感染组和正常细胞对照组。以LPS、Mtb及灭活的Mtb与小鼠骨髓来源的DC建立小鼠体外感染模型,用酶联免疫吸附法测定白细胞介素（ IL）-6、IL-12及肿瘤坏死因子-α的表达；流式细胞术检测DC表面主要组织相容性复合体Ⅱ类分子、CD40、CD80和CD86的表达。结果：每只小鼠的股骨骨髓可扩增获得5×10^6~1×10^7个具有典型细胞形态的DC,纯度达85%以上；与对照组比较,流式细胞术结果显示LPS、Mtb和灭活Mtb感染组均能促进DC表面分子的表达（P〈0.01）。 Mtb感染组DC表面分子上调显著低于LPS感染组与灭活Mtb感染组（P〈0.01）；LPS、Mtb或灭活Mtb作用后,DC的IL-6、IL-12和肿瘤坏死因子-α分泌量显著增加（P〈0.01）,Mtb感染组DC的细胞因子分泌量显著低于LPS感染组与灭活Mtb感染组（P〈0.01）。结论：Mtb活菌可干扰DC的细胞因子分泌,抑制DC成熟,从而削弱其抗原递呈的功能,影响抗原特异性细胞的免疫活化。

关键词：结核分枝杆菌树突状细胞免疫应答小鼠

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SCF/c-Kit信号促进膀胱癌T24细胞侵袭作用

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南方医科大学学报 2014年第4期34卷 507-510页

作者：郭术俊陶象男汪忆梦唐洁申林宋传旺蚌埠医学院免疫学教研室//安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院科研中心安徽蚌埠233030

目的探讨SCF/c-Kit信号对膀胱癌T24细胞侵袭性的影响。方法采用Western blot检测T24细胞c-Kit表达及经SCF刺激后PI3K途径激活情况;Transwell侵袭实验(直接与间接计数法)观察T24细胞经过SCF(1 ng/ml)刺激前后及使用Wortmannin(特异性PI3... 详细信息

目的探讨SCF/c-Kit信号对膀胱癌T24细胞侵袭性的影响。方法采用Western blot检测T24细胞c-Kit表达及经SCF刺激后PI3K途径激活情况;Transwell侵袭实验(直接与间接计数法)观察T24细胞经过SCF(1 ng/ml)刺激前后及使用Wortmannin(特异性PI3K阻断剂)预处理后侵袭性的变化。结果 T24细胞存在c-Kit蛋白的表达并且经SCF(1 ng/ml)作用24 h后,出现明显的磷酸化Akt;与对照组相比,SCF(1 ng/ml)刺激组穿过聚碳酸酯膜的T24细胞数明显增多(P<0.01),而Wortmannin预刺激阻断了SCF的这种效应。结论 SCF/c-Kit信号促进了T24细胞的侵袭性,这一效应是由PI3K途径介导的。

关键词： SCF c-Kit信号 T24细胞侵袭性膀胱癌

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白细胞介素17对结核病患者中性粒细胞凋亡的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2014年第8期30卷 833-836页

作者：姜丽娜姚春艳金齐力李柏青蚌埠医学院病理生理学教研室感染与免疫安徽省重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院免疫学教研室

目的探讨白细胞介素-17（IL-17）对结核病患者外周血中性粒细胞（PMN）凋亡的影响以及可能涉及的信号通路。方法取结核病患者和健康人外周血PMN培养0-24 h, annexinⅤ染色后流式细胞术检测PMN凋亡率; 或加不同浓度IL-17刺激培养24 h... 详细信息

目的探讨白细胞介素-17（IL-17）对结核病患者外周血中性粒细胞（PMN）凋亡的影响以及可能涉及的信号通路。方法取结核病患者和健康人外周血PMN培养0-24 h, annexinⅤ染色后流式细胞术检测PMN凋亡率; 或加不同浓度IL-17刺激培养24 h再检测PMN凋亡率; 或用MAPK特异性抑制剂U0126预处理30 min 后, 再加IL-17培养24 h后检测PMN的凋亡。结果结核病患者和正常人PMN凋亡率均随培养时间延长而增加（P〈0.05）, 结核病患者PMN在0、6、12、24 h 时的annexin Ⅴ＋细胞分别为（4.49±1.39）%、（21.89±2.90）%、39.96±4.15）%、（68.35±7.01）%, 均分别高于正常人组的（2.65±0.75）%、（11.00 ±1.72）%、（25.84±3.90）%, （45.59±4.10）%（P〈0.05）。而经IL-17刺激后, 结核病患者与正常人PMN的凋亡率, 在IL-17 0.5 μg/L组, 分别为（59.81±7.19）%和（34.65 ±4.79）%; 在IL-17 5 μg/L组, 分别为（51.62±6.91）%和（29.04±3.62）%; 均低于未加IL-17对照组（68.35±7.01）%和（45.59±4.10）%（P〈0.05）; 而在IL-17 50 μg/L组, 凋亡率则分别达到（76.04±5.59）%和（53.24±4.62）%, 明显高于对照组（P〈0.05）。预先用U0126处理, 可大部分阻断IL-17对结核病患者和正常人PMN凋亡的抑制作用。结论结核病患者和正常人PMN凋亡率均随培养时间延长而增加, 且结核病患者PMN凋亡率高于正常人。IL-17较低浓度延迟凋亡, 较高浓度促进凋亡。IL-17抑制PMN凋亡的作用和ERK途径有关。

关键词：结核中性粒细胞白细胞介素-17 凋亡

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HIF-1a、VEGF和CXCR4在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

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中国组织化学与细胞化学杂志 2015年第1期23卷 50-55页

作者：蔡兆根陆国玉承泽农徐浣白蚌埠医学院第一附属医院临床病理科蚌埠医学院病理学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠医学院第一附属医院急诊内科蚌埠医学院第一附属医院内分泌科上海交通大学附属第一人民医院内分泌科安徽233003

目的研究乏氧诱导因子1a(HIF-1a)、血管内皮生长因子(VEGF)和趋化因子受体4(CXCR4)在甲状腺乳头状癌组织中的表达及与临床病理因素的关系。方法应用免疫组化SP法检测120例甲状腺乳头状癌组织和60例正常对照组织中的HIF-1a、VEGF及CXCR4... 详细信息

目的研究乏氧诱导因子1a(HIF-1a)、血管内皮生长因子(VEGF)和趋化因子受体4(CXCR4)在甲状腺乳头状癌组织中的表达及与临床病理因素的关系。方法应用免疫组化SP法检测120例甲状腺乳头状癌组织和60例正常对照组织中的HIF-1a、VEGF及CXCR4的表达情况,统计分析相关临床病理因素。结果 HIF-1a、VEGF及CXCR4在甲状腺乳头状癌中的阳性表达率分别为65.0%(78/120)、56.8%(68/120)、60.0%(72/120);三者的阳性表达与甲状腺乳头状癌的淋巴结转移及临床病理分期密切相关(P<0.01);三者的表达之间存在一定的相关性(P<0.05)。多因素分析发现,TNM分期,HIF-1a和CXCR4与甲状腺乳头状癌淋巴结转移密切相关(均P<0.05)。结论 HIF-1a、VEGF及CXCR4与甲状腺乳头状癌的发生、发展相关,特别在甲状腺乳头状癌淋巴结转移中发挥重要作用,三者的检测在甲状腺乳头状癌的临床诊断及治疗中具有重要的指导意义。

关键词：甲状腺乳头状癌 HIF-1a VEGF CXCR4 免疫组织化学

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猪囊尾蚴特异性抗原cC1重组耻垢分枝杆菌疫苗的构建与鉴定

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中国血吸虫病防治杂志 2014年第3期26卷 287-291页

作者：王雪梅骆江坤李倩李江艳陈勇陶志勇夏惠方强蚌埠医学院病原生物学教研室蚌埠233030 安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠医学院免疫学教研室

目的构建表达猪囊尾蚴cC1抗原的重组耻垢分枝杆菌疫苗。方法提取pET28a-cC1质粒DNA,用xho I和BamH I双酶切,用Klenow酶补平xho I酶切末端,同时提取pMV261穿梭质粒载体,用Hind III和BamH I双酶切,用Klenow酶补平Hind III酶切末端,纯化后... 详细信息

目的构建表达猪囊尾蚴cC1抗原的重组耻垢分枝杆菌疫苗。方法提取pET28a-cC1质粒DNA,用xho I和BamH I双酶切,用Klenow酶补平xho I酶切末端,同时提取pMV261穿梭质粒载体,用Hind III和BamH I双酶切,用Klenow酶补平Hind III酶切末端,纯化后的酶切产物通过T4连接酶连接,构建pMV261-cC1穿梭质粒,测序验证正确后,将pMV261cC1穿梭质粒经电穿孔法转化耻垢分枝杆菌,构建重组耻垢分枝杆菌,经热诱导后,以猪囊尾蚴病患者血清为一抗进行Western-blotting鉴定。此外,比较正常耻垢分枝杆菌和重组cC1耻垢分枝杆菌生长状态并绘制生长曲线。结果构建的重组穿梭载体经酶切、测序验证正确。构建的重组耻垢分枝杆菌经热诱导后,SDS-PAGE电泳分析显示,在40 kDa处有外源性蛋白表达,与预期值相符。Western-blotting显示其可被猪囊尾蚴病患者血清识别,表明cC1抗原基因在耻垢分枝杆菌中表达成功。重组耻垢分枝杆菌与正常耻垢分枝杆菌的增殖特性无明显差异。结论成功构建了表达猪囊尾蚴特异性抗原cC1的重组耻垢分枝杆菌疫苗。

关键词：猪囊尾蚴 cC1 耻垢分枝杆菌疫苗

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中缅边境间日疟原虫氯喹敏感性研究

中缅边境间日疟原虫氯喹敏感性研究

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中国动物学会寄生虫学专业委员会第十五次全国学术会议暨第六次国际寄生虫学学术研讨会

作者：李江艳李倩陶志勇王英夏惠 Liwang Cui 方强蚌埠医学院病原生物学教研室感染与免疫安徽省重点实验室第三军医大学热带医学教研室美国宾州大学

目的:调查中缅边境间日疟原虫氯喹敏感性及其可能分子标志物Pvmdr1的基因多态性。方法:(1)将分离自中缅边境经镜检与PCR确认的间日疟患者的血样进行短期体外培养,采用微量法检测间日疟原虫对氯喹的药物敏感性。(2)应用PCR扩增间日疟原... 详细信息

目的:调查中缅边境间日疟原虫氯喹敏感性及其可能分子标志物Pvmdr1的基因多态性。方法:(1)将分离自中缅边境经镜检与PCR确认的间日疟患者的血样进行短期体外培养,采用微量法检测间日疟原虫对氯喹的药物敏感性。(2)应用PCR扩增间日疟原虫多重耐药蛋白1(Pvmdr1)基因片段、产物测序,进行多态性分析。结果:(1)40例中缅边境间日疟原虫氯喹IC50值2.11613.2n M,几何均数(Geometric mean)、95%CI(95%CI of ***)及中位数(Median)分别为88.82n M、59.333n M和86.82n M。其中8例间日疟原虫样本氯喹IC50大于220n M。(2)成功扩增并测序上述进行氯喹敏感性测定样本中25例样本的Pvmdr1基因,经过序列比对分析,发现3例存在Y976F突变(突变率为12.00%),16例存在F1076L突变(突变率为64.00%),3例Y976F、F1076L双突变(突变率为12.00%)。(3)氯喹IC50大于220n M的8例样本中6例测序成功,其中1例存在Y976F突变、4例存在F1076L突变,1例Y976F、F1076L双突变;而氯喹IC50小于220n M的32例样本中19例扩增并测序成功,其中2例存在Y976F突变,12例存在F1076L突变,2例Y976F、F1076L双突变;在氯喹IC50大于220n M的样本中与氯喹IC50小于220n M的样本之间Pvmdr1基因Y976F突变率、F1076L突变率及Y976F、F1076L双突变率均无显著差异(P>0.05)。结论:(1)中缅边境地区存在氯喹敏感性降低的间日疟原虫虫株。(2)中缅边境间日疟原虫Pvmdr1基因存在Y976F突变、F1076L突变以及Y976F、F1076L双突变现象。(3)未发现Pvmdr1基因Y976F突变、F1076L突变及Y976F、F1076L双突变与中缅边境地区间日疟原虫氯喹敏感性降低存在关联。

关键词：间日疟原虫氯喹药物敏感性间日疟原虫多重耐药蛋白1

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毛细管电泳法检测结核杆菌蛋白多肽类抗原活性成分研究

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化学研究与应用 2014年第10期26卷 1545-1550页

作者：张晖薛洪宝陈勇李柏青梁丽丽陶兆林蚌埠医学院化学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院感染与免疫安徽省重点实验室安徽蚌埠233030

采用毛细管电泳法分离检测结核杆菌耐热抗原样品中的活性成分。熔融石英毛细管55cm(40cm处检测窗口)×50μm i.d.;缓冲液:0.15mol·L-1硼酸盐(含5g·L-1PEG-4000,pH=10.92);分离电压:+12 kV;进样压力:0.5 psi(3.45 kPa),进... 详细信息

采用毛细管电泳法分离检测结核杆菌耐热抗原样品中的活性成分。熔融石英毛细管55cm(40cm处检测窗口)×50μm i.d.;缓冲液:0.15mol·L-1硼酸盐(含5g·L-1PEG-4000,pH=10.92);分离电压:+12 kV;进样压力:0.5 psi(3.45 kPa),进样时间3.0s;分离温度:25℃;UV-Vis检测器检测波长:200nm。本方法能分离溶菌酶标准蛋白和牛血清白蛋白标准品,根据分子量大小能有效分离结核杆菌耐热抗原样品活性成分,线性回归方程相关系数r2在0.99673以上,定量限在19.47μg·mL-1左右。样品加标回收率在96.09%左右,相对标准偏差小于8.13%,本方法与快速蛋白液相色谱法结果一致。该方法简便、灵敏、快速、可靠、重现性好,能用于结核杆菌耐热抗原样品中活性成分测定。

关键词：毛细管电泳法( CE) 结核杆菌耐热抗原( Mtb-Ag) 活性成分快速蛋白液相色谱法( FPLC)

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间日疟原虫氯喹抗性研究进展

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中国血吸虫病防治杂志 2014年第3期26卷 326-331,344页

作者：李江艳李倩方强蚌埠医学院病原生物学教研室、安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030

疟疾仍然是一个严重危害人类健康的公共卫生问题,尤其多见于发展中国家。随着认识的深入,间日疟也获得越来越多的重视。有效的药物治疗是控制疟疾甚至消除疟疾的基石,近年来已有越来越多的间日疟原虫氯喹抗性报道,间日疟原虫氯喹抗性已... 详细信息

疟疾仍然是一个严重危害人类健康的公共卫生问题,尤其多见于发展中国家。随着认识的深入,间日疟也获得越来越多的重视。有效的药物治疗是控制疟疾甚至消除疟疾的基石,近年来已有越来越多的间日疟原虫氯喹抗性报道,间日疟原虫氯喹抗性已成为间日疟防治中一个备受关注的问题。本文就间日疟原虫氯喹抗性的分布现状、体内外检测方法和分子检测标志物研究进展进行初步总结。

关键词：间日疟原虫氯喹抗性分子标记物

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