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猪带绦虫六钩蚴期特异性抗原基因真核表达质粒pcDNA3.1/TSO45-4B的构建

蚌埠医学院学报 2006年第4期31卷 334-335页

作者：方强孙新夏惠徐胜贵胡守锋杨小迪陈兴智王雪梅蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室(蚌埠医学院)安徽蚌埠233030

目的构建表达猪带绦虫六钩蚴期特异性抗原基因TSO45-4B的真核表达质粒pcDNA3.1/TSO45-4B。方法全基因合成TSO45-4B的基因序列,并利用PCR扩增该基因序列,将其插入真核表达载体pcDNA3.1,经酶切、测序鉴定。结果经酶切和测序鉴定表明所构... 详细信息

目的构建表达猪带绦虫六钩蚴期特异性抗原基因TSO45-4B的真核表达质粒pcDNA3.1/TSO45-4B。方法全基因合成TSO45-4B的基因序列,并利用PCR扩增该基因序列,将其插入真核表达载体pcDNA3.1,经酶切、测序鉴定。结果经酶切和测序鉴定表明所构建的重组表达质粒中含有TSO45-4B基因。结论成功构建pcDNA3.1/TSO45-4B重组质粒。

关键词：带绦虫六钩蚴 TSO45-4B 重组质粒

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抗猪带绦虫六钩蚴兔血清的制备及重组质粒pcDNA3.1/TSO45-4B在小鼠骨骼肌的表达

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蚌埠医学院学报 2006年第5期31卷 441-444,F0004页

作者：徐胜贵方强孙新夏惠杨小迪胡守锋陈兴智王雪梅蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室(蚌埠医学院) 安徽蚌埠233030

目的:制备抗六钩蚴全虫可溶性抗原的兔血清,观察本室制备的猪带绦虫六钩蚴期特异性抗原基因TSO45-4B的重组核酸疫苗pcDNA3.1/TSO45-4B经肌肉接种后在宿主体内的表达。方法:用次氯酸钠法孵化六钩蚴,Dot-Blo、tELISA检测兔血清中特异性抗... 详细信息

目的:制备抗六钩蚴全虫可溶性抗原的兔血清,观察本室制备的猪带绦虫六钩蚴期特异性抗原基因TSO45-4B的重组核酸疫苗pcDNA3.1/TSO45-4B经肌肉接种后在宿主体内的表达。方法:用次氯酸钠法孵化六钩蚴,Dot-Blo、tELISA检测兔血清中特异性抗体及滴度;以pcDNA3.1/TSO45-4B进行体内转染,继之免疫组化法观察其在鼠体骨骼肌的表达。结果:抗六钩蚴兔血清多克隆抗体制备成功,抗体效价为1∶20 100;免疫组化染色后在重组质粒注射部位肌肉组织的肌纤维内显示阳性的棕黄色分泌颗粒。结论:重组质粒在小鼠骨骼肌内成功地表达为猪囊尾蚴病多基因DNA疫苗的研制提供了体内表达的依据之一。

关键词：带绦虫六钩蚴抗血清质粒骨骼肌表达

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金葡菌及其L型对小鼠胸腺细胞凋亡的影响

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蚌埠医学院学报 2006年第2期31卷 116-118页

作者：徐飞夏佩莹管俊昌蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

目的:研究金黄色葡萄球菌(金葡菌)及其L型(金葡菌L型)对小鼠胸腺细胞凋亡的影响。方法:用金葡菌、金葡菌L型、肠毒素B(staphylococcal enterotoxin B,SEB)分别作用于小鼠胸腺细胞,同时设立正常对照,于作用后2 h、4 h、6 h、8 h、10 h终... 详细信息

目的:研究金黄色葡萄球菌(金葡菌)及其L型(金葡菌L型)对小鼠胸腺细胞凋亡的影响。方法:用金葡菌、金葡菌L型、肠毒素B(staphylococcal enterotoxin B,SEB)分别作用于小鼠胸腺细胞,同时设立正常对照,于作用后2 h、4 h、6 h、8 h、10 h终止培养。Ann in ix V和PI双染法流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:SEB作用2 h、金葡菌作用4 h、金葡菌L型作用6 h后各时间段小鼠胸腺细胞的凋亡率与对照组比较均明显增高(P<0.01),随着诱导时间的延长,胸腺细胞的凋亡率逐渐增加(P<0.01);SEB诱导胸腺细胞凋亡率在6 h、8 h和10 h时均明显弱于原菌(P<0.01)。结论:金葡菌L型和原菌以及SEB均能促进胸腺细胞凋亡,除SEB外,产SEB金葡菌株及其L型诱导胸腺细胞凋亡还可能有其他因素参与。

关键词：金黄色葡萄球菌细菌L型细胞凋亡胸腺小鼠

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猪囊尾蚴病疫苗研究进展

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蚌埠医学院学报 2006年第2期31卷 209-211页

作者：方强孙新蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

猪带绦虫的幼虫囊尾蚴又称囊虫,可寄生人体脑、眼和皮下肌肉等组织,导致不同部位的囊尾蚴病(囊虫病),其中脑囊尾蚴病是寄生于人体脑部最严重的寄生虫病之一,常导致患者中枢神经系统症状甚至死亡。我国人体囊尾蚴病分布广泛,据新近统计... 详细信息

猪带绦虫的幼虫囊尾蚴又称囊虫,可寄生人体脑、眼和皮下肌肉等组织,导致不同部位的囊尾蚴病(囊虫病),其中脑囊尾蚴病是寄生于人体脑部最严重的寄生虫病之一,常导致患者中枢神经系统症状甚至死亡。我国人体囊尾蚴病分布广泛,据新近统计在29个省(区、市)的675个县市有流行,严重威胁着广大人民健康。同时,囊尾蚴亦可寄生于猪体,造成猪的囊尾蚴病,给畜牧业生产造成极大的损失。为了有效的控制和预防囊尾蚴病,目前国内外很多研究者正致力于猪囊尾蚴病疫苗的研究,并取得了一定的进展。[第一段]

关键词：囊尾蚴病猪疫苗综述

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邻苯二甲酸二丁酯-OP乳化剂溶液治疗疥疮的疗效观察

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中国病原生物学杂志 2006年第5期1卷 400-400,I0003页

作者：胡守锋夏惠马维聚葛继华陈兴保蚌埠医学院病原生物学教研室-安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233003 安徽省寄生虫病防治研究所

邻苯二甲酸二丁酯-OP乳化剂溶液治疗门诊疥疮患者75例,1个疗程治愈率为90.67%,分别使用二丁酯-OP乳化剂溶液和疥宁霜治疗体检疥疮患者各80例,1个疗程治愈率分别为92.5%和82.50%,差异有显著性(χ2=9.00,P<0.005)。二丁酯-OP乳化剂是... 详细信息

邻苯二甲酸二丁酯-OP乳化剂溶液治疗门诊疥疮患者75例,1个疗程治愈率为90.67%,分别使用二丁酯-OP乳化剂溶液和疥宁霜治疗体检疥疮患者各80例,1个疗程治愈率分别为92.5%和82.50%,差异有显著性(χ2=9.00,P<0.005)。二丁酯-OP乳化剂是一种安全可靠、高效的疥疮治疗药物。

关键词：邻苯二甲酸二丁酯-OP乳化剂疥疮疗效

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PcDNA3.1/TSO45-4B的构建和在骨骼肌中的表达

PcDNA3.1/TSO45-4B的构建和在骨骼肌中的表达

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2005年寄生虫学国际学术研讨会暨中国动物学会寄生虫专业委员会第十次学术研讨会

作者：方强徐胜贵孙新夏惠杨杨小迪胡守锋陈兴智蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室

猪带绦虫的中绦期幼虫囊尾蚴可以寄生于人或猪的体内,引起囊尾蚴病,严重影响人民健康和畜牧业生产。作者试图根据囊尾蚴病的有效候选分子设计核酸疫苗有效的控制和预防囊尾蚴病。为此,我们计划构建表达猪带绦虫六钩蚴期特异性抗原TSO45... 详细信息

猪带绦虫的中绦期幼虫囊尾蚴可以寄生于人或猪的体内,引起囊尾蚴病,严重影响人民健康和畜牧业生产。作者试图根据囊尾蚴病的有效候选分子设计核酸疫苗有效的控制和预防囊尾蚴病。为此,我们计划构建表达猪带绦虫六钩蚴期特异性抗原TSO45-4B的真核表达质粒pcDNA3.1/TSO45-4B。我们根据GeneBank提供的已知序列,全基因合成TSO45-4B的基因序列,并根据该序列设计合成一对引物, 利用PCR扩增该基因序列。回收纯化PCR产物后,以HindⅢ和BamHⅠ进行双酶切,并同时以Hind Ⅲ和BamHⅠ双酶切pcDNA3.1,然后以T4连接酶连接,构建pcDNA3.1/TSO45-4B。转化DH5a大肠杆菌,筛选阳性克隆,扩增。抽提阳性克隆的重组质粒,进行HindⅢ和BamHⅠ双酶切,以琼脂糖电泳鉴

关键词：猪带绦虫六钩蚴 TS045-4B 重组质粒表达

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