检索结果-内蒙古大学图书馆

中国中西医结合杂志 2011年第10期31卷 1398-1400,1430页

作者：石莹夏俊杨同怀张玉心陈治文安徽蚌埠医学院生化与分子生物学教研室安徽233030

目的探讨三氧化二砷(As2O3)对小鼠B16黑色素瘤肺转移的抑制作用。方法 B16细胞静脉接种C57BL/6J小鼠,观察腹腔注射As2O3对小鼠肺组织重量及肿瘤肺转移结节的影响;HE染色、Ⅷ-RAg免疫组化染色观察肿瘤肺转移结节中微血管密度;CellTiter 9... 详细信息

目的探讨三氧化二砷(As2O3)对小鼠B16黑色素瘤肺转移的抑制作用。方法 B16细胞静脉接种C57BL/6J小鼠,观察腹腔注射As2O3对小鼠肺组织重量及肿瘤肺转移结节的影响;HE染色、Ⅷ-RAg免疫组化染色观察肿瘤肺转移结节中微血管密度;CellTiter 96 Aqueous One试剂检测细胞黏附率。结果 As2O3能显著抑制小鼠B16黑色素瘤的肺转移。实验组和对照组肺组织重量分别为(0.139±0.013)g和(0.353±0.070)g;肺转移结节数分别为(20.42±1.78)个和(61.42±3.09)个;每个视野的微血管数分别为(3.25±0.75)个和(7.50±1.45)个;两组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。As2O3对细胞黏附率有显著影响,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 As2O3具有显著的抗肿瘤转移效应,可能与其抑制血管生成及增强细胞黏附有关。

关键词：三氧化二砷 B16黑色素瘤细胞肿瘤转移血管生成细胞黏附

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葡萄籽原花青素下调miR-27a表达抑制胰腺癌细胞生长

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中南大学学报（医学版） 2015年第1期40卷 46-52页

作者：马佳方斌斌曾凡鹏庞海杰马聪夏俊蚌埠医学院生化与分子生物学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院临床检验诊断学实验室安徽蚌埠233030

目的:探讨葡萄籽原花青素(grape seed proanthocyanidins extract,GSPE)抑制胰腺癌细胞生长的作用及其可能机制。方法:体外培养人胰腺癌As PC-1细胞,分别采用MTT,Annexin V-FITC/PI双染,Transwell迁移实验等方法检测GSPE对As PC-1细胞... 详细信息

目的:探讨葡萄籽原花青素(grape seed proanthocyanidins extract,GSPE)抑制胰腺癌细胞生长的作用及其可能机制。方法:体外培养人胰腺癌As PC-1细胞,分别采用MTT,Annexin V-FITC/PI双染,Transwell迁移实验等方法检测GSPE对As PC-1细胞的增殖抑制、诱导凋亡及抑制细胞迁移的作用;mi RNA real-time RT-PCR和Western印迹检测GSPE对As PC-1细胞mi R-27a及其下游基因FOXO1表达的影响。转染mi R-27a抑制剂,检测GSPE通过下调mi R-27a调控As PC-1细胞生长、迁移的作用。结果:不同浓度(25,50,75,100μg/m L)GSPE对As PC-1细胞的增殖抑制率分别为8.36%,17.36%,50.42%和60.73%,GSPE≥50μg/m L时,增殖抑制率均显著高于对照组(P<0.05)。对照组及25,50,75μg/m L GSPE组的细胞早期凋亡率依次分别为2.5%,20.0%,42.3%,64.3%。75μg/m L GSPE组的细胞迁移率低于对照组,细胞内mi R-27a的表达亦显著低于对照组(P<0.01)。与对照组相比,mi R-27a抑制剂组、GSPE组、mi R-27a抑制剂+GSPE组的细胞增殖抑制率均显著升高(P<0.01),细胞迁移能力均显著降低(P<0.01),FOXO1蛋白表达增加;且共同处理组上述作用最明显,高于两者单独处理组。结论:GSPE可能通过下调mi R-27a表达来抑制胰腺癌As PC-1细胞生长和迁移。

关键词：葡萄籽原花青素 miR-27a FOXO1 胰腺癌

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内毒素血症诱导的HIV共受体CXCR4表达的下调

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现代预防医学 2008年第10期35卷 1897-1899页

作者：杨清玲石莹陈昌杰章菊王惠 233000 蚌埠医学院生化与分子生物学教研室蚌埠医学院生化与分子生物学教研室蚌埠

[目的]细菌LPS在体内可抑制单核细胞内HIV的复制。目的是为了检测LPS对HIV感染的共受体CX-CR4表达的影响。[方法]24只小鼠静脉注射LPS(10mg/kg),通过流式细胞仪检测CD4淋巴细胞表面的CXCR4蛋白表达水平,RT-PCR检测CXCR4的mRNA表达。[结... 详细信息

[目的]细菌LPS在体内可抑制单核细胞内HIV的复制。目的是为了检测LPS对HIV感染的共受体CX-CR4表达的影响。[方法]24只小鼠静脉注射LPS(10mg/kg),通过流式细胞仪检测CD4淋巴细胞表面的CXCR4蛋白表达水平,RT-PCR检测CXCR4的mRNA表达。[结果]LPS可诱导外周血单个核细胞CXCR4的mRNA升高,但可降低细胞表面的蛋白表达(P﹤0.001)。[结论]体内全血刺激,LPS下调PBMC表面的CXCR4表达(P﹤0.05)。因此,暴露于微生物的单个核细胞可通过HIV共受体效应而抵抗HIV的病毒复制。

关键词：脂多糖 CXCR4 HIV

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原花青素上调let-7a抑制胰腺癌AsPC-1细胞生长及迁移

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南方医科大学学报 2015年第8期35卷 1110-1115页

作者：马佳方斌斌马聪庞海杰曾凡鹏夏俊蚌埠医学院生化与分子生物学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院临床检验诊断学实验中心安徽蚌埠233030

目的探讨原花青素是否通过上调let-7a表达而抑制胰腺癌细胞生长及迁移。方法体外培养人胰腺癌As PC-1细胞,原花青素处理细胞后,分别用MTT法、Annexin V-FITC/PI双染及Transwell迁移等实验检测细胞增殖率、细胞凋亡率及细胞迁移能力的改... 详细信息

目的探讨原花青素是否通过上调let-7a表达而抑制胰腺癌细胞生长及迁移。方法体外培养人胰腺癌As PC-1细胞,原花青素处理细胞后,分别用MTT法、Annexin V-FITC/PI双染及Transwell迁移等实验检测细胞增殖率、细胞凋亡率及细胞迁移能力的改变;利用mi RNA实时逆转录PCR检测细胞内let-7a表达变化。As PC-1细胞转染let-7a mimics后,MTT法、Transwell迁移实验分别检测细胞增殖率及细胞迁移能力的改变。结果与对照组相比,原花青素处理As PC-1细胞后,细胞增殖率、细胞迁移能力随着原花青素浓度升高而下降,而细胞凋亡率随着药物浓度升高而逐渐升高。与对照组相比,原花青素处理细胞后,let-7a的表达升高。通过脂质体转染let-7a mimics后,细胞的增殖率及迁移能力均低于对照组,且let-7a mimics与原花青素共同作用后,细胞增殖及迁移明显低于let-7a mimics和原花青素单独作用组。结论原花青素具有抑制胰腺癌细胞生长、迁移,及诱导细胞凋亡的作用。原花青素可能是通过上调let-7a表达,从而抑制胰腺癌细胞的生长及迁移。

关键词：原花青素 let-7a 胰腺癌细胞

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葡萄籽提取物通过抑制Survivin的表达而抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖

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中国药理学通报 2009年第7期25卷 955-959页

作者：陈昌杰刘臣彪杨清玲章菊藤风猛蚌埠医学院生化与分子生物学教研室临床检验诊断学实验中心安徽蚌埠233030

目的观察GSE对乳腺癌细胞增殖的影响及其作用的分子信号途径,为寻找新的乳腺癌临床治疗药物奠定一定的理论基础。方法倒置显微镜观察不同浓度GSE作用后MCF-7细胞生长的形态学变化;PI单染后流式细胞仪检测MCF-7细胞的周期改变;半定量RT-... 详细信息

目的观察GSE对乳腺癌细胞增殖的影响及其作用的分子信号途径,为寻找新的乳腺癌临床治疗药物奠定一定的理论基础。方法倒置显微镜观察不同浓度GSE作用后MCF-7细胞生长的形态学变化;PI单染后流式细胞仪检测MCF-7细胞的周期改变;半定量RT-PCR观察Survivin mRNA的表达;Western blot检测Survivin和Caspase-3的蛋白表达变化;荧光素酶试剂盒检测Survivin核心启动子的活性;半定量RT-PCR观察与Survivin核心启动子活性相关的转录因子Sp1、E2F-1和HIF-1α的表达变化。结果经GSE作用24h后,MCF-7细胞形态发生改变,细胞变圆、脱壁,并聚集成团;细胞生长周期发生改变,细胞阻滞于S期,G2/M期细胞明显减少;Survivin mRNA表达降低,Survivin蛋白表达减少;Caspase-3蛋白有活性片段产生;Survivin核心启动子活性明显降低,与其活性相关的转录因子Sp1、HIF-1α mRNA表达降低,E2F-1 mRNA表达升高。结论GSE通过调节Survivin核心启动子活性相关转录因子的表达而抑制Sur-vivin核心启动子的活性,下调Survivin基因的表达同时激活Caspase-3蛋白的活性,抑制了乳腺癌MCF-7细胞的生长,同时可能还诱导了肿瘤细胞的凋亡。

关键词：葡萄籽提取物乳腺癌 Survivin Survivin核心启动子转录因子 Caspase-3

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人神经营养素-3基因真核表达载体的构建和鉴定

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中国临床解剖学杂志 2004年第6期22卷 652-654页

作者：陈昌杰赵莉蚌埠医学院生化与分子生物学教研室蚌埠医学院解剖学教研室安徽蚌埠233003

目的:构建含有人NT-3基因真核表达载体pcDNA3.1-NT-3。方法:采用PCR技术,扩增编码神经营养素-3基因,克隆到PMD18-T载体上,再亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1的Hind Ⅲ和BamHI位点。结果:重组真核表达载体pcDNA3.1-NT-3经酶切鉴定证明NT-3... 详细信息

目的:构建含有人NT-3基因真核表达载体pcDNA3.1-NT-3。方法:采用PCR技术,扩增编码神经营养素-3基因,克隆到PMD18-T载体上,再亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1的Hind Ⅲ和BamHI位点。结果:重组真核表达载体pcDNA3.1-NT-3经酶切鉴定证明NT-3基因正向插入真核表达载体中,碱基序列的测定证明重组质粒中含有人的NT-3基因序列。结论:构建的真核表达载体携有人NT-3cDNA序列,并且含有巨细胞病毒强启动子、ploy(A)加尾信号和neo标志基因,可能具有转染多种哺乳类细胞通用性,可用于NT-3基因的真核表达及基因治疗的研究。

关键词：神经营养素-3 真核表达载体

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转化生长因子β_1对人宫颈癌细胞上皮-间质转化的诱导作用

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上海交通大学学报（医学版） 2015年第4期35卷 530-534页

作者：石玉荣陈素莲杨滢王慧蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室蚌埠233000 蚌埠医学院检验诊断学实验中心蚌埠233000

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)对人宫颈癌He La细胞上皮-间质转化(EMT)发生的诱导作用。方法用10 ng/m L的TGF-β1处理He La细胞72 h,电镜下观察细胞形态,real-time PCR和Western blotting检测EMT相关上皮标记分子和间质标记分子的... 详细信息

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)对人宫颈癌He La细胞上皮-间质转化(EMT)发生的诱导作用。方法用10 ng/m L的TGF-β1处理He La细胞72 h,电镜下观察细胞形态,real-time PCR和Western blotting检测EMT相关上皮标记分子和间质标记分子的表达,划痕试验、Transwell实验检测细胞侵袭和转移能力。结果 TGF-β1可诱导He La细胞呈现EMT细胞形态,并且下调上皮相关标记蛋白E-cadherin和β-catenin的表达,上调间质相关标记蛋白Vimentin和N-cadherin的表达;细胞的侵袭和转移能力明显增强。结论 TGF-β1能够诱导He La细胞发生EMT,促进细胞侵袭和转移。

关键词：上皮-间质转化转化生长因子β1 宫颈癌细胞侵袭转移

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新型吡啶氮芥类化合物的合成及其抗微生物活性研究

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安徽医科大学学报 2016年第8期51卷 1145-1150页

作者：曹守莹白长存陶兆林梁丽丽蚌埠医学院化学教研室蚌埠233030 蚌埠医学院生化与分子生物学教研室蚌埠233030

目的以2,6-二甲基吡啶为起始原料,经氧化、酯化、还原、氯化、N-烷基化等多步反应合成了吡啶双氮芥类化合物及其盐酸盐、硝酸盐。方法目标化合物的结构经1H NMR、IR、MS和元素分析证实。结果体外抗菌、抗真菌活性研究表明:所测试的大多... 详细信息

目的以2,6-二甲基吡啶为起始原料,经氧化、酯化、还原、氯化、N-烷基化等多步反应合成了吡啶双氮芥类化合物及其盐酸盐、硝酸盐。方法目标化合物的结构经1H NMR、IR、MS和元素分析证实。结果体外抗菌、抗真菌活性研究表明:所测试的大多数化合物均可有效抑制被测微生物的生长,且目标化合物对金黄色葡萄球菌表现出很强的专一选择性抑制作用,活性与临床药物相当或优于临床药物。其中吡啶双氮芥化合物7、8a和8b对金黄色葡萄球菌的选择性抑制作用显著,与参照药物氯霉素相当,吡啶双酰胺氮芥化合物11对金黄色葡萄球菌的抑制能力是氯霉素的两倍。结论此类化合物有望作为潜在的抗金黄色葡萄球菌先导化合物,值得进一步研究其构效关系。实验培养得到了中间体产物6的晶体结构,单晶X射线衍射测试表明6的晶体结构属正交晶系P21212空间群。

关键词：氮芥吡啶抗细菌抗真菌

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vMIP-ⅡN端重组肽的表达纯化及活性鉴定

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中国生物工程杂志 2010年第9期30卷 80-86页

作者：杨清玲杨志峰高艳军陈昌杰蚌埠医学院生化与分子生物学教研室蚌埠233030 蚌埠医学院临床检验诊断学实验中心蚌埠233030

病毒巨噬细胞炎症蛋白-Ⅱ(viralmacrophageinflammatoryprotein-Ⅱ,vMIP-Ⅱ)由卡波西肉瘤疱疹病毒编码,前期研究证明了vMIP-IIN端21肽(NT21MP)选择性的阻断趋化因子CXCR4,从而抑制乳腺癌细胞趋化的活性。通过化学合成法获得编码vMIP-Ⅱ... 详细信息

病毒巨噬细胞炎症蛋白-Ⅱ(viralmacrophageinflammatoryprotein-Ⅱ,vMIP-Ⅱ)由卡波西肉瘤疱疹病毒编码,前期研究证明了vMIP-IIN端21肽(NT21MP)选择性的阻断趋化因子CXCR4,从而抑制乳腺癌细胞趋化的活性。通过化学合成法获得编码vMIP-ⅡN末端的基因序列,与pGEX-KG(克隆位点的N-端有谷胱甘肽转移酶GST标签序列)连接构建原核表达载体,重组质粒在大肠杆菌***21(DE3)中获得表达,免疫印迹显示重组蛋白GST-NT21MP主要在细菌裂解液上清中表达,可溶性部分经亲和层析、超滤、快速蛋白液相色谱(fastproteinliquidchromatography,FPLC)纯化获得高纯度的GST-NT21MP蛋白。利用Transwell趋化试验测定GST-NT21MP的活性。结果显示,重组蛋白GST-NT21MP能够抑制乳腺癌细胞SK-BR-3的趋化活性,可作为治疗乳腺癌转移的潜在性靶向药物。

关键词： vMIP-Ⅱ CXCR4 SDF-1 纯化

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病毒巨噬细胞炎性蛋白Ⅱ N端肽调控SDF-1α/CXCR4诱导趋化机制

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第2期28卷 137-140页

作者：杨清玲丁勇兴陈昌杰杨志峰高艳军蚌埠医学院生化与分子生物学教研室蚌埠市中心医院肿瘤外科安徽蚌埠233000

目的:评价病毒巨噬细胞炎性蛋白ⅡN端肽(NT21MP)是否通过干扰SDF-1α/CXCR4信号抑制人乳腺癌细胞株SKBR3细胞的趋化作用。方法:以RT-PCR和免疫组化检测SKBR3和MCF-7两种人乳腺癌细胞中CXCR4的表达;用细胞转移实验检测在NT21MP存在或缺... 详细信息

目的:评价病毒巨噬细胞炎性蛋白ⅡN端肽(NT21MP)是否通过干扰SDF-1α/CXCR4信号抑制人乳腺癌细胞株SKBR3细胞的趋化作用。方法:以RT-PCR和免疫组化检测SKBR3和MCF-7两种人乳腺癌细胞中CXCR4的表达;用细胞转移实验检测在NT21MP存在或缺乏的情况下SDF-1α诱导SKBR3细胞的趋化作用;以Fluo3/AM为细胞内游离钙离子的荧光指示剂,用激光扫描共聚焦显微镜测定NT21MP对SDF-1α诱导SKBR3细胞内游离钙浓度的影响;Western blot分析ERK1/2和FAK蛋白的磷酸化水平变化。结果:相对于MCF-7细胞,SKBR3细胞中CXCR4蛋白表达水平较高;经SDF-1α处理后,SKBR3的迁移能力提高,CXCR4抑制剂AMD3100可有效抑制SKBR3细胞的迁移,细胞经NT21MP预处理后,可剂量依赖性地抑制SKBR3细胞的迁移(P<0.05);NT21MP也可抑制由SDF-1α诱导的细胞内Ca2+峰值(P<0.05),而钙离子浓度升高是SKBR3细胞迁移的重要信号之一;另外,相对于阴性对照组,NT21MP也可下调SDF-1α诱导的SKBR3中信号蛋白ERK1/2和FAK的磷酸化水平(P<0.05)。结论:NT21MP可抑制SDF-1α诱导的SK-BR3细胞的迁移,可能与其上游钙离子释放和ERK1/2及FAK磷酸化阻断信号有关。

关键词：病毒巨噬细胞炎性蛋白 CXCR4 钙流胞外信号调节激酶

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