检索结果-内蒙古大学图书馆

中华地方病学杂志 2021年第10期40卷 802-807页

作者：陶莉张培艺胡瑞张璐李春草方强夏惠陶志勇山东枣庄学院校医院 277160 蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院感染与免疫省级重点实验室安徽蚌埠233030

目的观察妊娠期母鼠感染疟原虫对子代鼠细胞免疫功能的影响,并研究胚胎期暴露疟原虫抗原的小鼠感染疟原虫后细胞免疫应答反应的变化。方法选择清洁级成年昆明小鼠,雌雄小鼠合笼,将妊娠第14天的孕鼠按照随机数字表法分为实验组(n=5)和对... 详细信息

目的观察妊娠期母鼠感染疟原虫对子代鼠细胞免疫功能的影响,并研究胚胎期暴露疟原虫抗原的小鼠感染疟原虫后细胞免疫应答反应的变化。方法选择清洁级成年昆明小鼠,雌雄小鼠合笼,将妊娠第14天的孕鼠按照随机数字表法分为实验组(n=5)和对照组(n=5),实验组每只小鼠经腹腔接种1×10^(6)个感染伯氏疟原虫(Plasmodium berghei,P.b)的红细胞,对照组注射相同体积的生理盐水,孕鼠分娩后得到子代新生鼠(0、1、3、5 d),继续饲养4周,得到4周龄子代鼠。流式细胞术检测子代新生鼠(0、1、3、5 d)及4周龄子代鼠胸腺、脾脏CD4/CD8 T细胞亚群的变化;给予两组4周龄子代鼠腹腔接种P.b 1×10^(6)个/只,于第3天检测其胸腺、脾脏CD4/CD8 T细胞亚群的变化,并采用体外给予P.b抗原或有丝分裂原[刀豆蛋白A(ConA)]刺激方法检测两组子代鼠脾脏细胞对P.b抗原刺激的免疫反应。结果与对照组比较,实验组子代新生鼠(0、1、3、5 d)胸腺、脾脏中CD3^(+)CD4^(+)CD8^(-)T细胞的比例均较高(P均<0.05),而在胸腺中CD3^(+)CD4^(-)CD8^(+)T细胞的比例均较低(P均<0.05);与对照组比较,实验组4周龄子代鼠胸腺、脾脏中CD3^(+)CD4^(+)CD8^(-)T细胞的比例均较高(P均<0.05),而CD3^(+)CD4^(-)CD8^(+)T细胞的比例均较低(P均<0.05);4周龄子代鼠感染P.b后,与对照组比较,实验组胸腺、脾脏中CD3^(+)CD4^(+)CD8^(-)T细胞的比例均较高(P均<0.01),而CD3^(+)CD4^(-)CD8^(+)T细胞的比例均较低(P均<0.05)。两组4周龄子代鼠脾脏细胞,体外给予P.b抗原或有丝分裂原ConA刺激后,实验组CD3^(+)CD4^(+)CD8^(-)T细胞、CD3^(+)CD4^(-)CD8^(+)T细胞比例与对照组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论妊娠期母鼠感染P.b可明显影响子代鼠胸腺和脾脏CD4/CD8 T细胞亚群的比例;并改变子代鼠对再感染P.b的细胞免疫应答反应。

关键词：疟疾伯氏疟原虫细胞免疫 T细胞

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谷跗线螨交叉反应性变应原的定位

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昆虫学报 2011年第7期54卷 848-852页

作者：赵学影赵振富孙新刘志刚吕艳思蚌埠医学院病原生物学教研室感染与免疫安徽省重点实验室安徽蚌埠233030 深圳大学过敏反廊与免疫学研究所广东深圳518060

为明确谷跗线螨Tarsonemus granarius交叉反应性变应原在体内的定位,制作谷跗线螨石蜡切片,HE染色后光镜观察其内部形态结构;选用对尘螨过敏患者的阳性血清特异性IgE抗体作探针,免疫组织化学染色分析其交叉反应性抗原存在位置。HE染色... 详细信息

为明确谷跗线螨Tarsonemus granarius交叉反应性变应原在体内的定位,制作谷跗线螨石蜡切片,HE染色后光镜观察其内部形态结构;选用对尘螨过敏患者的阳性血清特异性IgE抗体作探针,免疫组织化学染色分析其交叉反应性抗原存在位置。HE染色显示谷跗线螨的消化系统占据其体腔的大部分,包括口咽部、中肠、后肠、肛门和唾液腺等结构。免疫组织化学染色显示谷跗线螨的口咽部、中肠、肠内容物、肠壁及生殖腺等均有阳性反应。谷跗线螨体内存在可诱发人体IgE抗体的变应原,变应原在其体内的分布格局与屋尘螨Dermatophagoides pteronyssinus基本一致。

关键词：谷跗线螨跗线螨科变应原抗原定位免疫组织化学 HE染色交叉反应性

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尘螨连续石蜡切片的制备及染色技术

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昆虫知识 2007年第2期44卷 294-296,309页

作者：张莺莺刘志刚孙新包莹李盟蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 深圳大学生命科学学院广东深圳518060

研究尘螨连续石蜡切片的制备技术。利用琼脂预包埋后再以塑化石蜡包埋,经切片和HE染色,获得结构完整、定位准确、染色清晰的连续切片。探讨制片过程中一些步骤的改进和注意事项,为尘螨显微结构的形态学研究提供可能,也为免疫组化、原位... 详细信息

研究尘螨连续石蜡切片的制备技术。利用琼脂预包埋后再以塑化石蜡包埋,经切片和HE染色,获得结构完整、定位准确、染色清晰的连续切片。探讨制片过程中一些步骤的改进和注意事项,为尘螨显微结构的形态学研究提供可能,也为免疫组化、原位PCR及过敏性疾病尘螨特异性变应原的定位等研究奠定良好的基础。

关键词：尘螨琼脂塑化石蜡 HE染色

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二(喹唑啉-4-基)二硒醚体外抗弓形虫速殖子的实验研究

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中国人兽共患病学报 2013年第7期29卷 692-696页

作者：陈兴智杨雯杨小迪王旗夏惠刘刚沈继龙蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 鲁东大学化学与材料科学学院烟台264025 人兽共患病安徽省重点实验室安徽医科大学病原生物学教研室合肥230032

目的观察二(喹唑啉-4-基)二硒醚体外对弓形虫RH株速殖子杀伤作用,探讨该药抗弓形虫的效果与机制。方法将二(喹唑啉-4-基)二硒醚,(下称药物)浓度分为4组,即生理盐水对照组(A组)、药物浓度为0.05μg/mL(B组)、0.5μg/mL(C组)、5.00μg/mL(... 详细信息

目的观察二(喹唑啉-4-基)二硒醚体外对弓形虫RH株速殖子杀伤作用,探讨该药抗弓形虫的效果与机制。方法将二(喹唑啉-4-基)二硒醚,(下称药物)浓度分为4组,即生理盐水对照组(A组)、药物浓度为0.05μg/mL(B组)、0.5μg/mL(C组)、5.00μg/mL(D组),分别加入到含弓形虫速殖子(含虫体4×106个/mL)的24孔培养板中,于1h、2h、4h后收集弓形虫速殖子,以Trypan blue染色法检测弓形虫着色率;C组和A组以MTT法检测弓形虫活性,Giemsa染色法观察虫体形态和结构变化,透射电镜观察弓形虫速殖子超微结构。结果不同浓度(0.05μg/mL、0.5μg/mL、5.00μg/mL)弓形虫经二(喹唑啉-4-基)二硒醚作用1h后的着色率分别为5.00%、26.70%和99.50%,作用2h后的着色率分别为22.00%、98.70%和100.00%,作用4h后的着色率分别为58.30%、100.00%和100.00%;生理盐水组1h、2h、4h后的着色率分别为1.0%、1.20%和1.70%。0.5μg/mL浓度药物组,MTT检测弓形虫活性,OD值随时间延长增长率明显低于生理盐水对照组(P<0.05);Giemsa染色观察,弓形虫速殖子随着时间的延长,逐渐出现肿胀,两端变圆,虫体坏死现象;透射电镜观察随着时间延长,逐渐出现虫体肿胀,胞膜与基质之间空隙明显,越来越多和大的空泡形成,胞膜出现断裂,内部结构溶解模糊。结论二(喹唑啉-4-基)二硒醚体外可部分或全部杀死弓形虫,效果与时间、剂量相关。

关键词：二(喹唑啉-4-基)二硒醚刚地弓形虫速殖子体外

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应用巢式PCR对恶性疟原虫培养中支原体污染的检测

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中国病原生物学杂志 2012年第1期7卷 32-33,29页

作者：胡东伟丁帅胡守锋孙新蚌埠医学院安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 第二军医大学病原生物学教研室上海200438

目的应用巢式PCR检测恶性疟原虫体外培养中的支原体污染。方法根据支原体16s和23s保守序列设计PCR引物,应用巢式PCR检测恶性疟原虫体外培养中的支原体。结果体外培养的恶性疟原虫标本16份,PCR检测支原体均阳性,经测序比对后确认为口腔... 详细信息

目的应用巢式PCR检测恶性疟原虫体外培养中的支原体污染。方法根据支原体16s和23s保守序列设计PCR引物,应用巢式PCR检测恶性疟原虫体外培养中的支原体。结果体外培养的恶性疟原虫标本16份,PCR检测支原体均阳性,经测序比对后确认为口腔支原体。已知阴性对照无扩增带。结论应用巢式PCR能敏感和特异地检出恶性疟原虫体外培养中的支原体。

关键词：支原体疟原虫,恶性培养巢式PCR

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构建间日疟原虫红内期全长cDNA文库

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2010年第3期28卷 239-240,F0003页

作者：方强夏惠袁远英曹俊王雪梅齐文娟高琪蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 江苏省寄生虫病防治研究所卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室无锡214064

采集未经治疗的间日疟患者血样,滤去白细胞后浓集含虫红细胞,提取总RNA,用SMARTcDNA文库构建试剂盒构建间日疟原虫红内期全长cDNA文库。测定cDNA文库库容,蓝白斑筛选,计算重组率。随机挑选48个菌落,用M13+/-引物进行PCR鉴定插入片段大... 详细信息

采集未经治疗的间日疟患者血样,滤去白细胞后浓集含虫红细胞,提取总RNA,用SMARTcDNA文库构建试剂盒构建间日疟原虫红内期全长cDNA文库。测定cDNA文库库容,蓝白斑筛选,计算重组率。随机挑选48个菌落,用M13+/-引物进行PCR鉴定插入片段大小。构建的间日疟原虫红内期全长cDNA文库原始库容为1.14×106,重组率为97.2%,重组子插入cDNA片段大小为900～2500bp。

关键词：间日疟原虫红内期 cDNA文库

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结核杆菌抗原诱导的人γδT细胞表达L-选择素的调控机制

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现代免疫学 2006年第5期26卷 413-417页

作者：武文娟李柏青蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室蚌埠233030 安徽省感染与免疫重点实验室(蚌埠医学院)

采用CD62L生物素-链霉亲和素染色流式细胞术检测L-选择素在细胞表面表达的方法，分别观察新鲜PBMC和刺激后培养3～21d的γδT细胞表面L-选择素的表达，并研究培养6～7d的MtbAT预先用LY294002（PI3K途径抑制剂）、SB203580（p38途径抑制... 详细信息

采用CD62L生物素-链霉亲和素染色流式细胞术检测L-选择素在细胞表面表达的方法，分别观察新鲜PBMC和刺激后培养3～21d的γδT细胞表面L-选择素的表达，并研究培养6～7d的MtbAT预先用LY294002（PI3K途径抑制剂）、SB203580（p38途径抑制剂）、PD98059（MEK抑制剂）分别处理20min，然后用Mtb-Ag再刺激3h时γδT细胞表面L-选择素的表达情况。结果显示新鲜PBMC中γδT细胞L-选择素的表达率为（43．9％±6．7％），γδT细胞L-选择素的表达率为（76．6％±7．9％），有显著差异（P〈0．05）。用Mtb-Ag激活后培养第6天时L-选择素在γδT细胞的表达达到高峰（90．7％）；以后L-选择素表达逐渐下降，15～21dγδT细胞L-选择素的表达在低水平（16．2％～10．6％）维持；Mtb—Ag再刺激MtbAT诱导γδT细胞L-选择素表达下调为69．5％，预先加入LY294002或PD98059，则L-选择素表达率分别为83．1％和78．7％；而加入SB203580未见明显影响。提示γδT细胞活化时L-选择素表达调控与PI3K、Ras／Erk途径有关，但与p38MAPK途径无关。

关键词： L-选择素 γδT细胞结核杆菌抗原信号转导

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丝裂原蛋白激酶两种抑制剂对弓形虫侵入宿主细胞影响的差异

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中国人兽共患病学报 2009年第2期25卷 97-99页

作者：杨小迪陈兴智徐军孙新常雪莲王媛媛胡守锋葛晓松李柏青感染与免疫安徽省重点实验室蚌埠医学院病原生物学教研室蚌埠233030 安徽省淮南市第一人民医院检验科淮南232007

目的观察两种丝裂原蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPK)抑制剂PD98059及U0126对刚地弓形虫侵入宿主细胞的影响,探讨其对弓形虫速殖子侵入宿主细胞信号转导途径的不同阻断效应。方法丝裂原蛋白激酶抑制剂PD98059或U0126... 详细信息

目的观察两种丝裂原蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPK)抑制剂PD98059及U0126对刚地弓形虫侵入宿主细胞的影响,探讨其对弓形虫速殖子侵入宿主细胞信号转导途径的不同阻断效应。方法丝裂原蛋白激酶抑制剂PD98059或U0126分别在不同时间及不同剂量作用于速殖子-宿主细胞培养系统,用流式细胞仪(FCM)检测宿主细胞感染速殖子的差异。结果流式细胞仪检测加入U01261μmol/L、10μmol/L和100μmol/L的细胞培养孔的细胞感染弓形虫速殖子的量分别比对照组平均降低了26.10%(P<0.01),66.42%(P<0.01)和70.39%(P<0.01)。而加入PD980591μmol/L、10μmol/L和100μmol/L的分别比对照组平均降低了25.45%(P<0.01),53.01%(P<0.01)和64.70%(P<0.01)。实验中发现100μmol/L U0126作用培养细胞9h的时候,可导致HL-60细胞出现部分聚集成团、漂浮的中毒现象。结论U0126和PD98059均可明显抑制弓形虫速殖子侵入宿主细胞,但其差异无显著性,其机制有待进一步探索。

关键词：弓形虫速殖子 MAP激酶 U0126 PD98059

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2009-2011年安徽省五河县疟疾流行特征分析

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中国血吸虫病防治杂志 2013年第1期25卷 70-72页

作者：王雪梅夏立环方强陶志勇焦玉萌夏惠孙新蚌埠医学院病原生物学教研室蚌埠 233030 安徽省感染与免疫重点实验室安徽省五河县疾病预防控制中心

目的分析2009-2011年安徽省五河县疟疾流行特征,为制定行之有效的防治措施提供科学依据。方法对2009-2011年五河县疟疾疫情报表和流行病学调查资料进行统计学分析。结果 2009-2011年五河县疟疾总发病349例,发病呈逐年下降趋势。其中男性... 详细信息

目的分析2009-2011年安徽省五河县疟疾流行特征,为制定行之有效的防治措施提供科学依据。方法对2009-2011年五河县疟疾疫情报表和流行病学调查资料进行统计学分析。结果 2009-2011年五河县疟疾总发病349例,发病呈逐年下降趋势。其中男性205例,女性144例,男女比例为1.42∶1。年龄最小的1岁,最大的100岁,11～、21～岁2个年龄组发病人数较多。疟疾流行有明显的季节性,1-3月发病较少,4月开始上升,6-9月为发病高峰季节,11-12月仅占2.01%。349例中,县城2例,占0.57%,农村347例,占99.43%。县城人口疟疾年均发病率0.08/万,显著低于农村的1.78/万(P<0.05)。发病率前2位为丘陵区的朱顶镇和小溪镇,年均发病率分别为5.53/万和4.78/万,丘陵区占发病总数的36.10%。患者多住平瓦房,纱门、纱窗使用率较低,少有疟防知识且多有露宿习惯。结论五河县疟疾发病呈逐年下降趋势。疟疾发病与居住条件、疟防知识知晓等因素有关。

关键词：疟疾疫情流行病学五河县安徽省

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金丝桃素对小鼠巨噬细胞内刚地弓形虫速殖子的增殖抑制作用

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中国人兽共患病学报 2018年第7期34卷 583-587页

作者：崔洁王旗杨小迪孙希萌汪瑞姜辉王守祥张敏魏明夏惠陈兴智沈继龙安徽医科大学基础医学院病原生物学教研室病原生物学安徽省重点实验室安徽省人兽共患病重点实验室(安徽医科大学) 合肥230032 蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 蚌埠医学院显微形态综合实验室蚌埠233030 安徽省血吸虫病防治研究所合肥230061 首都医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室北京100069

目的观察金丝桃素(Hypericin,Hy)对小鼠巨噬细胞内弓形虫的增殖抑制作用,为抗弓形虫天然药物的筛选提供线索。方法分离小鼠腹腔巨噬细胞(Macrophage,Mφ),建立体外Mφ感染稳定表达绿色荧光蛋白的弓形虫(RH-green fluorescent protein,RH... 详细信息

目的观察金丝桃素(Hypericin,Hy)对小鼠巨噬细胞内弓形虫的增殖抑制作用,为抗弓形虫天然药物的筛选提供线索。方法分离小鼠腹腔巨噬细胞(Macrophage,Mφ),建立体外Mφ感染稳定表达绿色荧光蛋白的弓形虫(RH-green fluorescent protein,RH-GFP)速殖子模型,观察不同剂量Hy的最佳作用效果。实验分4组:(1)A组(对照组),不加Hy;(2)B组(Mφ感染RH-GFP+100μg/mL Hy);(3)C组(Mφ感染RH-GFP+200μg/mL Hy);(4)D组(Mφ感染RH-GFP+400μg/mL Hy),分别在培养1、2和3h后利用荧光显微镜和流式细胞术观察计数感染的Mφ和游离速殖子在各药物浓度及各时间点的变化;透射电镜观察虫体超微结构的变化。结果与对照组相比,随着Hy浓度的增加和用药时间的延长,Mφ内速殖子数量明显减少,游离速殖子数量也显著减少,荧光强度逐渐降低;经药物组不同浓度Hy作用后,游离/Mφ内弓形虫的比值逐渐升高,至400μg/mL剂量作用3h后开始下降,游离与胞内速殖子比例的差异在同一时间段内均有统计学意义(P<0.05),但药物作用1h或2h各实验组之间无统计学差异(P>0.05),作用3h各浓度组之间差异有统计学意义(P<0.05),各实验组同一药物浓度下在孵育1、2和3h后效果增强(P<0.05)。透射电镜观察显示,随Hy作用时间延长,虫体逐渐出现肿胀,胞膜与基质之间空隙明显,空泡形成且增多、变大,胞膜断裂,内部结构溶解溢出。结论体外实验初步显示Hy呈剂量和时间依赖性地增强对Mφ内弓形虫速殖子增殖的抑制作用,可降低宿主细胞感染率,且对胞外速殖子有一定杀伤作用。

关键词：金丝桃素刚地弓形虫巨噬细胞抑制

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