检索结果-内蒙古大学图书馆

中国人兽共患病学报 2009年第2期25卷 97-99页

作者：杨小迪陈兴智徐军孙新常雪莲王媛媛胡守锋葛晓松李柏青感染与免疫安徽省重点实验室蚌埠医学院病原生物学教研室蚌埠233030 安徽省淮南市第一人民医院检验科淮南232007

目的观察两种丝裂原蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPK)抑制剂PD98059及U0126对刚地弓形虫侵入宿主细胞的影响,探讨其对弓形虫速殖子侵入宿主细胞信号转导途径的不同阻断效应。方法丝裂原蛋白激酶抑制剂PD98059或U0126... 详细信息

目的观察两种丝裂原蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPK)抑制剂PD98059及U0126对刚地弓形虫侵入宿主细胞的影响,探讨其对弓形虫速殖子侵入宿主细胞信号转导途径的不同阻断效应。方法丝裂原蛋白激酶抑制剂PD98059或U0126分别在不同时间及不同剂量作用于速殖子-宿主细胞培养系统,用流式细胞仪(FCM)检测宿主细胞感染速殖子的差异。结果流式细胞仪检测加入U01261μmol/L、10μmol/L和100μmol/L的细胞培养孔的细胞感染弓形虫速殖子的量分别比对照组平均降低了26.10%(P<0.01),66.42%(P<0.01)和70.39%(P<0.01)。而加入PD980591μmol/L、10μmol/L和100μmol/L的分别比对照组平均降低了25.45%(P<0.01),53.01%(P<0.01)和64.70%(P<0.01)。实验中发现100μmol/L U0126作用培养细胞9h的时候,可导致HL-60细胞出现部分聚集成团、漂浮的中毒现象。结论U0126和PD98059均可明显抑制弓形虫速殖子侵入宿主细胞,但其差异无显著性,其机制有待进一步探索。

关键词：弓形虫速殖子 MAP激酶 U0126 PD98059

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加强知识间比较联系,提高临床微生物学实验教学效果

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山西医科大学学报（基础医学教育版） 2009年第5期11卷 564-566页

作者：陈登宇刘勇闵宏林夏佩莹蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室

临床微生物学实验教学内容涉及细菌种类多、内容联系不紧密，教学上应强调知识间的横向和纵向比较联系、要点的突出，促进学习的横向、纵向迁移，提高学生对知识的掌握和应用能力。

关键词：临床微生物学实验教学教学方法

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外源性一氧化氮体外杀伤红内期间日疟原虫的实验研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2009年第4期27卷 318-321页

作者：方强夏惠王雪梅陆凤陶志勇曹俊孙新高琪苏州大学基础医学系寄生虫学教研室苏州215123 蚌埠医学院病原生物学教研室、安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 江苏省寄生虫病防治研究所、卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室无锡214064

目的探讨外源性一氧化氮(NO)对红内期间日疟原虫的杀伤作用。方法采集以早期滋养体期为主,原虫密度>0.5%的患者血样,配成含2%红细胞的虫血混悬液。96孔板中每孔加100μl虫血混悬液,再加入各组试剂,亚硝基铁氰化钠(SNP,分别为0.02、0... 详细信息

目的探讨外源性一氧化氮(NO)对红内期间日疟原虫的杀伤作用。方法采集以早期滋养体期为主,原虫密度>0.5%的患者血样,配成含2%红细胞的虫血混悬液。96孔板中每孔加100μl虫血混悬液,再加入各组试剂,亚硝基铁氰化钠(SNP,分别为0.02、0.05、0.10、0.20、0.50、1.00mmol/L),SNP+血红蛋白(Hb)0.15mmol/L,SNP+硫酸亚铁(FeSO4)0.15mmol/L,SNP+L-半胱氨酸(L-cyst)1.00mmol/L,SNP+FeSO40.15mmol/L+L-cyst1.00mmol/L,后4组SNP浓度均为1.00mmol/L,设对照组,每组重复3次,置37℃5%CO2培养箱中培养。根据虫龄,估计发育至裂殖体时间,提前3h取空白对照孔涂片镜检,确定终止培养时间,培养终止后吉氏染色,镜检计数成熟裂殖体,计算NO对红内期间日疟原虫的抑制率,统计分析各组对间日疟原虫抑制率的差异。结果SNP0.02mmol/L组,间日疟原虫抑制率为(0.84±1.69)%,对培养的红内期间日疟原虫无杀伤作用(P>0.05);SNP0.05mmol/L组,间日疟原虫抑制率为(12.26±3.04)%,对培养的红内期间日疟原虫存在杀伤作用(P<0.01)。且抑制率随SNP浓度上升而升高。在含有1.00mmol/LSNP的孔中分别加入Hb、L-cyst、FeSO4和FeSO4+L-cyst与只添加SNP1.00mmol/L孔相比,红内期间日疟原虫抑制率自(85.40±2.90)%下降为(5.90±2.90)%、(25.86±4.02)%、(30.16±2.75)%和(16.71±2.30)%。结论外源性NO对体外培养的红内期间日疟原虫有杀伤作用,而Hb、L-cyst和FeSO4可以逆转这种杀伤作用。

关键词：外源性NO 间日疟原虫红内期

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猪囊尾蚴病患者外周血T细胞亚群比例和产生IFN-γ、IL-4水平研究

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蚌埠医学院学报 2009年第9期34卷 756-758页

作者：胡守锋王雪梅孙新方强夏惠焦玉萌蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

目的:检测猪囊尾蚴病患者外周血T细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)体外诱生IFN-γ、IL-4的水平,探讨T细胞亚群在感染免疫中的调控。方法:采用流式细胞仪检测猪囊尾蚴病患者PBMC中T细胞亚群比例和IFN-γ/IL-4水平;用Cellqu... 详细信息

目的:检测猪囊尾蚴病患者外周血T细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)体外诱生IFN-γ、IL-4的水平,探讨T细胞亚群在感染免疫中的调控。方法:采用流式细胞仪检测猪囊尾蚴病患者PBMC中T细胞亚群比例和IFN-γ/IL-4水平;用Cellquest软件或WinMDI2.8软件数据分析。结果:猪囊尾蚴病患者T细胞亚群CD3+与CD4+细胞百分率均较正常人升高(P<0.01),CD4+/CD8+比值亦较正常人升高(P<0.01);PBMC中分泌IFN-γ及IL-4的CD3+细胞百分率与正常人差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:猪囊尾蚴病患者PBMC中CD3+、CD4+细胞百分率显著升高,T细胞亚群比例失调,免疫功能紊乱。

关键词：猪囊尾蚴病流式细胞术 Th1/Th2细胞因子

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永久性混合虫卵玻片标本制作和使用效果观察

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中国病原生物学杂志 2009年第6期4卷 474-474,411页

作者：胡守锋刘家荣孙新夏惠蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

采用内置小盖片和盖玻片碎片的简化方法制作永久性混合虫卵玻片,经20多年的使用,标本虫卵形态仍较为完整,基本没有褪色和变型,使用效果良好。使用该方法制作玻片,可以节省稀缺的虫卵和玻片的使用量,减少了资源浪费。使用混合虫卵玻片有... 详细信息

采用内置小盖片和盖玻片碎片的简化方法制作永久性混合虫卵玻片,经20多年的使用,标本虫卵形态仍较为完整,基本没有褪色和变型,使用效果良好。使用该方法制作玻片,可以节省稀缺的虫卵和玻片的使用量,减少了资源浪费。使用混合虫卵玻片有利于加深学生对多种寄生虫虫卵的记忆,丰富了实验内容,减少了操作步骤,提高了实验效果。

关键词：混合虫卵标本制作使用效果

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特异性IgG抗体在同源与异种疟原虫再感染中的作用研究

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中国人兽共患病学报 2009年第4期25卷 358-360页

作者：方强刘军陈光曹雅明高琪苏州大学医学院寄生虫学教研室苏州215123 蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 中国医科大学免疫学教研室沈阳110001 佳木斯大学基础医学院寄生虫学教研室佳木斯154000 江苏省寄生虫病防治研究所、卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室无锡

目的探讨特异性IgG抗体在同源和异种疟原虫再感染过程中的作用。方法DBA/2小鼠经腹腔感染致死型约氏疟原虫(Py17XL)60d后,采用等量Py17XL、Py17XNL、Pynigeriensis或PbANKA分别再次攻击,计数红细胞感染率;采用ELISA方法动态检测脾细胞... 详细信息

目的探讨特异性IgG抗体在同源和异种疟原虫再感染过程中的作用。方法DBA/2小鼠经腹腔感染致死型约氏疟原虫(Py17XL)60d后,采用等量Py17XL、Py17XNL、Pynigeriensis或PbANKA分别再次攻击,计数红细胞感染率;采用ELISA方法动态检测脾细胞培养上清中IFN-γ及其血清中特异性IgG抗体水平的变化。结果Py17XNL和Pynigeriensis再感染小鼠出现一过性低水平的原虫血症;再感染后第4d脾细胞培养上清中IFN-γ水平与正常小鼠相比无显著性差异(P>0.05),而血清中特异性IgG抗体水平明显升高(P<0.01),小鼠全部存活。相比,PbANKA再感染小鼠出现高水平的原虫血症,与其初次感染水平相近,再感染后第4d脾细胞培养上清中IFN-γ水平出现明显升高(P<0.01),而血清中特异性的IgG抗体水平却无明显变化,与正常小鼠水平接近,小鼠全部死亡。结论特异性IgG抗体可在宿主抗同源疟原虫再感染中发挥着重要作用,而对异种疟原虫再感染无保护性。

关键词：特异性IgG 啮齿类疟原虫再感染

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解脲脲原体垂直感染与新生小鼠肺炎关系的研究

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蚌埠医学院学报 2009年第12期34卷 1057-1059页

作者：吕杰李凤云唐素兰蚌埠医学院微生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

目的:建立妊娠期解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,UU)生殖道感染的小鼠模型,观察UU垂直感染与新生小鼠肺炎发生的关系。方法:采用血清4型UU标准菌株生殖道感染妊娠期孕鼠,同时设立对照组,通过病原学检查、病理学及免疫组化等方法观... 详细信息

目的:建立妊娠期解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,UU)生殖道感染的小鼠模型,观察UU垂直感染与新生小鼠肺炎发生的关系。方法:采用血清4型UU标准菌株生殖道感染妊娠期孕鼠,同时设立对照组,通过病原学检查、病理学及免疫组化等方法观察妊娠期UU感染与新生小鼠肺炎发生之间的关系及垂直传播情况。结果:病理检查显示UU感染组新生小鼠肺部有间质性炎症发生,且脾有多核巨细胞融合的炎性样变;病原学检测显示新生小鼠肺、脾部有UU定植,356只实验组新生仔鼠肺、脾UU阳性检出率分别为71.36%和33.34%;378只对照组相关组织未分离培养出UU;免疫组化显示新生小鼠肺部有UU抗原,而对照组则无。结论:妊娠期UU感染可通过垂直传播方式影响胚胎发育,从而导致新生小鼠间质性肺炎的发生。

关键词：解脲脲原体新生小鼠胚胎发育垂直感染间质性肺炎

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红内期间日疟原虫浓集纯化及免疫反应性研究

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蚌埠医学院学报 2009年第8期34卷 653-656页

作者：胡守锋陶志勇夏惠高琪胡开明蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 苏州大学医学院病原生物学教研室江苏苏州215006 江苏省血吸虫病防治研究所江苏无锡210004

目的:建立白细胞滤器(Plasmodipur)联合Percoll密度梯度离心浓集纯化红内期间日疟原虫(P.v)的方法。分析和比较皂素与冻融两种处理方法制备的P.v抗原与P.v感染者混合血清免疫反应性的差别。方法:P.v感染者血样,用Plasmodipur滤器分离去... 详细信息

目的:建立白细胞滤器(Plasmodipur)联合Percoll密度梯度离心浓集纯化红内期间日疟原虫(P.v)的方法。分析和比较皂素与冻融两种处理方法制备的P.v抗原与P.v感染者混合血清免疫反应性的差别。方法:P.v感染者血样,用Plasmodipur滤器分离去除白细胞,经60%Percoll浓集其中的感染红细胞(iRBC)。采用皂素法和冻融法从iRBC中释放疟原虫,经超声粉碎,所获P.v可溶性抗原和同样处理的正常红细胞(nRBC)成分经SDS-PAGE电泳分析其组分差别,并应用P.v感染者、正常对照混合血清与相应的抗原进行免疫印迹分析,确定具有免疫原性的抗原组分。结果:115例P.v感染者血样,用Plasmodipur滤器分离去除白细胞,每10个油镜视野中WBC残留≤5个99例(86.1%),经60%Percoll浓集的35例样本中,共有30例(85.7%)能提高iRBC比例至60%以上。SDS-PAGE电泳分析,皂素处理与冻融处理的P.v抗原分别显示出6条和2条P.v特异性蛋白条带。免疫印迹分析表明,P.v感染者混合血清能特异性地识别22、24.5、29、35、36 kDa皂素处理的P.v抗原,26、49、59、63、115、120 kDa冻融处理的P.v抗原。结论:血样中疟原虫皂素与冻融两种处理方法制备的P.v抗原与P.v感染者混合血清免疫反应性存在明显差异,其中皂素处理的22 kDa抗原组分具有较强的免疫原性,其作为P.v特异性诊断抗原的价值有待进一步研究。

关键词：间日,疟原虫红内期抗原免疫反应性浓集纯化

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弓形虫Prugniaud株诱导的对小鼠黑色素瘤抑制作用的体内实验研究

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热带病与寄生虫学 2009年第1期7卷 13-16页

作者：程启媛徐军杨小迪陈兴智孙新蚌埠医学院临床检验诊断学实验中心淮南市第一人民医院蚌埠医学院病原生物学教研室感染与免疫安徽省重点实验室

目的探讨弓形虫Prugniaud实验感染增强宿主的非特异性抗肿瘤效应,检测Prugniaud株单独感染或联合卡介苗(BCG)对小鼠恶性黑色素瘤的抑制作用。方法体内实验用绿色荧光标记的转基因小鼠每组9只,荷瘤后单独感染弓形虫Prugniaud株或联合BCG... 详细信息

目的探讨弓形虫Prugniaud实验感染增强宿主的非特异性抗肿瘤效应,检测Prugniaud株单独感染或联合卡介苗(BCG)对小鼠恶性黑色素瘤的抑制作用。方法体内实验用绿色荧光标记的转基因小鼠每组9只,荷瘤后单独感染弓形虫Prugniaud株或联合BCG,比较肿瘤生长情况,计算抑瘤率,并用流式细胞仪检测各组小鼠肿瘤细胞的凋亡率。RT-PCR检测肿瘤组织中VEGF的mRNA的表达水平。结果 B16组、BCG/B16组、TG/B16组、TG/BCG/B16组小鼠瘤重分别为3.237±0.552g、2.461±0.320g、1.521±0.263g、1.069±0.444g,各组肿瘤凋亡率分别为7.42±2.09%、9.27±2.10%、23.32±4.37%、43.88±6.33%;光镜下TG/B16组和TG/BCG/B16组小鼠能明显抑制肿瘤细胞生长,并且VEGF120/β-actin和VEGF120/β-actin低于其他组(TG/B16:0.167±0.011,0.190±0.015);TG/BCG/B16:0.140±0.015,0.171±0.011)。结论弓形虫感染对小鼠黑色素瘤有抑制作用,降低血管内皮生长因子mRNA表达量,并且在BCG联合作用下效果得到增强。

关键词：弓形虫 Prugniaud株感染黑色素瘤卡介苗

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紫外线辐照致弱RH株弓形虫速殖子及生物学性质的研究

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热带病与寄生虫学 2009年第2期7卷 63-66页

作者：徐军孙新杨小迪王媛媛程启媛淮南市第一人民医院检验科蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室

目的探讨紫外线辐照致弱RH株弓形虫的条件以及致弱弓形虫的生物学特性。方法以253.7nm紫外线在室温下辐照一定浓度的弓形虫速殖子,辐照时间为0、0.5、1、2、5、10、20、30、35、40min。台盼蓝染色观察辐照速殖子的活力;辐照速殖子与小... 详细信息

目的探讨紫外线辐照致弱RH株弓形虫的条件以及致弱弓形虫的生物学特性。方法以253.7nm紫外线在室温下辐照一定浓度的弓形虫速殖子,辐照时间为0、0.5、1、2、5、10、20、30、35、40min。台盼蓝染色观察辐照速殖子的活力;辐照速殖子与小鼠黑色素瘤B16细胞共同培养观察对细胞侵入以及在细胞内增殖情况;辐照速殖子接种小鼠,观察小鼠存活时间,判断速殖子在小鼠体内增殖情况;线粒体呼吸实验观察速殖子氧代谢功能;辐照2min速殖子免疫小鼠,60 d后接受同株弓形虫攻击,观察小鼠存活时间。结果紫外线辐照35min内速殖子保持活力,而辐照40min速殖子失去活力。辐照1～35min速殖子均能够侵入B16细胞但失去在细胞和小鼠体内的增殖能力,小鼠在30 d实验观察期内无死亡;与未经辐照的速殖子相比,辐照并没有影响速殖子的氧代谢功能;辐照速殖子免疫小鼠在受到攻击后存活时间较对照组明显延长(P<0.05)。结论在本实验条件下,紫外线辐照1～35min即可致弱弓形虫,致弱弓形虫失去增殖能力,但细胞侵入能力正常,并可以诱导一定的免疫保护力。

关键词：弓形虫速殖子紫外线辐照致弱生物学性质

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