检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2022年第6期38卷 565-570页

作者：谢卓贝代丽洪登校汤迎凯陶冶袁婷婷谢长好王元元蚌埠医学院第一附属医院风湿免疫科安徽蚌埠233030 蚌埠医学院人体解剖学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院临床医学院安徽蚌埠233030 蚌埠医学院慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院组织学与胚胎学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院感染与免疫安徽省重点实验室安徽蚌埠233030

系统性红斑狼疮(SLE)是一种可累及多器官、多系统的自身免疫性疾病,调节性T细胞(Treg)的异常表达与SLE的发生发展密切相关。Treg所表达的共信号分子细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA4)、程序性死亡蛋白1(PD-1)、 CD134(OX40)及其分泌的... 详细信息

系统性红斑狼疮(SLE)是一种可累及多器官、多系统的自身免疫性疾病,调节性T细胞(Treg)的异常表达与SLE的发生发展密切相关。Treg所表达的共信号分子细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA4)、程序性死亡蛋白1(PD-1)、 CD134(OX40)及其分泌的细胞因子白细胞介素2(IL-2)、 IL-10、转化生长因子β(TGF-β)均被证实与SLE的发生有关。共信号分子在Treg的发育和功能的维持中起着不可或缺的作用,新的研究表明IL-2在SLE的治疗中是一把双刃剑,TGF-β可以抑制Treg的分化,而IL-10在SLE发病中起特殊作用。

关键词：系统性红斑狼疮(SLE) 调节性T(Treg) 发病机制综述

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人黏着斑激酶(FAK)原核表达及多克隆抗体制备与鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2023年第2期39卷 175-180页

作者：张丽张娅季江颖魏梓妤刘家宇许涛汪洪涛蚌埠医学院第一附属医院分子诊断中心安徽蚌埠233030 蚌埠医学院检验医学院检验医学实验中心安徽蚌埠233030 蚌埠医学院慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院检验医学院临床检验诊断学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院检验医学院免疫学教研室安徽蚌埠233030

目的克隆、表达与纯化黏着斑激酶(FAK)基因C端黏着斑定位序列(第798~1041位氨基酸),制备兔抗FAK多克隆抗体并鉴定。方法PCR法体外扩增FAK基因C端序列(2671~3402 bp),克隆至pCZN1,构建pCZN1-FAK重组表达载体,将重组表达载体转化到大肠杆... 详细信息

目的克隆、表达与纯化黏着斑激酶(FAK)基因C端黏着斑定位序列(第798~1041位氨基酸),制备兔抗FAK多克隆抗体并鉴定。方法PCR法体外扩增FAK基因C端序列(2671~3402 bp),克隆至pCZN1,构建pCZN1-FAK重组表达载体,将重组表达载体转化到大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)感受态细胞,用异丙基β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达;利用镍-次氮基三乙酸(Ni-NTA)金属鳌合亲和层析树脂进行蛋白纯化,并免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体;通过间接ELISA和Western blot法进行效价和特异性鉴定。结果成功构建pCZN1-FAK重组表达载体,FAK蛋白主要以包涵体形式表达。目的蛋白纯化后,制备的兔抗FAK多克隆抗体效价达1∶512000,且与外源和内源FAK蛋白发生特异性反应。结论成功克隆、表达与纯化FAK蛋白,制备兔抗FAK多克隆抗体,可用于内源FAK蛋白特异性检测。

关键词：人黏着斑激酶(FAK) 多克隆抗体

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全氟辛酸对SD大鼠肝脂质代谢紊乱及脂肪酸代谢相关蛋白表达的影响

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中南大学学报（医学版） 2022年第1期47卷 18-25页

作者：王力周勇兵马新壮孙伟强刘辉蚌埠医学院公共卫生学院营养与食品卫生学教研室安徽蚌埠233030 慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院检验医学院生物化学与分子生物学教研室安徽蚌埠233030

目的:全氟辛酸(perfluorooctanoic acid,PFOA)能引起动物体脂代谢紊乱,影响脂肪酸的分解与合成,过氧化物酶体增殖剂激活受体(peroxisome proliferators-activated receptor,Ppar)在此过程中发挥极其重要的作用。本研究旨在探讨PFOA对Sprague Dawley(SD)大鼠肝脂质代谢紊乱及其相关蛋白表达的影响。方法:将40只雄性SD大鼠随机分成对照组(注射双蒸水)、低剂量组[PFOA剂量为1.25 mg/(kg·d)]、中剂量组[PFOA剂量为5.00 mg/(kg·d)],高剂量组[PFOA剂量为20.00 mg/(kg·d)],每组10只。正常饮食,采用PFOA经口灌胃14 d,每日观察、称重、记录。经口灌胃后,采血、处死大鼠、迅速剥离其肝脏。取部分肝组织固定于4%多聚甲醛后进行糖原过碘酸希夫(periodic acid-schiff,PAS)染色;检测血清以及肝组织中HDLC、LDLC、TG、TC的含量及相关酶的活性;蛋白质印迹法检测环磷腺苷效应元件结合蛋白(cyclic adenosine monophosphate-response element binding protein,Cbp)、类氨基酸合成酵母同源物通用调控蛋白2(general control of amino acid synthesis 5-like 2,Gcn5L2)、Ppar γ、沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,Sirt1)和人类视黄醇X受体α2(retinoid X receptor alpha 2,Rxrα2)的表达水平。结果:PFOA暴露14 d后,与对照组相比,中、高剂量组的SD大鼠肝细胞的胞质及胞核内PAS染色阳性颗粒明显减少。与对照组相比,低、中剂量组血清中LDLC、TC含量显著降低(均P<0.05),高剂量组中LDLC、TC含量升高,但差异无统计学意义(均P>0.05),HDLC、TG差异均无统计学意义(均P>0.05);低、中、高剂量组血清中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)的活性显著升高(均P<0.05);高剂量组中ALT/谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)比值显著升高(P<0.05);LDH、TG差异均无统计学意义(均P<0.05)。与对照组相比,高剂量组肝组织中的HDLC含量明显降低(P<0.05);低、中、高剂量组肝组织中的TC含量明显升高(均P<0.05),LDLC、TG差异均无统计学意义(均P<0.05);中、高剂量组肝组织中的AKP活性明显升高(均P<0.05),LDH、ALT、ALT/AST比值差异均无统计学意义(均P>0.05)。与对照组相比,高剂量组肝组织中Pparγ、Cbp、Rxrα2的蛋白质表达水平均明显下调(均P<0.05);Sirt1的蛋白质表达则明显上调(均P<0.05)。结论:PFOA暴露可导致SD大鼠肝脂质代谢紊乱以及糖原减少,这可能与PFOA激活Sirt1的表达、抑制Pparγ的表达,从而影响脂肪酸正常代谢及促进糖酵解有关。

关键词：全氟辛酸脂肪酸氧化过氧化物酶体增殖剂激活受体沉默信息调节因子1

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IL-15对人γδT细胞杀伤结核杆菌感染THP-1细胞的影响

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中国人兽共患病学报 2010年第10期26卷 926-930页

作者：金齐力韦莉姜丽娜姚春艳李柏青蚌埠医学院免疫学教研室蚌埠233030 安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 蚌埠医学院病原生物学教研室蚌埠233030 蚌埠医学院病理生理学教研室蚌埠233030

目的建立结核杆菌(Mtb)感染单核细胞THP-1细胞系模型;用流式细胞术检测人γδT细胞对Mtb感染THP-1细胞的细胞毒活性;并观察IL-15对人γδT细胞杀伤Mtb感染THP-1细胞的细胞毒活性的影响。方法 Mtb以10∶1的比例感染佛波醇酯(PMA)分化的TH... 详细信息

目的建立结核杆菌(Mtb)感染单核细胞THP-1细胞系模型;用流式细胞术检测人γδT细胞对Mtb感染THP-1细胞的细胞毒活性;并观察IL-15对人γδT细胞杀伤Mtb感染THP-1细胞的细胞毒活性的影响。方法 Mtb以10∶1的比例感染佛波醇酯(PMA)分化的THP-1细胞,建立Mtb感染细胞模型。人外周血单个核细胞用Mtb耐热性低分子多肽类抗原刺激优势扩增γδT细胞,作为效应细胞用于细胞毒活性实验。用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记Mtb感染THP-1细胞,作为靶细胞。效应细胞和靶细胞以不同比例孵育4 h,用碘化丙啶(PI)染色后在流式细胞仪上检测,CSFE和PI双阳性细胞为被杀伤靶细胞。IL-15作用于γδT细胞24 h后,再检测γδT细胞对Mtb感染THP-1细胞的细胞毒活性。结果人γδT细胞与Mtb感染THP-1细胞以1∶1至50∶1的比例作用4 h后,人γδT细胞对结核杆菌感染的THP-1细胞的细胞毒活性从22.5%增加至80.7%;而γδT细胞与未感染Mtb的THP-1细胞的细胞毒活性为16.1%至47.2%。IL-15作用γδT细胞后的细胞毒活性(64.06%)与对照组(46.81%)相比明显增加(P<0.05)。结论人γδT细胞对Mtb感染THP-1细胞的杀伤活性明显高于对未感染Mtb的THP-1细胞的作用,杀伤活性随效靶比的增加而增加。IL-15可以增强人γδT细胞对Mtb感染巨噬细胞的细胞毒活性。

关键词： IL-15 结核杆菌 γδT细胞 THP-1细胞细胞毒活性

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CD3＋CD56＋NKT细胞与Vα24~＋iNKT细胞的检测及其表型特点分析

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现代免疫学 2011年第6期31卷 490-494页

作者：姚春艳姜丽娜邱晓静李柏青蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠医学院病理生理学教研室蚌埠233000

为了比较CD3+CD56+NKT细胞与CD3+TCRVα24+iNKT细胞在外周血淋巴细胞中的相对比例及其表面分子表达的差别,本研究采集了健康人外周全血,用四色荧光抗体染色和流式细胞术检测CD3+CD56+NKT细胞和CD3+TCRVα24+iNKT细胞在淋巴细胞中的比例... 详细信息

为了比较CD3+CD56+NKT细胞与CD3+TCRVα24+iNKT细胞在外周血淋巴细胞中的相对比例及其表面分子表达的差别,本研究采集了健康人外周全血,用四色荧光抗体染色和流式细胞术检测CD3+CD56+NKT细胞和CD3+TCRVα24+iNKT细胞在淋巴细胞中的比例,及其亚群表型及活化分子CD69的表达情况。检测结果表明,在正常人外周血淋巴细胞中CD3+CD56+NKT细胞所占比例为3.90%±2.89%,以CD8亚群占多数(57.61%±17.35%);而CD3+TCRVα24+iNKT细胞所占比例仅为0.39%±0.19%,且以CD4亚群占多数(56.60%±19.66%)。两种NKT细胞的相对数量之间存在显著正相关(r=0.467,P<0.05),但两类细胞之间极少重叠。CD16和CD161在CD3+CD56+NKT细胞上的表达量显著高于在CD3+TCRVα24+iNKT细胞上的表达量(P均<0.01)。活化分子CD69在两种细胞上的表达量均较低(P>0.05)。本研究结果表明,正常人外周血CD3+CD56+NKT细胞与CD3+TCRVα24+iNKT细胞在相对数量、亚群及表型上存在显著差异,是两种截然不同的NKT细胞。

关键词： NKT细胞 iNKT细胞 CD16 CD161

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肺结核患者外周血中结核分枝杆菌耐热抗原特异性的TNF-α^＋ γδ T细胞数量和亚群分析

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细胞与分子免疫学杂志 2016年第11期32卷 1527-1531页

作者：唐洁陈策查成王兆华张晨曾林丽李柏青蚌埠医学院免疫学教研室安徽蚌埠233030 安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院科研中心安徽蚌埠233030 解放军123医院传染科安徽蚌埠233030 蚌埠市传染病医院安徽蚌埠233030 蚌埠医学院医学检验系安徽蚌埠233030

目的探讨结核分枝杆菌耐热抗原(MTB-HAg)刺激下,肺结核患者、潜伏性MTB感染者、健康者外周血γδT细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)产生细胞数量的差异。方法采集15例正常成人外周血,根据人MTB感染T细胞酶联免疫斑点诊断试剂盒检测结果分... 详细信息

目的探讨结核分枝杆菌耐热抗原(MTB-HAg)刺激下,肺结核患者、潜伏性MTB感染者、健康者外周血γδT细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)产生细胞数量的差异。方法采集15例正常成人外周血,根据人MTB感染T细胞酶联免疫斑点诊断试剂盒检测结果分为健康者(n=9)和潜伏性MTB感染者(n=6),另采集肺结核患者外周血(n=12),3组经密度梯度离心法获取外周血单个核细胞(PBMC),用MTB-HAg刺激20 h。收集细胞,流式细胞术检测TCRαβ+T细胞、TCRγδ+T细胞、CD4+αβT细胞、CD8+αβT细胞、TCR-Vδ2+T细胞亚群中产生TNF-α产生细胞的比例。结果肺结核患者外周血γδT细胞中TNF-α产生细胞比例显著低于潜伏性MTB感染者和健康者;肺结核患者外周血Vδ2T细胞中TNF-α产生细胞比例显著低于潜伏性MTB感染者和健康者;肺结核患者外周血中Vδ2T细胞在TNF-α+γδT细胞中所占比例显著低于潜伏性MTB感染者和健康者。结论肺结核患者外周血MTB-HAg特异性γδT细胞及其Vδ2亚群产生细胞因子TNF-α能力显著低于潜伏性MTB感染者和健康者。

关键词：结核分枝杆菌耐热抗原(MTB-HAg) 潜伏性MTB感染活动性肺结核 γδ T细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)

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nanos1基因在日本血吸虫不同发育时期的定位

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安徽医科大学学报 2020年第2期55卷 215-221页

作者：华梦晴邵延靖刘淼沈际佳蚌埠医学院检验医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 安徽医科大学基础医学院寄生虫学教研室合肥230032

目的探讨nanos1基因在日本血吸虫的定位以及不同发育时期的表达情况。方法在NCBI上搜索日本血吸虫nanos1基因,PCR扩增、测序并将其全长序列经BLAST软件分析,利用DNAMAN6.0和ClustalX2.0.9进行多重序列比对,利用MAGA 5.05构建进化树进行... 详细信息

目的探讨nanos1基因在日本血吸虫的定位以及不同发育时期的表达情况。方法在NCBI上搜索日本血吸虫nanos1基因,PCR扩增、测序并将其全长序列经BLAST软件分析,利用DNAMAN6.0和ClustalX2.0.9进行多重序列比对,利用MAGA 5.05构建进化树进行系统进化分析。体外转录地高辛(DIG)标记的RNA探针,并将其用于日本血吸虫感染后第18、24和42天3个发育时期的雌雄虫整体原位杂交,以确定nanos1基因在日本血吸虫的定位。结果PCR扩增获得日本血吸虫nanos1基因,生物信息学分析结果表明其编码的蛋白与曼氏血吸虫nanos2蛋白同源性最高。体外转录成功的RNA探针用于日本血吸虫整体原位杂交,在感染后第24、42天雌虫的卵巢和卵黄腺以及18天雌虫的卵巢检测到阳性杂交信号,而各个发育阶段的雄虫均未观察到明显阳性杂交信号。结论日本血吸虫nanos1基因高表达于感染后第18天雌虫的卵巢以及第24、42天雌虫的卵巢和卵黄腺。该研究初步揭示了日本血吸虫nanos1基因的表达模式,为研究nanos1基因的功能提供了重要线索。

关键词：日本血吸虫 nanos1 进化分析整体原位杂交

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miR-20b直接靶向3′-UTR负性调节VEGF的表达

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华中科技大学学报（医学版） 2016年第1期45卷 22-26页

作者：陶象男汪忆梦宋传旺蚌埠医学院第二附属医院检验科蚌埠233040 蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030

目的探讨miR-20b是否直接靶向VEGF 3′-非编码区(3′-UTR)而调控其表达。方法采用miRanda软件预测VEGF 3′-UTR是否存在miR-20b的结合位点;使用PCR方法扩增RAW264.7细胞VEGF基因3′-UTR序列,经双酶切后克隆到pmiR-RB-Report^(TM)质粒海... 详细信息

目的探讨miR-20b是否直接靶向VEGF 3′-非编码区(3′-UTR)而调控其表达。方法采用miRanda软件预测VEGF 3′-UTR是否存在miR-20b的结合位点;使用PCR方法扩增RAW264.7细胞VEGF基因3′-UTR序列,经双酶切后克隆到pmiR-RB-Report^(TM)质粒海肾荧光素酶的下游,得到pmiR-RB-Report TM-VEGF 3′-UTR双荧光素酶重组质粒,使用电泳法和测序法进行验证;将重组质粒或空质粒与miR-20b模拟物或其对照共转染HeLa细胞,24h后检测相应荧光素酶活性。结果 VEGF 3′-UTR存在miR-20b的结合位点;获得了含VEGF 3′-UTR的双荧光素酶报告载体;重组质粒与miR-20b模拟物共转染组HeLa细胞的荧光素酶活性明显低于空质粒转染组(P<0.05)。结论成功构建小鼠VEGF基因3′-UTR双荧光素酶报告载体,miR-20b可以直接靶向VEGF 3′-UTR而负性调控其表达。

关键词：血管内皮生长因子 3′-非编码区 miR-20b 双荧光素酶报告载体

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基于529bp高度重复序列的弓形虫PCR诊断方法的建立

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中国生物制品学杂志 2010年第7期23卷 767-769页

作者：方强夏惠陈兴智徐家森王雪梅齐文娟孙新沈继龙蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233030 安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院免疫学教研室安徽蚌埠233030 安徽医科大学病原生物学教研室合肥230032

目的建立基于529bp高度重复序列的弓形虫PCR诊断方法。方法以弓形虫基因组中529bp的高度重复序列为诊断靶基因设计引物,并以其为模板经PCR扩增该基因,与pMD18-T载体连接,构建pMD18/Tox529bp重组质粒,测序鉴定正确后,经稀释标定作为标准... 详细信息

目的建立基于529bp高度重复序列的弓形虫PCR诊断方法。方法以弓形虫基因组中529bp的高度重复序列为诊断靶基因设计引物,并以其为模板经PCR扩增该基因,与pMD18-T载体连接,构建pMD18/Tox529bp重组质粒,测序鉴定正确后,经稀释标定作为标准品。优化PCR反应体系及条件,并验证该方法的灵敏度及特异性。结果所构建的pMD18/Tox529bp重组质粒经测序正确,建立的PCR方法最低可检出10个拷贝的目的基因,除对弓形虫基因组DNA扩增出特异性条带外,用该方法对健康志愿者全血、正常小鼠全血、间日疟原虫、恶性疟原虫及结核杆菌基因组DNA均未扩增出特异性条带。结论已建立了一种具有较高灵敏度和特异性的弓形虫PCR诊断方法 ,有望应用于人和动物弓形虫感染的筛查、临床诊断及流行病学调查。

关键词：弓形虫病重复序列,核酸聚合酶链反应

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中性粒细胞在系统性红斑狼疮发病机制中的研究进展

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细胞与分子免疫学杂志 2022年第7期38卷 666-670页

作者：代丽谢卓贝谢长好汤迎凯时浚翔周雨诗陈琳洁王元元蚌埠医学院第一附属医院风湿免疫科安徽蚌埠233030 蚌埠医学院慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院人体解剖学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院临床医学院安徽蚌埠233030 蚌埠医学院组织学与胚胎学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院感染与免疫安徽省重点实验室安徽蚌埠233030

系统性红斑狼疮(SLE)是一种自身免疫性疾病,发病机制尚不清楚。其主要特征是免疫系统失调,自身免疫耐受的丧失及自身抗体的持续产生。目前发现中性粒细胞在SLE发病机制中也发挥着重要作用。其中中性粒细胞胞外诱捕网(NET)和中性粒细胞... 详细信息

系统性红斑狼疮(SLE)是一种自身免疫性疾病,发病机制尚不清楚。其主要特征是免疫系统失调,自身免疫耐受的丧失及自身抗体的持续产生。目前发现中性粒细胞在SLE发病机制中也发挥着重要作用。其中中性粒细胞胞外诱捕网(NET)和中性粒细胞胞外诱捕网凋零(NETosis)在参与及促进体内炎症反应中具有重要作用,同时也是近年来研究的重点及热点。中性粒细胞在发生一系列复杂的事件后释放出NET,而NET是由DNA或核小体蛋白与数百种胞质蛋白共同构成的,其中部分NET相关蛋白经过蛋白后修饰后参与SLE的发病机制。体内NET的平衡被打破,导致NET的清除延迟,刺激自身免疫性B细胞产生自身抗原,以及刺激其他免疫细胞促进SLE疾病的进展。

关键词：系统性红斑狼疮(SLE) 中性粒细胞低密度粒细胞中性粒细胞胞外诱捕网(NET) 中性粒细胞胞外诱捕网凋零(NETosis) 综述

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