检索结果-内蒙古大学图书馆

中国人兽共患病学报 2018年第7期34卷 583-587页

作者：崔洁王旗杨小迪孙希萌汪瑞姜辉王守祥张敏魏明夏惠陈兴智沈继龙安徽医科大学基础医学院病原生物学教研室病原生物学安徽省重点实验室安徽省人兽共患病重点实验室(安徽医科大学) 合肥230032 蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 蚌埠医学院显微形态综合实验室蚌埠233030 安徽省血吸虫病防治研究所合肥230061 首都医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室北京100069

目的观察金丝桃素(Hypericin,Hy)对小鼠巨噬细胞内弓形虫的增殖抑制作用,为抗弓形虫天然药物的筛选提供线索。方法分离小鼠腹腔巨噬细胞(Macrophage,Mφ),建立体外Mφ感染稳定表达绿色荧光蛋白的弓形虫(RH-green fluorescent protein,RH... 详细信息

目的观察金丝桃素(Hypericin,Hy)对小鼠巨噬细胞内弓形虫的增殖抑制作用,为抗弓形虫天然药物的筛选提供线索。方法分离小鼠腹腔巨噬细胞(Macrophage,Mφ),建立体外Mφ感染稳定表达绿色荧光蛋白的弓形虫(RH-green fluorescent protein,RH-GFP)速殖子模型,观察不同剂量Hy的最佳作用效果。实验分4组:(1)A组(对照组),不加Hy;(2)B组(Mφ感染RH-GFP+100μg/mL Hy);(3)C组(Mφ感染RH-GFP+200μg/mL Hy);(4)D组(Mφ感染RH-GFP+400μg/mL Hy),分别在培养1、2和3h后利用荧光显微镜和流式细胞术观察计数感染的Mφ和游离速殖子在各药物浓度及各时间点的变化;透射电镜观察虫体超微结构的变化。结果与对照组相比,随着Hy浓度的增加和用药时间的延长,Mφ内速殖子数量明显减少,游离速殖子数量也显著减少,荧光强度逐渐降低;经药物组不同浓度Hy作用后,游离/Mφ内弓形虫的比值逐渐升高,至400μg/mL剂量作用3h后开始下降,游离与胞内速殖子比例的差异在同一时间段内均有统计学意义(P<0.05),但药物作用1h或2h各实验组之间无统计学差异(P>0.05),作用3h各浓度组之间差异有统计学意义(P<0.05),各实验组同一药物浓度下在孵育1、2和3h后效果增强(P<0.05)。透射电镜观察显示,随Hy作用时间延长,虫体逐渐出现肿胀,胞膜与基质之间空隙明显,空泡形成且增多、变大,胞膜断裂,内部结构溶解溢出。结论体外实验初步显示Hy呈剂量和时间依赖性地增强对Mφ内弓形虫速殖子增殖的抑制作用,可降低宿主细胞感染率,且对胞外速殖子有一定杀伤作用。

关键词：金丝桃素刚地弓形虫巨噬细胞抑制

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结核病DNA疫苗研究进展

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蚌埠医学院学报 2016年第3期41卷 408-413页

作者：薛玉芹方强蚌埠医学院病原生物学教研室感染与免疫安徽省重点实验室安徽蚌埠233030

结核病（TB）是由结核分枝杆菌（Mtb）引起的以呼吸道为主的一种传染性疾病,严重危害人类健康。随着医学科学技术的发展,人类对抗TB已取得了一定的成果,包括有效的治疗药物及疫苗的研发。但同时由于Mtb耐药的严重性、人类免疫缺陷性病毒... 详细信息

结核病（TB）是由结核分枝杆菌（Mtb）引起的以呼吸道为主的一种传染性疾病,严重危害人类健康。随着医学科学技术的发展,人类对抗TB已取得了一定的成果,包括有效的治疗药物及疫苗的研发。但同时由于Mtb耐药的严重性、人类免疫缺陷性病毒（HIV）与Mtb的双重感染及流动人口的日益增多、吸毒等,加上不少国家对TB的忽视,TB在全球范围内呈回升趋势。

关键词：结核病 DNA疫苗综述

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弓形虫PRU株BSR4基因的体外扩增及生物信息学分析

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蚌埠医学院学报 2011年第3期36卷 217-222页

作者：郭凯陈兴智焦玉萌夏惠方强王雪梅蚌埠医学院病原生物学教研室感染与免疫安徽省重点实验室安徽蚌埠233030

目的:克隆弓形虫Prugniaud(PRU)株表面抗原BSR4基因,并进行序列测定和生物信息学分析。方法:根据BSR4基因已知序列(ME49株)设计合成一对引物,应用PCR技术从弓形虫PRU株基因组DNA中扩增BSR4基因,克隆入pET28a(+)载体并进行序列测定。用... 详细信息

目的:克隆弓形虫Prugniaud(PRU)株表面抗原BSR4基因,并进行序列测定和生物信息学分析。方法:根据BSR4基因已知序列(ME49株)设计合成一对引物,应用PCR技术从弓形虫PRU株基因组DNA中扩增BSR4基因,克隆入pET28a(+)载体并进行序列测定。用生物信息学方法对BSR4的理化性质、结构和功能进行预测。结果:得到弓形虫PRU株BSR4基因片段,测序结果表明,获得BSR4基因片段约1 194 bp,编码398个氨基酸。同源性分析显示,弓形虫PRU株和ME49株基因序列同源性为100%,BSR4相对分子量为42 344.75,有2个功能结构域,氨基酸序列的前40位为信号肽序列。N端为信号肽,C端为疏水序列,预测它为糖基磷脂酰肌醇固着蛋白,存在18个潜在抗原表位及2个保守功能区域。结论:成功获得弓形虫PRU株BSR4基因序列。

关键词：弓形虫 BSR4基因体外扩增生物信息学分析

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九华山猴群肠道蠕虫检查初步报告

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中国组织化学与细胞化学杂志 2014年第2期23卷 132-136页

作者：王媛媛陶志勇孙新胡守锋李进华杨小迪蚌埠医学院病原生物学教研室蚌埠医学院感染与免疫重点实验室安徽233030 安徽师范大学生命科学院安徽芜湖241000

目的了解九华山野生猴群肠道寄生虫感染情况,为野生猴疾病的防治及人兽共患寄生虫病原的控制提供参考依据。方法采用沉淀法和饱和盐水浮聚法对64份猴群粪便样品进行检查,对检出的虫卵分类计数,分析感染强度和混合感染率。结果共检出蠕虫... 详细信息

目的了解九华山野生猴群肠道寄生虫感染情况,为野生猴疾病的防治及人兽共患寄生虫病原的控制提供参考依据。方法采用沉淀法和饱和盐水浮聚法对64份猴群粪便样品进行检查,对检出的虫卵分类计数,分析感染强度和混合感染率。结果共检出蠕虫卵34份(53%);其中鞭虫卵13份(20%),食道口线虫卵12份(19%),肠毛细线虫卵各8份(12%),蛔虫卵1份(2%);寄生虫混合感染率为19%,同时感染其中2种的占10%,同时感染3种的占9%。感染强度为鞭虫"++",肠毛细线虫"+",食道口线虫"+",蛔虫"+"。另外还有两例幼虫有待鉴定。结论此次所检出的肠道寄生虫均可感染人,因此具有重要的公共卫生意义。

关键词：九华山猴群肠道蠕虫感染调查

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敲低锌指E盒增强子结合蛋白1(ZEB1)抑制胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移

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细胞与分子免疫学杂志 2017年第8期33卷 1073-1078页

作者：陈登宇褚一凡郑庆委徐志本周平李胜蚌埠医学院基础医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233030 安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院显微形态实验中心安徽蚌埠233030 上海浦东解码生命科学研究院上海交通大学Bio-X研究院上海交通大学“遗传发育与精神神经疾病”教育部重点实验室上海200030

目的通过RNA靶向干扰降低人胃癌BGC823细胞中锌指E盒增强子结合蛋白1(ZEB1)基因表达,观察ZEB1低表达对胃癌BGC823细胞的侵袭、迁移及增殖能力的影响,并检测相关基因lncRNA HOTAIR、上皮钙黏素(E-cadherin)表达情况。方法用载体构建针对... 详细信息

目的通过RNA靶向干扰降低人胃癌BGC823细胞中锌指E盒增强子结合蛋白1(ZEB1)基因表达,观察ZEB1低表达对胃癌BGC823细胞的侵袭、迁移及增殖能力的影响,并检测相关基因lncRNA HOTAIR、上皮钙黏素(E-cadherin)表达情况。方法用载体构建针对人ZEB1基因表达的干扰质粒sh ZEB1,脂质体转染胃癌BGC823细胞后,经G418及有限稀释法筛选稳定转染细胞株。通过实时定量PCR和Western blot法检测BGC823细胞ZEB1 mRNA和蛋白水平,MTT法检测其增殖能力,TranswellTM小室侵袭试验检测转染细胞侵袭能力、划痕试验检测细胞迁移能力,实时定量PCR检测lncRNA HOTAIR、E-cadherinmRNA水平。结果成功构建干扰质粒sh ZEB1,敲低BGC823细胞ZEB1水平后,BGC823细胞的增殖、侵袭和迁移能力降低、lncRNA HOTAIR水平降低、而E-cadherin表达增高。结论靶向降低BGC823胃癌细胞ZEB1的水平,可降低lncRNA HOTAIR水平及细胞增殖、侵袭、迁移力。

关键词：胃癌锌指E盒增强子结合蛋白1(ZEB1) RNA干扰长链非编码RNA HOX转录本反义RNA(HOTAIR)

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铜绿假单胞菌L型的诱导及其产绿脓菌素能力的研究

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实用医药杂志 2008年第1期25卷 77-79页

作者：陈登宇夏佩莹孟庆荣蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

目的采用哌拉西林诱导铜绿假单胞菌变异为L型,并研究其L型产绿脓菌素的能力。方法采用平板纸片法和液体浓度梯度法,利用哌拉西林药物纸片诱导铜绿假单胞菌标准菌株变异为L型;通过绿脓菌素试验测定铜绿假单胞菌L型的绿脓菌素产生能力。... 详细信息

目的采用哌拉西林诱导铜绿假单胞菌变异为L型,并研究其L型产绿脓菌素的能力。方法采用平板纸片法和液体浓度梯度法,利用哌拉西林药物纸片诱导铜绿假单胞菌标准菌株变异为L型;通过绿脓菌素试验测定铜绿假单胞菌L型的绿脓菌素产生能力。结果铜绿假单胞菌L型可被哌拉西林诱导为L型,铜绿假单胞菌L型仍具有产生绿脓菌素的能力,但产生的速度较原菌慢且量少。结论铜绿假单胞菌L型为该菌存在的重要形式,其仍能产生绿脓菌素为其致病因素之一。

关键词：铜绿假单胞菌细菌L型绿脓菌素

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猪带绦虫六钩蚴TSO45-4B抗原FnⅢ结构域相应的线性B细胞表位肽免疫原性研究

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蚌埠医学院学报 2013年第5期38卷 513-515页

作者：王媛媛陶志勇杨小迪王小莉常雪莲陈勇孙新夏惠方强蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

目的:观察载体蛋白偶联的TSO45-4B抗原FnⅢ结构域相应的线性B细胞表位肽诱导的体液免疫反应。方法:人工合成TSO45-4B抗原FnⅢ结构域2条预测表位肽,偶联钥孔血蓝蛋白免疫小鼠,采用ELISA法检测小鼠血清中预测表位肽特异性抗体滴度。结果:... 详细信息

目的:观察载体蛋白偶联的TSO45-4B抗原FnⅢ结构域相应的线性B细胞表位肽诱导的体液免疫反应。方法:人工合成TSO45-4B抗原FnⅢ结构域2条预测表位肽,偶联钥孔血蓝蛋白免疫小鼠,采用ELISA法检测小鼠血清中预测表位肽特异性抗体滴度。结果:免疫小鼠血清中检测到1条预测表位肽特异性抗体,其效价达到1∶1 280。结论:设计的1条TSO45-4B抗原FnⅢ结构域线性B细胞表位肽可诱导小鼠产生体液免疫反应。

关键词：猪带绦虫六钩蚴 TSO45-4B FnⅢ结构域 B细胞表位免疫反应

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哌拉西林诱导铜绿假单胞菌L型形成的实验研究

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蚌埠医学院学报 2010年第2期35卷 115-116页

作者：陈登宇陈艺林徐萍萍蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

目的:观察哌拉西林诱导铜绿假单胞菌变异为L型的情况。方法:采用平板纸片法和液体浓度梯度法,利用哌拉西林药物纸片诱导铜绿假单胞菌标准菌株变异为L型,并稳定传代。结果:铜绿假单胞菌可被哌拉西林诱导为典型L型,在诱导因素存在下可稳... 详细信息

目的:观察哌拉西林诱导铜绿假单胞菌变异为L型的情况。方法:采用平板纸片法和液体浓度梯度法,利用哌拉西林药物纸片诱导铜绿假单胞菌标准菌株变异为L型,并稳定传代。结果:铜绿假单胞菌可被哌拉西林诱导为典型L型,在诱导因素存在下可稳定传代。结论:哌拉西林可诱导铜绿假单胞菌变异为稳定L型。

关键词：假单胞菌属假单胞菌铜绿 L型菌哌拉西林

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弓形虫529 bp重复序列基因的PCR阳性质控质粒的构建

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蚌埠医学院学报 2011年第1期36卷 1-3页

作者：焦玉萌陈兴智孙新王雪梅方强蚌埠医学院病原生物学教研室感染与免疫安徽省重点实验室安徽蚌埠233030

目的:构建含有弓形虫529 bp高度重复序列基因的重组质粒,为基于该基因的弓形虫病分子生物学诊断建立标准阳性对照品。方法:以弓形虫RH株基因组DNA为模板,对529 bp的基因片段进行扩增,将纯化后的PCR产物与pMD18-T载体连接后转入大肠埃希... 详细信息

目的:构建含有弓形虫529 bp高度重复序列基因的重组质粒,为基于该基因的弓形虫病分子生物学诊断建立标准阳性对照品。方法:以弓形虫RH株基因组DNA为模板,对529 bp的基因片段进行扩增,将纯化后的PCR产物与pMD18-T载体连接后转入大肠埃希菌DH-5α中,提取重组质粒PCR及测序鉴定。以弓形虫529 bp基因为靶基因设计的检测引物,扩增弓形虫基因组DNA及质粒DNA。结果:PCR产物序列与GENBANK中弓形虫529 bp基因序列完全一致。以弓形虫基因组DNA和质粒DNA为模板,成功扩增出预期的249bp基因片段。结论:成功构建可作为标准阳性对照品的含有弓形虫529 bp高度重复序列基因的重组质粒pMD-18-Tox,为经济实用的弓形虫诊断试剂盒的研制奠定了基础。

关键词：弓形虫重组质粒 529 bp高度重复序列聚合酶链反应

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小鼠肝脏淋巴细胞几种分离方法的比较

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蚌埠医学院学报 2013年第8期38卷 1052-1055页

作者：孔晓明金齐力韦莉王婷范伟朱翔刘勇蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

目的:通过比较几种肝脏淋巴细胞分离方法得到的总淋巴细胞、T细胞、自然杀伤T细胞(NKT cells)及自然杀伤细胞(NK细胞)的比例和细胞绝对数,明确各种方法的适用范围。方法:按照析因设计,将不放血(A法)、摘眼球放血(B法)、体循环灌流(C法)... 详细信息

目的:通过比较几种肝脏淋巴细胞分离方法得到的总淋巴细胞、T细胞、自然杀伤T细胞(NKT cells)及自然杀伤细胞(NK细胞)的比例和细胞绝对数,明确各种方法的适用范围。方法:按照析因设计,将不放血(A法)、摘眼球放血(B法)、体循环灌流(C法)、摘眼球结合体循环灌流(B法+C法)4种肝脏预处理方法和单浓度离心法(Ⅰ法)、非连续密度梯度离心法(Ⅱ法)2种Percoll分离方法进行全面组合,共获得8种组合条件,分离小鼠肝脏淋巴细胞,用流式细胞术检测各类型细胞比例。结果:肝脏预处理方法中B法+C法获得淋巴细胞比例最高,A法获得淋巴细胞绝对数最高,B法获得的NKT细胞和NK细胞比例和细胞绝对数均最高;Ⅱ法获得的淋巴细胞、T细胞、NKT细胞和NK细胞比例和细胞绝对数均高于Ⅰ法。对于NKT细胞比例和NK细胞绝对数,肝脏预处理方法和Percoll浓度之间有交互作用(P<0.01和P<0.05),其他均无交互作用(P>0.05)。结论:采用摘眼球放血结合体循环灌流法,结合Percoll非连续密度梯度法(33%+70%),可获得较高数量和比例的固有免疫细胞,有助于对肝脏固有免疫细胞如NKT细胞、NK细胞等的研究。

关键词：细胞分离肝脏淋巴细胞分离方法 Percoll 析因分析

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