检索结果-内蒙古大学图书馆

南方医科大学学报 2015年第10期35卷 1463-1466页

作者：马华罗玉岚郭术俊申林宋传旺蚌埠医学院免疫学教研室//安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠医学院科研中心安徽蚌埠233030

目的探讨miR-20b对哮喘小鼠气道炎症的影响。方法 BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组、哮喘+miR-20b模拟物处理组、哮喘+miR-20b模拟物对照处理组。卵清白蛋白(OVA)致敏和激发构建哮喘模型小鼠,miR-20b模拟物及其对照采用鼻滴的方... 详细信息

目的探讨miR-20b对哮喘小鼠气道炎症的影响。方法 BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组、哮喘+miR-20b模拟物处理组、哮喘+miR-20b模拟物对照处理组。卵清白蛋白(OVA)致敏和激发构建哮喘模型小鼠,miR-20b模拟物及其对照采用鼻滴的方式给药干预。实验流程的第49天检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中的细胞总数和分类计数,肺组织进行HE染色观察病理学变化,ELISA检测BALF中血管内皮生长因子(VEGF)的浓度。结果哮喘小鼠经miR-20b模拟物处理后,BALF中细胞总数及中性粒细胞、嗜酸性粒细胞的分类计数明显降低(P<0.01),并且气道黏膜增厚减轻,气道腔内粘液分泌及支气管周围炎性细胞的浸润减少。与哮喘组BALF中VEGF的含量28.55±3.42 pg/m L相比,哮喘+miR-20b模拟物处理组的含量18.19±3.67 pg/m L明显降低(P<0.01)。结论 miR-20b对哮喘小鼠气道炎症产生抑制作用,这一效应可能是通过降低VEGF的表达来介导。

关键词： miR-20b 哮喘气道炎症血管内皮生长因子

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结核分枝杆菌抗原和TCRγδ抗体诱导人γδT细胞分化并产生IL-17

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细胞与分子免疫学杂志 2015年第2期31卷 226-230页

作者：陈立夏惠汪洪涛盛玲玲徐志庆孙垚唐洁李柏青蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院感染与免疫安徽省重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院免疫学教研室安徽蚌埠233030

目的探讨结核分枝杆菌耐热抗原（MTB—HAg）和抗T细胞受体γδ单克隆抗体（TCRγδ／5mAb）在刺激人γδT细胞诱导分化产生IL-17中的作用。方法健康人外周血单个核细胞经过免疫磁珠分选得到纯化的γδT细胞后，加入MTB-HAg或包被的TCRγ... 详细信息

目的探讨结核分枝杆菌耐热抗原（MTB—HAg）和抗T细胞受体γδ单克隆抗体（TCRγδ／5mAb）在刺激人γδT细胞诱导分化产生IL-17中的作用。方法健康人外周血单个核细胞经过免疫磁珠分选得到纯化的γδT细胞后，加入MTB-HAg或包被的TCRγδ 5mAb，再加或不加CD28mAb进行刺激，同时加或不加IL-17极化细胞因子组合（CK）（IL-1β、IL-6、TGF-β和IL-23），极化诱导培养10—12d。然后收集诱导极化培养的γδT细胞，经佛波醇酯和离子霉素再刺激6h后，用ELISPOT法检测产生IL—17的细胞数。结果经刺激和诱导分化培养的γδT细胞用ELISPOT法检测产生IL-17的细胞数发现，TCRγδ 8mAb联合CK组与TCRγδ／8mAb组相比明显增加，TCRγδ mAb联合CD28mAb组与TCRγδ mAb同时联合CD28mAb和CK组相比明显减少。TCRγδ 8mAb同时联合CD28mAb和CK组与TCRγδ mAb联合CK组相比明显增多。MTB—Hag同时联合CD28mAb和CK组与TCRγδ mAb同时联合CD28mAb和CK组相比显著减少，但与MTB—HAg联合CD28mAb组相比明显增多。结论诱导Th17分化的CK（IL-1β、IL-6、TGF-β和IL-23）也能诱导人γδT细胞分化产生IL-17，TCRγδ 8mAb刺激γδT细胞增殖后诱导分化产生IL—17的活性比MTB—HAg更强。另外，CD28在TCRγδ 8mAb激活γδT细胞诱导产生IL-17的过程中也有重要作用。

关键词：结核分枝杆菌耐热抗原 γδT细胞 IL-17

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结核分枝杆菌抗原B细胞表位肽对人外周γδT细胞的特异性激活作用

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中国免疫学杂志 2015年第7期31卷 884-889页

作者：王充李柏青(指导) 蚌埠医学院免疫学教研室感染与免疫安徽省重点实验室蚌埠233030

目的：探讨结核分枝杆菌（Mtb）抗原中B细胞多肽表位能否特异性刺激γδT细胞的活化和增殖。方法：选择文献报道的Mtb抗原中B细胞识别的多肽表位（BP）序列,人工合成6条多肽（BP1~BP6）和本实验室筛选的γδT细胞识别的2条表位多肽（TP... 详细信息

目的：探讨结核分枝杆菌（Mtb）抗原中B细胞多肽表位能否特异性刺激γδT细胞的活化和增殖。方法：选择文献报道的Mtb抗原中B细胞识别的多肽表位（BP）序列,人工合成6条多肽（BP1~BP6）和本实验室筛选的γδT细胞识别的2条表位多肽（TP）,包被24孔培养板,采集健康成年人外周血分离获取PBMC,经CFSE染色后放入分别包被BP1至BP6和TP14、15的培养板中刺激培养。以Mtb耐热抗原（Mtb-HAg）作为阳性对照,以IL-2作为阴性对照。培养12 d后,收集扩增细胞,用流式细胞术检测γδT细胞百分率及增殖指数（PI）。结果：用Wilcoxon符号秩检验将各组与阴性对照进行配对样本比较,发现14例的γδT细胞百分率在BP2、BP4、TP14、TP15组和Mtb-HAg组的增加具有统计学意义（P〈0.05）;7例的γδT细胞增殖指数在BP2、BP4、BP5、BP6、TP14组和TP15组的增加具有统计学意义（P〈0.05）。结论：Mtb抗原中B细胞表位肽片段,与γδT细胞的表位肽类似,在体外能刺激人PBMC中γδT细胞的增殖。虽然对γδT细胞刺激增殖和活化有个体差异性,但仍有力提示B细胞表位肽可特异性激活γδT细胞。

关键词： Mtb 抗原 γδT细胞 B细胞表位

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结核分枝杆菌耐热抗原激活的人γδT细胞Th2极性分化特征以及T-bet/GATA-3对分化的调控作用

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细胞与分子免疫学杂志 2015年第1期31卷 72-76页

作者：朱安友吕合作张伦军胡建国王凤超李柏青蚌埠医学院第一附属医院检验科安徽蚌埠233004 蚌埠医学院免疫学教研室安徽蚌埠233030 安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

目的研究结核杆菌耐热抗原(MTB-HAg)激活的人外周血γδT细胞Th2极性分化特点和表达于T细胞中的T盒(T-bet)和GATA结合蛋白3(GATA-3)转录因子的调控作用。方法用MTB-HAg刺激人外周血单个核细胞(PBMC)获得MTB-HAg激活的T细胞(MTBAT),分别... 详细信息

目的研究结核杆菌耐热抗原(MTB-HAg)激活的人外周血γδT细胞Th2极性分化特点和表达于T细胞中的T盒(T-bet)和GATA结合蛋白3(GATA-3)转录因子的调控作用。方法用MTB-HAg刺激人外周血单个核细胞(PBMC)获得MTB-HAg激活的T细胞(MTBAT),分别在中性条件和Th2极化条件培养后,再经10 ng/m L佛波醇酯(PMA)、500 ng/m L离子霉素(ionomycin)和2.5μmol/L莫能菌素(monensin)刺激6 h,四色荧光抗体染色流式细胞术检测γδT细胞和αβT细胞内细胞因子γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)的表达。流式细胞术分选28 d MTBAT中的γδT细胞和CD4+T细胞,反转录PCR(RT-PCR)检测T-bet和GATA-3 mRNA的表达。结果在中性条件和Th2极化条件下培养的MTBAT中,γδT细胞一直优势表达IFN-γ,而Th2极化条件下,随培养时间增加IFN-γ+αβT细胞百分率显著下降。与中性条件培养比较,Th2极化条件下MTBAT培养28 d,Th0型(IFN-γ+IL-4+)γδT细胞显著增加;而Th2型(IFN-γ-IL-4+)αβT细胞显著增加。RT-PCR结果显示,Th2极化的γδT细胞仍高表达T-bet mRNA,而在CD4+T细胞T-bet mRNA表达被显著下调;同时,GATA-3 mRNA在γδT细胞和CD4+T细胞的表达均显著上调。结论 Th2极化条件下,大部分γδT细胞仍为Th1型,仅部分极性分化为Th0型细胞;Th2极性分化的γδT细胞转录因子T-bet和GATA-3未表现出交互调节功能。

关键词：结核杆菌耐热抗原 γδT细胞 Th2极化 T-bet GATA-3

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多色流式细胞术对正常人外周血中TCRVα24^+NKT细胞与传统T细胞间的相关性研究

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华中科技大学学报（医学版） 2015年第2期44卷 196-201页

作者：姚春艳姜丽娜汪洪涛金齐力李柏青蚌埠医学院医学检验系免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233000 蚌埠医学院病理生理学教研室蚌埠233000 蚌埠医学院第二附属医院检验科蚌埠233000

目的探讨正常人外周血中TCRVα24+NKT细胞与传统CD3+T细胞在含量和亚群上的关系。方法采用五色荧光染色和流式细胞术检测TCRVα24+NKT细胞与传统CD3+T细胞在30例正常人外周血中所占比例,两群细胞中各亚群(CD4亚群、CD8亚群、双阴性亚群... 详细信息

目的探讨正常人外周血中TCRVα24+NKT细胞与传统CD3+T细胞在含量和亚群上的关系。方法采用五色荧光染色和流式细胞术检测TCRVα24+NKT细胞与传统CD3+T细胞在30例正常人外周血中所占比例,两群细胞中各亚群(CD4亚群、CD8亚群、双阴性亚群及CD45RA初始细胞亚群)在各自细胞群体中所占比例,统计软件分析两群细胞间各指标的差异及相关性。结果 NKT细胞在正常人外周血中所占比例为0.35%(0.10%~1.50%),CD3+T细胞比例为58.4%(43.2%~72.5%);在Va24+NKT细胞中CD4亚群所占比例为69.1%(21.3%~90.9%)、CD8亚群为15.0%(4.5%~76.2%)、双阴性亚群为9.5%(0.7%~69.4%)、CD45RA初始细胞亚群为32.4%(6.8%~54.0%),在CD3+T细胞中CD4亚群所占比例为54.7%(27.0%~74.7%)、CD8亚群为33.7%(19.9%~48.2%)、双阴性亚群为10.2%(1.9%~24.4%)、CD45RA初始细胞亚群为39.8%(10.3%~63.0%)。两群细胞间除CD4亚群和CD45RA亚群具有显著相关性(r=0.435 5,P<0.05;r=0.829 5,P<0.01),其余各指标均无相关性。CD4+NKT细胞含量与总NKT细胞含量呈显著负相关,而CD8+NKT与总NKT细胞呈显著正相关(r=-0.680 2,P<0.01;r=0.401 7,P<0.05)。结论正常人外周血中TCRVα24+NKT细胞与传统T细胞间除在CD4亚群和CD45RA初始细胞亚群间有显著相关外,其余各亚群相关较少。

关键词：流式细胞术 NKT细胞相关性

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呼吸道病毒感染与哮喘

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国际检验医学杂志 2015年第3期36卷 380-382页

作者：罗玉岚宋传旺蚌埠医学院医学检验系免疫学教研室/安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

哮喘是一种以喘息为主要症状并受多种因素影响的慢性气道性炎症。呼吸道病毒感染能对哮喘发病的多个方面产生重要影响。婴儿阶段,喘息性疾病通常起源于呼吸道感染病毒,如呼吸道合胞病毒（RSV）、人鼻病毒（HRV）、变性肺病毒、冠状病毒... 详细信息

哮喘是一种以喘息为主要症状并受多种因素影响的慢性气道性炎症。呼吸道病毒感染能对哮喘发病的多个方面产生重要影响。婴儿阶段,喘息性疾病通常起源于呼吸道感染病毒,如呼吸道合胞病毒（RSV）、人鼻病毒（HRV）、变性肺病毒、冠状病毒、流感及副流感病毒等。有严重喘息发作的婴幼儿以后更有可能形成哮喘,因此呼吸道病毒感染与哮喘的起始密切相关。在学龄儿童或成人,呼吸道病毒感染相对温和,

关键词：哮喘呼吸道病毒感染炎症

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磷酸类抗原刺激人外周血PBMC后T细胞亚群产生IFN-γ的比较

磷酸类抗原刺激人外周血PBMC后T细胞亚群产生IFN-γ的比较

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第十届全国免疫学学术大会

作者：陈策唐洁刘震天江京娣李柏青蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室

研究背景:已知磷酸类抗原可直接与γδTCR结合,特征性激活γδT细胞增殖。但不同的磷酸类抗原在刺激人PBMC后,T细胞亚群产生IFN-γ的差异,未见报道。目的 :检测磷酸类抗原(IPP、DMAPP)在刺激人外周血PBMC后,T细胞亚群产生IFN-γ的差异... 详细信息

研究背景:已知磷酸类抗原可直接与γδTCR结合,特征性激活γδT细胞增殖。但不同的磷酸类抗原在刺激人PBMC后,T细胞亚群产生IFN-γ的差异,未见报道。目的 :检测磷酸类抗原(IPP、DMAPP)在刺激人外周血PBMC后,T细胞亚群产生IFN-γ的差异。方法 :采集10例健康人新鲜外周血,分离PBMC置48孔培养板中(5-7.5×105细胞/孔),加IPP或DMAPP(终浓度均为20μmol/L)培养14小时后,加Monensin培养6小时收集细胞。加荧光单抗进行表面分子染色,透膜处理后再加荧光标记抗IFN-γ单抗作胞内染色,在流式细胞仪上检测γδT细胞、αβT细胞、CD4T细胞和CD8T细胞中表达IFN-γ的细胞比例。另设阴性对照组,不加抗原刺激仅加Monensin;以加PHA为阳性对照组。结果:IPP组,γδT细胞、αβT细胞、CD4T细胞和CD8T细胞中IFN-γ+细胞比例为7.568%、0.012%、0.005%和0.029%;DMAPP组分别为3.127%、0.016%、0.007%和0.021%;阴性对照组分别为0.257%、0.031%、0.005%和0.002%;阳性对照组分别为1.882%、0.687%、0.641%和0.773%。IPP组和DMAPP组中,γδT细胞中产生IFN-γ+细胞比例明显高于αβT细胞中的比例,IPP组γδT细胞中产生IFN-γ细胞比例明显高于DMAPP组,以上差异均有统计学意义(P<0.05)。IPP组、DMAPP和阴性对照组之间αβT细胞、CD4T细胞和CD8T细胞中产生IFN-γ细胞比例的差异进行比较,无统计学意义(P>0.05)。结论 :磷酸类抗原刺激人外周血PBMC,可特征性诱导γδT细胞产生IFN-γ,而αβT细胞几乎不产生。IPP诱导γδT细胞产生IFN-γ的活性明显强于DMAPP。

关键词：磷酸类抗原 T细胞亚群 IFN-γ γδT细胞

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健康人与肺结核患者外周血PBMC中γδT细胞亚群免疫表型的比较

健康人与肺结核患者外周血PBMC中γδT细胞亚群免疫表型的比较

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中国免疫学会第十届全国免疫学学术大会

作者：刘震天李柏青陈策江京娣唐洁安徽省蚌埠医学院免疫学教研室感染与免疫安徽省重点实验室

研究背景：T细胞亚群和免疫表型的研究中，健康人与肺结核患者γδT细胞各亚群免疫表型之间的差异，未见报道。目的：检测健康人与肺结核患者外周血PBMC中γδT细胞亚群免疫表型的差异。

关键词： T细胞亚群 γδT细胞免疫表型

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健康人与肺结核患者外周血PBMC中γδT细胞亚群免疫表型的比较

健康人与肺结核患者外周血PBMC中γδT细胞亚群免疫表型的比较

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第十届全国免疫学学术大会

作者：刘震天李柏青陈策江京娣唐洁安徽省蚌埠医学院免疫学教研室感染与免疫安徽省重点实验室

研究背景:T细胞亚群和免疫表型的研究中,健康人与肺结核患者γδT细胞各亚群免疫表型之间的差异,未见报道。目的 :检测健康人与肺结核患者外周血PBMC中γδT细胞亚群免疫表型的差异。方法 :采集健康人和肺结核患者新鲜外周血,分离PBMC,... 详细信息

研究背景:T细胞亚群和免疫表型的研究中,健康人与肺结核患者γδT细胞各亚群免疫表型之间的差异,未见报道。目的 :检测健康人与肺结核患者外周血PBMC中γδT细胞亚群免疫表型的差异。方法 :采集健康人和肺结核患者新鲜外周血,分离PBMC,荧光单抗进行表面分子染色,其中Tnave为CD45RA+CCR7+,Tcm为CD45RA-CCR7+,Tem为CD45RA-CCR7-,Temra为CD45RA+CCR7-,流式细胞仪检测分析Vδ1,Vδ2及Vδ3-8亚群不同免疫表型的百分率,并将健康人组与肺结核患者组进行比较。结果:γδT细胞中Tnaive,Tcm,Tem和Temra亚群的百分率在健康人(n=15)的Vδ1 T细胞中分别是98±32.63,13.14±8.67,1.90±3.36和32.45±33.33;Vδ2 T细胞中分别是12.27±10.67,48.01±31.44,21.33±19.99和18.38±18.81;Vδ3-8 T细胞中分别是36.10±25.29,14.87±9.84,6.98±6.81和37.73±28.51。在肺结核患者(n=7)的Vδ1T细胞中分别是92.71±5.00,2.27±2.84,0±0和3.07±5.05;Vδ2 T细胞中分别是25.60±10.19,11.30±17.82,8.70±13.09和54.40±29.86;Vδ3-8 T细胞中分别是71.57±22.31,14.76±19.46,1.15±1.26和12.51±9.76。以上健康人与肺结核患者γδT细胞亚群免疫表型的百分率的差异,除Vδ2亚群Tem和Vδ3-8亚群Tcm外,均具有统计学意义(P<0.05)。结论 :健康人与肺结核患者外周血PBMC中γδT细胞亚群免疫表型的百分率具有差异性。如Vδ2亚群中,健康人Tcm亚群明显高于肺结核患者,而Temra则相反。

关键词： T细胞亚群 γδT细胞免疫表型

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磷酸类抗原刺激人外周血PBMC后T细胞亚群产生IFN-γ的比较

磷酸类抗原刺激人外周血PBMC后T细胞亚群产生IFN-γ的比较

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中国免疫学会第十届全国免疫学学术大会

作者：陈策唐洁刘震天江京娣李柏青蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室 233030

研究背景：已知磷酸类抗原可直接与γδTCR结合,特征性激活γδT细胞增殖。但不同的磷酸类抗原在刺激人PBMC后,T细胞亚群产生IFN-γ的差异,未见报道。目的：检测磷酸类抗原(IPP、DMAPP)在刺激人外周血PBMC后,T细胞亚群产生IFN-γ的差异。

关键词：磷酸类抗原 T细胞亚群 IFN-γ γδT细胞

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