检索结果-内蒙古大学图书馆

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2012年第3期30卷 170-173页

作者：陈兴智郭凯陈勇刘丽丽沈继龙焦玉萌方强孙新蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 安徽医科大学病原生物学教研室合肥230032

目的重组表达刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)Prugniaud(PRU)株缓殖子期特异抗原(BSR4)基因,并检测其免疫特性。方法将已构建的重组表达质粒pET28a(+)-BSR4转化至大肠埃希菌(***)BL21中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达并纯化... 详细信息

目的重组表达刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)Prugniaud(PRU)株缓殖子期特异抗原(BSR4)基因,并检测其免疫特性。方法将已构建的重组表达质粒pET28a(+)-BSR4转化至大肠埃希菌(***)BL21中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达并纯化。分别以慢性感染PRU株刚地弓形虫小鼠血清和健康小鼠血清为一抗,用蛋白质印迹(Western blottting)鉴定BSR4重组蛋白的免疫反应性。用3H-TdR掺入法检测慢性感染PRU株刚地弓形虫小鼠脾淋巴细胞对不同浓度BSR4重组蛋白的特异性增殖水平,计算刺激指数(SI)。以BSR4重组蛋白为抗原,用ELISA法检测急性(抗弓形虫IgG-IgM+)和慢性(抗弓形虫IgG+IgM-)弓形虫病患者血清,以及健康人血清,各20份,评判该蛋白的免疫反应性。结果重组质粒pET28a(+)-BSR4经IPTG诱导后表达重组蛋白BSR4,经变性、复性和纯化后获得相对分子质量(Mr)45 000的可溶性蛋白。Western blotting分析结果显示,该蛋白能被慢性弓形虫感染小鼠血清识别。脾淋巴细胞增殖试验表明,1、5和25μg/ml重组蛋白BSR4刺激感染弓形虫小鼠脾淋巴细胞的SI分别为1.13、0.88和1.17,显著高于未感染组(分别为0.46、0.24和0.49,均P<0.01)。ELISA检测结果显示,BSR4抗原能被慢性弓形虫病患者血清(IgG+IgM-)特异性识别(20/20),而不能被急性弓形虫病患者血清(IgG-IgM+)识别(0/20)。结论重组BSR4蛋白具有特异的免疫原性和免疫反应性。

关键词：刚地弓形虫缓殖子表面抗原相关蛋白4 重组表达免疫原性免疫反应性

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外源性一氧化氮体外杀伤旋毛虫成虫的研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2012年第5期30卷 374-377页

作者：王小莉王媛媛方强薛玉芹沈继龙蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 安徽医科大学病原生物学教研室合肥230032

目的探讨外源性一氧化氮(NO)对旋毛虫成虫的杀伤作用。方法取感染旋毛虫的BALB/c小鼠小肠组织,分离成虫,配制成虫悬液(1 000条/ml)。48孔板中每孔加入100μl成虫悬液,再加入各组试剂,终浓度分别为:亚硝基铁氰化钠(SNP)0.02、0.05、0.10... 详细信息

目的探讨外源性一氧化氮(NO)对旋毛虫成虫的杀伤作用。方法取感染旋毛虫的BALB/c小鼠小肠组织,分离成虫,配制成虫悬液(1 000条/ml)。48孔板中每孔加入100μl成虫悬液,再加入各组试剂,终浓度分别为:亚硝基铁氰化钠(SNP)0.02、0.05、0.10、0.20、0.50和1.00mmol/L,1.00mmol/L SNP+0.15mmol/L血红蛋白(Hb)、1.00 mmol/LSNP+0.15 mmol/L硫酸亚铁(FeSO4)、1.00 mmol/L SNP+1.00 mmol/L L-半胱氨酸(L-cyst)、1.00 mmol/L SNP+0.15 mmol/LFeSO4+1.00 mmol/L L-cyst,设空白对照组和阳性对照组(1.00 mmol/L SNP+100μl肌幼虫悬液),每组设3个复孔。置37℃5%CO2培养箱中孵育,第4天收集各孔成虫,镜检并作番红染色,计算各组虫体死亡率。结果 SNP 0.02 mmol/L和0.05 mmol/L组旋毛虫死亡率分别为(1.4±1.2)%和(3.2±1.0)%,这两组与空白对照组的死亡率[(1.9±0.2)%]之间的差异无统计学意义(P>0.05)。SNP 0.10、0.20、0.50和1.00 mmol/L组虫体死亡率分别为(9.9±1.8)%、(37.7±2.5)%、(50.1±3.5)%和(80.8±1.1)%,与空白对照组之间的差异有统计学意义(P<0.05)。SNP浓度在0.02～1.00 mmol/L范围内与旋毛虫成虫死亡率呈线性正相关(P<0.05)。在1.00 mmol/L SNP的孔中分别加入Hb、L-cyst、FeSO4和FeSO4+L-cyst与仅SNP1.00 mmol/L实验组比较,成虫死亡率均有所下降,分别为(56.5±3.7)%、(72.7±5.6)%、(74.8±2.4)%和(69.8±2.3)%。SNP1.00 mmol/L组与SNP+Hb、SNP+FeSO4+L-cyst组旋毛虫成虫死亡率间的差异有统计学意义(P<0.05)。结论外源性NO对体外培养的旋毛虫成虫有杀伤作用,而Hb、L-cyst+FeSO4可抑制该杀伤作用。

关键词：外源性NO 旋毛虫成虫

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中国中部地区间日疟原虫分离株Duffy血型结合蛋白Ⅱ区的克隆表达与初步鉴定

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中国血吸虫病防治杂志 2012年第4期24卷 474-477页

作者：刘丹夏惠陶志勇陈勇方强王雪梅孙新高颖买月琴蚌埠医学院病原生物学教研室蚌埠233030 安徽省感染与免疫重点实验室

目的克隆中国中部地区间日疟原虫分离株Duffy血型结合蛋白Ⅱ区基因(PvDBPⅡ),体外表达和鉴定重组PvDBPⅡ蛋白。方法PCR法从间日疟患者血液DNA样品中扩增PvDBPⅡ基因,将产物插入到原核表达载体pET28a(+)中,构建pET28a PvDBPⅡ重组表达质... 详细信息

目的克隆中国中部地区间日疟原虫分离株Duffy血型结合蛋白Ⅱ区基因(PvDBPⅡ),体外表达和鉴定重组PvDBPⅡ蛋白。方法PCR法从间日疟患者血液DNA样品中扩增PvDBPⅡ基因,将产物插入到原核表达载体pET28a(+)中,构建pET28a PvDBPⅡ重组表达质粒,转化大肠埃希菌(***)BL21(DE3+),异丙基βD硫代吡喃半乳糖苷诱导表达带有His标签的重组蛋白,采用镍柱亲和层析纯化重组蛋白,相应表达物分别采用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot进行分析鉴定。结果PCR扩增的PvDBPII基因为1.1 kb,重组pET28a PvDBPⅡ质粒经测序验证,其插入片段序列与GenBank参考序列相似性为99%,转化***所表达的重组蛋白分子量约为44 kDa,且能被间日疟患者血清特异性识别。结论成功克隆了PvDBPⅡ基因,表达了重组PvDBPII蛋白,为进一步研究基于PvDBPⅡ的红内期间日疟疫苗奠定了基础。

关键词：间日疟原虫疟疾 Duffy血型结合蛋白原核表达疫苗中国Ⅱ

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猪带绦虫六钩蚴TSO45-4B抗原FnⅢ结构域线性B细胞表位预测及鉴定

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中国血吸虫病防治杂志 2012年第6期24卷 681-684,I0001页

作者：王媛媛王小莉常雪莲陶志勇夏惠方强蚌埠医学院病原生物学教研室、安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030

目的预测并鉴定猪带绦虫六钩蚴TSO45-4B抗原FnⅢ结构域线性B细胞表位。方法利用生物信息学在线工具分析TSO45-4B抗原FnⅢ结构域序列并预测其线性B细胞表位;采用SWISS-MODEL软件预测TSO45-4B的蛋白空间结构,并合成两条预测表位肽。采用... 详细信息

目的预测并鉴定猪带绦虫六钩蚴TSO45-4B抗原FnⅢ结构域线性B细胞表位。方法利用生物信息学在线工具分析TSO45-4B抗原FnⅢ结构域序列并预测其线性B细胞表位;采用SWISS-MODEL软件预测TSO45-4B的蛋白空间结构,并合成两条预测表位肽。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测猪囊尾蚴病人血清与两条预测表位肽的免疫反应性。结果获得2个TSO45-4B抗原FnⅢ结构域线性B细胞预测表位,其中1条预测表位合成肽可为猪囊尾蚴病患者血清识别。结论成功预测并鉴定了猪带绦虫六钩蚴TSO45-4B抗原FnⅢ结构域线性B细胞表位。

关键词：猪带绦虫六钩蚴 TSO45-4B FnⅢ结构域 B细胞表位

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真核表达的重组猪单链IL-12生物学活性的研究

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第7期28卷 691-695页

作者：王雪梅袁远英方强夏惠孙新李柏青蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 广州复大医疗股份有限公司复大医院广东广州510300 蚌埠医学院免疫学教研室安徽蚌埠233030

目的:真核表达重组猪单链IL-12(pscIL-12)并鉴定表达的pscIL-12的生物学活性。方法:采用梭华-SofastTM将pcDNA3.1(+)-pscIL-12转入CHO-K1细胞,ELISA法测定细胞培养上清中pscIL-12的表达水平;MTT法检测细胞培养上清对NK细胞杀伤作用的影... 详细信息

目的:真核表达重组猪单链IL-12(pscIL-12)并鉴定表达的pscIL-12的生物学活性。方法:采用梭华-SofastTM将pcDNA3.1(+)-pscIL-12转入CHO-K1细胞,ELISA法测定细胞培养上清中pscIL-12的表达水平;MTT法检测细胞培养上清对NK细胞杀伤作用的影响;ELISA法测定细胞培养上清刺激人PBMC分泌IFN-γ的水平;流式细胞术(FCM)检测细胞培养上清对人淋巴母细胞增殖水平的作用。结果:融合基因pscIL-12在CHO-K1细胞中表达产物pscIL-12融合蛋白含量较高;生物学活性鉴定表明:pscIL-12融合蛋白可增强NK细胞活性、提高IFN-γ的产生和促进人淋巴母细胞的增殖。结论:转染pcDNA3.1(+)-pscIL-12质粒的CHO-K1细胞成功表达了具有良好生物学活性的pscIL-12。

关键词：白细胞介素-12 融合基因真核表达

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应用巢式PCR对恶性疟原虫培养中支原体污染的检测

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中国病原生物学杂志 2012年第1期7卷 32-33,29页

作者：胡东伟丁帅胡守锋孙新蚌埠医学院安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 第二军医大学病原生物学教研室上海200438

目的应用巢式PCR检测恶性疟原虫体外培养中的支原体污染。方法根据支原体16s和23s保守序列设计PCR引物,应用巢式PCR检测恶性疟原虫体外培养中的支原体。结果体外培养的恶性疟原虫标本16份,PCR检测支原体均阳性,经测序比对后确认为口腔... 详细信息

目的应用巢式PCR检测恶性疟原虫体外培养中的支原体污染。方法根据支原体16s和23s保守序列设计PCR引物,应用巢式PCR检测恶性疟原虫体外培养中的支原体。结果体外培养的恶性疟原虫标本16份,PCR检测支原体均阳性,经测序比对后确认为口腔支原体。已知阴性对照无扩增带。结论应用巢式PCR能敏感和特异地检出恶性疟原虫体外培养中的支原体。

关键词：支原体疟原虫,恶性培养巢式PCR

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屋尘螨成螨形态的扫描电镜观察

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昆虫学报 2012年第4期55卷 493-496,I0001,I0002页

作者：赵学影刘晓宇李玲孙新刘志刚深圳大学过敏反应与免疫学研究所广东深圳518060 蚌埠医学院病原生物学教研室感染与免疫安徽省重点实验室安徽蚌埠233030 深圳大学电子科学技术学院激光工程重点实验室广东深圳518060

【目的】利用扫描电子显微镜(scanning electron microscopy,SEM)观察屋尘螨Dermatophagoides pteronyssinus颚体、躯体、外生殖器及足等的形态结构。【方法】从床尘、枕尘中采集屋尘螨,分离出雌雄成螨,在体视显微镜下清洗处理活螨后,用... 详细信息

【目的】利用扫描电子显微镜(scanning electron microscopy,SEM)观察屋尘螨Dermatophagoides pteronyssinus颚体、躯体、外生殖器及足等的形态结构。【方法】从床尘、枕尘中采集屋尘螨,分离出雌雄成螨,在体视显微镜下清洗处理活螨后,用SEM观察其外部形态特征。【结果】SEM照片显示,屋尘螨螯肢钳状,须肢扁平;体表具细密皮纹,似指纹状,纹间距小于2μm。外生殖器位于腹面正中,雌螨为产卵孔,雄螨生殖孔具1对叶状生殖盖。肛门呈纵行裂孔,雄螨具2个肛吸盘。雌螨足跗节末端各具爪垫1个,雄螨跗节Ⅳ具2个吸盘。【结论】本研究观察结果为尘螨鉴定提供了更多依据。

关键词：尘螨屋尘螨成螨形态扫描电子显微镜

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妊娠期母鼠给予葡萄球菌肠毒素B对成年子代CD3+TCR Vβ8+T细胞的影响

妊娠期母鼠给予葡萄球菌肠毒素B对成年子代CD3+TCR Vβ8+T细胞的...

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纪念中国微生物学会成立六十周年大会暨2012年中国微生物学会学术年会

作者：管俊昌刘勇孔晓明朱翔余峰玲林娜刘从森张涛蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠 233030 蚌埠医学院安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠 233030

目的：观察妊娠期母鼠给予葡萄球菌肠毒B(SEB)对成年子代CD3+TCR Vβ8+T细胞的影响。方法：在妊娠16d时给予SD大鼠尾静脉注射15μg SEB,同时设立PBS对照组。利用流式细胞仪检测成年子代鼠胸腺及外周血中CD3+TCR Vβ8+T细胞;并观察成年... 详细信息

目的：观察妊娠期母鼠给予葡萄球菌肠毒B(SEB)对成年子代CD3+TCR Vβ8+T细胞的影响。方法：在妊娠16d时给予SD大鼠尾静脉注射15μg SEB,同时设立PBS对照组。利用流式细胞仪检测成年子代鼠胸腺及外周血中CD3+TCR Vβ8+T细胞;并观察成年子代鼠再次给予SEB时胸腺及外周血中CD3+TCR Vβ8+T细胞的应答变化。结果：妊娠期母鼠给予SEB可导致雌、雄性成年子代鼠胸腺CD3+TCR Vβ8+T细胞比例，较对照组的明显减少。PBS组的雌雄性成年子代鼠给予SEB后其胸腺及外周血中CD3+TCR Vβ8+T细较同窝对照组明显减少。结论：妊娠期母鼠给予SEB改变其成年子代大鼠CD3+TCR Vβ8+T细胞对再次SEB刺激的应答方式。

关键词：葡萄球菌肠毒素妊娠期动物模型细胞发育应答方式

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铜绿假单胞菌L型对第三代和第四代头孢菌素药物敏感性研究

铜绿假单胞菌L型对第三代和第四代头孢菌素药物敏感性研究

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纪念中国微生物学会成立六十周年大会暨2012年中国微生物学会学术年会

作者：陈登宇蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠 233030

目的：探讨铜绿假单胞菌标准菌株L型对第三代和第四代头孢菌素药物敏感及耐药状况。方法：利用K-B药物纸片琼脂扩散法检测铜绿假单胞菌标准菌株L型对第三代和第四代头孢菌素药物敏感程度，分析铜绿假单胞菌L型的耐药状况。结果：铜绿假... 详细信息

目的：探讨铜绿假单胞菌标准菌株L型对第三代和第四代头孢菌素药物敏感及耐药状况。方法：利用K-B药物纸片琼脂扩散法检测铜绿假单胞菌标准菌株L型对第三代和第四代头孢菌素药物敏感程度，分析铜绿假单胞菌L型的耐药状况。结果：铜绿假单胞菌标准菌株L型对第三代头孢菌素抑菌圈直径较原菌缩小，对第三代头孢菌素头孢噻肟和头孢曲松的药物敏感性维持在中度敏感程度，与原菌有明显差异(P＜0.5)，对第三代头孢菌素头孢哌酮和头孢他啶的药物敏感性维持在敏感程度，对第四代头孢菌素头孢吡肟药物敏感性维持在敏感程度。结论：铜绿假单胞菌L型对第三代头抱菌素具有一定耐药性，联合使用抗菌药物是降低L型出现的有效方法。

关键词：头孢菌素药物铜绿假单胞菌敏感性分析

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猪带绦虫六钩蚴TSO45-4B抗原FNⅢ结构域线性B细胞表位预测及鉴定

猪带绦虫六钩蚴TSO45-4B抗原FNⅢ结构域线性B细胞表位预测及鉴定

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2012年安徽省医学会微生物与免疫学、热带病与寄生虫病学会换届改选与学术研讨会

作者：王媛媛王小莉常雪莲陶志勇夏惠方强蚌埠医学院病原生物学教研室，安徽省感染与免疫重点实验室，安徽蚌埠 233030

目的：预测并鉴定猪带绦虫六钩蚴TSO45-4B抗原FnⅢ结构域线性B细胞表位。　　方法：利用生物信息学在线工具分析TSO45-4B的FNⅢ结构域序列预测其线性B细胞表位，采用SWISS-MODEL预测TSO45-4B的蛋白空间结构，并合成两条预测表位肽。用EL... 详细信息

目的：预测并鉴定猪带绦虫六钩蚴TSO45-4B抗原FnⅢ结构域线性B细胞表位。
　　方法：利用生物信息学在线工具分析TSO45-4B的FNⅢ结构域序列预测其线性B细胞表位，采用SWISS-MODEL预测TSO45-4B的蛋白空间结构，并合成两条预测表位肽。用ELISA方法检测猪囊虫病人血清与两条预测表位肽的免疫反应性。
　　结果：获得2个TSO45-4B抗原FnⅢ结构域线性B细胞预测表位，其中1条预测表位合成肽可为猪囊尾蚴病患者血清识别。
　　结论：成功预测并鉴定了猪带绦虫六钩蚴TSO45-4B抗原FnⅢ结构域线性B细胞表位。

关键词：猪带绦虫六钩蚴 TSO45-4B抗原 FNⅢ结构域 B细胞表位抗原鉴定

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