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IL-17/IL-22在结核耐热性抗原和磷酸化抗原扩增极化后的表达及意义

中华全科医学 2021年第4期19卷 636-638,697页

作者：盛玲玲金辉杨再兴李柏青台州市第一人民医院检验科浙江台州318020 蚌埠医学院免疫学教研室安徽蚌埠233030 台州市第一人民医院消化内科浙江台州318020

目的γδT细胞在结核耐热性抗原(Mtb-HAg)和磷酸化抗原(HDMAPP)培养扩增后,阐明Mtb-HAg和HDMAPP在细胞因子(ck:IL-1β、TGF-β和IL-23)极化状态下,IL-17和IL-22表达情况。方法密度梯度离心法获取外周血单个核细胞(PBMC),用RPMI1640培养... 详细信息

目的γδT细胞在结核耐热性抗原(Mtb-HAg)和磷酸化抗原(HDMAPP)培养扩增后,阐明Mtb-HAg和HDMAPP在细胞因子(ck:IL-1β、TGF-β和IL-23)极化状态下,IL-17和IL-22表达情况。方法密度梯度离心法获取外周血单个核细胞(PBMC),用RPMI1640培养基培养。实验组:分Mtb-HAg、HDMAPP、全菌抗原3组,各组分别加入(IL-1β、TGF-β)培养3 d加入rIL-2继续培养,第9天加入IL-23培养至12 d;对照组:分Mtb-HAg、HDMAPP、全菌抗原3组,培养3 d加入rIL-2继续培养至12 d。各组最终扩增为富含效应性γδT细胞的细胞群,收集细胞PMA/Ionomycin和Monensin刺激培养6 h,检测Tγδ17和Tγδ22细胞亚群进行分析。结果各组中γδT细胞均能产生IL-17和IL-22,Mtb-HAg+ck组较Mtb-HAg组及HDMAPP+ck组较HDMAPP组中γδT细胞产生IL-17细胞比例上升(均P<0.05),且IL-17主要由Vδ2亚群产生,而各极化实验组中γδT细胞产生IL-22细胞比例比较差异无统计学意义(均P>0.05)。结论 Mtb-HAg、HDMAPP刺激培养PBMC,在IL-1β、TGF-β和IL-23极化状态下,可诱导γδT细胞产生更多IL-17,而对诱导IL-22无效。

关键词：结核病结核耐热性抗原磷酸化抗原白细胞介素17 白细胞介素22

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舒尼替尼调控miR-143对人肾癌细胞增殖、侵袭的影响

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蚌埠医学院学报 2021年第5期46卷 566-569页

作者：高迎新应冲涛崔迪梅传忠蚌埠医学院临床检验诊断学实验中心安徽蚌埠233030 安徽省蚌埠市第三人民医院检验科 233000 蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室安徽蚌埠233030

目的:探讨miR-143在肾癌细胞中的作用、舒尼替尼对miR-143表达的影响及与细胞增殖、侵袭的关系。方法:培养人肾癌786-O细胞株,分为对照组、miR-143组、舒尼替尼组、共同作用组。对照组细胞转染阴性对照序列,miR-143组细胞转染miR-143序... 详细信息

目的:探讨miR-143在肾癌细胞中的作用、舒尼替尼对miR-143表达的影响及与细胞增殖、侵袭的关系。方法:培养人肾癌786-O细胞株,分为对照组、miR-143组、舒尼替尼组、共同作用组。对照组细胞转染阴性对照序列,miR-143组细胞转染miR-143序列,舒尼替尼组细胞用舒尼替尼处理48 h,共同作用组细胞转染miR-143序列并用舒尼替尼处理48 h。MTT法检测细胞的增殖,Transwell检测其侵袭,qRT-PCR检测miR-143RNA表达水平,Western blotting检测DNA甲基转移酶3B(DNMT3B)、p-Akt-S473蛋白表达量。结果:成功构建稳定、高表达miR-143的人肾癌786-O细胞株,miR-143转染组细胞miR-143表达量增高(P<0.01)。舒尼替尼作用于786-O细胞48 h的IC50值为6μmol/L,选取该值作为后续实验用药浓度。786-O细胞经舒尼替尼作用48 h后miR-143表达量升高(P<0.01)。miR-143组和舒尼替尼组细胞存活率、细胞侵袭数、DNMT3B和p-AktS473蛋白表达量均低于对照组,且高于共同作用组,差异均有统计学意义(P<0.05~P<0.01)。结论:miR-143可以降低786-O细胞增殖、侵袭能力,这可能与miR-143降低DNMT3B、p-Akt的表达有关。舒尼替尼可能通过上调miR-143水平抑制786-O细胞的增殖与侵袭。

关键词：肾细胞癌舒尼替尼 miR-143 增殖侵袭

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重组人内抑素对兔耳增生性瘢痕成纤维细胞内钙离子浓度的影响

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蚌埠医学院学报 2020年第2期45卷 174-177,180页

作者：黄天宇龚永芳王晶李洋杨鑫雨项平蚌埠医学院临床医学院安徽蚌埠233030 蚌埠医学院人体解剖学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院医学检验学院安徽蚌埠233030 蚌埠医学院第一附属医院中心实验室安徽蚌埠233004

目的:通过探讨重组人内抑素(rhEndostatin)促进兔耳增生性瘢痕成纤维细胞(HSFs)凋亡的部分机制,为临床上药物治疗增生性瘢痕(HS)提供实验依据。方法:取新西兰大耳兔6只制备瘢痕模型。以HSFs为研究对象,应用激光共聚焦显微镜(CLSM)结合Fl... 详细信息

目的:通过探讨重组人内抑素(rhEndostatin)促进兔耳增生性瘢痕成纤维细胞(HSFs)凋亡的部分机制,为临床上药物治疗增生性瘢痕(HS)提供实验依据。方法:取新西兰大耳兔6只制备瘢痕模型。以HSFs为研究对象,应用激光共聚焦显微镜(CLSM)结合Fluo-4/AM(Ca2+荧光指示剂)检测在Hanks与D-Hanks液中(有、无细胞外钙)rhEndostatin(100μg/mL)对HSFs胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)的影响。结果:当细胞外液为Hanks液时,rhEndostatin(100μg/mL)可使HSF胞质内[Ca2+]i水平持续增加,当持续10 s给予rhEndostatin处理后,HSFs胞内[Ca2+]i可迅速增加达峰顶再缓慢下降,在停止药物处理后,HSFs胞内[Ca2+]i继续下降,停止处理约50 s后,胞内[Ca2+]i尚未至基线水平;而当细胞处于D-Hanks液中时,rhEndostatin对HSFs胞质内[Ca2+]i无明显影响。结论:rhEndostatin可通过干扰HSFs胞内钙离子稳态,推动胞外Ca2+内流导致胞内钙超载来诱导HSFs凋亡。

关键词：增生性瘢痕内抑素钙离子激光共聚焦显微镜兔

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气道滴注与腹腔注射脂多糖建立小鼠急性肺损伤模型的效果比较

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山西医科大学学报 2020年第11期51卷 1206-1210页

作者：顾玮张丽刘国权蚌埠医学院检验医学系生化与分子生物学教研室蚌埠233030 安徽省癌症转化医学重点实验室

目的比较脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)气道滴注法和腹腔注射法建立的小鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)模型的效果,为肺内炎症的研究提供实验模型。方法8周龄C57BL/6J小鼠36只,随机分为两组:对照组(PBS)和LPS组,两组分别采用气... 详细信息

目的比较脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)气道滴注法和腹腔注射法建立的小鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)模型的效果,为肺内炎症的研究提供实验模型。方法8周龄C57BL/6J小鼠36只,随机分为两组:对照组(PBS)和LPS组,两组分别采用气道滴注和腹腔注射处理。分别采用气道滴注和腹腔注射LPS建立ALI模型。两组小鼠分别采用气道滴注法将LPS(5 mg/kg)或等量体积PBS滴注小鼠气管中;或分别采用腹腔注射法将LPS(5 mg/kg)或等量体积PBS注入小鼠腹腔。气道滴注法给药后4 h和腹腔注射法给药后24 h,分别收集支气管肺泡灌洗液(BALF)检测肺生化指标,检测肺湿/干质量(W/D)比值,观察肺组织病理形态,检测肺组织内炎性因子的表达和肺呼吸功能指标。结果气道滴注LPS组的小鼠肺泡灌洗液总蛋白浓度明显高于腹腔注射LPS组(P<0.05)。肺组织病理切片HE染色显示,LPS组气道滴注诱导的肺损伤较腹腔注射所导致的肺中性粒细胞的浸润增多,肺泡壁增厚,红细胞大量渗出。RT-PCR检测肺组织中炎性因子的表达,与腹腔注射LPS组相比,气道滴注LPS组的ICAM-1和IL-6的mRNA表达量显著增加(P<0.01)。呼吸机检测小鼠的肺功能指标,气道滴注LPS组小鼠的呼吸系统弹性明显高于腹腔注射LPS组,呼吸系统的阻力明显低于腹腔注射LPS组(P<0.05)。结论结合肺组织的生化结果和病理组织切片的结果表明,小鼠ALI模型的建立,气道滴注法优于腹腔注射法。

关键词：急性肺损伤脂多糖气道滴注腹腔注射

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三氧化二砷对小鼠B16细胞p53、Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

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滨州医学院学报 2019年第6期42卷 411-414页

作者：黄桦朱红高洁蚌埠医学院检验医学院生化与分子生物学教研室蚌埠233030 蚌埠医学院第一附属医院儿科蚌埠医学院第一附属医院检验科

目的探讨三氧化二砷(As2O3)对小鼠B16细胞的生长抑制作用,对p53、Bax、Bcl-2蛋白表达的影响,为临床治疗恶性黑素瘤提供理论和实验依据。方法将不同剂量的As2O3作用于小鼠B16细胞后,吉姆萨染色和荧光染色观察B16细胞的凋亡变化;Western b... 详细信息

目的探讨三氧化二砷(As2O3)对小鼠B16细胞的生长抑制作用,对p53、Bax、Bcl-2蛋白表达的影响,为临床治疗恶性黑素瘤提供理论和实验依据。方法将不同剂量的As2O3作用于小鼠B16细胞后,吉姆萨染色和荧光染色观察B16细胞的凋亡变化;Western blot检测p53、Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果染色后镜下可见As2O3可致B16细胞出现凋亡现象;As2O3能诱导p53、Bax蛋白的表达,抑制Bcl-2蛋白的表达(P<0.01)。结论As2O3能诱导B16细胞凋亡,这一现象可能是通过诱导B16细胞的p53、Bax蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下降来实现。

关键词： B16细胞三氧化二砷细胞凋亡 p53

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运动诱发电位和BBB评分在大鼠脊髓损伤功能评价中的相关性研究

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中华解剖与临床杂志 2019年第3期24卷 299-304页

作者：马善峰马奎吕合作蚌埠医学院生理学教研室安徽省蚌埠市233030 安徽省第二人民医院神经外科合肥230041 蚌埠医学院第一附属医院检验科安徽省蚌埠市233004

目的探讨大鼠脊髓损伤功能评价指标运动诱发电位( MEP)和 Basso-Beattie-Bresnahan (BBB)评分的相关性.方法成年雌性SD大鼠16只,采用数字表法随机分为对照组和实验组,每组8只.对照组只施行手术,不给予外力打击.实验组应用PSI-IH装置... 详细信息

目的探讨大鼠脊髓损伤功能评价指标运动诱发电位( MEP)和 Basso-Beattie-Bresnahan (BBB)评分的相关性.方法成年雌性SD大鼠16只,采用数字表法随机分为对照组和实验组,每组8只.对照组只施行手术,不给予外力打击.实验组应用PSI-IH装置复制脊髓损伤模型.记录并分析损伤前以及损伤后3 h、1 d、3 d、1周、2周、3周、4周、5周、6周大鼠脊髓运动诱发电位(scMEP)和肌肉运动诱发电位(mMEP),同时采用BBB评分对大鼠后肢运动功能进行评定. 6周后观察大鼠脊髓组织学结构变化.结果实验组大鼠脊髓损伤后3 h scMEP波幅减小,为正常波幅的32.69% ± 0.83% ,2周后为正常波幅的52.93% ± 2.23%并处于稳定状态,但均低于对照组( P值均<0.01);损伤后3 h mMEP波形消失,1 d后恢复至正常波幅的1.16% ± 0.17% ,3 d后波幅明显恢复,4周后达正常波幅的48.20% ± 3.70%并处于稳定状态,但均低于对照组( P值均<0.01).实验组大鼠脊髓损伤后3 h和1 d,所有大鼠BBB评分均为0分,3 d后评分(1.38 ± 0.52)分,4周后评分(11.50 ± 0.93)分,达到稳定状态,但均低于对照组(P值均<0.01).实验组大鼠脊髓损伤后3 h^6周,scMEP与BBB评分均为显著相关(r值为0.732~0.908,P值均<0.05).实验组大鼠脊髓损伤后1~6周mMEP与BBB评分呈中度至高度相关(r值为0.718~0.951,P值均<0.05).对照组大鼠以上各指标均无显著变化.结论大鼠脊髓损伤发生后,scMEP、mMEP和BBB评分三个脊髓功能指标会先后顺序恢复,而且 scMEP、 mMEP 与 BBB 评分均存在着一定的相关性.大鼠脊髓损伤后, scMEP、mMEP是较BBB评分更为灵敏的脊髓功能评价指标.

关键词：脊髓损伤诱发电位,运动行为学检测 Basso-Beattie-Bresnahan评分模型,动物大鼠

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LBL-PBL联合教学法在医学免疫学教学中的探究

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健康必读 2019年第15期 198-199页

作者：华梦晴郭术俊宋传旺蚌埠医学院医学检验系免疫学教研室安徽蚌埠233030

医学免疫学因内容抽象、语言晦涩难懂等特点导致教学过程中很难让学生准确扎实的掌握授课内容.为改善医学免疫学教学效率低、难度大的现状,我校在医学免疫学课程教学过程中开展PBL(Problem-Based learning)教学辅助LBL(lecture-based ... 详细信息

医学免疫学因内容抽象、语言晦涩难懂等特点导致教学过程中很难让学生准确扎实的掌握授课内容.为改善医学免疫学教学效率低、难度大的现状,我校在医学免疫学课程教学过程中开展PBL(Problem-Based learning)教学辅助LBL(lecture-based learning)教学方法改革的试验与研究.从试验涉及教学内容的考核及问卷调查结果来看,LBL-PBL联合教学有助于提升学生对知识的掌握程度、分析能力及自主思考能力,提升医学免疫学教学质量.

关键词： LBL PBL 医学免疫学教学方法

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《肿瘤的免疫逃逸》微课的设计制作体会

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牡丹江医学院学报 2019年第2期40卷 149-152页

作者：吴凤娇钱中清宋传旺蚌埠医学院医学检验系免疫学教研室安徽蚌埠233030

《医学免疫学》作为一门前沿学科,是医学生培养体系中连接基础医学和临床医学的重要纽带,但是由于免疫学知识抽象难懂及近年来教学时数的缩减,传统教学方法的效果差强人意。随着智能移动软件的普及和碎片化移动阅读的兴起,微课已成为免... 详细信息

《医学免疫学》作为一门前沿学科,是医学生培养体系中连接基础医学和临床医学的重要纽带,但是由于免疫学知识抽象难懂及近年来教学时数的缩减,传统教学方法的效果差强人意。随着智能移动软件的普及和碎片化移动阅读的兴起,微课已成为免疫学教学领域的热点之一,本文将以《肿瘤的免疫逃逸》微课的设计和制作为例,探讨基于翻转课堂的《医学免疫学》微课的设计制作体会。

关键词：医学免疫学微课翻转课堂肿瘤的免疫逃逸

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利用混合式教学提升生物化学教学质量的探索

利用混合式教学提升生物化学教学质量的探索

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华东六省一市生物化学与分子生物学会联盟2019年学术与教学交流会

作者：黄桦孙钰武文娟郭俣张玉心夏俊蚌埠医学院检验医学院生物化学与分子生物学教研室

随着互联网技术的发展,课堂教学与网络教学互相融合、互相影响,从根本上改变了传统教学的多个方面。生物化学是医学教育各专业重要的基础课之一,其教学内容复杂抽象,不易理解,涉及面广,信息量大,知识点多,综合性强;且与其他学科交叉多,... 详细信息

随着互联网技术的发展,课堂教学与网络教学互相融合、互相影响,从根本上改变了传统教学的多个方面。生物化学是医学教育各专业重要的基础课之一,其教学内容复杂抽象,不易理解,涉及面广,信息量大,知识点多,综合性强;且与其他学科交叉多,融入了多门学科的理论和技术;同时教学与科研结合紧密,课程内容不断发展。所以学生普遍反应学习难度大、理解困难、枯燥乏味。正是基于以上问题,"虚实结合"、"线上线下"的混合式教学更适合于生物化学教育。首先,学生经过大学的基础教育,已经具备了初步的自学能力和科学素养。其次,医学教育的实践性很强,混合式教学通过网络平台的及时反馈,打通了理论与实践的隔阂。最后,医学中的许多问题需要进行交流共议,进而在讨论中加以解决,混合式教学在这方面作用突出。我们将混合式教学分为教学准备、教学实施和综合评价三个阶段。在教学准备阶段,教师按照各专业的培养目标制定教学大纲,以教学大纲为依据确定每个知识点的教学任务,依照教学任务进行教学设计。教师还可以根据教学任务,为学生提供一些课业指导和学习资料。教学实施阶段分为课前自学、交流协作、成果汇报等三部分。课前自学以我校生化精品资源共享课和生化MOOC平台为依托,结合人卫慕课、中国大学MOOC、中国知网等网络教育平台和教科书。交流合作则是通过小组协作讨论的方式来解决相应问题。教师将学生分为由4-5人组成的学习小组,确定其角色,每轮混合式教学结束后角色互换。成果汇报是要求学习者将自主探究、小组协作过程中的收获进行收集整理后,在课堂上向大家汇报,交流各自的学习心得和学习体会。整个综合评价过程都采用形成性评价,包括平台测试评价、学生自我评价、小组成员评价、其他小组评价和教师评价等几部分,以期能够最大限度地反映学生的真实表现。我们选取了糖尿病、高脂血症、苯丙酮尿症、阿尔茨海默病等四个项目进行混合式教学的改革探索。80%以上的学生认为通过混合式教学,对所学知识的掌握更加全面深入长久,自学能力和沟通能力都有了进一步提高。将混合式教学引入生物化学的教学实践后,学生和教师的能力都有所提高。

关键词：混合式教学生物化学教学小组协作

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CD19、CD56在急性髓系白血病RUNX1-RUNX1T1^+突变患者中的表达及其临床意义

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中国实验血液学杂志 2018年第3期26卷 727-732页

作者：胡忠利张凤黄保军潘少君蚌埠医学院第一附属医院血液科安徽蚌埠230003 安徽医科大学基础医学院免疫学教研室安徽合肥2300003 蚌埠医学院检验系安徽蚌埠233003

目的:探讨急性非M3髓细胞性白血病(AML non-M3)患者骨髓RUNX1-RUNX1T1表达水平的临床意义,了解表达淋系抗原CD19、CD56的RUNX1-RUNX1T1^+的AML的生物学特征及其对初次诱导缓解率和预后的影响。方法:应用实时荧光定量聚合酶链反应(RQ-PCR... 详细信息

目的:探讨急性非M3髓细胞性白血病(AML non-M3)患者骨髓RUNX1-RUNX1T1表达水平的临床意义,了解表达淋系抗原CD19、CD56的RUNX1-RUNX1T1^+的AML的生物学特征及其对初次诱导缓解率和预后的影响。方法:应用实时荧光定量聚合酶链反应(RQ-PCR)检测200例初诊AML(non-M3)患者骨髓RUNX1-RUNX1T1表达水平,用流式细胞术检测AML的淋系抗原表达水平,分析初次诱导缓解率(CR1)和总生存率(OS)的关系;对照分析RUNX1-RUNX1T1^+患者中CD56^+和CD56^-以及CD19^+和CD19^-患者在CR1和OS的区别。结果:在RUNX1-RUNX1T1^+的AML患者中,初诊时CD56^+患者具有较低的CR1(P<0.05)。CD19^+患者CR1较CD19^-患者高(P<0.05)。CD56^+患者的OS率显著低于CD56^-患者(P<0.05)。CD19^+患者的OS与CD19^-患者的OS率无显著差异。结论:RUNX1-RUNX1T1^+的AML患者中骨髓CD56^+提示预后不良,CD19^+仅与CR1相关,与OS无关。

关键词：急性髓细胞性白血病 RUNX1-RUNX1T1 CD19 CD56 总生存率

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