检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2022年第1期38卷 78-83页

作者：许涛李敏英王楚彤常先友钱中清李柏青汪洪涛蚌埠医学院检验医学院临床检验诊断学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院免疫学教研室慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院检验医学实验中心安徽蚌埠233030 蚌埠市第五人民医院感染科安徽蚌埠233030

目的克隆、表达和纯化结核分枝杆菌脯氨酸-脯氨酸-谷氨酸15(PPE15)蛋白,制备并鉴定PPE15蛋白兔多克隆抗体。方法通过PCR从结核分枝杆菌H37Rv株基因组扩增PPE15基因,利用同源重组克隆技术构建原核表达组氨酸标签PPE15蛋白的pET28a-PPE1... 详细信息

目的克隆、表达和纯化结核分枝杆菌脯氨酸-脯氨酸-谷氨酸15(PPE15)蛋白,制备并鉴定PPE15蛋白兔多克隆抗体。方法通过PCR从结核分枝杆菌H37Rv株基因组扩增PPE15基因,利用同源重组克隆技术构建原核表达组氨酸标签PPE15蛋白的pET28a-PPE15载体。将pET28a-PPE15转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导PPE15蛋白表达,通过SDS-PAGE鉴定PPE15蛋白表达。用亲和层析法Ni-NTA柱纯化PPE15蛋白,用复性纯化后的PPE15蛋白免疫新西兰大白兔,制备和纯化多克隆抗体。Western blot法鉴定PPE15蛋白与人血清和多克隆抗体结合特异性,间接ELISA检测多克隆抗体效价。结果成功构建pET28a-PPE15重组表达载体,PPE15蛋白主要以包涵体形式存在,纯化后在相对分子质量(M;)38 000位置处有单一条带。纯化后PPE15蛋白与结核病患者和多克隆抗体发生特异性反应,多克隆抗体效价达1∶1 300 480以上。结论成功表达和纯化重组PPE15蛋白,并制备出高效价兔源性多克隆抗体,为进一步研究PPE15蛋白的功能提供了实验基础。

关键词：结核分枝杆菌脯氨酸-脯氨酸-谷氨酸15(PPE15) Rv1040c 多克隆抗体

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黄芪活性成分结合EphA2的分子对接分析

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吉林医药学院学报 2024年第1期45卷 23-28页

作者：韩雪金家莉周蜜儿武体林万子豪李志强卞冰芝蚌埠医学院检验医学院免疫学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院感染与免疫安徽省重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院检验医学院安徽蚌埠233030 蚌埠医学院临床医学院安徽蚌埠233030 安徽医科大学附属六安医院重症医学科安徽六安237005

目的研究黄芪主要活性成分与目标蛋白EphA2的结合模式,并探讨药物分子与目标蛋白之间的相互作用机制。方法本研究使用Autodock4和Autodock vina两种不同的分子对接方法,对黄芪主要活性成分与EphA2蛋白的结合进行了分子对接研究。结果完... 详细信息

目的研究黄芪主要活性成分与目标蛋白EphA2的结合模式,并探讨药物分子与目标蛋白之间的相互作用机制。方法本研究使用Autodock4和Autodock vina两种不同的分子对接方法,对黄芪主要活性成分与EphA2蛋白的结合进行了分子对接研究。结果完成了黄芪主要活性成分阿拉伯糖、黄芪皂苷甲和毛蕊异黄酮苷与EphA2的分子对接,分析对接结果得到主要结合位点及残基。结论本研究为靶向EphA2蛋白的药物设计和进一步优化黄芪主要活性成分的结构提供了重要参考。

关键词：分子对接氢键作用药物设计 EphA2 黄芪 gHgL

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吉兰-巴雷综合征患者调节性B细胞与抑炎性细胞因子的水平分析

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牡丹江医学院学报 2022年第6期43卷 19-22,50页

作者：韩雪江波郭术俊华梦晴尹梅花宋传旺桑道乾蚌埠医学院检验医学院免疫学教研室蚌埠医学院第一附属医院神经内科蚌埠医学院感染与免疫安徽省重点实验室蚌埠医学院慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室蚌埠医学院检验医学院安徽蚌埠233030

目的研究吉兰-巴雷综合征(Guillain Barrésyndrome,GBS)患者外周血调节性B细胞和血清抑炎性细胞因子的变化。方法采用流式细胞术检测40例GBS患者外周血调节性B细胞(Regulatory B cells,Bregs)、记忆性B细胞和浆细胞的水平。采用酶... 详细信息

目的研究吉兰-巴雷综合征(Guillain Barrésyndrome,GBS)患者外周血调节性B细胞和血清抑炎性细胞因子的变化。方法采用流式细胞术检测40例GBS患者外周血调节性B细胞(Regulatory B cells,Bregs)、记忆性B细胞和浆细胞的水平。采用酶联免疫吸附法检测GBS患者和健康对照组血清抑炎性细胞因子白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、白细胞介素-35(interleukin-35,IL-35)和转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)的水平。结果与健康对照组相比,GBS患者CD19+CD24hiCD38hiBregs水平显著降低(P<0.01),而CD19+CD27+CD24hi记忆性B细胞和CD19+CD27hiCD38hi浆细胞的数量与健康对照组相比无显著差异。与健康对照组相比,GBS患者血清IL-10、IL-35和TGF-β1水平均显著上调(P<0.01)。结论外周血调节性B细胞和血清抑炎性细胞因子IL-10、IL-35和TGF-β1水平可作为吉兰-巴雷综合征的生物标志物。

关键词：吉兰-巴雷综合征调节性B细胞白细胞介素-10 白细胞介素-35 转化生长因子β1

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急性肺损伤小鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能降低

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南方医科大学学报 2020年第3期40卷 376-381页

作者：杨倩高培宇母迷迷陶象男何晶吴凤娇郭术俊钱中清宋传旺蚌埠医学院检验医学院免疫学教研室//安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院第二附属医院检验科安徽蚌埠233040

目的探讨急性肺损伤(ALI)小鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的变化及其影响因素。方法昆明种小鼠随机分为正常对照组、ALI模型组,脂多糖经气道滴入激发构建ALI模型小鼠;通过支气管肺泡灌洗获取肺泡巨噬细胞(AM),流式细胞术及荧光显微镜观察ALI小... 详细信息

目的探讨急性肺损伤(ALI)小鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的变化及其影响因素。方法昆明种小鼠随机分为正常对照组、ALI模型组,脂多糖经气道滴入激发构建ALI模型小鼠;通过支气管肺泡灌洗获取肺泡巨噬细胞(AM),流式细胞术及荧光显微镜观察ALI小鼠AM吞噬功能的变化;免疫印迹与ELISA检测ALI小鼠肺组织白介素-33(IL-33)的表达和分泌情况;ELISA检测不同浓度脂多糖刺激肺泡上皮细胞株MLE-12细胞IL-33分泌的情况;采用不同浓度的脂多糖和IL-33作用正常组AM,观察这些刺激因素对AM吞噬荧光微球的影响。结果与正常小鼠AM(75.1%±3.0)%相比,ALI小鼠AM吞噬荧光微球百分率(57.0±4.3)%明显降低,但ALI小鼠肺组织IL-33的表达和支气管肺泡灌洗液中IL-33的分泌均明显升高(P<0.05);脂多糖(100~1000 ng/mL)促进肺泡上皮细胞IL-33分泌增加(P<0.01);脂多糖(10~500 ng/mL)和IL-33(100 ng/mL)均明显抑制了AM的吞噬功能(P<0.05)。结论 ALI小鼠AM吞噬功能降低,这可能是由于脂多糖直接刺激AM引起,或者脂多糖激发肺泡上皮细胞产生的预警素IL-33也可抑制AM吞噬功能。

关键词：肺泡巨噬细胞急性肺损伤吞噬功能脂多糖 IL-33

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H37Rv结核分枝杆菌蛋白脯氨酸-谷氨酸8(PE8)的表达及其兔多克隆抗体制备

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细胞与分子免疫学杂志 2020年第6期36卷 549-554页

作者：许涛张丽钱中清李柏青汪洪涛蚌埠医学院检验医学院临床检验诊断学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院检验医学实验中心安徽蚌埠233030 蚌埠医学院免疫学教研室感染与免疫安徽省重点实验室安徽蚌埠233030

目的克隆Rv1040c结核分枝杆菌脯氨酸-谷氨酸8(PE8)基因、构建pET28a-PE8重组载体和表达纯化PE8蛋白,制备抗PE8多克隆抗体。方法利用重组克隆技术,将PE8基因克隆至原核表达载体pET28a,测序鉴定后,转化至大肠杆菌BL21(DE3),用0.5 mmol/L... 详细信息

目的克隆Rv1040c结核分枝杆菌脯氨酸-谷氨酸8(PE8)基因、构建pET28a-PE8重组载体和表达纯化PE8蛋白,制备抗PE8多克隆抗体。方法利用重组克隆技术,将PE8基因克隆至原核表达载体pET28a,测序鉴定后,转化至大肠杆菌BL21(DE3),用0.5 mmol/L异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达、稀释复性与纯化。用纯化PE8蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,间接ELISA和Western blot法进行效价及特异性鉴定。结果成功构建pET28a-PE8原核表达载体,ITPG诱导后PE8蛋白在大肠杆菌主要以包涵体的形式表达,复性后纯化PE8蛋白纯度达90%,纯化多克隆抗体效价为1∶430080以上,能与PE8蛋白发生特异性反应。结论大肠杆菌表达的PE8重组蛋白免疫新西兰大白兔获得高效价的多克隆抗体。

关键词：结核分枝杆菌(MTB)脯氨酸-谷氨酸8(PE8)蛋白 Rv1040c 多克隆抗体

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nanos1基因在日本血吸虫不同发育时期的定位

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安徽医科大学学报 2020年第2期55卷 215-221页

作者：华梦晴邵延靖刘淼沈际佳蚌埠医学院检验医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 安徽医科大学基础医学院寄生虫学教研室合肥230032

目的探讨nanos1基因在日本血吸虫的定位以及不同发育时期的表达情况。方法在NCBI上搜索日本血吸虫nanos1基因,PCR扩增、测序并将其全长序列经BLAST软件分析,利用DNAMAN6.0和ClustalX2.0.9进行多重序列比对,利用MAGA 5.05构建进化树进行... 详细信息

目的探讨nanos1基因在日本血吸虫的定位以及不同发育时期的表达情况。方法在NCBI上搜索日本血吸虫nanos1基因,PCR扩增、测序并将其全长序列经BLAST软件分析,利用DNAMAN6.0和ClustalX2.0.9进行多重序列比对,利用MAGA 5.05构建进化树进行系统进化分析。体外转录地高辛(DIG)标记的RNA探针,并将其用于日本血吸虫感染后第18、24和42天3个发育时期的雌雄虫整体原位杂交,以确定nanos1基因在日本血吸虫的定位。结果PCR扩增获得日本血吸虫nanos1基因,生物信息学分析结果表明其编码的蛋白与曼氏血吸虫nanos2蛋白同源性最高。体外转录成功的RNA探针用于日本血吸虫整体原位杂交,在感染后第24、42天雌虫的卵巢和卵黄腺以及18天雌虫的卵巢检测到阳性杂交信号,而各个发育阶段的雄虫均未观察到明显阳性杂交信号。结论日本血吸虫nanos1基因高表达于感染后第18天雌虫的卵巢以及第24、42天雌虫的卵巢和卵黄腺。该研究初步揭示了日本血吸虫nanos1基因的表达模式,为研究nanos1基因的功能提供了重要线索。

关键词：日本血吸虫 nanos1 进化分析整体原位杂交

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MiR-20b直接靶向3’-UTR调控HIF-1α表达

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重庆医科大学学报 2018年第5期43卷 657-661页

作者：王贺龙罗玉岚陶象男汪忆梦何晶郭术俊宋传旺蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 蚌埠医学院第二附属医院检验科蚌埠233030

目的:探讨微小RNA-20b(micro RNA-20b/miR-20b)是否直接靶向低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)信使RNA的3’-非编码区(3’-untranslated region,3’-UTR)调控其基因表达。方法:采用Target Scan和miRanda算法预测HIF-1α3’-UTR区是否存在miR-20b的配对序列;构建并鉴定表达HIF-1α3’-UTR的双荧光素酶基因报告系统(pmiRRB-ReportTM-HIF-1α3’-UTR),将重组质粒(recombinant plasmid,RP)与mimics-miR-20b(M)或NC-miR-20b(N)共转染He La细胞,本研究共分为RP、RP+M、RP+N、P、P+M和P+N六组,24 h后检测各组双荧光素酶活性的比值。结果:HIF-1α3’-UTR区存在miR-20b配对区域;成功构建了含HIF-1α3’-UTR序列的双荧光素酶基因报告载体;重组质粒与mimics-miR-20b共转染的He La细胞荧光素酶活性明显低于其他对照组(P=0.022)。结论:miR-20b可以直接靶向结合HIF-1α3’-UTR区负向调控其表达。

关键词：低氧诱导因子 3’-非编码区 miR-20b 双荧光素酶基因报告系统

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专业认证背景下《临床微生物学检验》课程体系的构建探索与实践

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牡丹江医学院学报 2018年第1期39卷 144-145页

作者：韦莉李玉云管俊昌金齐力张涛陈艺林吕小艳蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠医学院检验系蚌埠医学院第二附属医院检验科安徽蚌埠233040

医学检验技术是临床医学与现代实验室科学技术的结合,是一门发展十分迅速、多技术和多学科交叉的临床实践性很强的应用学科。现状下医学检验专业教学中遇到一些瓶颈亟待突破,因此寻找恰当的教学方法、探索专业建设发展方向已是当务之急... 详细信息

医学检验技术是临床医学与现代实验室科学技术的结合,是一门发展十分迅速、多技术和多学科交叉的临床实践性很强的应用学科。现状下医学检验专业教学中遇到一些瓶颈亟待突破,因此寻找恰当的教学方法、探索专业建设发展方向已是当务之急。虽然我国医学专业认证刚刚起步,但专业认证已成为高等医学教育改革与发展的必然趋势。为探索这一背景下医学院校检验医学教学的客观规律,我们以医学检验专业为试点,进行了《临床微生物学检验》课程体系改革的探索和实践,从教学内容、教学手段、实践教学体系及考核方案等方面进行了系列改革与尝试。

关键词：专业认证临床微生物学检验课程体系

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正常成年人血液中固有样淋巴细胞频数分布规律的研究

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中国实验血液学杂志 2016年第3期24卷 897-902页

作者：姚春艳魏婷婷郭路路单鹏李柏青蚌埠医学院医学检验系免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233000 蚌埠医学院医学检验系安徽蚌埠233000

目的:探讨3种固有样淋巴细胞i NKT细胞、γδT细胞和B1细胞在正常人外周血淋巴细胞中的百分率及其相关性。方法:采用六色荧光染色和流式细胞术检测i NKT细胞、γδT细胞和B1细胞及适应性T淋巴细胞、B2细胞在50例正常人外周血淋巴细胞中... 详细信息

目的:探讨3种固有样淋巴细胞i NKT细胞、γδT细胞和B1细胞在正常人外周血淋巴细胞中的百分率及其相关性。方法:采用六色荧光染色和流式细胞术检测i NKT细胞、γδT细胞和B1细胞及适应性T淋巴细胞、B2细胞在50例正常人外周血淋巴细胞中所占比例,应用统计软件分析各群细胞在正常人外周血中的频数分布规律及其相关性。结果:i NKT细胞在50例正常人外周血淋巴细胞中百分率为0.18%(0.01%-2.01%),γδT细胞为4.90%(1.45%-20.14%),B1细胞为1.62%(0.20%-3.77%),适应性T细胞为63.52%(33.20%-83.22%),B2细胞为6.64%(3.07%-13.80%)。在B淋巴细胞群体中以B2细胞占多数,其百分率为81.43%(57.90%-94.12%),B1细胞相对较少为17.28%(5.28%-41.13%);在T淋巴细胞群体中i NKT细胞、γδT细胞和适应性T细胞的百分率分别为0.32%(0.01%-3.6%)、7.55%(3.04%-27.66%)、91.98%(72.22%-96.86%)。相关性分析显示,i NKT细胞和γδT细胞间、γδT细胞和适应性T细胞间以及B1细胞和B2细胞间具有显著正相关性(r=0.39,P=0.0056;r=0.602 8,P<0.000 1;r=0.4791,P=0.000 4),其余各指标间均无相关性。女性血液中i NKT细胞百分含量为0.29%(0.06%-2.01%),显著高于男性0.12%(0.01%-1.37%)(P<0.05),其余各亚群含量无性别差异。结论:正常人外周血淋巴细胞中γδT细胞、B1细胞和i NKT细胞百分率显著低于适应性淋巴细胞,其在外周血中含量依次递减;除i NKT细胞外,其余各淋巴细胞亚群含量无性别差异。

关键词：成年人血液固有样淋巴细胞频数分布固有免疫细胞适应性免疫细胞

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结核患者外周血αβT和γδT细胞亚群免疫亚型细胞分布的探讨

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蚌埠医学院学报 2017年第2期42卷 141-144页

作者：刘震天王兆华李柏青安徽省儿童医院检验科安徽合肥233001 蚌埠医学院免疫学教研室感染与免疫安徽省重点实验室安徽蚌埠233030

目的:检测健康成人和结核患者外周血αβT细胞亚群以及γδT细胞亚群分布情况。方法:采集健康成人及结核病患者外周血,用不同荧光素标记单抗染色后,用流式细胞术检测αβT细胞免疫亚型CD45RA+CD27+初始型细胞(Tnaive)、CD45RA-CD27中央... 详细信息

目的:检测健康成人和结核患者外周血αβT细胞亚群以及γδT细胞亚群分布情况。方法:采集健康成人及结核病患者外周血,用不同荧光素标记单抗染色后,用流式细胞术检测αβT细胞免疫亚型CD45RA+CD27+初始型细胞(Tnaive)、CD45RA-CD27中央记忆型T细胞(Tcm)+、CD45RA-CD27-效应记忆型T细胞(Tem)和CD45RA+CD27-效应型T细胞(Teff);γδT细胞中Vδ1、Vδ2、Vδ1-Vδ2-(即Vδ3-8)4种免疫亚型的百分率。结果:与健康成人比较,结核患者CD4+αβT细胞中Tnaive、Teff细胞的百分率降低(P<0.01),Tem细胞的百分率升高(P<0.01),Tcm细胞差异无统计学意义(P>0.05)。结核与健康成人比较,患者CD8+αβT细胞中Tnaive、Tcm细胞的百分率降低(P<0.01和P<0.05),Tem、Teff细胞的百分率升高(P<0.01)。与健康成人比较,结核患者Vδ1γδT细胞中Tnaive、Tcm细胞的百分率降低(P<0.05),Tem细胞的百分率升高(P<0.05),Teff细胞差异无统计学意义(P>0.05);结核患者Vδ2γδT细胞中Tcm细胞的百分率降低(P<0.05),Tem、Teff细胞的百分率升高(P<0.05,P<0.01),Tnaive细胞差异无统计学意义(P>0.05);结核患者Vδ3-8γδT细胞中Tem细胞的百分率升高(P<0.05),Tnaive、Tcm、Teff细胞差异无统计学意义(P>0.05)。结论:结核病患者外周血中αβT和γδT细胞亚群分布均有显著改变。

关键词：结核 αβT细胞 γδT细胞亚群亚型

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