检索结果-内蒙古大学图书馆

华中科技大学学报（医学版） 2011年第4期40卷 423-428页

作者：杨清玲陈昌杰高艳军章菊蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室蚌埠233030 蚌埠医学院临床检验诊断学实验中心蚌埠233030

目的观察神经生长因子(NGF)受体TrkA和p75在乳腺肿瘤和不同乳腺癌细胞株的表达情况,分析它们与乳腺肿瘤的相关性及TrkA/p75比值对NGF诱导增殖效应的影响。方法采用免疫组化技术检测15例正常乳腺组织、28例乳腺良性肿瘤和62例乳腺恶性肿... 详细信息

目的观察神经生长因子(NGF)受体TrkA和p75在乳腺肿瘤和不同乳腺癌细胞株的表达情况,分析它们与乳腺肿瘤的相关性及TrkA/p75比值对NGF诱导增殖效应的影响。方法采用免疫组化技术检测15例正常乳腺组织、28例乳腺良性肿瘤和62例乳腺恶性肿瘤中TrkA和p75的表达及乳腺癌细胞株MCF-7和SKBR3中NGF、TrkA和p75的表达,采用实时荧光定量PCR技术检测2种细胞株中TrkA和p75的mRNA表达水平,采用MTT检测2种细胞株对NGF诱导增殖的反应。结果 TrkA在乳腺恶性肿瘤中的表达高于乳腺良性肿瘤和正常乳腺组织(χ2=39.98,P<0.01);p75仅在正常乳腺的肌上皮细胞和结缔组织中高表达,随着肿瘤的恶性程度增高,p75的表达逐渐减少最终缺失(χ2=50.96,P<0.01);SKBR3乳腺癌细胞分泌的NGF,表达的TrkA和p75 mRNA及蛋白水平均高于MCF-7细胞(均P<0.05),并且SKBR3细胞表达的TrkA/p75比值高于MCF-7细胞(P<0.05);相对于空白对照组,NGF可诱导SKBR3和MCF-7细胞的增殖(均P<0.05),并在各时点,NGF对SKBR3细胞诱导的增殖率均高于MCF-7细胞(均P<0.05)。结论 TrkA和p75的表达与乳腺肿瘤的恶性程度有关,有可能作为乳腺癌治疗的分子靶点。

关键词：乳腺肿瘤神经生长因子 TrkA p75 细胞增殖

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病毒巨噬细胞炎性蛋白Ⅱ-N端肽联合三氧化二砷对乳腺癌生长和转移的抑制作用

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华中科技大学学报（医学版） 2013年第3期42卷 268-272页

作者：陈素莲郭玉红童芳李自岩张枫杨清玲陈昌杰蚌埠医学院生化与分子生物学教研室蚌埠233000 蚌埠医学院生物科学系蚌埠233000 蚌埠医学院临床检验诊断学实验中心蚌埠233000

目的利用荷乳腺癌动物模型观察病毒巨噬细胞炎性蛋白Ⅱ-N端肽(NT21MP)联合三氧化二砷(As2O3)对乳腺癌生长和肺转移的抑制效应,为选择最佳的乳腺癌治疗方案提供依据。方法建立荷乳腺癌BALB/c小鼠模型,测量荷瘤小鼠的肿瘤大小,计算抑瘤率... 详细信息

目的利用荷乳腺癌动物模型观察病毒巨噬细胞炎性蛋白Ⅱ-N端肽(NT21MP)联合三氧化二砷(As2O3)对乳腺癌生长和肺转移的抑制效应,为选择最佳的乳腺癌治疗方案提供依据。方法建立荷乳腺癌BALB/c小鼠模型,测量荷瘤小鼠的肿瘤大小,计算抑瘤率;苏木精-伊红(HE)染色观察肿瘤病理组织学变化和肺转移情况;苦味酸浸泡法计数肺结节;利用TUNEL法及免疫组化SP法检测各组原发肿瘤组织中细胞凋亡指数(AI)以及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果 NT21MP和As2O3均可抑制原发瘤的生长,抑制率分别为30.4%和40.0%,联合用药效果更显著(54.4%)。NT21MP和As2O3均可抑制肺转移,以两者联合用药作用更明显。与生理盐水对照组相比,NT21MP组、As2O3组及NT21MP+As2O3组增殖细胞核抗原指数明显降低(均P<0.05),凋亡指数明显升高(均P<0.05),以联合用药作用更明显(P<0.05)。结论 NT21MP和As2O3可通过抑制增殖、促进凋亡而抑制肿瘤的生长和转移,并具有协同效应。

关键词：乳腺癌巨噬细胞炎性蛋白Ⅱ N端肽三氧化二砷

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脂肪酸结合蛋白、载脂蛋白E基因多态性与2型糖尿病并发冠心病的关系

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西安交通大学学报（医学版） 2009年第1期30卷 85-88页

作者：石玉荣周海艳章尧蚌埠医学院生化与分子生物学教研室蚌埠医学院临床检验诊断学实验中心蚌埠医学院第一附属医院老干科安徽蚌埠233000

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者脂肪酸结合蛋白(FABP2)及载脂蛋白E(ApoE)与冠心病(CHD)的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-PFLP)技术分别检测T2DM并发CHD组及T2DM非CHD组FABP2、ApoE基因型,并检测T2DM并发CHD组不同... 详细信息

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者脂肪酸结合蛋白(FABP2)及载脂蛋白E(ApoE)与冠心病(CHD)的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-PFLP)技术分别检测T2DM并发CHD组及T2DM非CHD组FABP2、ApoE基因型,并检测T2DM并发CHD组不同等位基因携带者血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HLD-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。结果T2DM并发CHD组FABP2A/T突变频率高于非冠心病组(P<0.05),T等位基因携带者与A等位基因携带者相比TG、TC、LDL-C浓度升高,血HDL-C浓度降低,有显著性差异(P<0.05);T2DM并CHD组ε4等位基因频率明显高于对照组(P<0.01),ε4等位基因携带者与ε3等位基因携带者相比TC、LDL-C浓度升高,HDL-C浓度降低,差异有统计学意义(P<0.05),FABP与ApoE基因连锁分析,FABP2T基因和ApoEε4基因连锁时,T2DM并发CHD的几率增加(P<0.05)。结论FABP2T基因及ApoE/ε4等位基因增高T2DM并发CHD的遗传易感性。

关键词：糖尿病冠心病脂肪酸结合蛋白基因多态性载脂蛋白E

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RNAi抑制MCF-7细胞survivin基因及对多西他赛敏感性影响

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中国药理学通报 2008年第6期24卷 792-796页

作者：杨清玲丁勇兴王惠李成华蚌埠医学院生化与分子生物学教研室安徽蚌埠233000 蚌埠市中心医院肿瘤科安徽蚌埠233000 蚌埠医学院临床检验诊断实验中心安徽蚌埠233000

目的利用RNAi技术抑制乳腺癌细胞株MCF-7sur-vivin基因,观察MCF-7细胞株的细胞凋亡率、survivin蛋白表达及对多西他赛(docetaxel)药物敏感性的变化。方法以培养的乳腺癌MCF-7细胞株为体外研究模型,设对照组、空载体组及RNAi组进行实验。... 详细信息

目的利用RNAi技术抑制乳腺癌细胞株MCF-7sur-vivin基因,观察MCF-7细胞株的细胞凋亡率、survivin蛋白表达及对多西他赛(docetaxel)药物敏感性的变化。方法以培养的乳腺癌MCF-7细胞株为体外研究模型,设对照组、空载体组及RNAi组进行实验。(1)半定量RT-PCR、Western blot法检测survivin mRNA、蛋白在各组细胞中的表达;(2)用流式细胞术分析各组细胞周期及细胞凋亡率的影响;(3)用MTT法分析多西他赛对各组细胞存活率作用的浓度。结果(1)RT-PCR检测结果显示,RNAi组survivin扩增条带(134bp)明显弱于空载体组及对照组,mRNA相对含量较空载体组明显下降(75.4%),差异有统计学意义(P<0.05);Western blot检测空载体组与对照组survivin蛋白条带明显存在,且基本一致,而RNAi组同样位置的条带基本消失(79.8%);(2)RNAi组细胞阻滞在G0/G1期,与空载体组和对照组分别比较,差异有统计学意义(P<0.05);(3)MTT比色法检测结果显示,不同浓度多西他赛处理后对照组、空载体组、RNAi组的IC50分别为(124.7±0.21)、(116.9±0.25)、(15.2±2.8)μg.L-1,RNAi组MCF-7细胞对多西他赛的药物敏感性增高(P=0.000)。结论RNAi明显抑制了survivin在转录及翻译水平的表达;RNAi抑制survivin基因表达,能明显提高乳腺癌MCF-7细胞对多西他赛的药物敏感性。

关键词：乳腺癌 survivin 多西他赛 RNA干扰

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pBIFC-VN173-CXCR4和pBIFC-VC155-NT21MP真核表达质粒的构建及其在活细胞内的作用

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浙江大学学报（医学版） 2012年第5期41卷 519-526页

作者：高艳军杨清玲陈昌杰丁勇兴蚌埠医学院临床检验诊断学实验中心蚌埠医学院生化与分子生物学教研室蚌埠市中心医院普外肿瘤科安徽蚌埠233030

目的:构建pBIFC-VN173-CXCR4和pBIFC-VC155-NT21MP真核表达质粒,利用双分子荧光互补(BiFC)技术,在活细胞内直接观察趋化因子受体4(chemokine receptor 4、CXCR4和CD184)与CXCR4抑制性多肽的相互作用。方法:应用化学合成法获得巨噬细胞... 详细信息

目的:构建pBIFC-VN173-CXCR4和pBIFC-VC155-NT21MP真核表达质粒,利用双分子荧光互补(BiFC)技术,在活细胞内直接观察趋化因子受体4(chemokine receptor 4、CXCR4和CD184)与CXCR4抑制性多肽的相互作用。方法:应用化学合成法获得巨噬细胞炎症蛋白Ⅱ(viralmacrophage inflammatory protein-Ⅱ,vMIP-Ⅱ)N端21肽(N-terminal 21-mer peptide,NT21MP)编码的基因序列,克隆至经Kpn I和EcoRⅠ酶切的pBiFC-VC155中,筛选含有目标基因的正确克隆。利用RT-PCR扩增人乳腺癌细胞株SKBR3的CXCR4全长基因后,T-A亚克隆至经Kpn I和EcoRⅠ酶切的pBiFC-VN173载体中。然后,经酶切鉴定及DNA测序分析2个基因是否正确连接至真核表达载体中。应用脂质体转染的方法共转染pBiFC-VC155-NT21MP和pBiFC-VC155-CXCR4至细胞株COS-7中,在荧光显微镜下观察NT21MP与CXCR4在胞内的相互作用。结果:经DNA测序及同源性对比,证实pBiFC-VC155-NT21MP和pBiFC-VN173-CXCR4重组载体构建成功;基因片段与NCBI基因库vMIP-Ⅱ和CXCR4基因CDS序列同源性达99.9%。BiFC法观察NT21MP与CXCR4在细胞内结合出现的荧光信号,该信号分布细胞内。结论:本实验成功构建了应用BiFC技术的真核表达载体,并且在活细胞内检测到NT21MP与CXCR4的互相结合。

关键词：受体,趋化因子/遗传学趋化因子CXCL2 质粒重组蛋白质类/遗传学遗传载体转染遗传互补测验

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人白细胞介素18突变体的构建及其功能(英文)

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生物化学与生物物理学报 2003年第5期35卷 409-415页

作者：傅奕裴冬生孙兵沈万华陆梁胡书群赵惠仁扬州大学医学院生化教研室徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心苏州大学附属医院神经外科徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心扬州225001 徐州221002 苏州215001

为研究人白细胞介素 18(hIL 18)结构与功能的关系 ,用PCR定点突变技术分别构建了N末端、C末端缺失突变体(ΔNC)和IL 1特征样序列突变体S154A/Y156F/E157P/C163 T (S)。将突变体cDNA与原核表达载体 pJW 2重组并转化大肠杆菌DH5α ,经热... 详细信息

为研究人白细胞介素 18(hIL 18)结构与功能的关系 ,用PCR定点突变技术分别构建了N末端、C末端缺失突变体(ΔNC)和IL 1特征样序列突变体S154A/Y156F/E157P/C163 T (S)。将突变体cDNA与原核表达载体 pJW 2重组并转化大肠杆菌DH5α ,经热诱导表达蛋白质 ,SDS PAGE证实表达的目的蛋白质以包涵体形式存在。菌体经超声破碎后 ,包涵体以 2mol/L尿素洗涤 ,8mol/L尿素溶解 ,并经SephadexG 75柱纯化 ,纯度可达 95 %以上。突变体蛋白质经逐步稀释复性后 ,以诱导人外周血单个核细胞 (PBMC)产生干扰素 γ(IFN γ)及对核因子 κB(NF κB)的激活能力为指标 ,检测突变体的生物学活性。结果显示ΔNC、S这 2个突变体对IFN γ的诱生能力显著低于野生型hIL 18,分别为野生型hIL 18的 13%和 4 8%。同时 ,ΔNC、S对NF κB的激活能力也低于野生型hIL 18,分别为野生型hIL 18的 6 9.7%和 89.8%。这些结果表明缺失的片段或突变的位点对hIL 18的功能有重要的作用。

关键词：白细胞介素-18 结构与功能干扰素-γ 核因子-κB 定点突变

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金边瑞香浸膏体内外抗肿瘤作用

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中国新药杂志 2008年第23期17卷 2019-2021+2026页

作者：徐静傅颖媛黄彬红曾小平况南珍周智兴南昌大学医学院免疫学教研室赣南医学院生化与分子生物学教研室

目的:探讨金边瑞香浸膏的体内外抗肿瘤作用。方法:采用流式细胞术观察不同浓度金边瑞香浸膏对SMMC7721细胞周期的影响。采用MTT法检测不同浓度金边瑞香浸膏对SMMC7721,NKM45,A549和S180肿瘤细胞增殖的影响。利用小鼠皮下移植性肿瘤模型... 详细信息

目的:探讨金边瑞香浸膏的体内外抗肿瘤作用。方法:采用流式细胞术观察不同浓度金边瑞香浸膏对SMMC7721细胞周期的影响。采用MTT法检测不同浓度金边瑞香浸膏对SMMC7721,NKM45,A549和S180肿瘤细胞增殖的影响。利用小鼠皮下移植性肿瘤模型观察不同浓度金边瑞香浸膏的体内抗肿瘤作用。结果:金边瑞香浸膏可使SMMC7721 G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,以0.5 ***-1剂量作用最明显,G0/G1期细胞达80.64%。金边瑞香浸膏浓度在0.031 25~1.0 ***-1范围内对体外培养的SMMC7721,NKM45,A549和S180肿瘤细胞增殖均有一定程度的抑制作用,0.5 ***-1浓度时对此4种肿瘤细胞的增殖抑制率分别为65.82%,60.38%,42.36%和49.94%。金边瑞香浸膏对荷S180小鼠的肿瘤生长有抑制作用,20和40 ***-1.d-1金边瑞香剂量组抑瘤率分别为43.57%和28.13%。结论:金边瑞香浸膏在体内外具有抗肿瘤作用。

关键词：金边瑞香抗肿瘤作用细胞周期 MTT法

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低相对分子质量肝素增强顺铂诱导肝癌细胞的凋亡作用

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中南大学学报（医学版） 2015年第12期40卷 1298-1305页

作者：武文娟于北凯耿英华蚌埠医学院生化与分子生物学教研室安徽蚌埠233030 潍坊市中医院检验科山东潍坊261041 蚌埠医学院第一附属医院血液科安徽蚌埠233004

目的:探讨低相对分子质量肝素(low molecular weight heparin,LMWH)对顺铂(cisplatin,DDP)诱导肝癌细胞凋亡作用的影响及其作用机制。方法:实验分为对照组、LMWH组、DDP组、LWMH与DDP联合应用组。应用MMT法检测药物对肝癌SMMC-7721细胞... 详细信息

目的:探讨低相对分子质量肝素(low molecular weight heparin,LMWH)对顺铂(cisplatin,DDP)诱导肝癌细胞凋亡作用的影响及其作用机制。方法:实验分为对照组、LMWH组、DDP组、LWMH与DDP联合应用组。应用MMT法检测药物对肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响;吖啶橙/溴化乙锭双荧光法和流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;实时荧光定量PCR和Western印迹检测细胞凋亡相关蛋白Fas,Bcl-2和Bax的表达。结果:MTT检测结果显示:与对照组相比,DDP组及LWMH与DDP联合应用组的SMMC-7721细胞生长均有显著的抑制(均P<0.05);LMWH组的Fas,Bcl-2和Bax m RNA及蛋白均无明显的变化(均P>0.05);DDP组Fas表达量明显增加(P<0.05),而Bcl-2轻度降低(P<0.05),Bax无明显变化(P>0.05)。LWMH与DDP联合应用组与对照组及DDP组相比,Bcl-2表达明显降低(均P<0.05),Bax表达明显增高(均P<0.05);Fas表达量与对照组相比明显增加(P<0.05),但与DDP组相比增加不明显(P>0.05)。结论:LMWH具有增强DDP诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用,其机制可能与LMWH增强DDP诱导的细胞凋亡中线粒体通路和促使细胞凋亡增加有关。

关键词：肝癌低相对分子质量肝素顺铂凋亡 Fas Bcl-2 Bax

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蛋白激酶Cθ在γδT细胞表达L-选择素中的调控作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第2期29卷 146-150页

作者：武文娟耿英华唐洁李柏青蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室 233030 安徽省感染与免疫重点实验室免疫学教研室蚌埠医学院附属医院血液科

目的探讨蛋白激酶Cθ（PKCθ）信号转导途径在γδT细胞表达L-选择素（CD62L）中的调控作用。方法用结核分枝杆菌抗原（Mtb-Ag）刺激人外周血单个核细胞（PBMC）并培养6～8d，获得富含γδT细胞的结核分枝杆菌活化T细胞（MtbAT），作为... 详细信息

目的探讨蛋白激酶Cθ（PKCθ）信号转导途径在γδT细胞表达L-选择素（CD62L）中的调控作用。方法用结核分枝杆菌抗原（Mtb-Ag）刺激人外周血单个核细胞（PBMC）并培养6～8d，获得富含γδT细胞的结核分枝杆菌活化T细胞（MtbAT），作为γδT细胞来源，分别加佛波醇酯（PMA）、PMA＋离子霉素（IMN）培养3、6、12、24h，或用培养8d的MtbAT细胞分别加入Mtb—Ag、Rottlerin＋Mtb-Ag、PMA、Rottlerin＋PMA刺激4h，收集细胞用荧光抗体染色后，流式细胞术（FCM）检测CD62L在18T细胞表面的表达。结果体外激活培养6～8d的18T细胞表面CD62L的表达率为75．0％～87．0％。PMA刺激78T细胞3～12h时CD62L表达逐渐下调，表达率为42．3％～25．5％；但在刺激后24h时，又明显回升至53．2％。而PMA＋IMN刺激3、6h时，18T细胞CD62L表达也下调，表达率分别为52．1％、39．3％；但在刺激12h和24h时CD62L表达率分别为52．9％和35．3％。在PMA刺激γδT细胞同时加入Rottlerin，则CD62L的表达率（47．9％）明显高于PMA单独刺激组（31．8％）；MtbAT用Mtb—Ag再刺激4h后，γδT细胞CD62L的表达率由70．0％降为54．8％，而在***再刺激时加入Rottlerin，则CD62L表达率增加到63．1％。结论γδT细胞在PMA或Mtb-Ag刺激后CD62L的表达下调可被PKCθ特异性抑制剂部分阻断，表明CD62L在γδT细胞表面的表达可能与PKCθ信号转导途径的调控相关。

关键词： L-选择素 γδT细胞蛋白激酶C

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2型糖尿病患者脂蛋白脂酶基因S447X和载脂蛋白E基因多态性与冠心病的关系

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四川大学学报（医学版） 2008年第3期39卷 506-507,513页

作者：石玉荣周海艳蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室蚌埠233000 蚌埠医学院附属医院老干科蚌埠233000

目的探讨2型糖尿病患者脂蛋白酯酶(LpL)及载脂蛋白E基因(ApoE)与冠心病的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-PFLP)技术分别检测2型糖尿病并冠心病组(110例)及对照组(116例)LpL、ApoE基因型。结果2型糖尿病并冠心病组... 详细信息

目的探讨2型糖尿病患者脂蛋白酯酶(LpL)及载脂蛋白E基因(ApoE)与冠心病的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-PFLP)技术分别检测2型糖尿病并冠心病组(110例)及对照组(116例)LpL、ApoE基因型。结果2型糖尿病并冠心病组LpL/S447XX突变频率低于对照组(P<0.05);2型糖尿病并冠心病组ε3/3和ε4/3频率分别为41.2%和37.3%,分别明显低于对照组ε3/3(频率70.7%)和高于对照组ε4/3(频率21.6%),P均<0.01。ε4等位基因频率为28.2%,明显高于对照组(13.4%,P<0.01)。结论LpL/S447XX突变降低2型糖尿病并发冠心病患者的遗传易感性,而ApoE/ε4等位基因增高2型糖尿病并发冠心病患者的遗传易感性。

关键词：糖尿病冠心病脂蛋白酯酶基因多态性载脂蛋白E

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