目的探讨结核分枝杆菌抗原(Mtb-Ag)对中性粒细胞自发凋亡的影响。方法取健康成人外周血分离中性粒细胞,加 Mtb-Ag 培养24 h,或用核因子κB(NF-κB)抑制剂 N-甲苯磺基-L-苯乙胺酰氯甲基酮(TPCK)预处理30 min 后,膜联蛋白 V(AnnexinV/PI)...
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目的探讨结核分枝杆菌抗原(Mtb-Ag)对中性粒细胞自发凋亡的影响。方法取健康成人外周血分离中性粒细胞,加 Mtb-Ag 培养24 h,或用核因子κB(NF-κB)抑制剂 N-甲苯磺基-L-苯乙胺酰氯甲基酮(TPCK)预处理30 min 后,膜联蛋白 V(AnnexinV/PI)染色,流式细胞术观察细胞凋亡情况;并用凝胶电泳迁移率变动分析(EMSA)化学发光法检测 Mtb-Ag 刺激0、1、2、4、6、24 h 后,中性粒细胞 NF-κB的 DNA 结合活性。结果加 Mtb-Ag(1.125 mg/ml)培养的中性粒细胞凋亡率(32%±3%)与中性粒细胞体外培养24 h 后自发凋亡率(55%±6%)相比,明显降低(P<0.05)。Mtb-Ag(1.125 mg/ml)作用中性粒细胞1 h 后明显可见 NF-κB活化,2 h NF-κB的 DNA 结合活性达高峰,24 h 回到静息水平;经 TPCK(30μmol/L)预处理后可阻断 Mtb-Ag 的抑制凋亡作用。结论经激活 NF-κB介导后,Mtb-Ag 对中性粒细胞自发凋亡有抑制作用。
目的:探讨脂筏干扰剂甲基-β-环糊精(MβCD)在体外对血小板活化和聚集的影响。方法:采静脉全血静止20 m in后加二磷酸腺苷(ADP)20μmol/L刺激10 m in,或预先用MβCD(10 mmol/L)处理后再加ADP刺激;同时设立未加ADP为实验对照组。用流式...
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目的:探讨脂筏干扰剂甲基-β-环糊精(MβCD)在体外对血小板活化和聚集的影响。方法:采静脉全血静止20 m in后加二磷酸腺苷(ADP)20μmol/L刺激10 m in,或预先用MβCD(10 mmol/L)处理后再加ADP刺激;同时设立未加ADP为实验对照组。用流式细胞术检测血小板中表达膜表面活化纤维蛋白原受体(FIB-R)阳性比例及其平均荧光强度(MFI)和血小板聚集率。结果:ADP刺激组血小板中FIB-R阳性比例(%)、FIB-R(MFI)和血小板聚集率(%)分别为75.93±10.27、329.19±121.72和23.03±4.96,实验对照组则分别为66.66±12.58、73.78±21.91和2.53±0.72,其中后两种指标差异有统计学意义(P<0.01)。MβCD预处理加ADP刺激组的三项指标均比ADP刺激组显著降低(P<0.01)。结论:具有转移细胞膜胆固醇的MβCD在体外能显著抑制ADP诱导的血小板活化和聚集。
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