检索结果-内蒙古大学图书馆

生物工程学报 2025年第4期41卷 1490-1499页

作者：敖艺菲张琪陈昱僖黄军就文锦坤广东药科大学生命科学与生物制药学院广东药科大学基础医学院中山大学生命科学学院

Split-Cre系统是指被拆分为无活性的N端和C端这2个片段的Cre酶在一定条件下重组为有酶活性的全长Cre的基因工程工具。该系统常结合LoxP元件使用，近年来在多基因操纵、多基因活性标记以及神经环路示踪等方面有着重要的应用。为了开发更... 详细信息

Split-Cre系统是指被拆分为无活性的N端和C端这2个片段的Cre酶在一定条件下重组为有酶活性的全长Cre的基因工程工具。该系统常结合LoxP元件使用，近年来在多基因操纵、多基因活性标记以及神经环路示踪等方面有着重要的应用。为了开发更高效的Split-Cre系统，本研究利用海洋红嗜热盐菌(Rhodothermus marinus, Rma)内含肽对Cre进行拆分，在“红绿灯”报告细胞系中筛选出了能够高效介导Cre酶重组的S102拆分位点，并且通过双腺相关病毒(adeno-associatedvirus,AAV)将S102 Split-Cre系统递送至小鼠体内，证明了Rma内含肽介导的S102 Split-Cre系统在小鼠体内同样具有高效的活性。本研究为Split-Cre的基础和应用研究提供了可靠的参考。

关键词： Cre酶 Split-Cre系统海洋红嗜热盐菌内含肽断裂内含肽

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寒冷刺激调控小鼠脂质代谢和皮下脂肪外泌体分泌

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生理学报 2025年第2期77卷 231-240页

作者：柯烁徐莉史瑞雪王佳琦崔乐纪元李菁姜晓宏南京大学生命科学学院南京大学医学院附属鼓楼医院

寒冷是哺乳动物进化过程中长期面临的生存挑战。在寒冷应激情况下，除褐色脂肪通过吸收糖脂产热维持体温外，寒冷刺激也能激活皮下米色脂肪的产热功能。但是，寒冷应激对其他组织和全身脂代谢的影响尚不明确。我们前期的研究表明在寒冷... 详细信息

寒冷是哺乳动物进化过程中长期面临的生存挑战。在寒冷应激情况下，除褐色脂肪通过吸收糖脂产热维持体温外，寒冷刺激也能激活皮下米色脂肪的产热功能。但是，寒冷应激对其他组织和全身脂代谢的影响尚不明确。我们前期的研究表明在寒冷应激情况下，褐色脂肪组织除自身产热外，还可以通过分泌大量的外泌体介导组织器官间的信息交互，但皮下脂肪是否具有类似的机制尚不清楚。本研究旨在探索冷刺激下不同组织的脂代谢变化，以及皮下脂肪是否通过外泌体调控全身糖脂代谢，以深入理解生理应激下的脂代谢稳态调节机制。采用RT-qPCR、Western blot及H&E染色等方法，探究小鼠在冷刺激下血清、肝脏、附睾白色脂肪，皮下脂肪脂质代谢的生理性变化。结果显示在冷刺激下皮下脂肪表现出显著的产热活性，外泌体分泌显著增加，且这些外泌体能被肝细胞摄取，显著影响肝细胞脂代谢，表现为脂质合成和分解途径关键基因表达水平的变化。本研究揭示了在冷刺激下皮下脂肪通过外泌体调控脂代谢的新机制，为理解米色脂肪在寒冷应激下的系统调控作用提供了新见解，也为开发肥胖和代谢性疾病的新治疗策略提供了理论基础。

关键词：皮下脂肪组织冷暴露脂质代谢外泌体

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镉污染水土中抗镉菌株的筛选鉴定及功能特性

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微生物学通报 2025年第4期52卷 1430-1446页

作者：徐紫夏王婉婷郑文豪崔越童高启禹新乡医学院生命科学技术学院河南新乡453003 兰州大学生命科学学院甘肃兰州730000

【背景】重金属镉污染已经严重威胁到人类赖以生存的环境和生命安全。目前镉污染修复中微生物修复因其具有修复安全、简便、有效、成本低、环境友好等特点而具有更好的应用潜力。【目的】从镉污染水土中筛选抗镉微生物,为镉污染治理提... 详细信息

【背景】重金属镉污染已经严重威胁到人类赖以生存的环境和生命安全。目前镉污染修复中微生物修复因其具有修复安全、简便、有效、成本低、环境友好等特点而具有更好的应用潜力。【目的】从镉污染水土中筛选抗镉微生物,为镉污染治理提供更佳的优势菌株。【方法】采用梯度稀释法和平板划线法从镉污染水土中筛选分离出128株抗镉菌株,采用16S rRNA基因测序技术结合不同微生物的抗镉能力及遗传稳定性,筛选到1株高抗镉菌株HGX-24,对其生物学特性及抗镉性能进行分析,并通过傅里叶变换红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,FTIR)、扫描电子显微镜-能量色散谱仪(scanning electron microscope-energy dispersive spectrometer,SEM-EDS)、胞外蛋白质和多糖含量测定等方法初步探究了菌株HGX-24在镉胁迫下的响应机制,并通过植物盆栽试验探究了菌株HGX-24在修复镉污染中的实际应用效果。【结果】筛选分离的菌株HGX-24与已报道菌株的相似性≤97.0%,为金黄杆菌属(Chryseobacterium),该菌株的最高抗镉浓度为350 mg/L,遗传性能稳定,可通过分泌胞外可溶性蛋白及结合菌体表面官能团对镉进行吸附,并能有效缓解镉胁迫下玉米植株的氧化应激。【结论】抗镉菌株HGX-24具有较好的水土镉污染治理潜力,在镉污染农田修复中发挥菌种优势。

关键词：水土镉污染抗镉菌株分离鉴定抗镉机制

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靶向c-Met的CAR-T细胞构建及其对人浆液性卵巢癌细胞SKOV-3的体外杀伤性

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生理学报 2025年第2期77卷 241-254页

作者：杜娜娜张艳君李艳秋张露安然甄翔程闵静婷李正红蚌埠医科大学基础医学院蚌埠医科大学生命科学学院蚌埠医科大学公共基础学院蚌埠医科大学临床医学院安徽省肿瘤演进及智能诊疗重点实验室

本研究旨在构建靶向细胞间质上皮转换因子(c-mesenchymal-epithelial transition factor, c-Met)的第二代和第三代嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cells, CAR-T)，观察其对人浆液性卵巢癌细胞SKOV-3的体外杀伤作用。采用生物信息学分析MET基因在卵巢浆液性囊腺癌中的表达情况、MET基因表达与免疫细胞浸润丰度的相关性及其对卵巢浆液性囊腺癌组织功能的影响；免疫组织化学染色法检测浆液性卵巢癌组织以及癌旁组织中c-Met的表达情况；流式细胞术检测SKOV-3表面c-Met蛋白的表达；通过慢病毒感染制备第二代和第三代c-Met CAR-T细胞，流式细胞术检测细胞亚群和感染效率。以CD19 CAR-T和活化T细胞为对照组，以c-Met阴性表达的人卵巢癌细胞A2780细胞设置Non target组，通过乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)释放、ELISA、CCK-8等功能实验探究第二代[c-Met CAR-T(2G)]和第三代[c-Met CAR-T(3G)]c-Met CAR-T对c-Met阳性表达的SKOV-3细胞的杀伤效果、细胞因子分泌和增殖能力。生物信息学分析与免疫组织化学染色结果显示，与正常组织相比，卵巢癌组织的MET基因表达显著上调，而在各病理阶段MET表达无明显差异，且MET基因表达与卵巢癌患者的种族、年龄均没有相关性。成功构建第二代和第三代c-Met CAR-T细胞，且在慢病毒感染后c-Met CAR-T(2G)的CD8+T细胞比例有所上调，c-Met CAR-T(3G)细胞亚群无明显变化；LDH释放实验显示，第二代和第三代c-Met CAR-T对靶细胞SKOV-3的杀伤效率随效靶比提高而上升，效靶比为20:1时，c-Met CAR-T(2G)的杀伤效率达到(42.02±5.17)%(P <0.05),c-Met CAR-T(3G)的杀伤效率达到(51.40±2.71)%(P <0.05);ELISA结果显示，c-Met CAR-T相较于CD19 CAR-T和活化T细胞能释放更多细胞因子(P <0.05),c-Met CAR-T(3G)的释放量高于c-Met CAR-T(2G)(P <0.01);CCK-8结果显示，在48 h后，c-Met CAR-T(2G)细胞数量显著多于c-Met CAR-T(3G)(P <0.01)。以上结果提示，第二代和第三代c-Met CAR-T均能靶向识别并杀伤c-Met阳性的人浆液性卵巢癌细胞SKOV-3，两者的细胞毒性无明显差异，c-Met CAR-T(2G)的增殖能力更强，c-Met CAR-T(3G)释放细胞因子的水平更高。

关键词：浆液性卵巢癌 c-Met CAR-T 生物信息学

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白术根中4个新倍半萜类化合物

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药学学报 2025年第1期60卷 179-184页

作者：周刚刚刘佳佳王纪琼刘辉廖志华王国伟陈敏孟凡成西南大学药学院重庆400715 佛山大学医学院广东佛山528099 西南大学生命科学学院重庆400715

对苍术属植物白术Atractylodes macrocephala Koidz.的干燥根进行化学成分研究。运用正相硅胶、ODS、半制备HPLC等色谱方法从白术乙酸乙酯部位分离纯化得到4个倍半萜类化合物,采用1D和2D NMR、HR-ESIMS、IR、UV、CD等技术手段鉴定其结... 详细信息

对苍术属植物白术Atractylodes macrocephala Koidz.的干燥根进行化学成分研究。运用正相硅胶、ODS、半制备HPLC等色谱方法从白术乙酸乙酯部位分离纯化得到4个倍半萜类化合物,采用1D和2D NMR、HR-ESIMS、IR、UV、CD等技术手段鉴定其结构为白术酮A(1)、9β-羟基紫菀内酯(2)、白术内酯H(3)、白术内酯J(4)。化合物1~4均为新的倍半萜类化合物,其中化合物1具有一个少见的6/7双环骨架结构。

关键词：白术化学成分倍半萜提取分离结构鉴定

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C6TSEDRVAJZ小分子化合物组合诱导人胎盘成纤维细胞分化为上皮样细胞

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南方医科大学学报 2025年第2期45卷 322-330页

作者：代振佳高群伟应梦娇王澳洪娟王春景郭俣刘长青刘高峰蚌埠医科大学生命科学学院安徽蚌埠233000 蚌埠医科大学安徽省神经再生技术与医用新材料工程研究中心安徽蚌埠233000 蚌埠医科大学检验医学院安徽蚌埠233000

目的利用小分子化合物组合将人胎盘成纤维细胞(HPFs)重编程为化学诱导上皮样细胞(ciEP-Ls)。方法常氧条件下培养HPFs细胞,通过免疫荧光、PCR和染色体核型分析鉴定HPFs。生理性低氧条件下(37℃,5%O2),HPFs在含有小分子化合物C6TSEDRVAJZ(... 详细信息

目的利用小分子化合物组合将人胎盘成纤维细胞(HPFs)重编程为化学诱导上皮样细胞(ciEP-Ls)。方法常氧条件下培养HPFs细胞,通过免疫荧光、PCR和染色体核型分析鉴定HPFs。生理性低氧条件下(37℃,5%O2),HPFs在含有小分子化合物C6TSEDRVAJZ(CHIR99021、616452、TTNPB、SAG、EPZ5676、DZNep、Ruxolitinib、VTP50469、Afuresertib、JNK-IN-8、EZM0414)的培养基中进行诱导,诱导期间每日定时观察细胞形态。通过免疫荧光法、Western blotting和PCR技术检测上皮细胞标志物的表达水平。对诱导细胞进行染色体核型分析,并计算诱导效率。结果HPFs免疫荧光结果显示,表达成纤维表面标记物CD34和Vimentin,不表达上皮表面标志物;PCR结果显示,成纤维特异性基因S100A4、COL1A1高表达,且具有人正常二倍体核型。在低氧条件下诱导1 d后,部分HPFs细胞形态发生改变,由多突的纺锤形变成圆形或多边形,具有ciEP-Ls形态特征。诱导处理完成第4天,免疫荧光和Western blotting结果显示,诱导细胞能够高表达上皮细胞特征性标志物E-Cadherin和Lin28A(P<0.05)。PCR结果表明,细胞显著表达上皮标志物Smad3,GLi3,PAX8,WT1,KRT19和KRT18,而成纤维细胞表面标记物表达均下调,且诱导细胞具有人正常二倍体核型,HPFs重编程效率为(64.53±2.80)%~(68.10±3.60)%。结论小分子组合C6TSEDRVAJZ在低氧条件下成功将HPFs诱导为ciEP-Ls,且具有较高的诱导效率。

关键词：化学重编程小分子诱导成纤维细胞上皮样细胞

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结直肠癌类器官的构建与应用

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中国科学:生命科学 2025年第2期55卷 239-249页

作者：杨志琴常娟娟聂尊珍郭英西北大学生命科学学院西安710069 延安大学延安医学院延安716000 西安大兴医院西安710069

结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是最常见的恶性肿瘤之一,对人类健康构成严重威胁.结直肠癌类器官(colorectal cancer organoids)是通过从患者体内提取肿瘤细胞,结合三维培养技术在实验室中构建的微型肿瘤模型.与传统的二维培养系统相... 详细信息

结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是最常见的恶性肿瘤之一,对人类健康构成严重威胁.结直肠癌类器官(colorectal cancer organoids)是通过从患者体内提取肿瘤细胞,结合三维培养技术在实验室中构建的微型肿瘤模型.与传统的二维培养系统相比,结直肠癌类器官能够保留原发肿瘤的分子特征和细胞组成,在培养环境中模拟真实肿瘤的生物学特性和组织结构.正因如此,类器官成为了癌症生物学、药物筛选和个性化治疗等领域的重要研究工具,并展现出广泛的应用前景.本文综述了结直肠癌类器官的相关研究进展,详细探讨了类器官的培养条件,并总结了其在结直肠癌建模、CRC类器官生物库建设、药物筛选、毒性评估以及个体化治疗等方面的应用进展.本文旨在为结直肠癌类器官技术在基础研究和临床治疗中的进一步应用提供有益的借鉴与参考.

关键词：结直肠癌结直肠癌类器官构建应用

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不同类型啮齿类疟原虫对小鼠免疫应答反应的影响

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中国人兽共患病学报 2025年第1期41卷 75-84页

作者：梁晓枫张玉红齐艳伟广州医科大学生命科学学院广州511436 广州医科大学基础医学院广州511436

疟疾是一种严重威胁人类健康的古老疾病,疟原虫是其病原体。机体通过固有免疫和适应性免疫两种方式对抗疟原虫的侵袭。固有免疫是第一道防线,通过固有免疫细胞及其细胞因子发挥作用;适应性免疫通过体液免疫和细胞免疫来抵抗疟原虫。由... 详细信息

疟疾是一种严重威胁人类健康的古老疾病,疟原虫是其病原体。机体通过固有免疫和适应性免疫两种方式对抗疟原虫的侵袭。固有免疫是第一道防线,通过固有免疫细胞及其细胞因子发挥作用;适应性免疫通过体液免疫和细胞免疫来抵抗疟原虫。由于抗疟药物的广泛使用,疟原虫逐渐产生抗药性,迫切需要寻找更有效的治疗药物。啮齿类疟原虫是研究疟疾的良好模型,通过研究其对小鼠免疫应答的影响,加深对疟疾的了解,并为新治疗靶点提供思路。本文综述了不同类型啮齿类疟原虫、免疫细胞及其细胞因子在免疫应答中的作用,以及目前的一些治疗新靶点,旨在促进对疟疾免疫反应的理解,并探索新的治疗方向。

关键词：啮齿类疟原虫免疫细胞免疫细胞因子疟疾治疗

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核嵌入线粒体DNA序列(NUMTs)：线粒体DNA精准检测的“绊脚石”

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生命科学 2025年第4期 347-358页

作者：雷璋玟郭姗姗孙天雷李圣婧邢金良郭文杰西北大学医学院空军军医大学基础医学院西北大学生命科学学院

线粒体DNA (mtDNA)编码氧化呼吸链复合体的核心蛋白，其突变可显著影响线粒体功能，并对细胞的能量代谢产生深远影响。mtDNA突变与肿瘤等多种疾病的发生和发展密切相关，具有成为新型临床标志物的潜力。精准检测mtDNA突变对于疾病的早... 详细信息

线粒体DNA (mtDNA)编码氧化呼吸链复合体的核心蛋白，其突变可显著影响线粒体功能，并对细胞的能量代谢产生深远影响。mtDNA突变与肿瘤等多种疾病的发生和发展密切相关，具有成为新型临床标志物的潜力。精准检测mtDNA突变对于疾病的早期诊断、精准治疗及预后评估具有重要意义。在真核细胞中，mtDNA片段可持续整合到核基因组，形成核嵌入线粒体DNA序列(NUMTs)，这一现象在不同物种中普遍存在。NUMTs与mtDNA具有同源性和高度相似性，成为干扰mtDNA突变准确检测的关键混杂因素。本文系统综述了NUMTs的形成机制，并基于核参考基因组GRCh37中的785条NUMTs，详细分析了其在染色体分布、数量、长度以及与mtDNA的相似性等方面的基本特征。此外，本文探讨了NUMTs在mtDNA测序数据中引入假阳性的研究证据，并分析了影响假阳性干扰程度的关键因素。本文还总结了生化实验阶段减少NUMTs假阳性的方法，并深入讨论了当前用于识别和过滤NUMTs的生物信息学方法，概述了它们的特点和应用场景。最后，本文展望了未来NUMTs识别、mtDNA精准检测及其临床应用的发展趋势和挑战。

关键词：核嵌入线粒体DNA序列(NUMTs) 线粒体DNA突变识别方法假阳性过滤

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狼毒大戟中的酚酸化合物及α-葡萄糖苷酶抑制活性研究

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中草药 2025年第2期56卷 389-394页

作者：张佳王梦雅李周子祺戴秦陈意淋赫军马立威张维库续洁琨北京中医药大学中药学院&生命科学学院中日友好医院临床医学研究所&药学部齐齐哈尔医学院医药科学研究院

目的对狼毒大戟Euphorbia fischeriana中的酚酸类化学成分进行分离和结构鉴定，并评价化合物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性。方法采用多种色谱技术进行分离纯化，通过红外、高分辨质谱及核磁共振等波谱学手段鉴定化合物结构，采用PNPG法... 详细信息

目的对狼毒大戟Euphorbia fischeriana中的酚酸类化学成分进行分离和结构鉴定，并评价化合物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性。方法采用多种色谱技术进行分离纯化，通过红外、高分辨质谱及核磁共振等波谱学手段鉴定化合物结构，采用PNPG法测定α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果从狼毒大戟的根部分离并鉴定了8个酚酸类化合物，分别为苯甲酸甲酯-4-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基-（1→6）-β-D-葡萄糖苷（1）、苯乙基-6-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基-β-D-葡萄糖苷（2）、东莨菪苷（3）、corilagin（4）、6-羟基-2-甲氧基苯乙酮-4-O-β-D-葡萄糖苷（5）、6-羟基-2-甲氧基苯乙酮-4-O-α-L-阿拉伯糖-（1→6）-β-D-葡萄糖苷（6）、6-羟基-2-甲氧基苯乙酮-4-O-β-D-木糖-（1→6）-β-D-葡萄糖苷（7）、erythroxyloside B（8）。结论化合物1为新化合物，命名为狼毒酚苷A（euphfischcoside A），化合物2～4为首次从大戟属中分离得到。化合物4和8对α-葡萄糖苷酶的半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC50)值分别为（7.44±3.95）μmol/L和（134.40±30.27）μmol/L。

关键词：狼毒大戟酚酸化合物糖苷 α-葡萄糖苷酶狼毒酚苷A 苯乙基-6-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基-β-D-葡萄糖苷东莨菪苷

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