检索结果-内蒙古大学图书馆

中国临床药理学杂志 2023年第13期39卷 1908-1912页

作者：龙赤荣王万初吴胜男于影高琴李正红蚌埠医学院生理教研室蚌埠医学院检验医学院蚌埠医学院科研中心

目的探讨右美托咪定（Dex）后处理对大鼠脑缺血再灌注损伤（CIRI）及内质网应激（ERS）的影响。方法将36只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组和实验组，每组12只。模型组和实验组用线栓法进行缺血2 h再灌注24 h处理，构建大脑中动... 详细信息

目的探讨右美托咪定（Dex）后处理对大鼠脑缺血再灌注损伤（CIRI）及内质网应激（ERS）的影响。方法将36只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组和实验组，每组12只。模型组和实验组用线栓法进行缺血2 h再灌注24 h处理，构建大脑中动脉栓塞模型。实验组于再灌注30 min前腹腔注射100μg·kg-1Dex,假手术组和模型组均腹腔注射等体积0.9%NaCl。用Longa评分法评估大鼠的神经功能缺损状况，用2,3,5-三苯基氯化四氮唑法检测大鼠脑梗死体积百分比，用酶联免疫吸附试验法检测大鼠海马组织中超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）的含量，用蛋白质印迹法测定G蛋白偶联受体78（GRP78）、C/EBP同源蛋白（CHOP）和胱天蛋白酶12（caspase-12）的表达水平。结果假手术组、模型组和实验组的神经功能缺损评分分别为0、（2.58±0.49）和（1.25±0.43）分，脑梗死体积比分别为0、（19.56±6.87）%和（10.01±6.58）%,SOD分别为（206.61±11.56）、（116.83±3.78）和（174.91±2.44）U·mg prot-1,MDA分别为（4.94±0.30）、（9.55±0.23）和（7.33±0.52）U·mg prot-1,GRP78蛋白相对表达水平分别为1.00±0.15、1.74±0.02和2.08±0.08,CHOP蛋白相对表达水平分别为1.00±0.31、2.82±0.14和1.84±0.15,caspase-12蛋白相对表达水平分别为1.00±0.35、2.42±0.09和1.60±0.26。模型组的上述指标与实验组和假手术组比较，差异均有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。结论 Dex可通过上调GRP78、下调CHOP而影响脑缺血再灌注损伤大鼠的内质网应激反应，提高细胞活力，缩小脑梗死灶体积，抑制细胞凋亡，具有一定的脑保护作用。

关键词：右美托咪定脑缺血再灌注损伤内质网应激细胞凋亡

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结核分枝杆菌H37Rv株PE_PGRS35蛋白的表达、纯化及其生物信息学分析

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中国生物制品学杂志 2023年第1期36卷 32-38页

作者：袁美丽王楚彤李敏英李柏青许涛汪洪涛蚌埠医学院检验医学院检验医学实验中心安徽蚌埠233000 蚌埠医学院慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室安徽蚌埠233000 蚌埠医学院检验医学院免疫学教研室安徽蚌埠233000 蚌埠医学院检验医学院临床检验诊断学教研室安徽蚌埠233000

目的克隆结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)PE_PGRS35基因,构建pET28a-PE_PGRS35重组表达载体,异源表达并纯化MTB H37Rv的PE_PGRS35蛋白,经生物信息学分析后,探讨抗MTB新型靶点。方法PCR扩增PE_PGRS35编码基因,利用重组克隆技术,构建表达载体pET28a-PE_PGRS35,测序鉴定成功后转化至大肠埃希菌(***)BL21(DE3)中,加入异丙基-β-D半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达。用Ni柱亲和层析纯化PE_PGRS35蛋白,并对其进行生物信息学分析。结果经测序证明pET28a-PE_PGRS35表达载体构建正确,表达的PE_PGRS35蛋白相对分子质量约53000,主要以包涵体形式存在,纯度达90%。生物信息学分析表明,PE_PGRS35蛋白为酸性不稳定性蛋白,主要二级结构为β-折叠和无规则卷曲,无跨膜区,推测为膜外蛋白,有39个磷酸化位点和2个保守结构域,有Rv1769、PPE8、PPE64、PPE54、PPE24、PPE16、PPE35、PPE6、PPE28、PE2共10个蛋白与PE_PGRS35蛋白相互作用。结论成功获得高纯度的PE_PGRS35蛋白,为进一步开发抗MTB药物新型靶点提供了参考。

关键词：结核分枝杆菌 PE_PGRS35蛋白原核表达生物信息学分析

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人黏着斑激酶(FAK)原核表达及多克隆抗体制备与鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2023年第2期39卷 175-180页

作者：张丽张娅季江颖魏梓妤刘家宇许涛汪洪涛蚌埠医学院第一附属医院分子诊断中心安徽蚌埠233030 蚌埠医学院检验医学院检验医学实验中心安徽蚌埠233030 蚌埠医学院慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院检验医学院临床检验诊断学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院检验医学院免疫学教研室安徽蚌埠233030

目的克隆、表达与纯化黏着斑激酶(FAK)基因C端黏着斑定位序列(第798~1041位氨基酸),制备兔抗FAK多克隆抗体并鉴定。方法PCR法体外扩增FAK基因C端序列(2671~3402 bp),克隆至pCZN1,构建pCZN1-FAK重组表达载体,将重组表达载体转化到大肠杆... 详细信息

目的克隆、表达与纯化黏着斑激酶(FAK)基因C端黏着斑定位序列(第798~1041位氨基酸),制备兔抗FAK多克隆抗体并鉴定。方法PCR法体外扩增FAK基因C端序列(2671~3402 bp),克隆至pCZN1,构建pCZN1-FAK重组表达载体,将重组表达载体转化到大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)感受态细胞,用异丙基β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达;利用镍-次氮基三乙酸(Ni-NTA)金属鳌合亲和层析树脂进行蛋白纯化,并免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体;通过间接ELISA和Western blot法进行效价和特异性鉴定。结果成功构建pCZN1-FAK重组表达载体,FAK蛋白主要以包涵体形式表达。目的蛋白纯化后,制备的兔抗FAK多克隆抗体效价达1∶512000,且与外源和内源FAK蛋白发生特异性反应。结论成功克隆、表达与纯化FAK蛋白,制备兔抗FAK多克隆抗体,可用于内源FAK蛋白特异性检测。

关键词：人黏着斑激酶(FAK) 多克隆抗体

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IL-6通过激活JAK2/STAT3信号通路增强小鼠肺泡巨噬细胞的吞噬功能

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细胞与分子免疫学杂志 2024年第1期40卷 13-18页

作者：华梦晴高培宇方芳苏浩宇宋传旺蚌埠医学院检验医学院免疫学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室安徽蚌埠233030

目的探讨白细胞介素6(IL-6)对MH-S小鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响及其相关机制。方法脂多糖(LPS)经气道滴入激发构建小鼠急性肺损伤(ALI)模型,ELISA检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-6的含量。体外培养MH-S细胞,在信号转导子与转录激... 详细信息

目的探讨白细胞介素6(IL-6)对MH-S小鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响及其相关机制。方法脂多糖(LPS)经气道滴入激发构建小鼠急性肺损伤(ALI)模型,ELISA检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-6的含量。体外培养MH-S细胞,在信号转导子与转录激活子3 (STAT3)抑制剂Stattic(5μmol/L)存在与否的情况下,再加入IL-6(10 ng/mL~500 ng/mL)刺激6 h,加入荧光微球孵育2 h后,采用流式细胞术检测MH-S细胞吞噬荧光微球情况;Western blot法检测磷酸化的Janus激酶2(p-JAK2)、磷酸化的STAT3(p-STAT3)、肌动蛋白相关蛋白2(Arp2)、纤维型肌动蛋白(F-actin)的表达水平。结果鼻腔滴入LPS后,小鼠BALF中IL-6含量显著升高。随着IL-6刺激剂量的增加,MH-S细胞吞噬荧光微球的作用增强,Arp2、 F-actin蛋白的表达水平升高。100 ng/mL IL-6刺激MH-S细胞后,p-JAK2和p-STAT3蛋白的表达水平升高。阻断MH-S细胞STAT3信号后,IL-6促进细胞吞噬的效应完全消失,IL-6诱导的Arp2、 F-actin蛋白表达增加被抑制。结论 IL-6通过激活JAK2/STAT3信号通路促进MH-S细胞Arp2、 F-actin蛋白的表达增强吞噬功能。

关键词：白细胞介素6(IL-6) MH-S细胞吞噬功能 Janus激酶2(JAK2) 信号转导子与转录激活子3(STAT3) 肺泡巨噬细胞

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miR-30e-5p过表达促进结直肠癌细胞的增殖和迁移:基于下调PTEN激活CXCL12轴

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南方医科大学学报 2023年第7期43卷 1081-1092页

作者：魏可石纪雯肖雨寒王文锐杨清玲陈昌杰蚌埠医学院癌症转化医学安徽省重点实验室安徽蚌埠233000 蚌埠医学院肿瘤基础研究与临床检验诊断重点实验室安徽蚌埠233000 蚌埠医学院生物技术教研室安徽蚌埠233000 蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室安徽蚌埠233000

目的探讨miR-30e-5p通过PTEN/CXCL12轴对结直肠癌生物学活性的影响及机制。方法实验设置空白对照、阴性对照、miR-30e-5p mimics组、miR-30e-5p inhibitor组及共转染miR-30e-5p mimics+LV-PTEN(PTEN过表达)组或miR-30e-5p inhibitor+si-PTEN(PTEN干扰)组。生物信息学分析miR-30e-5p在结直肠癌组织和正常组织中的表达差异;qRT-PCR检测miR-30e-5p在肠上皮细胞和结直肠癌细胞中的差异表达;生物信息学和双荧光素酶实验预测并验证miR-30e-5p与PTEN的靶向关系;平板克隆、CCK-8增殖、细胞周期、细胞凋亡、划痕愈合和Transwell实验检测癌细胞的生物学活性;Western blotting检测癌细胞PTEN、CXCL12表达情况;小鼠体内实验检测miR-30e-5p(miR-NC、miR-30e-5p inhibitor组)对结直肠癌发生发展的影响。结果生信分析结直肠癌组织miR-30e-5p较癌旁组织表达升高(P<0.01);在癌细胞中miR-30e-5p较肠上皮细胞表达升高(P<0.01);双荧光素酶实验证实miR-30e-5p与PTEN存在靶向关系(P<0.05);相对于Control组,miR-30e-5p mimics能增强癌细胞增殖、转移能力并抑制凋亡(P<0.05),共转染miR-30e-5p mimics+LV-PTEN能够逆转miR-30e-5p mimics的作用(P<0.05);miR-30e-5p mimics能抑制PTEN表达,增强CXCL12表达(P<0.01);然而miR-30e-5p inhibitor与mimics效果相反,将细胞阻滞在G0/G1期,共转染miR-30e-5p inhibitor+si-PTEN能逆转miR-30e-5p inhibitor的作用(P<0.05);体内实验发现相对于miR-NC组,miR-30e-5p inhibitor可抑制肿瘤发生发展。结论miR-30e-5p过表达通过下调PTEN激活CXCL12轴,从而促进结直肠癌细胞的增殖和迁移。

关键词：结直肠癌 miR-30e-5p PTEN CXCL12

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敲低lncRNA CACNA1C-AS2促进上皮间质转化增强人食管癌细胞的增殖、侵袭和迁移

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细胞与分子免疫学杂志 2023年第3期39卷 249-257页

作者：秦玉萍曹通许颖蒋旭马佳禹莉蚌埠医学院肿瘤基础研究与临床检验诊断重点实验室安徽蚌埠233000 蚌埠医学院检验医学院输血学教研室安徽蚌埠233000

目的探讨钙电压门控通道亚基α1C反义RNA2(CACNA1C-AS2)通过调节上皮间质转化(EMT)对食管癌细胞恶性生物学行为的影响。方法通过癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析CACNA1C-AS2在癌旁组织和食管癌组织的表达;实时定量PCR检测食管癌细胞中... 详细信息

目的探讨钙电压门控通道亚基α1C反义RNA2(CACNA1C-AS2)通过调节上皮间质转化(EMT)对食管癌细胞恶性生物学行为的影响。方法通过癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析CACNA1C-AS2在癌旁组织和食管癌组织的表达;实时定量PCR检测食管癌细胞中CACNA1C-AS2 mRNA表达水平;在食管癌细胞中敲低和高表达CACNA1C-AS2后,采用噻唑蓝(MTT)法和细胞集落形成实验检测细胞的活力,TranswellTM小室法检测细胞的侵袭能力和纵向迁移能力,划痕愈合实验检测细胞的横向迁移能力,流式细胞术检测细胞的凋亡率;Western blot法检测神经钙黏素(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)和锌指转录因子snail 2(slug)蛋白表达。结果 CACNA1C-AS2在食管癌组织和细胞系中均低表达;敲低EC-9706细胞和Eca-109细胞中CACNA1C-AS2后,食管癌细胞的侵袭、迁移能力和细胞活力显著增强,细胞凋亡减少;N-cadherin、vimentin和slug表达上调。过表达CACNA1C-AS2则结果相反。结论 CACNA1C-AS2通过促进EMT增强食管癌细胞的增殖、侵袭和迁移。

关键词：食管癌长链非编码RNA(lncRNA) 钙电压门控通道亚基α1C反义RNA2(CACNA1C-AS2) 上皮间质转化(EMT)

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细胞与分子免疫学杂志 2023年第1期39卷 15-20页

作者：马丽马童童周文静李娟李玉云徐慧蚌埠医学院肿瘤基础研究与临床检验诊断重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院检验医学院安徽蚌埠233030 安徽省亳州市人民医院检验科安徽亳州236800 蚌埠医学院检验医学院输血教研室安徽蚌埠233030

目的探讨姐妹染色体过早分离基因5黏附相关因子B(PDS5B)对A549肺癌细胞株生物学功能的影响及可能的分子机制。方法沉默或过表达A549人肺癌细胞的PDS5B后,噻唑蓝(MTT)法及集落形成实验检测肺癌细胞的增殖情况;划痕实验及TranswellTM检测... 详细信息

目的探讨姐妹染色体过早分离基因5黏附相关因子B(PDS5B)对A549肺癌细胞株生物学功能的影响及可能的分子机制。方法沉默或过表达A549人肺癌细胞的PDS5B后,噻唑蓝(MTT)法及集落形成实验检测肺癌细胞的增殖情况;划痕实验及TranswellTM检测细胞迁移的情况;Western blot法检测A549细胞PDS5B及无翅基因5a(Wnt5a)的蛋白表达;共同转染PDS5B小干涉RNA(siRNA)及Wnt5a siRNA,TranswellTM检测细胞迁移的情况。结果与转染阴性对照组相比,转染PDS5B siRNA后,PDS5B蛋白表达明显下降且A549细胞增殖能力、细胞集落形成率、迁移能力均明显提高,Wnt5a的表达升高;过表达PDS5B后,则结果相反;共转实验显示Wnt5a可以抵抗PDS5B对A549细胞的抑制作用。结论PDS5B通过下调Wnt5a表达抑制肺癌细胞增殖。

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紫菀酮对小鼠脊髓损伤后神经元凋亡的影响

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中国医学科学院学报 2023年第5期45卷 703-712页

作者：许轶博孙洋肖林雨朱国庆宋雪胡建国齐琦蚌埠医学院基础医学院组织与胚胎学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院第一附属医院炎症相关性疾病基础与转化研究安徽省重点实验室安徽蚌埠233000 蚌埠医学院第一附属医院康复科安徽蚌埠233000 蚌埠医学院第一附属医院检验科安徽蚌埠233000 蚌埠医学院第一附属医院中心实验室安徽蚌埠233000

目的探讨紫菀酮(SHI)对脊髓损伤(SCI)小鼠运动功能的影响及可能的分子机制。方法采用C57BL/6小鼠构建SCI模型,分为模型组(SCI组)和SHI药物治疗组(SCI+SHI组),假手术小鼠为对照组。采用Basso小鼠量表(BMS)评分评估SCI小鼠运动功能恢复... 详细信息

目的探讨紫菀酮(SHI)对脊髓损伤(SCI)小鼠运动功能的影响及可能的分子机制。方法采用C57BL/6小鼠构建SCI模型,分为模型组(SCI组)和SHI药物治疗组(SCI+SHI组),假手术小鼠为对照组。采用Basso小鼠量表(BMS)评分评估SCI小鼠运动功能恢复情况,采用HE染色和Nissl染色观察SCI小鼠脊髓组织纤维化和神经元的形态学变化,采用免疫荧光染色分析脊髓组织中神经元凋亡情况。体外培养小鼠海马神经元HT22细胞,分为肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导组和SHI药物治疗组,采用Western blot检测各组细胞凋亡相关蛋白的表达。利用网络药理学、基因本体和京都基因与基因组百科全书富集分析预测SHI促进SCI功能恢复的可能分子靶点和信号通路,并通过体内外实验对其分子机制进行验证。结果与SCI组比较,SCI+SHI组小鼠BMS评分在第21、28、35、42天显著升高(P=0.003、P=0.004、P=0.023、P=0.007),脊髓组织纤维化面积显著降低(P=0.021),神经元存活数量显著增加(P=0.001),活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved-Caspase3)表达显著降低(P=0.017)。与TNF-α组比较,SHI组cleaved-Caspase3、Bax蛋白表达水平显著降低(P=0.010、P=0.001),而Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P=0.001)。生物信息学分析结果显示SHI改善SCI小鼠运动功能可能与磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路相关。体内和体外实验检测结果显示,SHI可抑制SCI小鼠或TNF-α诱导的HT22细胞中PI3K和Akt的磷酸化水平(P均<0.05),而胰岛素样生长因子-1干预后HT22细胞凋亡数量显著高于SHI组(P=0.003)。结论 SHI可能通过PI3K/Akt信号通路抑制神经元凋亡,从而促进SCI小鼠运动功能恢复。

关键词：脊髓损伤紫菀酮神经元凋亡磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B

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低分子肝素联合普通肝素在下肢深静脉血栓形成导管直接溶栓中的应用

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中华全科医学 2023年第4期21卷 568-571页

作者：王颖王孝高官泽宇 Ayoade Philip Adegoke 高涌余朝文陈世远卢冉蚌埠医学院检验医学院生化与分子生物学教研室安徽蚌埠233000 蚌埠医学院第一附属医院血管外科安徽蚌埠233004

目的探索不同抗凝方案在下肢深静脉血栓形成(deep venous thrombosis, DVT)导管直接溶栓治疗(catheter-directed thrombectomy, CDT)过程中的溶栓疗效。方法将2021年3月—2022年2月蚌埠医学院医院第一附属医院血管外科收治的35例下肢... 详细信息

目的探索不同抗凝方案在下肢深静脉血栓形成(deep venous thrombosis, DVT)导管直接溶栓治疗(catheter-directed thrombectomy, CDT)过程中的溶栓疗效。方法将2021年3月—2022年2月蚌埠医学院医院第一附属医院血管外科收治的35例下肢DVT患者,采用随机数字表法分为低分子肝素(low molecular weight heparin, LMWH)+小剂量普通肝素(unfractionated heparin, UFH)脉冲应用组(观察组,18例)及单独低分子肝素组(对照组,17例),通过动态监测血浆D-二聚体来评估血栓溶解情况,治疗完成后通过测量手术前后下肢周径的差值及下肢静脉通畅评分分析疗效。结果观察组与对照组的血浆D-二聚体在溶栓过程中(第3天)升高情况为(78.26±11.57)mg/L、(66.06±12.31) mg/L(t=3.020,P=0.005);溶栓后患肢膝下15 cm周径差值为(1.43±0.34)cm、(2.48±0.63)cm(t=6.185,P<0.001);患肢下肢静脉通畅评分为(5.34±0.90)分、(7.29±1.19)分(t=5.235,P<0.001);尿激酶用量为(302.22±20.45)万U、(381.17±27.59)万U(t=9.656,P<0.001),上述数据对比差异均有统计学意义。结论低分子肝素+小剂量普通肝素脉冲在DVT的CDT中疗效是确切的、安全的,可在下肢DVT临床治疗中推广应用。

关键词：深静脉血栓形成溶栓肝素抗凝导管直接溶栓

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新型结核疫苗研究现状及发展趋势

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中国生物制品学杂志 2024年

作者：郭方正李柏青许涛汪洪涛蚌埠医学院检验医学院检验医学实验中心蚌埠医学院慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室蚌埠医学院检验医学院免疫学教研室蚌埠医学院检验医学院临床检验诊断学教研室

结核病（tuberculosis,TB）是由结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,Mtb）引起的慢性消耗性传染性疾病，其发病率及致死率呈逐年上升趋势，已成为全球公共卫生系统的一大挑战。目前，用于预防TB唯一有效的疫苗卡介苗（Bacillus C... 详细信息

结核病（tuberculosis,TB）是由结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,Mtb）引起的慢性消耗性传染性疾病，其发病率及致死率呈逐年上升趋势，已成为全球公共卫生系统的一大挑战。目前，用于预防TB唯一有效的疫苗卡介苗（Bacillus Calmette-Guérin,BCG）对成人的保护非常有限，因此，加快新型结核疫苗的研发是防治TB的当务之急。本文就进入临床试验阶段的TB候选疫苗的研究进展作一综述，为后续疫苗研发和TB的防控提供参考。

关键词：结核分枝杆菌结核病卡介苗结核疫苗

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